يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

إجراءات تصنيع وقياسات إنكسار مزدوج لتصميم أيون لانثانيدات مغناطيسيا استجابة خالب فسفوليبيد التجميعات

7K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/56812

⸱

يناير 3, 2018

 ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory of Food Process Engineering, ETH Zurich, 2MAX IV Laboratory, Lund University

في هذه المقالة

ملخص

وترد الإجراءات تلفيق لايون لانثانيدات استجابة عالية مغناطيسيا خالب بوليموليكولار التجميعات. الاستجابة المغناطيسية يمليها حجم الجمعية، التي هي مصممة بقذف من خلال الأغشية نانوبوري. الجمعيات اليجنابيليتي مغناطيسي والتغيرات الهيكلية الناجمة عن الحرارة تخضع مقاييس إنكسار مزدوج، تقنية مجانية للرنين المغناطيسي النووي وتشتت النيوترونات زاوية صغيرة.

الملخص

بيسيليس تجميعات الانضباطي القرص مثل بوليموليكولار التي تكونت من مجموعة كبيرة ومتنوعة من خليط الدهن. تطبيقات تتراوح من غشاء بروتين الدراسات الهيكلية بالرنين المغناطيسي النووي (الرنين المغناطيسي النووي) للتطورات نانوتيتشنولوجيكال بما في ذلك تشكيل الهلام نشطة ضوئياً ومغناطيسيا للتحويل. هذه التكنولوجيات تتطلب مراقبة ارتفاع حجم الجمعية والاستجابة المغناطيسية والمقاومة الحرارية. خليط من 1، 2-ديميريستويل-sn-جليسيرو-3-phosphocholine (دمبك) وبه أيون لانثانيدات (Ln3 +) خالب فسفوليبيد المتقارن، 1، 2--ديميريستويل-تريامينيبينتاسيتاتي-جليسيرو-3-والرمات-ايثانولامين-الغلايكول (sn دمبيدتبا)، التجمع في الجمعيات استجابة عالية مغناطيسيا مثل دمبك/دمب-دتبا/Ln3 + (المولى نسبة 4:1:1) بيسيليس. مقدمة من نسبة الكولسترول في الدم (شول-OH) ومشتقات الستيرويد في نتائج بلير في مجموعة أخرى من الجمعيات توفر الخصائص الفيزيائية-الكيميائية الفريدة. لتكوين دهن معين، اليجنابيليتي المغناطيسي يتناسب مع حجم بسيلي. كومبليكسيشن Ln3 + النتائج في الردود المغناطيسي لم يسبق لها مثيل من حيث الحجم والمحاذاة اتجاه. الحرارية-عكسها انهيار هياكل شبيهة بالقرص إلى حويصلات عند التسخين يسمح للخياطة لإبعاد الجمعيات بقذف من خلال مرشحات الغشاء مع أحجام مسام المعرفة. يتم إعادة إنشاء بيسيليس النابل مغناطيسيا بالتبريد إلى 5 درجات مئوية، أسفر عن أبعاد الجمعية تعرف حويصلة والسلائف. هنا، هو تفسير هذا الإجراء تلفيق وهو كمياً اليجنابيليتي المغناطيسي للجمعيات بقياسات إنكسار مزدوج تحت حقل مغناطيسي تي 5.5. كذلك تمكن الإشارة إنكسار مزدوج، منشؤها بلير فسفوليبيد، رصد بوليموليكولار التغييرات التي تطرأ بلير. هذه التقنية البسيطة مكملة لتجارب الرنين المغناطيسي النووي التي تستخدم عادة لوصف بيسيليس.

المقدمة

بيسيليس هي بوليموليكولار القرص مثل التجميعات التي تم الحصول عليها من العديد دهن المزائج. 1 , 2 , 3 , 4 , 5 أنها تستخدم على نطاق واسع لتوصيف الجزيئات الحيوية الغشاء الهيكلي بالتحليل الطيفي الرنين المغناطيسي النووي. 6 , 7 ولكن الجهود التي بذلت مؤخرا تهدف إلى توسيع مجال التطبيقات الممكنة. 5 , 8 , 9 أهم درس بيسيلي وتتألف من خليط من 1، 2-ديميريستويل-sn-جليسيرو-3-phosphocholine (دمبك)، التي تشكل الجزء مستو من الجمعية العامة، و 1، 2-ديهيكسانويل-sn-جليسيرو-3-phosphocholine (DHPC) فسفوليبيد تغطي الحافة. 1 , 2 , 3 هندسة جزيئية فوسفوليبيدات يؤلف بلير إملاء بنية هيكل بوليموليكولار الذاتي تجميعها. 4 , 5 استبدال DHPC مع دتبا دمب يولد أنظمة بسيلي استجابة عالية مغناطيسيا والانضباطي. 10 , 11 دمبك/دمب-دتبا/Ln3 + (المولى نسبة 4:1:1) بيسيليس المنتسبين مع العديد من أيونات لانثانيدات باراماجنيتيك أكثر (Ln3 +) على السطح لبلير، أسفر عن استجابة مغناطيسية معززة. 10 علاوة على ذلك، الاستعاضة عن الجزيئات DHPC للذوبان في الماء مع دمب-دتبا/Ln3 + يتيح تشكيل بيسيليس المقاوم للتخفيف. 11

اليجنابيليتي المغناطيسي للجمعيات بوليموليكولار مستو تمليه على الطاقة المغناطيسية عموما،

figure-introduction-1(1)

حيث B هو قوة الحقل المغناطيسي، figure-introduction-2 ن المستمر، المغناطيسي عدد التجميع و figure-introduction-3 تباين قابلية دياماجنيتيك الجزيئية الدهون يؤلف في بيلايير. ولذلك، مصمم خصيصا استجابة دمبك/دمبي-دتبا/Ln3 + بيسيليس للحقول المغناطيسية بحجمها (n العدد الكلي) و Δχ تباين قابلية دياماجنيتيك الجزيئية. ويتحقق هذا الأخير سهولة بتغيير طبيعة Ln الكلاب3 +. 12 , 13 , 14 , 15 إدخال نسبة الكولسترول في الدم (شول-OH) أو مشتقات ستيرويد أخرى في بيلايير يتيح إمكانية ضبط n العدد الكلي و Δχ قابلية مغناطيسية للجمعيات. 11 , 16 , 17 , 18 , 19 لتكوين دهن معين، تتضمن التجميعات أكبر الدهون أكثر قادرة على الإسهام في هماج (n عدد أكبر تجميعية)، أسفر عن الأنواع اليجنابل أكثر. على سبيل المثال، حجم دمبك/DHPC بيسيليس، يسيطر تقليديا من خلال الاستغلال الأمثل لتركيز الدهن يؤلف نسبة أو مجموعة. 20 , 21 , 22 على الرغم من أن هذا أمر ممكن في دمبك/دمبي-دتبا/Ln3 + بيسيليس، تحولها عكسها الحرارية من بيسيلي إلى حويصلات عند تدفئة العروض إضافة خيارات للخياطة. يعني الميكانيكية مثل قذف من خلال مرشحات غشاء يسمح تشكيل الحويصلات. يتم إعادة إنشاء بيسيليس اليجنابل مغناطيسيا عند التبريد إلى 5 درجة مئوية وهي تملي أبعادها من السلائف حويصلة. 11 هيرين، نحن نركز على إمكانات التصنيع الميكانيكي الإجراءات مع دمبك/دمبي-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) أو دمبك/تشول-أوه/دمبي-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5) كالنظم المرجعية. وتعمل العملية المثل عند العمل مع سائر Ln3 + من الخرائط المواضيعية3 +. مجموعة واسعة من الإمكانيات التي تتيحها هذه التقنيات وأبرزت في الشكل 1 ونوقشت باستفاضة في أماكن أخرى. 23

