في الماضي، أجرى تشعيع الحيوانات الصغيرة عادة دون القدرة على استهداف من حجم ورم تحديداً جيدا. وكان الهدف تقليد معاملة جليوبلاستوما البشرية في الفئران. باستخدام منصة تشعيع حيوانات صغيرة، نحن إجراء التصوير بالرنين المغناطيسي يسترشد تشعيع الامتثالي 3D مع زيادة حجم الفرعي المستندة إلى الحيوانات الأليفة في إعداد السريرية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الحيوانات الأليفة والتصوير بالرنين المغناطيسي يسترشد تشعيع نموذج الفئران جليوبلاستوما استخدام الصغرى--إيرادياتور
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
على مدى عقود، أجريت أبحاث الإشعاع الحيوانات الصغيرة معظمهم استخدام الأجهزة التجريبية الخام إلى حد كبير تطبيق تقنيات شعاع واحد بسيط دون القدرة على استهداف من حجم ورم أو محددة تحديداً جيدا. وتم تسليم الإشعاع استخدام مصادر إشعاعية ثابتة أو المعجلات الخطية تنتج الأشعة السينية ميجافولتاجي (MV). هذه الأجهزة غير قادرة على تحقيق الدقة ملليمتر الفرعية المطلوبة للحيوانات الصغيرة. وعلاوة على ذلك، تسليم جرعات عالية تعوق الأنسجة المحيطة سليمة استجابة التقييم. زيادة الترجمة بين الدراسات الصغيرة على الحيوانات والبشر، أن هدفنا تقليد معاملة جليوبلاستوما البشرية في نموذج الفئران. لتمكين تشعيع أكثر دقة في إعداد السريرية، في الآونة الأخيرة، وضعت برامج البحوث الإشعاعية الحيوانات الصغيرة الموجهة بصورة الدقة. مماثلة لنظم التخطيط البشري، يستند العلاج التخطيط في هذه الجزئية-إيرادياتورس على التصوير المقطعي (CT). ومع ذلك، التباين المنخفض الأنسجة اللينة في الأشعة المقطعية يجعل من صعبة للغاية لترجمة الأهداف في بعض الأنسجة، مثل الدماغ. ولذلك، تتضمن التصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي)، التي قد تباين الأنسجة اللينة ممتازة مقارنة بالأشعة المقطعية، سيمكن أكثر دقة تحديد الهدف التشعيع. في آخر العقد البيولوجية أيضا تقنيات التصوير، مثل التصوير المقطعي بالبوزيترون (PET) اكتسب الفائدة لتوجيه العلاج العلاج بالإشعاع. الحيوانات الأليفة يمكن التصور مثلاً، واستهلاك الجلوكوز، والأحماض الأمينية النقل أو نقص، الموجودة في الورم. استهداف تلك الأجزاء عالية التكاثري أو مقاومة للإذاعة للورم مع جرعة أعلى يمكن أن تعطي فائدة البقاء على قيد الحياة. هذا الافتراض أدى إلى إدخال حجم الورم البيولوجية (فيروس اللسان الأزرق)، بالإضافة إلى وحدة التخزين الهدف الإجمالي التقليدية (GTV) ووحدة التخزين الهدف السريرية (CTV)، ووحدة التخزين الهدف المخطط لها (بي تي).
في مختبر التصوير السريري من جامعة غينت، تتوفر الصغير-إيرادياتور وحيوانات صغيرة الأليفة تي حيوانات صغيرة 7 التصوير بالرنين المغناطيسي. وكان الهدف دمج تشعيع الموجهة بالتصوير بالرنين المغناطيسي، وزيادة حجم الفرعية الموجهة بالحيوانات الأليفة في نموذج الفئران جليوبلاستوما.
المقدمة
الدبقي عالية الجودة هو ورم خبيث في الدماغ الأكثر شيوعاً والأكثر عدوانية في البالغين المصابين متوسط بقاء سنة واحدة على الرغم من طرائق المعاملة الحالية. ويشمل معيار العناية القصوى الاستئصال الجراحي يتبعه العلاج الإشعاعي شعاع الخارجية مجتمعة (RT) وتيموزولوميدي (زد)، متبوعاً بصيانة زد1،،من23. منذ إدخال زد الآن أكثر من 15 عاماً، بذلت لا تحسينات كبيرة في علاج هذه الأورام. ولذلك، تنفيذ استراتيجيات علاجية جديدة عاجلة بل ينبغي التحقيق الأولى في نماذج العلاج السرطان الحيوانات الصغيرة (معظمهم من الفئران والجرذان). يمكن استخدام نماذج القوارض الحاملة للورم للتحقيق في مدى فعالية البروتوكول....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على الدراسة بلجنة أخلاقيات التجارب على الحيوانات (النماء 09/23 ونماء الطفولة المبكرة 12/28). يمكن الاطلاع على جميع التفاصيل التجارية في الجدول للمواد.
