يصف لنا طريقة ل laminotomy في الخنازير التي توفر الوصول إلى العقد القطنية الظهرية الجذرية (DRG) لحقن إينتراجانجليونيك. رصد التقدم حقن إينتراوبيراتيفيلي والأشيع وأكد تصل إلى 21 يوما بعد الجراحة. يمكن استخدام هذا البروتوكول للدراسات الإكلينيكية المستقبلية التي تشمل حقن DRG.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
و Laminotomy للوصول إلى العقدة الجذر الظهرية القطنية وحقن في الخنازير
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
العقد الجذرية الظهرية (DRG) هي هياكل تشريحيا المعالم التي تحتوي على كافة الخلايا العصبية الحسية الأولية أسفل الرأس. وهذه الحقيقة تجعل الرسم أهدافا جذابة لحقن للمداواة رواية تهدف إلى علاج الألم المزمن. وقد استخدمت الصفيحة في نماذج حيوانية صغيرة، لتسهيل الحقن الرسم لأنه ينطوي على الاستئصال الجراحي للعمود الفقري العظام المحيطة بكل الرسم. علينا أن نظهر تقنية لحقن إينتراجانجليونيك للرسم القطني في أنواع حيوانية كبيرة، إلا وهي الخنازير. يتم تنفيذ Laminotomy للسماح بالوصول المباشر إلى الرسم باستخدام تقنيات الجراحة العصبية القياسية والأدوات والمواد. وبالمقارنة مع إزالة العظام أكثر شمولاً عن طريق الاستئصال، علينا أن ننفذ laminotomy للحفاظ على تشريح العمود الفقري أثناء تحقيق وصول DRG كاف. رصد التقدم الموضعية لحقن الرسم باستخدام صبغة غير سامة. في أعقاب القتل الرحيم بعد العمليات الجراحية في اليوم 21، يتحدد نجاح حقن الأنسجة لتوزيع إينتراجانجليونيك 4 ', 6-دياميدينو-2-فينيليندولي (DAPI). نحن حقن حلاً غير نشط بيولوجيا لتبرهن على البروتوكول. يمكن أن يكون هذا الأسلوب التطبيقية الدراسات السريرية في المستقبل بهدف الحلول العلاجية للرسم. ينبغي أن تيسر لنا منهجية اختبار طواعية نماذج الحيوانات الصغيرة إينتراجانجليونيك في أنواع حيوانية كبيرة. بالإضافة إلى ذلك، قد يعمل هذا البروتوكول كمورد أساسي لتخطيط الدراسات الإكلينيكية لحقن الرسم في الخنازير.
المقدمة
العقد الجذرية الظهرية (DRG) مجموعات منفصلة تشريحيا، والخلايا العصبية التي تقع على طول العمود الفقري. كل الرسم يحتوي على الخلايا العصبية الحسية الأولية التي ترميز وترحيل المحفزات الطرفية للجهاز العصبي المركزي (CNS) من مناطق محددة من الجسم. على سبيل المثال، يبدأ الألم من هشاشة العظام عند مستقبلات الألم الموجودة حول مشترك لإدراك المنبهات الضارة. ويطلق على هذه العملية nociception. توعية طويلة الأجل من المنبهات الضارة يؤدي إلى الألم المزمن 1.
الألم المزمن موضوع متكرر من الدراسة السريرية 2 فيها هدف واحد تطوير أساليب مفيدة للتنفيذ الهادف للمسكنات للرسم، مثل حقن إينتراجانجليونيك 3
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
عليها جميع الأساليب الموصوفة هنا "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (IACUC) لينك.
1-الشروط المسبقة لدقتها وإمكانية تكرار نتائج
- لضمان دقة التصميم، واتباع المعايير الوطنية مختبر جيدة الممارسات في جميع الأوقات، والحصول على موافقة الداخلية بواسطة IACUC (أو لجنة مماثلة) قبل أي الحيوان المشاركة في التجارب-
ملاحظة: صمم هذا البروتوكول للمحافظة على نهج المؤمنين سريرياً. وهكذا، يرد وصف المواد والأدوات، والتقنيات المستخدمة بطريقة مطابقة لأعلى معايير سريرية في البشر. على سبيل المثال، يتم اتباع أسلوب تعقيم صارمة ولا ينبغي ابدأ استخدام المواد منتهية الصلاحية. - لدعم إمكانية تكرار نتائج هذه المنهجية في إعداد تجريبية، وضع إج....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تقييم نسيجية لانتشار إينجيكتاتي
يتحدد النجاح في إيصال إينجيكتاتي إلى الرسم نسيجية تقييم DAPI تنتشر. الأسلوب الذي ينطوي على تلميح إبرة لتحديد المواقع في وسط ثلاثي الأبعاد الرسم. ولذلك، يتحدد النجاح في إيصال بتقييم مدى DAPI تلطيخ من المقاطع النسجية سواء قرب (مقاطع الرسم المركزي) والبعيدة (مقاطع الرسم الطرفية) لطرف الإبرة. الشكل 1A و 1B الشكل تمثل حقنه ناجحة للرسم واحد. تم تفريق تلطيخ DAPI بالتساوي من خلال حمة DRG المركزية والطرفية. وهكذا يتجلى .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وسعينا إلى وصف طريقة للتعرض الجراحية للرسم عن طريق laminotomy وحقن إينتراجانجليونيك في أنواع حيوانية كبيرة صحية، على وجه التحديد، من الخنازير. في القوارض، أسلوب مشابهة تم مفصلة 12 وتستخدم لتقديم عوامل دوائية التقليدية 8،10 والنواقل الفيروسية 6،7،،من912 للرسم. النتائج من الدراسات الحيوانية الصغيرة أعلاه ت.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
لا شيء؛ الكتاب قد لا يوجد تضارب في المصالح ذات الصلة بهذه الدراسة.
شكر وتقدير
وأجرى الدراسة مع دعم مؤسسة الأسرة شولز (إلى A.S.B.).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| حبال إنسانية كبيرة | بريتز & أمبير الشركة | 002539 | تم تعديله ليشمل فتحة البطن |
| المريض اللاصق - 9 بوصات | Medtronic | E7506-Ranger | |
| نظام تسخين الدم والسوائل | 3M | 24500-Lactated | |
| Ringer | Hospira | 0409-7953-09-جهاز | |
| تسخين الهواء | 3M | 77500 | - |
| محلول Duraprep مع قضيب ، 26 مل (0.7٪ يود povacrylex ، 74٪ كحول الأيزوبروبيل) | 3M | 8630-مناشف | |
| جراحية معقمة يمكن التخلص منها ثنى | شق Medline | ||
| MDT2168286-Ioban | 2 3M | 6651EZSB | - |
| علبة شفط وأنابيب Medline | DYND44703H-Button | ||
| switch قلم رصاص | أحادي القطب كهربائياMedtronic | E2450H-ملقط | |
| كهربائي ثنائي القطب مستقيم ناعم ، 4 1/2 بوصة | Bovie | A826 | - |
| # 15 شفرة | Miltex | 4-315 | - |
| # 11 شفرة | Miltex | 4-311-4 | |
| × 4 شاش جراحي | Dynarex | 3262-Weitlaner | |
| ضام ذاتي الاحتفاظ ، 8 بوصة | Miltex | 11-618 | - |
| ضام Meyerding ذاتي الاحتفاظ ، 1 × 2 3/8 بوصة | Sklar | 42-2078-Gelpi | |
| ضام ذاتي الاحتفاظ ، 7 بوصات | Sklar | 60-6570-Freer | |
| المصعد ، 5 مم | Medline | MDS4641518F-Bone | |
| Wax Ethicon | W31G-Spurling | ||
| قرص بين الفقرات ، 3 مم | Sklar | 42-2852 | - |
| Spurling 45 درجة ، عض Kerrison rongeur ، 2 مم | Medline | ||
| MDS4052802-Leksell بزاوية رونجر ، 2 مم | Sklar | 40-4097-Gelfoam | |
| ، مقاس 50 | Pfizer | ||
| AZL32301-Cottonoid | Medtronic | 8004007-Frazier | |
| طرف شفط ، 6 Fr | Sklar | 50-2006-Frazier | |
| طرف شفط ، 10 Fr | Sklar | 50-2010-Dandy | |
| حادة الزاوية اليمنى العصب هوك | Medline | MDS4005220-النايلون | |
| خياطة ، 6-0 | Ethicon | 697G-Castroviejo | |
| حامل إبرة صغيرة ناعمة | Medline | ||
| MDG2428614-22 قياس Quinke نقطة إبرة العمود الفقري | Halyard Health | 18397-32 | |
| قياس إبرة CED مع قفل محور Luer | انظر التعليقات | غير / أ | كما في: Pleticcha ، J. ، Maus ، TP ، Christner ، JA ، Marsh ، MP ، Lee ، KH ، Hooten ، W.M. ، Beutler ، A.S. التوصيل المعزز بالحمل الحراري طفيف التوغل للمواد البيولوجية في العقد الجذرية الظهرية: التحقق من الصحة في نموذج الخنزير والنمذجة المستقبلية في البشر. ملاحظة فنية. J Neurosurg. 121 (4) ، 851-8 (2014). |
| أنابيب البولي إيثيلين ، 5 أقدام | السلع العلمية | BB31695-PE / 05-حقنة | |
| مونوجيكت ، 3 مل | كيندال | SY15352-NanoJet | |
| Chemyx | 10050-DAPI | ||
| Sigma-Aldrich | D9542-Fast | ||
| Green FCF | Sigma-Aldrich | F7252-Bulb | |
| حقنة | الري Medline | ملقط | |
| Adson ذو أسنان دقيقة | DYND20125 Medline | ||
| MDS1000212-Vicryl خياطة ، خياطة Ethicon | J603H-Vicryl | ||
| 0 ، 2-0 | Ethicon | J317H-Needle | |
| Medline | NC20FBRGS-Steri-Strip | ||
| إغلاق الجلد ، 1/2x4 بوصة | 3M | R1547 | - |
المراجع
- Millan, M. J. The induction of pain: An integrative review. Prog Neurobiol. 57 (1), 1-164 (1999).
- Burma, N. E., Leduc-Pessah, H., Fan, C. Y., Trang, T. Animal models of chronic pain: Advances and challenges for clinical translation. J Neurosci Res. , (2016).
- Pleti....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