figure-introduction-4
رقم 1: نظرة عامة التخطيطي الإجراءات الممكن تصنيع. درس مغناطيسيا النابل Ln3 + شيلاتينغ بوليموليكولار التجميعات مؤلفة من أما دمبك/دمب-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) أو دمبك/تشول-أوه/دمب-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5). الفيلم الدهن الجاف هو رطب مع عازلة فوسفات 50 مم في قيمة الرقم الهيدروجيني 7.4 وتركيز الدهون الإجمالية 15 ملم. ترطيب فعال للفيلم الدهن يتطلب أما تجميد ذوبان دورات (قدم) أو تدفئة وتبريد دورات (ح & ج). ح & ج دورات ضرورية لتجديد عينات بعد تجميد الماضي ذوبان خطوة، أو لتجديد عينات أبقى مجمدة على مدى فترة طويلة من الزمن إذا كانت ستستخدم دون مزيد من الإقصاء. وتناقش هذه الخطوات على نطاق واسع من إيسابيتيني وآخرون. وتتحقق 23 بوليموليكولار اليجنابل أقصى التجميعات، تسليم أبنية الجمعية مختلفة استناداً إلى تكوين الدهن. حجم بيسيلي واليجنابيليتي المغناطيسي الانضباطي بقذف (تحويله) من خلال مرشحات غشاء نانوبوري. حسبت عوامل بمحاذاة قدمو من زاوية صغيرة في 2D النيوترون نثر (SANS) أنماط دمبك/تشول-أوه/دمبي-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5) عينة مقذوف من خلال 800، 400، 200، أو 100 المسام شمال البحر الأبيض المتوسط. بلا قياسات هي وسيلة مكملة للتحديد الكمي للمحاذاة بيسيلي التي لن تكون مشمولة بمزيد من التفصيل هنا. 11 , 16 Aو تتراوح بين-1 (التشتت النيوتروني موازية أو المحاذاة العمودية بيسيليس فيما يتعلق باتجاه المجال المغناطيسي) إلى 0 لنثر الخواص.الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

ودرست بنية بيسيليس على نطاق واسع بمجموعة واسعة من تقنيات الوصف. 13 تم كمياً محاذاة بيسيليس المعرضة لمجال المغناطيسي باستخدام مطيافية الرنين المغناطيسي النووي أو زاوية صغيرة النيوترون تجارب نثر (بلا). 5 , 10 , 11 , 12 , 13 , 16 , 17 , 18 , 19 , 24 , 25 لكن التحول وتوسيع قمم الرنين المغناطيسي النووي تحدث حضور Ln3 + قيود خطيرة على الأسلوب. 15 , 26 , 27 , 28 "بلا على الرغم من أن" التجارب لا تعاني من هذا القيد، بديلة وتقنيات أكثر يسرا ومن المستصوب للقياس الكمي الروتينية لمحاذاة مغناطيسيا مستحث التجميعات في الحل. إنكسار مزدوج القياسات بديلاً صالحاً وبسيطة نسبيا. المثل تكشف قياسات إنكسار مزدوج لتجارب الرنين المغناطيسي، معلومات قيمة بشأن ترتيبات جديدة الدهن والدهن المراحل التي تحدث في بلير. وعلاوة على ذلك، يتم رصد التحولات الهندسية التي تحدث في الجمعية بوليموليكولار مع تغير الظروف البيئية مثل درجة الحرارة. 11 , 12 , 13 , 16 Δn′ مغناطيسيا مستحث إنكسار مزدوج، قد استخدمت لدراسة مختلف أنواع النظم فسفوليبيد. 13 , 29 , 30 مقاييس إنكسار مزدوج استناداً إلى تقنية التحوير المرحلة في مجال المغناطيسي وسيلة فعالة للكشف عن اتجاه بيسيليس. 12 , 16 , 18 , 29 , 31 , 32 إمكانية التحقيق بيسيليس مع إنكسار مزدوج في الحقول المغناطيسية عالية تصل إلى 35 ر كما تجلى ليبي M. et al. 13

عندما يدخل الضوء المستقطبة مادة متباين، سوف يتخلله في موجه العادية وغير العادية. 11 دفعتين بسرعات مختلفة وهي تحول في المرحلة قبل δ التخلف العقلي. يتم قياس درجة التخلف العقلي δ وتحويلها إلى إشارة إنكسار مزدوج figure-introduction-5 لقياس درجة تباين في استخدام المواد

figure-introduction-6(2)

حيث λ هو طول موجه بالليزر ومد هو سمك العينة. فوسفوليبيدات بصريا متباينة، وعلى المحور البصري يتزامن مع محاورها الجزيئية منذ وقت طويل، موازية لذيول الهيدروكربونية. 11 , 12 التخلف العقلي لا يقاس إذا هي الموجه فوسفوليبيدات عشوائياً في الحل. يتم قياس التخلف العقلي عند محاذاة فوسفوليبيدات موازية لبعضها البعض. إنكسار مزدوج مغناطيسيا مستحث figure-introduction-7 يمكن أن يكون علامة إيجابية أو سلبية تبعاً لاتجاه الجزيئات في المجال المغناطيسي؛ انظر الشكل 2. فوسفوليبيدات الانحياز موازية للمحور السيني سيؤدي إلى صورة سلبية figure-introduction-8 ، في حين أن تسفر تلك المنحازة على طول محور ع إيجابية figure-introduction-9 . ويلاحظ لا إنكسار مزدوج المحور البصري عندما تتزامن مع اتجاه انتشار الضوء كما فسفوليبيد محاذاة موازية للمحور الصادي.

