يصف لنا طريقة ل laminotomy في الخنازير التي توفر الوصول إلى العقد القطنية الظهرية الجذرية (DRG) لحقن إينتراجانجليونيك. رصد التقدم حقن إينتراوبيراتيفيلي والأشيع وأكد تصل إلى 21 يوما بعد الجراحة. يمكن استخدام هذا البروتوكول للدراسات الإكلينيكية المستقبلية التي تشمل حقن DRG.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
و Laminotomy للوصول إلى العقدة الجذر الظهرية القطنية وحقن في الخنازير
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
العقد الجذرية الظهرية (DRG) هي هياكل تشريحيا المعالم التي تحتوي على كافة الخلايا العصبية الحسية الأولية أسفل الرأس. وهذه الحقيقة تجعل الرسم أهدافا جذابة لحقن للمداواة رواية تهدف إلى علاج الألم المزمن. وقد استخدمت الصفيحة في نماذج حيوانية صغيرة، لتسهيل الحقن الرسم لأنه ينطوي على الاستئصال الجراحي للعمود الفقري العظام المحيطة بكل الرسم. علينا أن نظهر تقنية لحقن إينتراجانجليونيك للرسم القطني في أنواع حيوانية كبيرة، إلا وهي الخنازير. يتم تنفيذ Laminotomy للسماح بالوصول المباشر إلى الرسم باستخدام تقنيات الجراحة العصبية القياسية والأدوات والمواد. وبالمقارنة مع إزالة العظام أكثر شمولاً عن طريق الاستئصال، علينا أن ننفذ laminotomy للحفاظ على تشريح العمود الفقري أثناء تحقيق وصول DRG كاف. رصد التقدم الموضعية لحقن الرسم باستخدام صبغة غير سامة. في أعقاب القتل الرحيم بعد العمليات الجراحية في اليوم 21، يتحدد نجاح حقن الأنسجة لتوزيع إينتراجانجليونيك 4 ', 6-دياميدينو-2-فينيليندولي (DAPI). نحن حقن حلاً غير نشط بيولوجيا لتبرهن على البروتوكول. يمكن أن يكون هذا الأسلوب التطبيقية الدراسات السريرية في المستقبل بهدف الحلول العلاجية للرسم. ينبغي أن تيسر لنا منهجية اختبار طواعية نماذج الحيوانات الصغيرة إينتراجانجليونيك في أنواع حيوانية كبيرة. بالإضافة إلى ذلك، قد يعمل هذا البروتوكول كمورد أساسي لتخطيط الدراسات الإكلينيكية لحقن الرسم في الخنازير.
المقدمة
العقد الجذرية الظهرية (DRG) مجموعات منفصلة تشريحيا، والخلايا العصبية التي تقع على طول العمود الفقري. كل الرسم يحتوي على الخلايا العصبية الحسية الأولية التي ترميز وترحيل المحفزات الطرفية للجهاز العصبي المركزي (CNS) من مناطق محددة من الجسم. على سبيل المثال، يبدأ الألم من هشاشة العظام عند مستقبلات الألم الموجودة حول مشترك لإدراك المنبهات الضارة. ويطلق على هذه العملية nociception. توعية طويلة الأجل من المنبهات الضارة يؤدي إلى الألم المزمن 1.
الألم المزمن موضوع متكرر من الدراسة السريرية 2 فيها هدف واحد تطوير أساليب مفيدة للتنفيذ الهادف للمسكنات للرسم، مثل حقن إينتراجانجليونيك 3. ومع ذلك، الرسم يصعب الوصول إليها نظراً لأنهم يقيمون داخل حدود الثقب الفقرية 4بوني. العديد من المجموعات التغلب بنجاح على هذه العقبة من خلال استخدام جراحة العمود الفقري في القوارض 5،6،،من78،،من910.
في العيادة، الاستئصال هو عملية مشتركة للعمود الفقري، ويشير إلى الاستئصال الجراحي للصفيحة الفقرية، مما أونروفينج الفقري القناة 11. إدماج التقنيات الجراحية لتوفير إمكانية الوصول المباشر من الرسم قد نجحت في القوارض 5،12، ومع ذلك، قد تكون الترجمة غير الواقعي الاختلافات النظر في حجم الهياكل ذات الصلة والكيفية التي يؤثر الدوائية أو الجدوى التقنية 13،14. على سبيل المثال، حددت الدراسة واحد قطر الحبل الشوكي عرضية في T10 إلى 3.0 و 7.0 و 8.2 مم للفئران والخنازير والإنسان، على التوالي 15. وهكذا، النماذج الحيوانية الكبيرة أفضل التقريبي الأبعاد البشرية لهياكل الجهاز العصبي.
