Method Article

تشريح وإعداد شريحة الاكليلية وضع الغدة النخامية الماوس

DOI:

10.3791/56356

⸱

November 16th, 2017

 ,  ,  , 
1Department of Pathophysiology, Second Military Medical University, 2Department of Cell Biology, Second Military Medical University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نقدم بروتوكولا لتشريح الغدد النخامية وإعداد أقسام الاكليلية الغدة النخامية من الفئران البلدان النامية.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الغدة النخامية أو النخامية جهاز الغدد الصماء هام إفراز الهرمونات الضرورية للتوازن. يتكون من الغدد اثنين مع أصول الجنينية منفصلة والوظائف – في نيوروهيبوفيسيس وفي أدينوهيبوفيسيس. الغدة النخامية الماوس نامية صغيرة وحساسة بشكل بيضاوي ممدود. مقطع الاكليلية هو المفضل لعرض كل من أدينوهيبوفيسيس ونيوروهيبوفيسيس في شريحة واحدة من الغدة النخامية الماوس.

والهدف من هذا البروتوكول تحقيق الأقسام الاكليلية الغدة النخامية سليمة مع أبنية الأنسجة المحفوظة جيدا من البلدان النامية الفئران. ونحن في هذا البروتوكول، تصف بالتفصيل كيفية تشريح ومعالجة الغدد النخامية بشكل صحيح من البلدان النامية الفئران. أولاً، يحدد نضح ترانسكارديال الفورمالدهايد قبل تشريح الفئران. ثم يتم تطبيق ثلاث تقنيات تشريح مختلفة للحصول على الغدد النخامية سليمة تبعاً لعمر الفئران. للفئران الجنينية سن 17.5 يوما الجنينية (ه)-18.5 وحديثي الولادة تصل إلى 4 أيام، هي تشريح لمنطقتي سيلا كامل بما في ذلك عظم وتدي والغدة تريجيمينال الأعصاب. الجراء هي تشريح عمره يوما بعد الولادة (ع) 5-14، الغدد النخامية متصلة مع الأعصاب تريجيمينال ككل. للفئران القديمة أكثر من 3 أسابيع، يتم تشريح الغدد النخامية بعناية مجانية من الأنسجة المحيطة بها. ونحن أيضا عرض كيفية تضمين الغدد النخامية في اتجاه سليم باستخدام الأنسجة المحيطة بها كمعالم للحصول على إشباع المقاطع الاكليلية. هذه الأساليب مفيدة في تحليل الملامح النسيجي واﻹنمائية الغدد النخامية في وضع الفئران.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الغدة النخامية أو النخامية جهاز الغدد الصماء هام إفراز الهرمونات الضرورية للتوازن1،2. تشريحيا، الغدة النخامية بنية '' اثنين في واحد '' تتكون من نيوروهيبوفيسيس وأدينوهيبوفيسيس. هذه الأجزاء لها أصول جنينية مختلفة والدالة بطريقة مختلفة جداً. مشتق من الأديم الظاهر العصبي neurohypophysis وتفرز الاكسيتوسين والهرمون المضاد. Adenohypophysis تنبع من الحقيبة راثكي وهي المسؤولة عن الإفراج عن الهرمونات بما فيها هرمون النمو، البرولاكتين، – الغدة الدرقية الهرمون، جريب – الهرمون، والهرمون، وهرمون ﻫﺭﻣﻭﻧ، و الصباغية – الهرمون3،،من45.

الغدة النخامية تقع على سطح عظم وتدي (السرج) الجمجمة الماوس الظهرية وإرفاق الكلمة الدماغ بساق هشة. ويحاط جانبياً بالاعصاب تريجيمينال والأسفل6،chiasm البصرية7. الغدة بشكل بيضاوي ممدود مع محورها طويل عمودي إلى رئيس. على سطحه الظهرية، في نيوروهيبوفيسيس وفي أدينوهيبوفيسيس يمكن بسهولة أن ترسيمها، مع السابقة تحتل منطقة وسطى الظهرية وتوسيع هذه الأخيرة أفقياً وبطنيا. خلال التنمية اللاحقة للولادة، وزيادة حجم الغدة النخامية سريعاً في الشهر الأول بعد الولادة8،9. ومع ذلك، لا تزال الغدة النخامية الماوس صغيرة جداً في الحجم مع متوسط وزن 1.9 ملغ وقطر منذ فترة طويلة-محور ~ 3 مم في البالغين10، قطر منذ فترة طويلة-المحور 2-2.5 ملم في يوم الولادة 21 (P21)، و 1-1، 5 ملم فقط في P0.