figure-introduction-10
الشكل 2: محاذاة فوسفوليبيدات وعلامة المقابلة لانكسار مزدوج مغناطيسيا مستحث figure-introduction-11 . علامة قياس figure-introduction-12 يعتمد على اتجاه فسفوليبيد في المجال المغناطيسي. تشير الخطوط المتقطعة إلى المحور البصري للجزيء. الضوء هو الاستقطاب في 45°، وتنتشر في اتجاه y. المجال المغناطيسي ب في الاتجاه z. وقد تم تعديل هذا الرقم من م. ليبي. 11 الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

في حالة وقف الغروية الخواص بيسيليس، سيتم اتجاه المستحث بترتيب فوسفوليبيدات في بيلايير فقدان، التصفير δ التخلف العقلي. كما يجب محاذاة بيسيليس بغية توجيه فوسفوليبيدات بصريا النشطة في ما بيلاييرس، مما تسبب في δ التخلف العقلي ضوء الاستقطاب. ونتيجة لذلك، إنكسار مزدوج أداة حساسة لقياس المغناطيسية اليجنابيليتي من الجمعيات بوليموليكولار. بيسيليس محاذاة خط عمودي على المجال المغناطيسي سوف تسفر عن إيجابية figure-introduction-13 ، في حين أن تلك الانحياز مواز سوف تسفر عن سلبية figure-introduction-14 . العلامة يعتمد على المواءمة بين الإعداد وقد راجعت مع عينة مرجعية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1-التصنيع الداخلي دمبك/دمب-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) وجمعيات دمبك/تشول-أوه/دمب-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5) بوليموليكولار

  1. التحضيرات الأولية
    1. أغسل جميع الأواني الزجاجية واسطة بيغ مرة واحدة مع الإيثانول استقرت كلوروفورم (> كلوروفورم 99 ٪) والجافة بالهواء المضغوط.
    2. إنتاج 2 متميزة 10 ملغ/مل حلول الأسهم دمبك ودتبا دمبي في كلوروفورم استقرت الإيثانول (> كلوروفورم 99 ٪)، حل أسهم 10 ملم شول-أوه في كلوروفورم استقرت الإيثانول (> كلوروفورم 99 ٪) وحل أسهم 10 مم تمكل3 في والميثانول.
    3. إعداد المخزن مؤقت فوسفات 50 مم في قيمة الرقم الهيدروجيني 7.4 بخلط 0.121 ز من ثنائي هيدرات فوسفات هيدروجين الصوديوم وز 0.599 اللامائى دي-الصوديوم فوسفات الهيدروجين في 100 مل من النقاوة H2o.
  2. إعداد الفيلم الدهن الجاف
    1. المبالغ المطلوبة من أمفيفيليس (دمبك دتبا دمب واختيارياً شول-OH) و Ln3 + الأسهم الحلول في وزن منفصلة 3 مل الزجاج الأداة الإضافية-كوب مع حقنه زجاجية 2.5 مل.
      1. لحجم عينة 3 مل دمبك/دمب-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1: تركيز الدهون الإجمالية 1، 15 ملم)، تزن 3.6435 ز الحل دمبك الأسهم، 1.4731 ز الحل الأسهم دتبا دمب و 0.7126 ز الحل تمكل الأسهم3 .
      2. لكمية عينة 3 مل من دمبك/تشول-أوه/دمب-دتبا/Tm3 + (16:4:5:5 نسبة المولى، وتركز الدهون الإجمالية 15 ملم)، في 2.9148 ز الحل الأسهم دمبك ز 1.4731 الحل الأسهم دتبا دمب و 1.0749 غ من محلول الأسهم شول-يا وز 0.7126 من وزن الحل تمكل الأسهم3 .
        تنبيه: كلوروفورم الميثانول والسامة والمتفجرة في درجة حرارة الغرفة. تعمل تحت غطاء دخان والمضي قدما على وجه السرعة مع القياسات الشامل.
    2. نقل محتوى الأداة الإضافية-كوب مل 25 جولة قارورة السفلي. مسح كل الأدوات الإضافية-كأس في قارورة أسفل جولة مع حوالي 2.5 مل المذيب المقابلة.
    3. إزالة المذيب تحت فراغ في مبخر دوراني عند 40 درجة مئوية. تعيين الضغط الأولى إلى 30 000 السلطة الفلسطينية حتى تتم إزالة معظم المذيبات. الحد من الضغط على 100 الجاف العينة تحت التناوب لحد أدنى من 2 حاء والسلطة الفلسطينية الحصول على فيلم دهن جاف موحدة على جدران زجاجية قارورة.
    4. ضع الفيلم الدهن الجاف لمدة 1 دقيقة تحت دفق مستمر من الأرجون تجنب الأكسدة الدهنية في الهواء وتخزين العينة في الثلاجة قبل الإماهة.
  3. ترطيب الفيلم الدهن الجاف
    1. إضافة مل 3 من المخزن المؤقت للفوسفات إلى قارورة أسفل جولة للوصول إلى تركيز دهن الكلي من 15 ملم.
    2. القيام بدوره (قدم) ذوبان تجميد التي تغرق قارورة تحت التناوب في النتروجين السائل حتى يتم تجميد شامل (توقف النتروجين السائل المغلي)، ثم الحرارة مرة أخرى تصل إلى 60 درجة مئوية قبل وضع العينة لمدة 5 دقائق في حمام مائي، يحوم في قارورة باستمرار إلى المساعدة في عملية الصهر. تطبيق 30 s فورتيكسينج قبل كل دورة التجميد عندما تكون العينة السائلة المعونة الماء الفيلم الدهن.
      ملاحظة: الفيلم الدهن لا يجب أن تكون مرئية على جدران قارورة بعد تجميد الثانية دورة ذوبان.
    3. كرر 1-3-2 مجموع خمس مرات. إغلاق قارورة مع غطاء لتجنب التبخر لا لزوم لها للفوسفات المخزن المؤقت عندما تكون العينة الساخنة. قد يكون مؤقتاً في البروتوكول عندما يتم تجميد العينة.
    4. المضي قدما إلى اثنين من تدفئة وتبريد (ح & ج) دورات تستقر عينة الخروج من آخر خطوة التجميد، أو تبقى مجمدة لمدة تصل إلى شهرين. حرارة العينة إلى 40 أو 60 درجة مئوية دمبك/دمبي-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) أو دمبك/تشول-أوه/دمبي-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5)، على التوالي، قبل التبريد إلى 5 درجة مئوية في 1 درجة مئوية/دقيقة الحفاظ على العينة 5 دقيقة في الحد الأقصى والحد الأدنى درجات الحرارة دورة.
    5. الآن، أما تحديد إشارة إنكسار مزدوج من العينة في حقل مغناطيسي خارجي (الخطوة 2) أو كذلك قذف العينة لتكييف أبعاد بيسيلي والمغناطيسية اليجنابيليتي (الخطوة 1، 4).
      ملاحظة: دمبك/دمبي-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) عينات هي تتألف أساسا من بيسيليس قطره يعني هيدرودينامية دح 70 نانومتر كما كشف بتوزيع أرقام تم الحصول عليها من تشتت الضوء الحيوي (DLS) القياسات في 5 درجة مئوية. هذه العينات تحتوي أيضا على الجمعيات بوليموليكولار أكبر مع د يعنيح 500 نانومتر كما يتبين من توزيع كثافة. دمبك/تشول-أوه/دمبي-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5) العينات غاية بوليديسبيرسي في الحجم مع توزيع كثافة نموذجي الكشف عن د يعنيح 700 نانومتر، بينما تكشف توزيع عدد سكان تهيمن أصغر بيسيليس في نطاق حجم 200 نانومتر. توزيع حجم أكثر تفصيلاً والبرد صور المجهر الإلكتروني انتقال هذه العينات قد أبلغت عن إيسابيتيني et al. 23
  4. البثق للجمعيات بوليموليكولار.
    1. تجميع الطارد كما هو مبين في الشكل 3. استخدام قفازات وملاقط مع حماية أنابيب السليكا للمناولة. ويت ورق الترشيح (5) مع بضع قطرات من المخزن المؤقت للسماح لموضع أمثل لتصفية الأغشية (6). تأكد من أن الورقة قد لا طيات بعد وضع الدائري (7) على أعلى.
      ملاحظة: تم اختبار عملية البثق على غشاء فلاتر (6) مع قطر مسام من 800 و 400، 200 و 100 نانومتر؛ انظر الشكل 7.
    2. تعيين حمام المياه إلى 40 درجة مئوية دمبك/دمبي-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) عينات أو 60 درجة مئوية دمبك/تشول-أوه/دمبي-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5) عينات لضمان تشكيل الحويصلات اكسترودابل.
    3. الاتصال في الطارد لزجاجة نيتروجين مضغوط باستخدام أنبوب بولي كلوريد الفينيل ذات الضغط العالي (> 4 الآلام والكروب الذهنية) مجهزة بمحولات سيرتو وقذف المواد السائلة عبر الغشاء. 1 ميغاباسكال الضغط مطلوب عادة لقذف من خلال مرشحات غشاء (6) مع قطر مسام من 200 نانومتر والمذكورة أعلاه. 1.5-2.5 MPa مطلوبة للمرشحات الغشاء أصغر (6) مع قطر مسام من 100 نانومتر.
      ملاحظة: تغيير عامل تصفية الغشاء إذا طبيعي الضغوط العالية (> 2.5 ميغاباسكال) مطالبون بقذف العينة (وهذا هو أول بادرة من انسداد).
    4. افتح الغطاء (10) وإدراج نموذج استخدام ماصة زجاجية 2 مل. ثم قم بإغلاق الغطاء (10) وفتح صمام الضغط (12) حين عقد أنبوب منفذ عينة (2). إغلاق صمام الضغط (12) بعد اكتمال دورة البثق والتنفيس وتواصل مع الدورة القادمة.
      ملاحظة: لا تترك العينة في الاتصال وقتاً طويلاً مع السفينة تغلف الساخنة (8) لتجنب فقدان عينة المفرط بالتبخر.
30-60 ثانية هو ما يكفي من الوقت لمل 3 عينة حجته في الطارد قبل فتح صمام الضغط (12).
  • المضي قدما إلى 10 دورات البثق لبعد مسام غشاء معين كما هو مبين في الشكل 3. معظم النظم بسيلي هي مقذوف 10 مرات من خلال الأغشية يبلغ قطرها 200 وآخر 10 مرات من خلال الأغشية مسام مع قطر مسام من 100 نانومتر، تضمن نموذج القابلية للمقارنة.
  • والآن، تحديد إشارة إنكسار مزدوج من العينة في حقل مغناطيسي خارجي (الخطوة 2).

    • figure-protocol-1
    الشكل 3: الطارد المختبرية المستخدمة للإعداد بسيلي وحويصله- يتم تجميعها في الطارد من أسفل إلى أعلى: (1) جبل، (2) نموذج جمع الفضاء مع أنبوب البلاستيك منفذ 2.4 مم (القطر الداخلي) والدائري، (3) ومش استقرار (4) الكبيرة والصغيرة، (5) تصفية ورقة، مرشحات (6) غشاء، يا الدائري (7)، (8) تغلف السفينة، (9. ) أعلى الغطاء مع اتصال مدخل والضغط، والغطاء (10)، مسامير الفراشة (11)، صمام الضغط (12). ويرد رسماً تخطيطياً الطارد تجميعها من اليمين الجانب. غاز النيتروجين (N2) توفرها وعاء ضغط، والسفينة تغلف (9) متصل بحمام مائي للتحكم في درجة الحرارة. العينة يخضع 10 دورات البثق لأي قطر المسام تصفية غشاء معين (مسار نموذج يظهر باللون الأزرق). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

    2-إنكسار مزدوج قياسات دمبك/دمبي-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) وجمعيات دمبك/تشول-أوه/دمبي-دتبا/Tm3 + (نسبة المولى 16:4:5:5) بوليموليكولار.

    1. بناء والاتصال الإعداد إنكسار مزدوج كما عرض في الشكل 4 ، وتوفير الطاقة للعناصر الإلكترونية الخاصة بكل منها. لا مكان يم، والعينة، والمستقطب الثاني في مسار الليزر في هذه المرحلة. تجنب الكشف عن ضوء الليزر المنتشرة في ظهره بتغطية الأسطح تعكس، على سبيل المثال الألومنيوم مرآة المكلفين، مع ورقة سوداء.
    2. ضبط المرايا لزيادة كثافة الليزر في الكاشف، الذي يتم تمثيله بكثافة التيار المباشر إلى figure-protocol-2 التي تم الحصول عليها من مرشح تمرير منخفض في الشكل 4B.
      تنبيه: ارتداء حماية العين المناسبة عند ضبط المرايا والتشاور مع مدرب سلامة ليزر إذا كان التلاعب بأشعة الليزر لأول مرة.
    3. تشغيل أول عبرت المستقطب الخطي (الحفاظ على خط عمودي لشعاع الليزر الحادث) إلى أقصى حد ممكن figure-protocol-3 .