في الخنازير، تستخدم روري et al. الصفيحة متعدد المستويات للوصول إلى الحبل الشوكي عنق الرحم ل حقن إينتراسبينال متعددة 16. الإجراء كان جيد التحمل وأدت إلى مرحلة أنا التجارب السريرية حيث كانت النتائج الجراحية مقارنة موثقة 17. هذه النتائج تشجع الاستمرار في استخدام نماذج حيوانية كبيرة الإكلينيكية تنبؤ للجدوى التقنية والسلامة في البشر.
وحتى الآن، يوجد لا منهجية مفصلة للوصول إلى العمليات الجراحية والحقن للرسم في أنواع حيوانية كبيرة. لتضييق هذه الفجوة متعدية الجنسيات، ونحن التقرير بروتوكول للتعرض للرسم وحقن عن طريق laminotomy في الخنازير. واستخدمت تقنيات الجراحة العصبية القياسية والأدوات، والمواد، والأسلوب الذي صمم لتقليد الممارسة الجراحية الحديثة. ونحن تثبت حقن إينتراجانجليونيك باستخدام محلول مائي للرسم القطني وتأكيد التسليم الناجحة عبر الأنسجة بعد بعد العمليات الجراحية يوم 21.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
عليها جميع الأساليب الموصوفة هنا "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (IACUC) لينك.
1-الشروط المسبقة لدقتها وإمكانية تكرار نتائج
- لضمان دقة التصميم، واتباع المعايير الوطنية مختبر جيدة الممارسات في جميع الأوقات، والحصول على موافقة الداخلية بواسطة IACUC (أو لجنة مماثلة) قبل أي الحيوان المشاركة في التجارب-
ملاحظة: صمم هذا البروتوكول للمحافظة على نهج المؤمنين سريرياً. وهكذا، يرد وصف المواد والأدوات، والتقنيات المستخدمة بطريقة مطابقة لأعلى معايير سريرية في البشر. على سبيل المثال، يتم اتباع أسلوب تعقيم صارمة ولا ينبغي ابدأ استخدام المواد منتهية الصلاحية. - لدعم إمكانية تكرار نتائج هذه المنهجية في إعداد تجريبية، وضع إجراءات التشغيل الموحدة الداخلية والسيطرة لتقلب في سلالة الخنازير والوزن والجنس والعمر بين أفواج منفصلة.
ملاحظة: يستند تصميم هذا البروتوكول إلى استخدام الخنازير وزنها 38-53 كجم
2. رعاية الحيوان قبل العملية
- إدارة سيفتيوفور (IM) العضلي الاتقائية، إعطاء 5 ملغ/كغ، يوم واحد قبل الإجراء.
- حيوانات أغذية الصلبة بسرعة وتقييد الحيوانات من العلاجات التجميلية، أي النفط الحمامات، ح 12 قبل الإجراء.
- التخدير العام الحث ضمن ح 1 من الإجراء، باستخدام الدردشة تيليتاميني وزولازيبام، تيلازول في 5 مغ/كغ، وايم إكسيلازيني، نظراً للساعة 2 مغ/كجم
- بمجرد فعل، إدارة (SC) تحت الجلد البوبرينورفين يستمر الإفراج (SR)، النظر في 0.18 ملغم/كجم
- مكان قسطرة الوريد إذن وإجراء تنبيب التسلسل السريع لوضع أنبوب داخل رغامى.
- نعلق نبضي مع معدل ضربات القلب الرصد وظيفة للسان لرصد معدل ضربات القلب والأكسجين. وضع الحيوان في موقف المعرضة
- وقصاصة الجلد على دورسوم استخدام ماكينة كهربائية. قص الشعر على مساحة كبيرة، والثنائية تمتد من الطائرة السهمي خط الوسط للطائرة الاكليلية خط الوسط وطوليا من ذروة المقدسة بالاشواك المنكب. استخدم شريط لاصق لإزالة الشعر والجلد التعويم الحر.
- فرك المنطقة المقطوعة تصل إلى 3 مرات بالماء الدافئ والصابون وتجفيف الجلد باستخدام منشفة خالية من الوبر.
- مارك المعالم التشريحية الثنائية باستخدام قلم تمييز العمليات جراحية. الاحتفال آخر الأضلاع، والقمم حرقفي، العمليات الشائكة، وعمليات عرضية.
ملاحظة: بمناسبة آخر الأضلاع، القمم الحرقفي، وعمليات عرضية، العمود الفقري القطني هو ترسيم على طول حدوده أعلى وأدنى والأفقي، على التوالي. قد تم تصميم هذا البروتوكول لتوجيه الوصول وحقن من أي DRG القطني من الفائدة. للإشارة، القمم حرقفي متفوقة تتماشى مع مستوى العمود الفقري L3 أو L4. - تغطي الحيوان ببطانية دافئة للنقل إلى جناح المنطوق.
3. لتحديد المواقع في "جناح منطوق"
- برفق أرفع وموقف الحيوان المعرضة إلى حيوان إنسانية كبيرة تم تعديل حبال مع فتحه البطن مبطن.
ملاحظة: فتحه البطن يسمح لتخفيض الضغط البطن مشابهة للإطار ويلسون المستخدمة أثناء الجراحة البشرية في العمود الفقري. وفي المقابل، هذا يقلل المضاعفات النزف من الأوعية الدموية العمود الفقري. حبال لأنه مفيد الساقين ويسمح لشنق بحرية من خلال فتحات المحشوة التي تحمي الحيوان من اصطدام الأعصاب الطرفية. ومع ذلك، نظراً لأن الإطار حبال مصنوع من المعدن، ينبغي مبطن مع العزل تجنب عرقلة الكهربائية وحرق الحيوانات غير مقصود. يمكن أن توضع لفة بطانية لوضع الرأس والرقبة في وضع مريح، تبعاً لحجم الحيوان. - المحافظة على التخدير العام استخدام % 1-3 استنشاقه isoflurane (IH)، معاير للتأثير. ترطيب العينين مع مرهم العيون والشريط بلطف لهم إغلاق.
- خطوط مكان لرصد علامة حيوية للوثيقة درجة الحرارة وضغط الدم ومعدل ضربات القلب والأوكسجين. مراقبة التهوية عن طريق كابنوجرافي-
- ضع قطب المشتتة الكهربائية لاصقة، المتاح على الكتف الأيمن أو الأيسر. استعد
- إدارة "المسابقة لاكتاتيد" ' s كسوائل الصيانة عن طريق قسطرة الوريد الإذن. إعطاء السوائل بمعدل 5-10 مل/كغ/h.
- مكان جهاز الاحترار الجوي أجبر أكثر من منطقة الصدر وسرطان عنق الرحم وتجنب تغطي الأضلاع الأخيرة-
4. إعداد العقيمة "من ميدان المنطوق" لحقنه من جانب اليسار
ملاحظة: من هذه النقطة إلى الأمام، المضي قدما في أزياء العقيمة الدقيق.
- تحضير الجلد تغمر بداية الفقرات القطنية مع التطبيق الواسع النطاق لنسبة 0.7 في المائة اليود بوفاكريليكس و 74% كحول الأيزوبروبيل وفقا للشركة المصنعة ' تعليمات s. للتأكد من أن الإبرة دليل يمكن وضعها في وقت لاحق بطريقة عقيمة، لاتيراليزي التطبيق إلى الجانب الحقن المخططة بتمديد مراجعتان نحو الطائرة الاكليلية خط الوسط في الماضي عمليات عرضية ملحوظ.
- المكان المتاح المناشف الجراحية في أزياء مستطيلة مخطط الموقع شق المخطط الذي يتم عبر خط الوسط على طول العمليات الشائكة القطني ملحوظ.
- تطبيق لاصقة مضادات الميكروبات جداً ثني على المناشف المنطوق وتعرض الجلد. المشبك الستائر في مكان وتمتد على حافة القماش قبالة ميدان المنطوق.
- الآمنة ثني رأسي للبولنديين على رأس حبال بين ميدان المنطوق والرصد الفني. خطوط
- آمنة لشفط وكهربيه داخل ميدان المنطوق لقط للستائر العقيمة. تمرير الحرة نهايات الأنابيب والأسلاك الخروج من حقل معقم.
5. الجلد شق وتشريح سوببيريوستيل
- جس القطني العمليات الشائكة على طول خط الوسط، وتحديد مستويات العمود الفقري على التوالي 3.
- استخدام مشرط #15 لفتح شق خط الوسط 8-12 سم السهمي عن طريق ثني إينسيسي الخلفي مباشرة في العمليات الشائكة. المحافظة على استخدام سد شاش وكهربيه أحادي القطب الأرقاء.
ملاحظة: أن الحرص لا تحيد عن خط الوسط كما الشق متقدمة في الاتجاه الأمامي لأن هذا يحد من النزيف من العضلات باراسبينال. وييسر الجس الدوري للعمليات الشائكة النهوض. قد وضعت ذاتي الاحتفاظ الكامشات ويتلانير، أو ميييردينج، أو جلبي وموضعها حسب الحاجة لتيسير التشريح. يتم استخدام الشفط للحفاظ على الرؤية. - تشريح النسيج تحت الجلد والدهون باستخدام كهربية أحادي القطب حتى يتم التوصل إلى اللفافة ما. جس العمليات الشائكة العميقة إلى اللفافة ما وقطع اللفافة على طول خط الوسط لفضح الرباط سوبراسبينوس التي تمتد بين العمليات الشائكة.
ملاحظة: يتم تعريف اللفافة ما غمد المنظمة، أبونيوروتيك مع حبة نسيج الضام التي يشابك في مائلة، أفقي إلى الاتجاه الآنسي. عند هذه النقطة، قد تطول الشق في أي من الاتجاهين أعلى أو أدنى التأكد من أن العمليات الشائكة 3 مرئية تماما مع العملية الشائكة سينتيرموست الانحياز داخل مركز مجال تشريح. - استخدام شفرة #15 لوضع شق 2 مم باراساجيتال عميق من خلال الرباط سوبراسبينوس الخلفي لكل عملية الشائكة. ضع كل شق على طول الثالث الأيسر من السطح الخلفي من العملية الشائكة. الإصدار
- برفق في الرباط سوبراسبينوس في كل مستوى على طول كل لجنة التفاوض الحكومية الدوليةإيسيون استخدام مصعد أكثر تحرراً 5 مم.
- تحديد الطائرة سوببيريوستيل وتشريح داخل الطائرة على طول السطح الأفقي لكل عملية الشائكة.
- إجراء تشريح subperiosteal في كل العملية الشائكة بطريقة موازية للتأكد من أن لطيف، والتشريح حتى يتحقق.
- جداً المرفق العضلات باراسبينال على طول المسافات interspinous استخدام كهربية أحادي القطب في الحفل مع تشريح سوببيريوستيل.
- تحديد الصفيحة على كل مستوى، ومواصلة تشريح subperiosteal أفقياً للوصول إلى الحدود الجانبية في المفاصل zygapophyseal 2 التي تربط فقرات المكشوفة 3 والتوصل إلى الحافة الجانبية الصفيحة بين المفاصل، ودعا بارس interarticularis.
ملاحظة: هو interarticularis بارس الحدود الخلفي من الثقبة الفقرية حيث يتواجد الرسم. في بعض الأحيان، ينشأ الوريد صغيرة من ثقبة تقع على السطح الخلفي الصفيحة. هذه الأوردة لديهم ميل إلى تمزق أثناء تشريح سوببيريوستيل. الأرقاء يتحقق بسهولة باستخدام مزيج من القطبين كهربية والشمع العظام تطبق على الثقبة-
6. مستوى واحد Laminotomy
- تحديد هدف laminotomy الصفيحة سينتيرموست يقع بين والانسي في المفاصل zygapophyseal 2-
- تتبع الصفيحة إلى حافته السفلي، إلى نقطة وسطى فقط لعملية مفصلي أدنى متجاورة المشترك zygapophyseal والذيلية.
- استخدام مصعد أكثر تحرراً 5 مم أو كورت لجس الانتقال بين حافة الصفيحة والقناة الوسطى كودالموست-
ملاحظة: الحرص على لا قوة الصك بالباتينج الأمامي كهذا سيكون الاتصال دورال الكيس والحبل الشوكي. علما بأن يمتد الحبل الشوكي في الخنازير الفقرات القطنية 18. يمكن استخدامها قرص الفقرية رونجيور لإزالة الأنسجة اللينة إضافي تغمر هذا المجال لتيسير الجس. - الاستخدام 2 مم حتى قضم، 45 درجة كرسون رونجيور لاستخراج العظام بطريقة بيسيويسي. إزالة العظام على طول قاعدة العملية الشائكة ﻷسلحته إلى مستوى والذيلية فقط على السطح والذيلية بيديكلي والخروج أفقياً إلى مداها الكامل.
- استخدام زاوية رونجيورس العظام للمساعدة في إزالة العظام. تترك هذه العملية مفصلي أقل شأنا الذي كان متصلاً بالصفيحة في المكان حتى تكتمل إلى حد كبير و laminotomy-
- التأكد من أن عملية مفصلي أقل شأنا بحرية متنقلة وتعلق فقط بواسطة الكبسولة المشتركة زيجابوفيسيل. جداً الكبسولة باستخدام شفرة #15 أو #11-
- إزالة عملية مفصلي أقل شأنا بطريقة بيسيويسي ولكن ترك عملية مفصلي متفوقة المجاورة سليمة.
ملاحظة: اكتمال و laminotomy، يتم إجراء الأرقاء كهربية بين القطبين. لا يتم استخدام كهربية أحادي القطب بسبب قربها الهياكل العصبية. يمكن وضع الشمع العظام على طول مواقع النزيف من العظام المكشوفة والإسفنج الجيلاتين الامتصاص يمكن استخدامها للحصول على الأرقاء القرب من الأنسجة اللينة. كوتونويد أداة مفيدة للسائل المصلي الفتيل والدم بعيداً عن التشريح.
7. تشريح للرسم
- افاكواتي الدهون فوق الجافية بطريقة بيسيويسي من سطحية لبداية العميق ميديالى وتسير أفقياً. إزالة الدهون بتشريح لطيف باستخدام الملقط القطبين والشفط مع نصائح شفط "الفرنسية فرايزر" 6-10-
ملاحظة: لتكبير العدسة أو استخدام مجهر تشريح مفيدة في توفير مستوى التفاصيل اللازمة لإخلاء الدهون فوق الجافية بأمان وتحقيق دقيق الأرقاء من الضفيرة الوريدية الجافية استخدام كهربية بين القطبين- - تحديد الكيس دورال على طول خط الوسط يعمل في اتجاه سوبيروينفيريور، موازية لمحور شق الجلد. إزالة الدهون فوق الجافية على طول الكيس دورال حتى يمكن رؤية الكيس دورال تثير جلبه جذر العصب دورال.
- تتبع الأكمام دورال جانبياً وإينفيريورلي بإخلاء الدهون فوق الجافية حتى يتضح لتكبير حولها الرسم.
ملاحظة: تحديد الرسم على شكل بيضاوي والأصفر إلى اللون البرتقالي. في العمود الفقري القطني منتصف، الرسم هو عادة 4-6 مم في الحجم وأطول في الآنسي إلى الاتجاه الأفقي، ويقع مباشرة دونية أو الآنسي للها بيديكلي الخاصة بكل منها 2-3 مم. يمكن استخدام ربط عصب كليلة، ذو زاوية يمنى لجس برفق بيديكلي- - إخلاء الدهون فوق الجافية أفقياً، في الماضي الرسم، حتى ينظر في العصب الشوكي المجاور.
ملاحظة: في حالة حدوث دوروتومي، إصلاحها بمحكم الإغلاق استخدام خياطة نايلون 6-0 وبرنامج التشغيل السلس إبرة صغيرة في شتيخ تشغيل بسيطة.
8. حقن DRG
- استخدام إبرة 22-قياس العمود الفقري لتوجيه مسار إبرة التسليم المعزز (CED) 32-قياس الحمل الحراري. ثقب الإبرة دليل قياس 22 عن طريق عضلات الجلد وباراسبينال-
ملاحظة: الإبرة صعقة يرمي إلى تحقيق الحراري السوائل في الأنسجة، والمعروف أيضا تدفق الجزء الأكبر، بسبب الضغط التدرجات 19 ، 20- - ترمي الإبرة دليل على طول مسار يقارب المحور الطولي للرسم وينتج عنه نصيحة إبرة الناشئة عن الجدار الجانبي باراسبينال حقل التشريح.
- غرامة ضبط مسار إبرة حتى التجويف إبرة بمحاذاة مع مركز الرسم.
ملاحظة: الإبرة دليل ينبغي ابدأ أن يسمح للاتصال الرسم. - وضع إينجيكتاتي العقيمة في محقن معقم والاتصال حقنه بأنابيب ضخ العقيمة.
- يد المحاقن خارج الحقل العقيمة وتأمين الأنابيب إلى الإبرة صعقة. الاتصال حقنه بمضخة الحقن لبرمجة-
ملاحظة: أنابيب مستعدة ليبلغ طوله 5 أقدام ضمان الإبقاء على العقم والتنقل. أيضا، من الأهمية بمكان أن إدخال لا فقاعات الهواء في الحل- - المضي قدما في إينجيكتاتي حتى يعتبر التعبير من طرف إبرة CED. مكان الإبرة صعقة داخل التجويف إبرة دليل
- والنهوض ببطء الإبرة صعقة حتى يتضح من طرف إبرة دليل. ضمان أن لا هو ثقب في الرسم أثناء محاذاة الإبرة.
- غرامة قيمتها موقف إبرة دليل على طول المحور طويلة من مساره لتحديد الموقع النهائي لنصيحة صعقة.
- تأمين الدليل إبرة والإبرة صعقة معا باستخدام المتشابكة إبرة محاور حالما يتحقق العمق والمحاذاة للدليل والإبر CED.
- تأكيد أن كافة اتصالات أجهزة الحقن تماما المضمون، بما في ذلك دليل الإبرة، صعقة الإبرة، وأنابيب اتصال محملة إينجيكتاتي.
- دفع الإبرة دليل على طول محورها طويل لتقريب صعقة إبرة نصيحة والرسم.
- الثقب الرسم مع طرف إبرة صعقة.
- سوبميرسي نصيحة إبرة صعقة في وسط ثلاثي الأبعاد الرسم.
ملاحظة: نظراً لأن الرسم هيكل ثلاثي الأبعاد متغير الحجم والشكل، التعرض للرسم يجب أن تكون كاملة من أجل دقة مكان نصيحة إبرة صعقة في مركز حقيقي للرسم. يقع مركز الرسم الحقيقي عند التقاطع في ثلاثة محاور التشريحية، وهما الأمامي إلى الخلفي، الأفقي إلى الآنسي، ومتفوقة على محاور أدنى. - تسليم 100 ميكروليتر من إينجيكتاتي بصعقة باستخدام معدل تخرج وحجم الخطوات 3-
- ميكروليتر تسليم 4 في 2 ميكروليتر/دقيقة للخطوة الأولى. تسليم 8 ميكروليتر في 4 ميكروليتر/دقيقة للخطوة الثانية. تسليم ميكروليتر 88 في 8 ميكروليتر/دقيقة للخطوة الثالثة والأخيرة-
ملاحظة: تسمح بوقفه 3-دقيقة بين الخطوات وبعد الخطوة النهائية للسماح للموازنة الضغط. - سحب جهاز الحقن، بعد الخطوة النهائية الحقن ووقفه 3-مين على طول محورها طويل في حركة ناعمة، رقيقة.
ملاحظة: لحقن الحلول التي عديم اللون، يتم تضمين صبغة ملونة في الحل بتركيز 0.1% وزن/حجم للمساعدة في تقييم المرئي ل التوزيع إينجيكتاتي 12. أيضا، الصبغة الحيوية 4 '، 6-دياميدينو-2-فينيليندولي (DAPI) يتم تضمينها في الحل بتركيز 0.25 ميكروغرام/ميكروليتر عند تصميم الدراسة يتطلب تقييم نسيجية ل التوزيع إينجيكتاتي 5-
9. إغلاق
- تطبيق 3 جولات من الري المالحة الدافئة إلى الموقع الجراحي قبل الإغلاق لتعبئة ومسح موقع الحطام، أي العظام الشظايا. استخدام الشفط لاستعادة المياه المالحة والحطام.
ملاحظة: الأرقاء دقيق يكفل عند الري لا يزال واضحا. تتم إزالة عوامل مرقئ (الجيلاتين الأسفنج) وكوتونويد في هذا الوقت. التأكد من أن جميع المواد والأدوات قد أزيلت من موقع شق قبل الإغلاق- - استخدام أسلوب 3-الطبقات للإغلاق.
- خياطة اللفافة ما استخدام خياطة 0 بطريقة بسيطة، وتوقف، noninverted. ضع شتيخ كل 5-8 ملم لتحقيق محكم الإغلاق-
- خياطة الأنسجة تحت الجلد باستخدام خياطة 2-0 بطريقة بسيطة، وتوقف، والمقلوب مع غرزة وضع كل 5 إلى 8-مم لتحقيق القوة الكافية.
- إغلاق الجلد باستخدام خياطة 0 في بسيطة، وتشغيل أو توقف الموضة.
- استخدام عداد إبرة لضمان أن لا الأدوات الحادة في عداد المفقودين له.
- ري الجلد مع المالحة والجلد الجاف ووضع شرائط ضمادة لاصقة عمودي على الشق.
- مكان الشاش فوق ضمادة شرائط وإرفاق مادة لاصقة نهائية الميكروبات جداً ثني.
10. رعاية الحيوان بعد العمليات الجراحية
- اكستوباتي، تغطي ببطانية دافئة، ونقل الحيوانات إلى الانتعاش.
- اتباع إجراءات التشغيل المؤسسية الموحدة للرصد والتعافي من الجراحة البقاء على قيد الحياة بعد العمليات الجراحية. كحد أدنى، مراقبة الحيوان كل 15 دقيقة حتى عودة الوعي، وكل ساعة حتى يتحقق الانتعاش الكامل مخدر، ومرتين يوميا بعد ذلك.
- توفير إدارة الألم بعد العمليات الجراحية بإدارة الدردشة أو عن طريق الفم والايبوبروفين، النظر في 4 مغ/كغ، مرة واحدة يوميا لمدة 5 أيام تبدأ من يوم بعد العمليات الجراحية 0. إدارة اتفاقية استكهولم البوبرينورفين ريال، تعطي 0.18 مغ/كغ، مرة واحدة في اليوم بعد العمليات الجراحية 2-
- إدارة مراجعتان بعد العمليات الجراحية بإعطاء سيفتيوفور إيم، إعطاء 5 ملغ/كغ، مرة واحدة في اليوم بعد العمليات الجراحية 4-
- إزالة ضمادة على المنطوق بعد يوم 5-7. إزالة خياطة الجروح التئام الجروح عند الانتهاء، عادة في مرحلة ما بعد المنطوق يوم 10-14-
- إنسانية euthanize الحيوان وفقا لإجراءات التشغيل المؤسسية الموحدة حالما يتم التوصل إلى نقطة نهاية الدراسة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تقييم نسيجية لانتشار إينجيكتاتي
يتحدد النجاح في إيصال إينجيكتاتي إلى الرسم نسيجية تقييم DAPI تنتشر. الأسلوب الذي ينطوي على تلميح إبرة لتحديد المواقع في وسط ثلاثي الأبعاد الرسم. ولذلك، يتحدد النجاح في إيصال بتقييم مدى DAPI تلطيخ من المقاطع النسجية سواء قرب (مقاطع الرسم المركزي) والبعيدة (مقاطع الرسم الطرفية) لطرف الإبرة. الشكل 1A و 1B الشكل تمثل حقنه ناجحة للرسم واحد. تم تفريق تلطيخ DAPI بالتساوي من خلال حمة DRG المركزية والطرفية. وهكذا يتجلى ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وسعينا إلى وصف طريقة للتعرض الجراحية للرسم عن طريق laminotomy وحقن إينتراجانجليونيك في أنواع حيوانية كبيرة صحية، على وجه التحديد، من الخنازير. في القوارض، أسلوب مشابهة تم مفصلة 12 وتستخدم لتقديم عوامل دوائية التقليدية 8،10 والنواقل الفيروسية 6،7،،من912 للرسم. النتائج من الدراسات الحيوانية الصغيرة أعلاه ت...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
لا شيء؛ الكتاب قد لا يوجد تضارب في المصالح ذات الصلة بهذه الدراسة.
شكر وتقدير
وأجرى الدراسة مع دعم مؤسسة الأسرة شولز (إلى A.S.B.).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| حبال إنسانية كبيرة | بريتز & أمبير الشركة | 002539 | تم تعديله ليشمل فتحة البطن |
| المريض اللاصق - 9 بوصات | Medtronic | E7506-Ranger | |
| نظام تسخين الدم والسوائل | 3M | 24500-Lactated | |
| Ringer | Hospira | 0409-7953-09-جهاز | |
| تسخين الهواء | 3M | 77500 | - |
| محلول Duraprep مع قضيب ، 26 مل (0.7٪ يود povacrylex ، 74٪ كحول الأيزوبروبيل) | 3M | 8630-مناشف | |
| جراحية معقمة يمكن التخلص منها ثنى | شق Medline | ||
| MDT2168286-Ioban | 2 3M | 6651EZSB | - |
| علبة شفط وأنابيب Medline | DYND44703H-Button | ||
| switch قلم رصاص | أحادي القطب كهربائياMedtronic | E2450H-ملقط | |
| كهربائي ثنائي القطب مستقيم ناعم ، 4 1/2 بوصة | Bovie | A826 | - |
| # 15 شفرة | Miltex | 4-315 | - |
| # 11 شفرة | Miltex | 4-311-4 | |
| × 4 شاش جراحي | Dynarex | 3262-Weitlaner | |
| ضام ذاتي الاحتفاظ ، 8 بوصة | Miltex | 11-618 | - |
| ضام Meyerding ذاتي الاحتفاظ ، 1 × 2 3/8 بوصة | Sklar | 42-2078-Gelpi | |
| ضام ذاتي الاحتفاظ ، 7 بوصات | Sklar | 60-6570-Freer | |
| المصعد ، 5 مم | Medline | MDS4641518F-Bone | |
| Wax Ethicon | W31G-Spurling | ||
| قرص بين الفقرات ، 3 مم | Sklar | 42-2852 | - |
| Spurling 45 درجة ، عض Kerrison rongeur ، 2 مم | Medline | ||
| MDS4052802-Leksell بزاوية رونجر ، 2 مم | Sklar | 40-4097-Gelfoam | |
| ، مقاس 50 | Pfizer | ||
| AZL32301-Cottonoid | Medtronic | 8004007-Frazier | |
| طرف شفط ، 6 Fr | Sklar | 50-2006-Frazier | |
| طرف شفط ، 10 Fr | Sklar | 50-2010-Dandy | |
| حادة الزاوية اليمنى العصب هوك | Medline | MDS4005220-النايلون | |
| خياطة ، 6-0 | Ethicon | 697G-Castroviejo | |
| حامل إبرة صغيرة ناعمة | Medline | ||
| MDG2428614-22 قياس Quinke نقطة إبرة العمود الفقري | Halyard Health | 18397-32 | |
| قياس إبرة CED مع قفل محور Luer | انظر التعليقات | غير / أ | كما في: Pleticcha ، J. ، Maus ، TP ، Christner ، JA ، Marsh ، MP ، Lee ، KH ، Hooten ، W.M. ، Beutler ، A.S. التوصيل المعزز بالحمل الحراري طفيف التوغل للمواد البيولوجية في العقد الجذرية الظهرية: التحقق من الصحة في نموذج الخنزير والنمذجة المستقبلية في البشر. ملاحظة فنية. J Neurosurg. 121 (4) ، 851-8 (2014). |
| أنابيب البولي إيثيلين ، 5 أقدام | السلع العلمية | BB31695-PE / 05-حقنة | |
| مونوجيكت ، 3 مل | كيندال | SY15352-NanoJet | |
| Chemyx | 10050-DAPI | ||
| Sigma-Aldrich | D9542-Fast | ||
| Green FCF | Sigma-Aldrich | F7252-Bulb | |
| حقنة | الري Medline | ملقط | |
| Adson ذو أسنان دقيقة | DYND20125 Medline | ||
| MDS1000212-Vicryl خياطة ، خياطة Ethicon | J603H-Vicryl | ||
| 0 ، 2-0 | Ethicon | J317H-Needle | |
| Medline | NC20FBRGS-Steri-Strip | ||
| إغلاق الجلد ، 1/2x4 بوصة | 3M | R1547 | - |
المراجع
- Millan, M. J. The induction of pain: An integrative review. Prog Neurobiol. 57 (1), 1-164 (1999).
- Burma, N. E., Leduc-Pessah, H., Fan, C. Y., Trang, T. Animal models of chronic pain: Advances and challenges for clinical translation. J Neurosci Res. , (2016).
- Pleticha, J., Maus, T. P., Beutler, A. S. Future directions in pain management: integrating anatomically selective delivery techniques with novel molecularly selective agents. Mayo Clin Proc. 91 (4), 522-533 (2016).
- Standring, S. The anatomical basis of clinical practice. , Elsevier Churchill. Edinburg. (2005).
- Fischer, G., et al. Direct injection into the dorsal root ganglion: technical, behavioral, and histological observations. J Neurosci Methods. 199 (1), 43-55 (2011).
- Zhao, X., et al. A long noncoding RNA contributes to neuropathic pain by silencing Kcna2 in primary afferent neurons. Nat Neurosci. 16 (8), 1024-1031 (2013).
- Xu, Y., Gu, Y., Wu, P., Li, G. W., Huang, L. Y. M. Efficiencies of transgene expression in nociceptive neurons through different routes of delivery of adeno-associated viral vectors. Hum Gene Ther. 14 (9), 897-906 (2003).
- Puljak, L., Kojundzic, S. L., Hogan, Q. H., Sapunar, D. Targeted delivery of pharmacological agents into rat dorsal root ganglion. J Neurosci Methods. 177 (2), 397-402 (2009).
- Mason, M. R. J., et al. Comparison of AAV serotypes for gene delivery to dorsal root ganglion neurons. Mol Ther. 18 (4), 715-724 (2010).
- Jelicic Kadic, A., Boric, M., Kostic, S., Sapunar, D., Puljak, L. The effects of intraganglionic injection of calcium/calmodulin-dependent protein kinase II inhibitors on pain-related behavior in diabetic neuropathy. Neurosci. 256, 302-308 (2014).
- Greenberg, M. S. Handbook of neurosurgery. , Thieme. (2010).
- Yu, H., Fischer, G., Hogan, Q. H. AAV-mediated gene transfer to dorsal root ganglion. Methods Mol Biol. 1382, 251(2016).
- Yaksh, T. L., et al. Pharmacology and toxicology of chronically infused epidural clonidine HCL in dogs. Toxicol Sci. 23 (3), 319-335 (1994).
- Federici, T., et al. Surgical technique for spinal cord delivery of therapies: demonstration of procedure in gottingen minipigs. J Vis Exp. (70), e4371(2012).
- Lee, J. H. T., et al. A novel porcine model of traumatic thoracic spinal cord injury. J Neurotrauma. 30 (3), 142-159 (2013).
- Raore, B., et al. Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs. Spine. 36 (3), e164(2011).
- Riley, J., et al. Intraspinal stem cell transplantation in amyotrophic lateral sclerosis: A phase I safety trial, technical note, and lumbar safety outcomes. Neurosurg. 71 (2), 405-416 (2012).
- Olmarker, K., Holm, S., Rosenqvist, A., Rydevik, B. Experimental nerve root compression. A model of acute, graded compression of the porcine cauda equina and an analysis of neural and vascular anatomy. Spine. 16 (1), 61-69 (1991).
- Bobo, R. H., et al. Convection-enhanced delivery of macromolecules in the brain. Proc Natl Acad Sci U.S.A. 91 (6), 2076-2080 (1994).
- Lonser, R. R., Sarntinoranont, M., Morrison, P. F., Oldfield, E. H. Convection-enhanced delivery to the central nervous system. J Neurosurg. 122 (3), 697-706 (2015).
- Shen, J., Wang, H. Y., Chen, J. Y., Liang, B. L. Morphologic analysis of normal human lumbar dorsal root ganglion by 3D MR imaging. AJNR Am J Neuroradiol. 27 (0195–6108 (Print)), 2098-2103 (2006).
- Pleticha, J., et al. Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans. J Neurosurg. 121 (4), 851-858 (2014).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