1-F98 جيجابايت الفئران نموذج الخلية
- الثقافة الخلايا F98 غيغابايت، والتي تم الحصول عليها من ATCC، في مونولاييرس باستخدام دولبيكو لتعديل "النسر المتوسطة" مصل العجل 10%، البنسلين 1%، ستربتوميسين 1%، 1% ل الجلوتامين و 0.1% الامفوتريسين ب، وفي حاضنة2 CO (5% CO2 و 37 درجة مئوية).
- تلقيح خلايا الدبقي في الدماغ من إناث الفئران F344 فيشر (وزن الجسم ز 170).
- استخدام أدوات معقمة وارتداء قفازات معقمة في جميع الأوقات. ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
لتقليد المنهجية المعاملة الإنسانية تشعيع جليوبلاستوما في نموذج الإكلينيكية، إدراج العلاج بالأشعة الموجهة بالتصوير بالرنين المغناطيسي ضروري. باستخدام بكتبس وواجهة مايكرو-إيرادياتور كنا قادرين على تشعيع جليوبلاستوما F98 في الفئران مع أقواس غير للديوكسينات الامتثالي متعددة تستهدف المنطقة تعزيز التباين في التصوير بالرنين المغناطيسي T1 المرجحة17. استخدمت هيئة جامدة التحولات في تركيبة مع سرير طرائق متعددة لتسجيل الصورة بين التصوير بالرنين المغناطيسي وتخطيط قيراط واختير إ.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
لتحقيق إشعاع دقيقة الهدف جليوبلاستوما ورم في الدماغ الفئران، التوجيه CT على متن الطائرة الصغيرة إيرادياتور لم تكن كافية. أورام الدماغ مرئية لا يكاد نظراً لتباين الأنسجة اللينة غير كافية، حتى إذا كانت ستستخدم في تعزيز النقيض. على هذا النحو، يحتاج التصوير بالرنين المغناطيسي لإدراجها للسماح التشعيع أكثر دقة. استخدام عملية امتلاك السيد متسلسلة على نظام تي 7 واكتساب CT في الدقيقة-إيرادياتور تمكنا من استهداف الجرعة لانسجة الورم تعزيز التباين في الدماغ وحساب جرعات خطة استخدام قيراط التخطيط وكان هذا ممكناً بعد حسابات الانصهار وا.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب قد لا يوجد تضارب في الكشف عن
شكر وتقدير
المؤلف يود أن يشكر Stichting لوكا هيميلايري، والرابطة الدولية لدعم هذا العمل.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <قوي > جيجابايت نموذج RAT < / قوي > F98 | |||
| خط خلية الورم الأرومي الدبقي | ATCC | CRL-2397 | |
| Fischer F344 / Ico crl Rats | Charles River | N / A | |
| نظام Micropump | World Precision | Instruments UMP3 | مايكرو 4: https://www.wpiinc.com/products/top-products/make-selection-ump3-ultramicropump/#tabs-1 |
| إطار تجسيمي | Kopf | 902 | موديل 902 الإطار التجسيمي المزدوج للحيوانات الصغيرة |
| الثقاب | Velleman | VTHD02 | https://www.velleman.eu/products/view/?id=370450 |
| شمع العظام | Aesculap | 1029754 | https://www.aesculapusa.com/products/wound-closure/hemostatic-bone-wax |
| حقنة الأنسولين ميكروفين | بيكتون ديكنسون | 320924 | 1 مل ، 29 جرام |
| مصباح الأشعة تحت الحمراء الأشعة | فيليبس | HP3616 / 01 | |
| Ethilon | Ethicon | 662G / 662H | FS-2 ، 4-0 ، 3/8 ، 19 مم |
| Name< / strong> | Company< / strong> | رقم الكتالوج | Comments |
| Cell culture | |||
| DMEM | Invitrogen | 14040-091 | |
| Penicilline-Streptomycine | Invitrogen | 15140-148 | |
| L-glutamine | Invitrogen | 25030-032 | |
| Fungizone | Invitrogen | 15290-018 | |
| Trypsin-EDTA | Invitrogen | 25300-062 | |
| PBS | Invitrogen | 14040-224 | |
| Falcons | Thermo Scientific | 178883 | 175 سم 2< / sup> سطح nunclon ، مستهلكات لزراعة الخلايا مع أغطية المرشح |