مقطع الاكليلية هو المفضل لعرض كل من أدينوهيبوفيسيس ونيوروهيبوفيسيس في شريحة واحدة من الغدة النخامية الماوس. بيد بعض المهارات التقنية المطلوبة للحصول على إرضاء المقاطع الاكليلية الغدد النخامية من الفئران نظراً للحجم الصغير استثنائية والتشريح متميزة البلدان النامية. في هذه المقالة الفيديو، نظهر كيفية تشريح الغدد النخامية الماوس وإعداد أقسام الاكليلية الغدة النخامية في مراحل مختلفة من التنمية.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هي ولدت الفئران C57BL/6 في ظروف معينة خالية من مسببات الأمراض. جميع الأساليب التجريبية الحيوانية امتثالا للمبادئ التوجيهية التي أقرتها لجنة الأخلاقيات في الجامعة الطبية العسكرية الثانية ورعاية الحيوان.

1-"تسلخ من بعد الولادة تطوير الغدة النخامية"

  1. إجراء التخدير: مكان الفئران حديثي الولادة (P0-P5) على الثلج المجروش للحث على انخفاض درجة حرارة الجسم. للفئران التي مضى عليها أكثر من 5 أيام عمر، حقن يوريتان 5% (30 ميليلتر/غرام من وزن الجسم) إينترابيريتونيلي للحث على التخدير. تقييم الاستجابات للذيل/تو يقرصه. المضي قدما إلا بعد أن يكون الماوس لا يستجيب للمنبهات الضارة.
  2. تأمين الماوس في موقف ضعيف (ملقى على ظهره والوجه إلى الأعلى) بتسجيل بلطف فوريباوس وهيندباوس إلى سطح عمل يمكن أن تكون مثبتة (أي، الستايروفوم) داخل غطاء الأبخرة كيميائية.
  3. إجراء نضح ترانسكارديال.
    1. قص القفص الصدري الماوس مع المقص الجراحي لفضح القلب (والأجهزة الأخرى والصدر)-
    2. تأمين قلب ينبض بالملقط حادة وأدخل إبرة ز 26 (0.45 ملم) في البطين الأيسر. يتم إرفاقه الإبرة حقنه 10 مل مليئة بالفوسفات هيبارينيزيد مخزنة المالحة (برنامج تلفزيوني؛ تستكمل مع نتريت الصوديوم 5 ملغ/مل و 10 يو/مليلتر الهيبارين، درجة الحموضة 7.4، الحارة إلى 37 درجة مئوية قبل الاستخدام). قطع الاذين الأيمن مع مقص غرامة فورا والبدء في نتخلل الجسم مع برنامج تلفزيوني الحارة حتى السوائل تخرج اتريوم الصحيح الواضح.
      ملاحظة: التقريبية 5-10 مل برنامج تلفزيوني المسبق للفئران حديثي الولادة و 10-20 مل برنامج تلفزيوني للفئران الكبار-
    3. تبقى الإبرة في المكان وتغيير آخر حقنه مليئة بارافورمالدهيد 4% (منهاج عمل بيجين؛ ودرجة الحموضة 7.4). نتخلل 10 مل و 20 مل من مثبت للأطفال حديثي الولادة والماوس P21، على التوالي.
      تنبيه: منهاج عمل بيجين السامة. قد يسبب التهابات الجهاز التنفسي، الجلد وتلف العين. ارتداء القفازات وتعمل تحت غطاء كيميائية.
  4. قطع رأس الماوس ثابتة في منهاج عمل بيجين وقطع عظم الجمجمة مفتوحة مع المقص.
    1. مع الملقط الصغيرة بلطف رفع هيندبرين من قاعدة الجمجمة. في أول بادرة من السرج، قص رفع الإيقاف ولكن عقد هيندبرين، ساق الغدة النخامية والألياف العصبية الاتصال بقاعدة الدماغ مع مقص غرامة. تعد هذه الخطوة الحاسمة لضمان أن الغدة النخامية لا يرفع بعيداً مع الدماغ.
    2. ثم الحفاظ على رفع الدماغ وإزالة الدماغ كله لفضح الغدة النخامية تماما. قص سيلا كامل المنطقة بما في ذلك الغدة النخامية، الأفقي تريجيمينال الأعصاب، وتحت عظم وتدي مع المقص (حوالي 3 × 5 مم 2)-
  5. موضع تشريح الأنسجة طبق 35 ملم أو بئر واحدة للوحة 6-البئر الذي يحتوي على 2 مل الباردة 4% منهاج العمل (درجة الحموضة 7.4). إصلاح الأنسجة عند 4 درجة مئوية لمدة 40 دقيقة ل P0-بيتويتاريس P7، ح 1 عن بيتويتاريس P14، ح 1.5 ل P21-بيتويتاريس P28، و 3 ح للكبار بيتويتاريس.
  6. تفارق مزيد من الغدة النخامية
    1. غسل الأنسجة الثابتة مع 10 مل برنامج تلفزيوني، 5 التغييرات، كل 15 دقيقة. الغدة النخامية الولدان جنبا إلى جنب مع الأنسجة المحيطة به، وتحت عظم وتدي يمكن معالجتها بصورة مباشرة للجفاف. ومع ذلك، ينبغي أن تنفصل الغدد النخامية من الفئران التي مضى عليها أكثر من 5 أيام أخرى تحت مجهر ستيريو.
    2. وضع الأنسجة الثابتة في طبق 35 ملم يحتوي على 1 مل برنامج تلفزيوني. P5-بيتويتاريس P14، إزالة الأغشية الضام بين الأعصاب والعظام مع غرامة ملقط ومقص، وعزل الغدة النخامية جنبا إلى جنب مع الأفقي trigeminal الأعصاب بعناية ككل ولكن ترك في السرج. غدة معزولة والأعصاب متصلة بواسطة الأغشية الضام مع " ح "-مثل مظهر ( الشكل 1B).
      3. بيتويتاريس
    3. ل P21، والكبار، إزالة الأعصاب وأغشية الضام حول الغدة النخامية والغدة من الأنسجة المحيطة بها. التفاف أنسجة الغدة النخامية مع عدسة تنظيف المناديل الورقية ووضعه في كاسيت تضمين.
      ملاحظة: التفاف الغدة النخامية صغيرة مع عدسة تنظيف المناديل الورقية يساعد على منع أي خسارة محتملة للعينات، والمحافظة على سلامة الأنسجة في الإجراء التالي تضمين البارافين. فإنه قد لا يكون ضروريا التفاف الغدة النخامية إذا تتم معالجتها في زجاجة صغيرة في الإجراء تضمين cryo.

2. البارافين تضمينها وسيكتيونينج

  1. يذوي العينات في تضمين أشرطة الكاسيت مع حلول الإيثانول 50%، 65%، 75%، و 95% لمدة 15 دقيقة. في وقت لاحق يذوي مع التغييرات 3 من الإيثانول النقي، 3 دقيقة ل P0-P4 الغدد، 4 دقيقة ل P5-P14 الغدد، وكل 5 دقائق P21 والغدد كبار السن. واضحة مع زيلين نفط، 3 التغييرات، 3 دقيقة ل P0-P4 الغدد، 4 دقيقة ل P5-P14 الغدد، وكل 5 دقائق ل P21 والغدد كبار السن. التسلل مع شمع البارافين المنصهر، التغييرات 3، 7 دقيقة ل P0-الغدد P4، ودقيقة 8 مرتين تليها 6 دقيقة مرة P5 والغدد كبار السن-
    ملاحظة: معلمات الأمثل لمعالجة الأنسجة يمكن تجريبيا تعديلها. للحصول على المقاطع ذات جودة عالية، وينبغي تجنب الجفاف غير كافية أو أكثر. نفس الشيء صحيح بالنسبة لإزالة الأنسجة استخدام زيلين نفط.
    2. إزالة العينة من الكاسيت
  2. التوجه عند تضمين
    1. في أنسجة تضمين وحدة تحكم النظام، ووضعها في قالب قاعدة نصف مليئة شمع البارافين المنصهر. التوجه السليم للغدة النخامية التضمين أمر ضروري لتلبية أقسام الاكليلية.
      2. الغدد النخامية
    2. ل P21، والكبار، ضع الغدة النخامية مع محورها قصيرة عمودي على السطح السفلي لقاعدة العفن (الطائرة القسم). استخدام وتدي العظام والأعصاب trigeminal كالمعالم التشريحية ل P0-P4 و P5-P14 بيتويتاريس، على التوالي. توجيه العينات بالاعصاب تريجيمينال أو الصفيحة مستعرضة من العظام الاسفينية عمودي على السطح السفلي لقاعدة العفن.
    3. برفق عقد الأنسجة في الموضع المطلوب مع الملقط غرامة المعالجون حتى يصبح الشمع شبه صلبة على لوحة تبريد. أعلى القالب مع شمع البارافين المنصهر. تسمح الكتلة البارافين لتبرد حتى تماما هو توطد الشمع.
      ملاحظة: يمكن علاج الغدة النخامية في يوم الجنينية 18.5 (E18.5) بنفس الطريقة كالغدة النخامية الولدان. لكن بيتويتاريس (راثكي ' s الحقائب) أصغر من E16.5 ينبغي أن تكون جزءا لا يتجزأ مع الرأس كله والمنحى مع المحور السهمي (من الفم إلى قفا) عمودي على السطح السفلي لقاعدة العفن.
  3. البرد في كتلة البارافين في-20 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة وبعد ذلك قطع رقيقة إلى شرائح (4 ميكرون سمك المفضل) مع مبضع. للحصول على المقاطع الاكليلية مرضية، تهذيب موقف كتل البارافين خلال تمزيقها. جبل شرائح الأنسجة على الشرائح الزجاجية المغلفة بوليليسيني لمنع انفصال شرائح في الإجراءات التالية.
    ملاحظة: بدلاً من ذلك، العينات يمكن أن تكون مجففة بنسبة 15%، 30% (W/V) حلول السكروز (في برنامج تلفزيوني) في 4 درجات مئوية حتى أنها تنزل إلى القاع، جزءا لا يتجزأ من مجمع cryo التضمين باستخدام نفس أسلوب التوجيه، وتجمد بسرعة على الجليد الجاف. ثم قص كتل الأنسجة المجمدة إلى شرائح من 8-10 ميكرون استخدام كريوستات. مورفولوجية cryo-الفروع، ومع ذلك، في كثير من الأحيان أقل شأنا من البارافين المقاطع.

3. ح & ه تلطيخ ووسم الفلورة

  1. الحارة الشرائح على حرارة كتلة في 55 درجة مئوية ودو مع زيلين نفط، التغييرات 2، 4 دقيقة. يذوي العينات مع الإيثانول 95% مرتين و 75% إيثانول مرتين، 3 دقيقة. يغسل الشرائح مع الماء المقطر لمدة 5 دقائق على شاكر.
  2. "على ح" & ه تلطيخ، وصمة عار المقاطع في الشب توضع حل لمدة 6 دقائق، وشطف في runnماء الصنبور جي ل 2 دقيقة، تفرق مع المياه الأمونيا 0.2% s 45، وإعادة شطف في الماء لمدة 2 دقيقة. ثم يذوي المقاطع مع الإيثانول 95% 1 دقيقة ووصمة عار مع ويوزين للحد الأدنى 2 من التتابع يذوي، واضحة، وجبل-
    3. علاج
  3. وسم الفلورة
    1. الأقسام مع الميثانول التي تحتوي على 3 ٪ ح 2 س 2 و 0.01 ٪ نان 3 لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة لإلغاء تنشيط بيروكسيداسيس الذاتية. استرداد المستضدات من الغليان المقاطع في استرجاع المخزن المؤقت (يدتا 1 مم و 1 مم تريس-HCl، درجة الحموضة 7.4) في طنجرة الضغط للحد الأدنى 2 إينكوباتي المقاطع مع حظر المخزن المؤقت (5% الماعز المصل في برنامج تلفزيوني) لمدة 30 دقيقة في 37 درجة مئوية.
    2. احتضان الأقسام مع جسم هرمون النمو المضادة (غ) الأرانب (1:2، 000) أو جسم مكافحة الدبقية فيبريلاري الحمضية البروتين (توصيني) أرنب (1:2، 000) المخفف في المخزن المؤقت لحظر بين عشية وضحاها في 4 ° C.
    3. احتضان الأقسام مع جسم الثانوي (الماعز الأرنب المضادة مفتش-برنامج الصحة الإنجابية، رافعة في المخزن المؤقت لحظر) لمدة 35 دقيقة في 37 درجة مئوية.
    4. تضخيم الإشارات باستخدام بيوتينيل تيراميدي (01:50 في تريس مخزنة المالحة التي تحتوي على نسبة 0.3% ح 2 س 2) لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، وتصور مع 488 (رافعة في حجب المخزن المؤقت, 30 دقيقة, 37 درجة مئوية) أو ستريبتافيدين-Alexa594-
    5. كونتيرستين الأنوية مع DAPI (50 مغ/لتر في برنامج تلفزيوني) لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة-
      ملاحظة: أنه لا يلزم لتضخيم الإشارات استخدام نظام التضخيم إشارة تيراميدي (TSA). بدلاً من ذلك، يمكن استخدام جسم ثانوي مترافق الأسفار تصور الإشارة-
  4. الحصول على الصور باستخدام مجهر الأسفار مجهزة × DAPI وتكساس الأحمر ومجموعات التصفية فيتك، 4/0.13 إلى × 40/0.75 الأهداف وكاميرا 5.0 ميجا بكسل. استخدام في 360 و 488 594 موجات الليزر في شمال البحر الأبيض المتوسط للتصوير DAPI، أليكسا 488-ومقاطع 594 أليكسا الملون، على التوالي. تحسين طاقة الليزر (0.8 استخدمت عموما) ووقت التعرض إلى المستويات المنشودة لكل قناة. التقاط الصورة تحت سيطرة صورة اقتناء البرمجيات وتراكب الصور الأسفار فيما بعد باستخدام برنامج معالجة الصور-

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويقدم هذا البروتوكول وسيلة تشريح الغدد النخامية من الفئران البلدان النامية. للماوس الولدان، ومنطقتي سيلا كاملة تحتوي على الغدة النخامية والأعصاب تريجيمينال، وتحت تم تشريح عظم وتدي خارجاً من قاعدة الجمجمة. الغدة النخامية صغيرة وحساسة لا تزال سليمة أثناء العملية (الشكل 1A). للفئران التي مضى عليها أكثر من 5 أيام، كانت الغدد النخامية يعلق على الأعصاب trigeminal الأفقي ثم عزلة. الهيكل الإجمالي للغدة النخامية معزولة عن P7 كذلك المحافظة على الماوس (

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لوضع بيتويتاريس مورين، كان من الصعب من الناحية الفنية للحصول على أقسام الاكليلية السليمة نظراً لخصائصها صغيرة وهشة والخصائص التشريحية الفريدة6،8. ومن ثم اختيار بعض المجموعات البحثية أبواب منتصف السهمي لتحليل مورفولوجية الجنينية والوليدية الغدة النخامية11،12. على الرغم من أن القسم منتصف السهمي للغدة النخامية أيضا قادرة على عرض أمامي، والمتوسطة، والخلفي الفصوص في شريحة واحدة، قسم الاكليلية المفضل عالية كما ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وأيد هذا العمل المنح "الوطنية الطبيعية مؤسسة العلوم الصينية" (31201086 و 31470759 و 31671219) و "شنغهاي مؤسسة العلوم الطبيعية" (12ZR1436900).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
<قوي >أدوات / معدات < / قوي >
مقص جراحي مستقيمJinZhongJ21010يمكن شراؤه من بائعين
آخرين يمكن شراء مقص ناعم - strainghtJinZhongWA1010من بائعين آخرين يمكن
ملقط حادJinZhongJD1020من بائعين آخرين
ملقط ناعمDumontRS-5015الغدة النخامية
26G (0.45 مم)HongDaلحقنة نضح عبر القلب
(1 مل)شراء 300841دينار بحرينيمن بائعين آخرين يمكن
حقنة (10 مل)دينار بحرينيمن بائعين آخرين يمكن
430165Corningمن بائعين آخرين
يمكن شراء ورق تنظيف العدسةShuangQuanمن بائعين آخرين المجهر
التشريحيOLYMPUSSZX-ILLB2-200يمكن شراؤه من بائعين آخرين يمكن
كاسيتالتضمين Thermo Fisher22-272423من بائعين آخرين
وحدة التحكم لتضمين الأنسجةيمكن شراء KEDEEKD-BM11من بائعين
MicrotomeThermo FisherHM315Rمن بائعين آخرين يمكن
شرائح Superfrost-PlusThermo Fisher22-037-246من بائعين آخرين يمكن
غطاء زجاجThermo Fisher12-543من بائعين آخرين
مجهر مضانأوليمبوسBH2-RFCAمن بائعين
آخرين < قوي>الاسم< / strong>Company< / strong> Catalog NumberComments
Recodes
UrethaneBBIEB0448
NaClSigmaS9625for PBS
KClSigmaP9541for PBS
Na2HPO4.12H2OSigma71650ل PBS
K2HPO4SigmaP2222ل PBS
NaNO2Sigma237213
حقن الصوديوم الهيبارينSPHH31022051للتروية الملحية
بارافورمالالديهايد (PFA)سيجماP6148
الإيثانولSCR10009218
الزيلينSCR10023418
البارافينثيرمو فيشر8330
هيماتوكسيلينسيجماH9627لليد & تلطيخ
Eosin YSigmaE4009لليد & E تلطيخ
الأرنب هرمون النمو المضاد للنمو (GH)الهرمونللجسم
المضاد للجسمبرنامج الغدة النخامية
الأرنب المضاد للفأر GFAP الجسم المضادSigmaG9269للتلطيخ
المناعي للماعز المضاد للأرانب IgG ، HRPجاكسون111-035-003لنظام TSA
NEN منتجات علومNEL700للتلوين المناعي
ستربتافيدين ، أليكسا فلور 594ثيرمو فيشرS32356للتلوين المناعي
المضاد ل FITC Alexa Fluor 488Thermo FisherA11090للتلوين المناعي
شراء لعزل إبرة يمكن شراء شراء شراء نظام آخرينيمكن شراء شراء شراء يمكن شراء الوطني المناعي المناعي الحياة

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Fauquier, T., Lacampagne, A., Travo, P., Bauer, K., Mollard, P. Hidden face of the anterior pituitary. Trends Endocrinol Metab. 13 (7), 304-309 (2002).
  2. Haedo, M. R., et al. Regulation of pituitary function by cytokines. Horm Res. 72 (5), 266-274 (2009).
  3. Zhu, X., Gleiberman, A. S., Rosenfeld, M. G. Molecular physiology of pituitary development: signaling and transcriptional networks. Physiol Rev. 87 (3), 933-963 (2007).
  4. Bancalari, R. E., Gregory, L. C., McCabe, M. J., Dattani, M. T. Pituitary gland development: an update. Endocr Dev. 23, 1-15 (2012).
  5. Kelberman, D., Rizzoti, K., Lovell-Badge, R., Robinson, I. C., Dattani, M. T. Genetic regulation of pituitary gland development in human and mouse. Endocr Rev. 30 (7), 790-829 (2009).
  6. Peker, S., Kurtkaya-Yapicier, O., Kilic, T., Pamir, M. N. Microsurgical anatomy of the lateral walls of the pituitary fossa. Acta Neurochir (Wien). 147 (6), 641-648 (2005).
  7. Wolpert, S. M., Molitch, M. E., Goldman, J. A., Wood, J. B. Size, shape, and appearance of the normal female pituitary gland. AJR Am J Roentgenol. 143 (2), 377-381 (1984).
  8. Carbajo-Perez, E., Watanabe, Y. G. Cellular proliferation in the anterior pituitary of the rat during the postnatal period. Cell Tissue Res. 261 (2), 333-338 (1990).
  9. Nantie, L. B., Himes, A. D., Getz, D. R., Raetzman, L. T. Notch signaling in postnatal pituitary expansion: proliferation, progenitors, and cell specification. Mol Endocrinol. 28 (5), 731-744 (2014).
  10. Tzou, S. C., Landek-Salgado, M. A., Kimura, H., Caturegli, P. Preparation of mouse pituitary immunogen for the induction of experimental autoimmune hypophysitis. J Vis Exp. (46), (2010).
  11. Budry, L., et al. Related pituitary cell lineages develop into interdigitated 3D cell networks. Proc Natl Acad Sci U S A. 108 (30), 12515-12520 (2011).
  12. Wilson, D. B., Wyatt, D. P. Histopathology of the pituitary gland in neonatal little (lit) mutant mice. Histol Histopathol. 7 (3), 451-455 (1992).
  13. Jonkers, B. W., Sterk, J. C., Wouterlood, F. G. Transcardial perfusion fixation of the CNS by means of a compressed-air-driven device. J Neurosci Methods. 12 (2), 141-149 (1984).
  14. Cao, D., et al. ZBTB20 is required for anterior pituitary development and lactotrope specification. Nat Commun. 7, 11121(2016).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Pituitary Gland DissectionCoronal Section PreparationMouse Pituitary DevelopmentTissue Embedding TechniqueSellar Region IsolationTrigeminal Nerve OrientationParaffin Wax SectioningHistological Analysis MethodImmunolabeling CompatibilityDeveloping Mouse Pituitaries

Related Articles