نقدم بروتوكولا لتشريح الغدد النخامية وإعداد أقسام الاكليلية الغدة النخامية من الفئران البلدان النامية.
مقالة منهجية
نقدم بروتوكولا لتشريح الغدد النخامية وإعداد أقسام الاكليلية الغدة النخامية من الفئران البلدان النامية.
الغدة النخامية أو النخامية جهاز الغدد الصماء هام إفراز الهرمونات الضرورية للتوازن. يتكون من الغدد اثنين مع أصول الجنينية منفصلة والوظائف – في نيوروهيبوفيسيس وفي أدينوهيبوفيسيس. الغدة النخامية الماوس نامية صغيرة وحساسة بشكل بيضاوي ممدود. مقطع الاكليلية هو المفضل لعرض كل من أدينوهيبوفيسيس ونيوروهيبوفيسيس في شريحة واحدة من الغدة النخامية الماوس.
والهدف من هذا البروتوكول تحقيق الأقسام الاكليلية الغدة النخامية سليمة مع أبنية الأنسجة المحفوظة جيدا من البلدان النامية الفئران. ونحن في هذا البروتوكول، تصف بالتفصيل كيفية تشريح ومعالجة الغدد النخامية بشكل صحيح من البلدان النامية الفئران. أولاً، يحدد نضح ترانسكارديال الفورمالدهايد قبل تشريح الفئران. ثم يتم تطبيق ثلاث تقنيات تشريح مختلفة للحصول على الغدد النخامية سليمة تبعاً لعمر الفئران. للفئران الجنينية سن 17.5 يوما الجنينية (ه)-18.5 وحديثي الولادة تصل إلى 4 أيام، هي تشريح لمنطقتي سيلا كامل بما في ذلك عظم وتدي والغدة تريجيمينال الأعصاب. الجراء هي تشريح عمره يوما بعد الولادة (ع) 5-14، الغدد النخامية متصلة مع الأعصاب تريجيمينال ككل. للفئران القديمة أكثر من 3 أسابيع، يتم تشريح الغدد النخامية بعناية مجانية من الأنسجة المحيطة بها. ونحن أيضا عرض كيفية تضمين الغدد النخامية في اتجاه سليم باستخدام الأنسجة المحيطة بها كمعالم للحصول على إشباع المقاطع الاكليلية. هذه الأساليب مفيدة في تحليل الملامح النسيجي واﻹنمائية الغدد النخامية في وضع الفئران.
الغدة النخامية أو النخامية جهاز الغدد الصماء هام إفراز الهرمونات الضرورية للتوازن1،2. تشريحيا، الغدة النخامية بنية '' اثنين في واحد '' تتكون من نيوروهيبوفيسيس وأدينوهيبوفيسيس. هذه الأجزاء لها أصول جنينية مختلفة والدالة بطريقة مختلفة جداً. مشتق من الأديم الظاهر العصبي neurohypophysis وتفرز الاكسيتوسين والهرمون المضاد. Adenohypophysis تنبع من الحقيبة راثكي وهي المسؤولة عن الإفراج عن الهرمونات بما فيها هرمون النمو، البرولاكتين، – الغدة الدرقية الهرمون، جريب – الهرمون، والهرمون، وهرمون ﻫﺭﻣﻭﻧ، و الصباغية – الهرمون3،،من45.
الغدة النخامية تقع على سطح عظم وتدي (السرج) الجمجمة الماوس الظهرية وإرفاق الكلمة الدماغ بساق هشة. ويحاط جانبياً بالاعصاب تريجيمينال والأسفل6،chiasm البصرية7. الغدة بشكل بيضاوي ممدود مع محورها طويل عمودي إلى رئيس. على سطحه الظهرية، في نيوروهيبوفيسيس وفي أدينوهيبوفيسيس يمكن بسهولة أن ترسيمها، مع السابقة تحتل منطقة وسطى الظهرية وتوسيع هذه الأخيرة أفقياً وبطنيا. خلال التنمية اللاحقة للولادة، وزيادة حجم الغدة النخامية سريعاً في الشهر الأول بعد الولادة8،9. ومع ذلك، لا تزال الغدة النخامية الماوس صغيرة جداً في الحجم مع متوسط وزن 1.9 ملغ وقطر منذ فترة طويلة-محور ~ 3 مم في البالغين10، قطر منذ فترة طويلة-المحور 2-2.5 ملم في يوم الولادة 21 (P21)، و 1-1، 5 ملم فقط في P0.
مقطع الاكليلية هو المفضل لعرض كل من أدينوهيبوفيسيس ونيوروهيبوفيسيس في شريحة واحدة من الغدة النخامية الماوس. بيد بعض المهارات التقنية المطلوبة للحصول على إرضاء المقاطع الاكليلية الغدد النخامية من الفئران نظراً للحجم الصغير استثنائية والتشريح متميزة البلدان النامية. في هذه المقالة الفيديو، نظهر كيفية تشريح الغدد النخامية الماوس وإعداد أقسام الاكليلية الغدة النخامية في مراحل مختلفة من التنمية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
هي ولدت الفئران C57BL/6 في ظروف معينة خالية من مسببات الأمراض. جميع الأساليب التجريبية الحيوانية امتثالا للمبادئ التوجيهية التي أقرتها لجنة الأخلاقيات في الجامعة الطبية العسكرية الثانية ورعاية الحيوان.