    figure-protocol-4
    الشكل 4: التمثيل التخطيطي للإعداد إنكسار مزدوج واتصالات للإشارات الضوئية- A) مغناطيس المغناطيسية فائقة التوصيل إمدادات حقل مغناطيسي تي 5.5. الضوء من ليزر أشباه الموصلات في 635 نانومتر هو الاستقطاب المستقطبات متقاطعة اثنين. المغير فوتويلاستيك يم-90 تعمل على 50 كيلو هرتز مع سعة0 من راد 2.405 ووضعها بين المستقطبات اثنين. العينة يكمن في المغناطيس بين يم والمستقطب الثاني. مرايا الاستقطاب عدم توجيه الضوء من خلال العناصر المختلفة، وأخيراً يتم الكشف عن جهاز الكشف عن صور. التوافقية الأولى والثانية figure-protocol-5 و figure-protocol-6 من إشارة التيار المتردد ترصد، تسمح بحساب إشارة إنكسار مزدوج إعطاء معلومات بشأن اليجنابيليتي المغناطيسي Ln3 + خالب بوليموليكولار التجميعات. ومبومو نموذج متصل بحمام مياه خارجية للتحكم في درجة الحرارة (أزرق). يتم رصد درجة حرارة العينة مع مجس حرارة (أحمر). ب) يتم تغذية الإشارة من الكشف عن صور في ثانية أمر Sallen-مفتاح تمرير منخفض مرشح (إمدادات الطاقة V AC 24) مع وقف إنتاج المواد الانشطارية من تردد 360 هرتز عبر كبل براديد إمدادات طاقة ±12 V DC (3). مرشح تمرير منخفض مقتطفات المكون DC figure-protocol-7 وأوصلها إلى الكمبيوتر-الواجهة (4) من خلال كابل Ω BNC 50. يتم تسليم الإشارة من الكشف عن صور للمكبرات قفل اثنين (الذي استخراج التوافقي الأولى والثانية figure-protocol-8 و figure-protocol-9 ) من خلال كابل Ω BNC 50 (1) & (2). يتم الكشف عن كثافة متناسق بالكشف عن مرحلة حساسة. ونتيجة لذلك، كيم الإشارة إشارة مرجعية لقفل في المكبرات (1f-الإخراج ليم إلى أول قفل في مكبر للصوت والإخراج 2 واو إلى الثانية، متصلة مع BNC 50 Ω الكابلات). يتم تسليم إشارات الإخراج إلى وحدة واجهة الكمبيوتر عن طريق الكابلات Ω BNC 50. اكتساب التناظرية وحدات الحراجية المعتمدة-منظمة العفو الدولية-110 والحركة--سي بي-1 الرقمي الإشارات التي يتم نقلها إلى جهاز الكمبيوتر من خلال كابل RS 232 للرصد. مسبار درجة الحرارة نوع ك متصل أيضا إلى وحدة واجهة الكمبيوتر حيث رقمنة التناظرية اقتناء وحدات الحراجية المعتمدة-سي بي-3 والحراجية المعتمدة-TC-120 الإشارة قبل نقلها إلى جهاز الكمبيوتر من خلال كابل RS 232 للرصد. يتم تعريف ج) صورة للإعداد التخطيطي قدمت في العناصر الرئيسية باء مع الأرقام المقابلة من 1 إلى 4. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

    1. المكان الثانية عبرت المستقطب الخطي عمودي على شعاع الليزر الحادث، كما هو مبين في الشكل 4A. التقليل إلى أدنى حد figure-protocol-10 عن طريق تعيين المستقطب الثاني بزاوية 90 درجة فيما يتعلق بالأولى.
    2. مكان المغير فوتويلاستيك (بيم) في 0° بين المستقطبات الخطية متقاطعة وعمودي على شعاع الليزر الحادث كما هو موضح في الشكل 4A. قم بضبط يم بتردد 50 كيلو هرتز والسعة A0 إلى راد 2.405 كما هو موضح في الشكل 5 ألف. وهذا ما يجعل عنصر DC مستقلة عن إنكسار مزدوج ويعزز figure-protocol-11 .
      ملاحظة: يجوز ضبطها محور بصري يم ببضع درجات للحفاظ على ثابت figure-protocol-12 في الهواء قبل قياس أي عينة.
    3. انتظر ح 1 بعد تشغيل الليزر والمعدات الإلكترونية لتحقيق استقرار الإشارة.
    الإشارة مستقر بمجرد السيارات التدريجي من مكبرات الصوت في سجن لا تزال مستمرة.
  • ضع العينة في ومبومو كوارتز مقطورات بمسار-طول 10 ملم وتوصيله إلى حمام مياه خارجية مبدئياً في 5 درجة مئوية.
  • ضع الحرارية نوع سميكة ك 0.5 مم (درجة حرارة مسبار) مباشرة في العينة لرصد درجة حرارة العينة. تحقق من أن التحقيق لا تتداخل مع أشعة الليزر بوضع ورقة بيضاء في مسار الليزر (بعد ومبومو) وتبحث عن الظلال الناتجة عن التحقيق.
    ملاحظة: هناك فرق 2-3 درجة مئوية بين تسجيل درجة الحرارة حمام الماء ودرجة حرارة العينة.
  • مكان في ومبومو في التجويف المغناطيسي، كما هو مبين في الشكل 4A. ضوء الليزر تنتشر أفقياً من خلال العينة وتحرف بمرايا غير الاستقطاب والكشف عنها بواسطة جهاز الكشف عن صور.
    ملاحظة: هو الليزر الموجه إلى أسفل، ومن خلال العينة، والنسخ الاحتياطي على نفس المسار لمراعاة الآثار فاراداي (أي دوران الطائرة استقطاب الضوء الناجم عن المجال المغناطيسي عند نزول إلغاء عند الخروج مرة أخرى في الاتجاه المعاكس).
  • تطبيق تدفق هواء ثابت من الهواء المضغوط في درجة حرارة الغرفة و 10000 السلطة الفلسطينية بشأن ومبومو تجنب تكثيف مياه على جدران الخلية، مما يقلل كثافة الإشارات وزيادة الضوضاء. وهذا مهم بشكل خاص عندما بلغت قوته 5 درجات مئوية.
  • اكتشاف التوافقية الأولى والثانية figure-protocol-13 و figure-protocol-14 من إشارة التيار المتردد مع اثنين قفل في مكبرات الصوت. المرحلة قفل في مكبرات الصوت بالضغط على زر (2) هو موضح في الشكل 5 (ب) السيارات وضبط الحساسية كما هو مبين في الشكل 5 (ب) (1). تأكد من أن ليس هناك أكثر من أربعة أشرطة حمراء على مكبرات الصوت كما هو موضح في الشكل 5 (ب) (3) لتجنب الحمل الزائد للإشارات. ملاحظة انخفاض حساسية العاملين لكل قفل في مكبرات الصوت في برنامج Tesla_Magnet_Const_V092 كما هو موضح في الشكل 5 (8). وتقدم البرنامج كمعلومات تكميلية.
  • منحدر الحقل المغناطيسي تصل إلى 5.5 طن بتزويد الحالية للمغناطيس عن طريق برنامج Tesla_Magnet_Const_V092 كما هو موضح في الشكل 5 (5).
  • الحصول على إنكسار مزدوج في figure-protocol-15 باستخدام المعادلة 2، حيث يحسب التخلف العقلي مع
    figure-protocol-16(3)
    حيث figure-protocol-17 و figure-protocol-18 وظائف بسل من النوع الأول، مع figure-protocol-19 و figure-protocol-20 . 11 , 13 , 18 , 33 , 34 قطعة التخلف العقلي في برنامج Tesla_Magnet_Const_V092، كما هو مبين في الشكل 5 (4).
    ملاحظة: التخلف العقلي المقدمة من البرنامج ينبغي أن لا ستستخدم لحساب إشارة إنكسار مزدوج إذا اثنين في سجن من مكبرات الصوت لا تعمل في حساسية نفسه (راجع الخطوة 2، 12). كثافات متناسق تسجيل figure-protocol-21 و figure-protocol-22 يجب أن يكون مضروباً في حساسية قفل في مكبرات الصوت للحصول على الأبعاد الصحيحة. وعلاوة على ذلك، يجب تطبيع إنكسار مزدوج الإشارة المقاسة تحت حقل مغناطيس بطرح إشارة إنكسار مزدوج يعني الحصول على ت. 0
  • رصد إشارة إنكسار مزدوج للعينة في ثابت أو تغيير درجة الحرارة (1 درجة مئوية/دقيقة) من خلال تنظيم درجة حرارة حمام المياه متصلة ومبومو هو مبين في الشكل 4.
  • تسجيل بيانات تجريبية بملء في وصف تجريبي في الشكل 5 (8)، توفير اسم ملف في (9)، والضغط على زر "بدء تسجيل الدخول" (10).

    • figure-protocol-23
    الرقم 5: الرسوم التوضيحية لإعدادات المستخدمين ولقطات من البرنامج- A) إعدادات يم: التخلف العقلي 2.405 راد، الطول الموجي 635 نانومتر، تردد 50 هرتز-الأبيض الدوائر تبين ما هي إعدادات لتنشيط (USR = تخلف المعرفة من قبل المستخدم، لوك = الوضع المحلي للعملية). ب) في قفل إعدادات مكبر للصوت. الحساسية (1) قد يتم اختيارها من قبل كل قياس كما هو مطلوب في خطوة 2.11. لا ينبغي أكثر من أربعة أشرطة حمراء على الشاشة (3) لتجنب إشارة زائد. يحدث التحميل زائد عند يضيء الأحمر أدت في (1)، مما يجعل من المستحيل قياس. اضغط على الزر المرحلة السيارات (2) قبل كل قياس. ج) لقطات البرنامج Tesla_Magnet_Const_V092 المقدمة كمعلومات تكميلية. هذا البرنامج يتيح السيطرة على المجال المغناطيسي وتسجيل جميع نواتج الإشارة كدالة للزمن. يتم رسمها بقوة الحقل المغناطيسي ودرجة حرارة العينة في (1). التوافقية الأولى والثانية figure-protocol-24 و figure-protocol-25 من إشارة التيار المتردد تقاس اثنين في سجن من مكبرات الصوت يتم رسمها في (2). كثافة التيار المباشر figure-protocol-26 المرسومة في (3). يحسب كما هو موضح في الخطوة 2، 13 التخلف العقلي والمرسومة في (4). يتم تعيين قوة الحقل المغناطيسي في (5). القياس المباشر لدرجة حرارة سجلتها الحرارية "ك نوع" يرد في (6) وإشارات الإخراج (figure-protocol-27 و figure-protocol-28 ) في (7). قد يكون إدراج معلومات إضافية عينة في (8) مثل حساسية العاملين مكبرات الصوت، واسم العينة، إلخ. قد يتم تسجيل البيانات وتصديرها إلى ملف.txt في (9). بدء وإيقاف الحصول على البيانات باستخدام الزر "بدء تسجيل الدخول" (10). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

    الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

    النتائج

    إشارة إنكسار مزدوج غير مقذوف دمبك/دمبي-دتبا/Tm3 + (المولى نسبة 4:1:1) عينة تم رصدها في إطار حقل مغناطيسي تي 5.5 خلال تدفئة والتبريد دورة من 5 إلى 40 درجة مئوية، ومرة أخرى بمعدل 1 درجة مئوية/دقيقة (الشكل 6). وأكدت نتائج إنكسار مزدوج التحالفات مغناطيسية عالية في 5 درجة مئوية بقيمة 1.5 × 10-5، مرتين كقوى فيما يتعلق بنظم مقذوف المبلغ عنها. 6 , 7 , 23

    الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

    المناقشة

    عرض مفصل لكيفية استخدام مقاييس إنكسار مزدوج في تركيبة مع بلا تجارب لتقييم الطرق لتوليد استجابة عالية مغناطيسيا Ln3 + خالب فوسفوليبيدات الجمعيات في إيسابيتيني et al. 23 البروتوكولات تلفيق المقترحة تنطبق أيضا للجمعيات التي تتألف من فوسفوليبيدات إثيوبية ودب دتبا أطول أو لتلك التي تحتوي على مشتقات ستيرويد المهندسة كيميائيا في بيلايير بهم. 11 , 12 , 17 , 18

    الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

    الإفصاحات

    الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

    شكر وتقدير

    يعترف الكتاب "مؤسسة العلوم الوطنية السويسرية" لتمويل سمهاردبي (المشروع رقم 200021_150088/1). وأجريت تجارب بلا مصدر النيوترون النيترونات السويسرية سينك، معهد بول شيرر، فيليجين، سويسرا. يشكر المؤلفون ترحيبا حارا الدكتور يواكيم كوهلبريتشير لقيادته مع التجارب بلا. إعداد قياس إنكسار مزدوج تحت المجالات المغناطيسية عالية مستوحاة من الإعداد الموجودة في عالية-الحقل المغناطيسي مختبر هفمل، نيجميجن، هولندا. ونحن نشكر فيستر برونو لمساعدته في تطوير إلكترونيات الإعداد إنكسار مزدوج، يان كورسانو ودانيال كييتشل لبناء أطر تسمح بالمحاذاة الدقيقة والسطحية من الليزر، والدكتور برنهارد كولر للدعم التقني المستمر.

    الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

    المواد

    قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
    الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
    1،2-dimyristoyl-sn< / em>-glycero-3-phosphocholine (DMPC)Avanti Polar Lipids850345P>99٪
    1،2-dimyristoyl-sn< em>-glycero-3-phospho-ethanolamine-diethylene triaminepentaacetate acid hexammonium salt (DMPE-DTPA)Avanti Polar Lipids790535P>99٪
    Thulium (III) كلوريدSigma-Aldrich439649اللامائي، مسحوق ، 99.9٪ أساس المعادن النزرة
    Dysprosium (III) كلوريدSigma-Aldrich325546اللامائي ، مسحوق ، 99.9٪ أساس المعادن النزرة
    Ytterbium (III) كلوريدSigma-Aldrich439614اللامائي ، مسحوق ، 99.9٪ أساس المعادن النزرة
    يحتوي 319988 الكلوروفورمSigma-Aldrichعلى الإيثانول كمثبت ، كاشف ACS ، & ge ؛ 99.8٪
    ميثانولسيجما ألدريتش34860 99.9٪
    كوليسترولAmresco433D2O ARMAR فائقة النقاء
    141099.8 ذرة٪ D
    ماء عالي النقاءMilliporeSynergy pak2 (SYPK0SIX2) ، Millipack GP (MPGP02001)
    مقياس الأس الهيدروجيني الإلكترونيMetrohm17440010
    Whatmann Nuclepore 25 مم 100nm مرشح غشاءVWR515-2028
    فلتر غشائي Whatmann Nuclepore 25 مم 200nmVWR515-2029
    Whatmann Nuclepore 25 مم 400nm مرشح غشاءVWR515-2030
    Whatmann Nuclepore 25 مم 800nm مرشح غشاءVWR515-2032
    ورق ترشيح WhatmannVWR230600
    25 مل قارورة قاع دائريVWR201-135214/23 NS
    3 مل كوب زجاجيVWR548-0554ND18 ، 18 × 30 مم
    2.5 مل حقنة زجاجيةهاميلتون
    ثنائي هيدروجين فوسفات الصوديوم ثنائي هيدراتميرك1.06342ملح يستخدم في صنع عازلة الفوسفات
    ثنائي الصوديوم فوسفات الهيدروجينميرك1.06586ملح يستخدم في صنع عازلة الفوسفات
    سائل النيتروجينكرباجاس-
    غاز النيتروجين المضغوطCarbagas-200بار زجاجة
    الطارد الدهني 10 ملLipex-مجهزة بالكامل بأنبوب
    PVC عالي الضغطGR NETUM-يجب أن تقاوم أكثر من 4 ميجا باسكال
    محولات سيرتوسيرتوت
    النتريلVWR-2
    مل ماصات زجاجيةVWR612-1702230 مم
    ليزرنيوبورتLPM635-25C
    DSP مكبر للصوت ثنائي الطورSRSSR830
    كاشف الصمام الثنائي الضوئيSilonex Inc.SLSD-71N55 مم 2 ، سيليكون ، موصل للصور
    5.5 T مغناطيسي مبرد/ Oerlikon AG-12بار مبرد. ضاغط RW4000 / 6000 ، رأس التبريد RGD 5/100 TA
    تمرير منخفض من الدرجة الثانيةطاقة خطي محلي الصنع 24 فولت تيار مستمر ، من الدرجة الثانية ، مفتاح Sallen ، تردد القطع 360 هرتز ، +/- 12 فولت ، بحد أقصى 10 مللي أمبير
    المغير المرنالضوئي أدوات هيندزPEM-90
    Glan-Thompson Calcite PolarizerNewport10GT04قطر 25.4 مم
    كوفيت عينة كوارتزهيلما165-10-40خلية يتم التحكم في درجة حرارتها ، 0.8 مل ، طول المسار 10 مم
    مسبار درجة الحرارةThermocontrol-TypeK ، قطر 0.5 مم ،
    مرايا Thermocoax غير المستقطبة Newport50326-100225.4mm
    RS 232Instruments الوطنية189284-02للاتصال بمنفذ RS-232 في مقدمة وحدات التحكم FieldPoint المدمجة
    BNC 50 & Omega ؛ الكابلات والموصلات الوطنيةللأدوات763389-01
    cFP-الذكاء الاصطناعي-110الأدوات الوطنية777318-110التناظري 8 قنوات ووحدة الإدخال الحالية للأدوات الوطنية المدمجة
    cFP-CB-1778618-01كتلة موصل متكاملة للأسلاك إلى FieldPoint I / O
    cFP-CB-3National Instruments778618-03كتلة موصل متساوية الحرارة المتكاملة للأسماك المزدوجات الحرارية إلى وحدة cFP-TC-120
    cFP-TC-120الأدوات الوطنية777318-120إدخال مزدوجة حرارية ذات 8 قنوات ل FieldPoint المدمجة
    cFP-1804الأدوات الوطنية779490-01واجهة إيثرنت / تسلسلية ل NI Compact FieldPoint
    LabView 2010الأدوات الوطنية-
    الطاقة الصناعية توريدTraco PowerTCL 060-124100-240V AC
    حمام مائيJulaboFP40-HEالمبرد / التدفئة الدائري
    كيماويات قفازات مرشح مزود الجهد وحدة

    المراجع

    1. Sanders, C. R., Hare, B. J., Howard, K. P., Prestegard, J. H. Magnetically-oriented phospholipid micelles as a tool for the study of membrane-associated molecules. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 26, 421-444 (1994).
    2. Glover, K. J., et al. Structural evaluation of phospholipid bicelles for solution-state studies of membrane-associated biomolecules. Biophys. J. 81 (4), 2163-2171 (2001).
    3. Katsaras, J. H. T. A., Pencer, J., Nieh, M. -P. "Bicellar" lipid mixtures as used in biochemical and biophysical studies. Naturwissenschaften. 92 (8), 355-366 (2005).
    4. Sanders, C. R., Prosser, R. S. Bicelles: a model membrane system for all seasons? Structure. 6 (10), 1227-1234 (1998).
    5. Dürr, U. H. N., Soong, R., Ramamoorthy, A. When detergent meets bilayer: birth and coming of age of lipid bicelles. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 69, 1-22 (2013).
    6. Dürr, U. H. N., Gildenberg, M., Ramamoorthy, A. The magic of bicelles lights up membrane protein structure. Chem. Rev. 112, 6054-6074 (2012).
    7. Ujwal, R., Abramson, J. High-throughput crystallization of membrane proteins using the lepidic bicelle method. J. Vis. Exp. (59), (2012).
    8. Barbosa-Barros, L., et al. Bicelles: lipid nanostructured platforms with potential dermal applications. Small. 6, 807-818 (2012).
    9. Lin, L., et al. Hybrid bicelles as a pH-sensitive nanocarrier for hydrophobic drug delivery. RSC Adv. 6, 79811-79821 (2016).
    10. Beck, P., et al. Novel type of bicellar disks from a mixture of DMPC and DMPE-DTPA with complexed lanthanides. Langmuir. 26 (8), 5382-5387 (2010).
    11. Liebi, M. Tailored phospholipid bicelles to generate magnetically switchable material. , ETH Zürich. Switzerland. PhD Thesis n° 21048, ISBN 978-3-905609-55-4 (2013).
    12. Liebi, M., et al. Magnetically enhanced bicelles delivering switchable anisotropy in optical gels. ACS. Appl. Mater. Interfaces. 6 (2), 1100-1105 (2014).
    13. Liebi, M., et al. Alignment of bicelles studied with high-field magnetic birefringence and small-angle neutron scattering measurements. Langmuir. 29, 3467-3473 (2013).
    14. Prosser, R. S., Hwang, J. S., Vold, R. R. Magnetically aligned phospholipid bilayers with positive ordering: a new model membrane system. Biophys J. 74, 2405-2418 (1998).
    15. Prosser, R. S., Bryant, H., Bryant, R. G., Vold, R. R. Lanthanide chelates as bilayer alignment tools in NMR studies of membrane-associated peptides. J. Magn. Reson. 141, 256-260 (1999).
    16. Liebi, M., Kohlbrecher, J., Ishikawa, T., Fischer, P., Walde, P., Windhab, E. J. Cholesterol increases the magnetic aligning of bicellar disks from an aqueous mixture of DMPC and DMPE-DTPA with complexed thulium ions. Langmuir. 28 (29), 10905-10915 (2012).
    17. Liebi, M., et al. Cholesterol-diethylenetriaminepentaacetate complexed with thulium ions integrated into bicelles to increase their magnetic alignability. J. Phys. Chem. B. 117 (47), 14743-14748 (2013).
    18. Isabettini, S., et al. Tailoring bicelle morphology and thermal stability with lanthanide-chelating cholesterol conjugates. Langmuir. 32, 9005-9014 (2016).
    19. Isabettini, S., et al. Mastering the magnetic susceptibility of magnetically responsive bicelles with 3β-Amino-5-Cholestene and complexed lanthanide ions. Phys. Chem. Chem. Phys. 19, 10820-10824 (2017).
    20. De Angelis, A. A., Opella, S. J. Bicelle samples for solid-state NMR of membrane proteins. Nat. Protoc. 2 (10), 2332-2338 (2007).
    21. Son, W. S., et al. "Q-Titration" of long-chain and short-chain lipids differentiates between structured and mobile residues of membrane proteins studied in bicelles by solution NMR spectroscopy. J. Magn. Reson. 214, 111-118 (2012).
    22. Avanti Polar Lipids Inc. Bicelle Preparation. , Available from: https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/bicelle-preparation (2017).
    23. Isabettini, S., et al. Methods for Generating Highly Magnetically Responsive Lanthanide-Chelating Phospholipid Polymolecular Assemblies. Langmuir. 33, 6363-6371 (2017).
    24. Nieh, M. -P., Glinka, C. J., Krueger, S., Prosser, R. S., Katsaras, J. SANS study on the effect of lanthanide ions and charged lipids on the morphology of phospholipid mixtures. Biophysical Journal. 82 (5), 2487-2498 (2002).
    25. Watts, A., Spooner, P. J. R. Phospholipid phase transitions as revealed by NMR. Chem. Phys. Lip. 57, 195-211 (1991).
    26. Bleaney, B. Nuclear magnetic-resonance shifts in solution due to lanthanide ions. J. Magn. Reson. 8, 91-100 (1972).
    27. Prosser, R. S., Volkov, V. B., Shiyanovskaya, I. V. Solid-state NMR studies of magnetically aligned phospholipid membranes: taming lanthanides for membrane protein studies. Biochem. Cell Biol. 76, 443-451 (1998).
    28. Prosser, R. S., Volkov, V. B., Shiyanovskaya, I. V. Novel chelate-induced magnetic alignment of biological membranes. Biophys. J. 75, 2163-2169 (1998).
    29. Shklyarevskiy, I. O., et al. Magnetic alignment of self-assembled anthracene organogel fibers. Langmuir. 21, 2108-2112 (2005).
    30. Christianen, P. C. M., Shklyarevskiy, I. O., Boamfa, M. I., Maan, J. C. Alignment of molecular materials in high magnetic fields. Physica B: Condens. Matter. 346, 255-261 (2004).
    31. Maret, G., Dransfeld, K. Biomolecules and polymers in high steady magnetic fields. Top. App. Phys. 57, 143-204 (1985).
    32. Gielen, J. C., Shklyarevskiy, I. O., Schenning, A. P. H. J., Christianen, P. C. M., Maan, J. C. Using magnetic birefringence to determine the molecular arrangement of supramolecular nanostructures. Sci. Tech. Adv. Mater. 10 (1), 014601(2009).
    33. Shklyarevskiy, I. O. Deformation and ordering of molecular assemblies in high magnetic fields. , Nijmegen University. The Netherlands. PhD Thesis, ISBN 90-9018956-4 (2005).
    34. Fuller, G. G. Optical rheometry of complex fluids. , Oxford University Press. NY. (1995).
    35. Walde, P., Cosentino, K., Engel, H., Stano, P. Giant vesicles: preparations and applications. ChemBioChem. 11, 848-865 (2010).
    36. Avanti Polar Lipids Inc. Liposome Preparation. , Available from: https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation (2017).
    37. Avanti Polar Lipids Inc. Preparing Large, Unilamellar Vesicles by Extrusion (LUVET). , Available from: https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/luvet (2017).
    38. Isabettini, S., et al. Molecular engineering of lanthanide ion chelating phospholipids generating assemblies with a switched magnetic susceptibility. Phys. Chem. Chem. Phys. 19, 20991-21002 (2017).
    39. Battaglia, M. R., Ritchie, G. L. D. Molecular magnetic anisotropies from the Cotton-Mouton effect. J. Chem. Soc., Faraday Trans. 2. 73 (2), 209-221 (1977).
    40. Sprunt, S., Nounesis, G., Litster, J. D., Ratna, B., Shashidhar, R. High-field magnetic birefringence study of the phase behavior of concentrated solutions of phospholipid tubules. Phys. Rev. E. 48 (1), 328-339 (1993).
    41. Zhao, J., et al. Continuous paranematic ordering of rigid and semiflexible amyloid-Fe3O4 hybrid fibrils in an external magnetic field. Biomacromolecules. 17 (8), 2555-2561 (2016).

    الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

    إعادة الطباعة والأذونات

    الوسوم

    DMPC DMPE DTPA
    إجراءات تصنيع وقياسات إنكسار مزدوج لتصميم أيون لانثانيدات مغناطيسيا استجابة خالب فسفوليبيد التجميعات
    اتصل بنا
    أوصِ بها للمكتبة

    الخصوصية

    شروط الاستخدام

    السياسات

    2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.