| وسط تجميد الخلايا | Sigma-aldrich | C6164 | خلية تجميد متوسطة-DMSO ، معقمة مفلترة ، مناسبة بالنسبة لزراعة الخلايا ، تم اختبار السموم |
| الداخلية < قوي > الاسم < / قوي > | < قوي > الشركة < / strong > | < قوي > رقم الكتالوج < / strong > | التعليقات < strong > |
| Animal irradiation < / strong > | |||
| Micro-irradiator | X-strahl | SARRP | |
| software for التشعيع | X-strahl | نظام تخطيط العلاج قبل السريري (PCTPS) ، الإصدار 2.0.5. | |
| <قوي>الاسم | <قوي>الشركة | رقم الكتالوج | تعليقات |
| animal pet الصغيرة< / strong> | |||
| microPET إمكانية النظام 1 | Molecubes | B-Cube | http://www.molecubes.com/b-cube/ |
| microPET إمكانية النظام 2 | TriFoil التصوير, Northridge CA | FLEX Triumph II | http://www.trifoilimaging.com |
| PET متتبعات | داخلية مصنوعة | من 18F-FDG, 18F-FET, 18F-FAZA, 18F-الكولين | |
| <قوي>الاسم | الشركة | Catalog Number | Comments |
| Small animal MRI | |||
| نظام التصوير بالرنين المغناطيسي الصغير | Bruker Biospin | Pharmascan 70/16 | https://www.bruker.com/products/mr/preclinical-mri/pharmascan/overview.html |
| عامل تباين Dotarem | عامل | تباين التصوير بالرنين المغناطيسي Guerbet ، Dotarem 0,5 مليمول / مل | |
| P-H02LE-070 | |||
| وحدة تسخين مائية | Bruker Biospin | MT0125 | |
| 30 G إبرة للحقن الوريدي | Beckton-Dickinson | 305128 | 30 G |
| PE 10 أنابيب (60 سم / حقن) | مختبرات Instech، Inc | BTPE-10 | BTPE-10 ، أنابيب البولي إيثيلين 0.011 × .024 بوصة (0.28 × 60 مم) ، غير معقمة ، بكرة 30 م (98 قدما) ، مختبرات Instech، Inc اجتماع بليموث PA USA- (800) 443-4227- http://www.instechlabs.com |
| الشعيرات الدموية الدقيقة غير الهيبارينية | GMBH | 7493 21 | تمتلئ هذه الشعيرات الدموية بالماء لإنشاء علامات مرئية على التصوير بالرنين المغناطيسي و CT |
| strong>Name | Company | Catalog Number | Comments |
| >Consumables | |||
| إيزوفلوران: إيزوفلو | زويتيس | B506 | التخدير |
| كيتامين: كيتاميدور | إيكوفار | التخدير | |
| زيلازين: سيداكسيل | كوديفار إن في | قسطرة التخدير | |
| Terumo | Versatus-W | 26G | |
| تيموزولوميد | سيجما ألدريتش | T2577-100MG | العلاج الكيميائي |
| DMSO | سيجما ألدريتش | 276855-100 مل | |
| حقنة الأنسولين ميكروفين | بيكتون ديكنسون | 320924 | 1 مل ، 29 |
| جم <قوي>الاسم < / strong> | Company | Catalog Number | Comments |
| >Image analysis | |||
| برنامج PMOD | PMOD technologies LLC | PFUS (أداة الانصهار) برنامج | قياس كمية الصور الطبية الحيوية (BIQS) ، الإصدار 3.405 ، https://www.pmod.com/web/?portfolio=22-image-processing-pfus |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anesthesia-equipment | |||
| نقل التخدير | ASA LTD | ASA 0039 | ASA LTD ، 5 Valley Road ، Keighley ، BD21 4LZ |
| مولد الأكسجين | التقنيات البيطرية Int. | 7F-3 | BDO-Medipass, Ijmuiden |
المراجع
- Stupp, R., et al. Promising survival for patients with newly diagnosed glioblastoma multiforme treated with concomitant radiation plus temozolomide followed by adjuvant temozolomide. J Clin Oncol. 20 (5), 1375-1382 (2002).
- Dhermain, F.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