1-"تسلخ من بعد الولادة تطوير الغدة النخامية"
2. البارافين تضمينها وسيكتيونينج
3. ح & ه تلطيخ ووسم الفلورة
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ويقدم هذا البروتوكول وسيلة تشريح الغدد النخامية من الفئران البلدان النامية. للماوس الولدان، ومنطقتي سيلا كاملة تحتوي على الغدة النخامية والأعصاب تريجيمينال، وتحت تم تشريح عظم وتدي خارجاً من قاعدة الجمجمة. الغدة النخامية صغيرة وحساسة لا تزال سليمة أثناء العملية (الشكل 1A). للفئران التي مضى عليها أكثر من 5 أيام، كانت الغدد النخامية يعلق على الأعصاب trigeminal الأفقي ثم عزلة. الهيكل الإجمالي للغدة النخامية معزولة عن P7 كذلك المحافظة على الماوس (
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
لوضع بيتويتاريس مورين، كان من الصعب من الناحية الفنية للحصول على أقسام الاكليلية السليمة نظراً لخصائصها صغيرة وهشة والخصائص التشريحية الفريدة6،8. ومن ثم اختيار بعض المجموعات البحثية أبواب منتصف السهمي لتحليل مورفولوجية الجنينية والوليدية الغدة النخامية11،12. على الرغم من أن القسم منتصف السهمي للغدة النخامية أيضا قادرة على عرض أمامي، والمتوسطة، والخلفي الفصوص في شريحة واحدة، قسم الاكليلية المفضل عالية كما ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
وأيد هذا العمل المنح "الوطنية الطبيعية مؤسسة العلوم الصينية" (31201086 و 31470759 و 31671219) و "شنغهاي مؤسسة العلوم الطبيعية" (12ZR1436900).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <قوي >أدوات / معدات < / قوي > | |||
| مقص جراحي مستقيم | JinZhong | J21010 | يمكن شراؤه من بائعين |
| آخرين يمكن شراء مقص ناعم - strainght | JinZhong | WA1010 | من بائعين آخرين يمكن |
| ملقط حاد | JinZhong | JD1020 | من بائعين آخرين |
| ملقط ناعم | Dumont | RS-5015 | الغدة النخامية |
| 26G (0.45 مم) | HongDa | لحقنة نضح عبر القلب | |
| (1 مل) | شراء 300841 | دينار بحريني | من بائعين آخرين يمكن |
| حقنة (10 مل) | دينار بحريني | من بائعين آخرين يمكن | |
| 430165 | Corning | من بائعين آخرين | |
| يمكن شراء ورق تنظيف العدسة | ShuangQuan | من بائعين آخرين المجهر | |
| التشريحي | OLYMPUS | SZX-ILLB2-200 | يمكن شراؤه من بائعين آخرين يمكن |
| كاسيت | التضمين Thermo Fisher | 22-272423 | من بائعين آخرين |
| وحدة التحكم لتضمين الأنسجة | يمكن شراء KEDEE | KD-BM11 | من بائعين |
| Microtome | Thermo Fisher | HM315R | من بائعين آخرين يمكن |
| شرائح Superfrost-Plus | Thermo Fisher | 22-037-246 | من بائعين آخرين يمكن |
| غطاء زجاج | Thermo Fisher | 12-543 | من بائعين آخرين |
| مجهر مضان | أوليمبوس | BH2-RFCA | من بائعين |
| آخرين < قوي>الاسم< / strong> | Company< / strong> | Catalog Number | Comments |
| Recodes | |||
| Urethane | BBI | EB0448 | |
| NaCl | Sigma | S9625 | for PBS |
| KCl | Sigma | P9541 | for PBS |
| Na2HPO4.12H2O | Sigma | 71650 | ل PBS |
| K2HPO4 | Sigma | P2222 | ل PBS |
| NaNO2 | Sigma | 237213 | |
| حقن الصوديوم الهيبارين | SPH | H31022051 | للتروية الملحية |
| بارافورمالالديهايد (PFA) | سيجما | P6148 | |
| الإيثانول | SCR | 10009218 | |
| الزيلين | SCR | 10023418 | |
| البارافين | ثيرمو فيشر | 8330 | |
| هيماتوكسيلين | سيجما | H9627 | لليد & تلطيخ |
| Eosin Y | Sigma | E4009 | لليد & E تلطيخ |
| الأرنب هرمون النمو المضاد للنمو (GH) | الهرمون | للجسم | |
| المضاد للجسم | برنامج الغدة النخامية | ||
| الأرنب المضاد للفأر GFAP الجسم المضاد | Sigma | G9269 | للتلطيخ |
| المناعي للماعز المضاد للأرانب IgG ، HRP | جاكسون | 111-035-003 | لنظام TSA |
| NEN منتجات علوم | NEL700 | للتلوين المناعي | |
| ستربتافيدين ، أليكسا فلور 594 | ثيرمو فيشر | S32356 | للتلوين المناعي |
| المضاد ل FITC Alexa Fluor 488 | Thermo Fisher | A11090 | للتلوين المناعي |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن