نموذج إعداد وتصوير اكسوسوميس مجهر إلكتروني

Min Kyo Jung; Ji Young Mun

doi:10.3791/56482

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

نموذج إعداد وتصوير اكسوسوميس مجهر إلكتروني

40.4K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/56482

⸱

يناير 4, 2018

Min Kyo Jung¹ , Ji Young Mun²

¹Department of Convergence Medicine, University of Ulsan College of Medicine and Asan Institute for Life Sciences, Asan Medical Center, ²Synaptic Circuit Plasticity Laboratory, Department of Structure and Function of Neural Network, Korea Brain Research Institute

في هذه المقالة

ملخص

ويصف هذا البروتوكول مختلف التقنيات اللازمة مجهر إلكتروني بما في ذلك صبغة سلبية، وتمزيقها سامسونج للهيكل المفصل، ووضع العلامات لتحديد مواقف محددة من البروتينات في اكسوسوميس المناعية والذهب.

الملخص

اكسوسوميس هي حويصلات خارج الخلية نانو الحجم يفرزها سوائل الجسم، ومن المعروف أن تمثل خصائص الخلايا التي تفرز لهم. وتعكس محتويات ومورفولوجية الحويصلات يفرز سلوك الخلية أو الحالة الفسيولوجية، على سبيل المثال نمو الخلايا، والهجرة والانقسام، والموت. قد يتوقف دور اكسوسوميس عاليا في الحجم، ويختلف حجم اكسوسوميس من 30 إلى 300 نانومتر. الأسلوب الأكثر استخداماً لتصوير اكسوسومي تلطيخ سلبية، في حين تستند النتائج الأخرى في البرد مجهر إلكتروني، وفحص المجهر الإلكتروني، ومجهر القوة الذرية. مورفولوجيا اكسوسومي نموذجية لتقييمها عن طريق تلطيخ السلبي شكل كوب، ولكن المزيد من التفاصيل ليست واضحة بعد. اكسوسومي تتسم جيدا من خلال دراسة الهيكلية اللازمة خاصة في المجالات الطبية والصيدلانية. ولذلك، ينبغي التحقق من مورفولوجيا تعتمد على الدالة بتقنيات الميكروسكوب الإلكتروني مثل وسم بروتين محددة في هيكل اكسوسومي مفصلة. لمراقبة الهيكل المفصل، قورنت سامسونج مقطعة والصور السلبية الملون من اكسوسوميس. ونقترح في هذا البروتوكول، مجهر إلكتروني لتصوير اكسوسوميس بما في ذلك صبغة سلبية وتلطيخ المناعية جبل كله وإعداد كتلة، قسم رقيقة ووسمها المناعية والذهب.

المقدمة

حويصلات خارج الخلية (EVs) حويصلات بلير الدهن يفرز من الخلايا، ويتراوح حجمها بين 30 و 300 نانومتر. تم الإبلاغ عن المركبات الكهربائية أولاً في عام 1978، مع الأدلة من حويصلات من المرضى الذين يعانون من مرض هودجكن¹. هذه الحويصلات أفيد بأن 40 إلى 120 نانومتر في الحجم. في عام 1980، أفيد بأن المركبات الكهربائية وتشارك في نظام تخثر وتجلط الدم، تشكيل تجلط الدم داخل الأوعية الدموية في مرضى السرطان². بعد 30 عاماً، أبلغ المركبات الكهربائية لتكون عاملاً مهما لتعزيز غزو الورم، ومحصنة ضد الهرب، وتولد الأوعية³. وبالإضافة إلى ذلك، قد درست وظائف المركبات الكهربائية حسب المنظمين في التفاعلات الخلوية في المناطق من الا....