Hypofunction الغدة اللعابية نتيجة متكررة للعلاج بالإشعاع وأمراض المناعة الذاتية. التقييم استنساخه من وظيفة الغدة اللعابية في نماذج الماوس لهذه الأمراض تحديا تقنيا. وهنا يتم وصف طريقة بسيطة لقياس دقيق واستنساخه لإنتاج اللعاب في الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
طريقة لقياس وظيفة الغدة اللعابية في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
المرضى الذين يعانون من المتلازمة في سيورغن، أحد أمراض المناعة الذاتية التي تؤثر في إفرازات الغدد، تطوير التهاب الغدة اللعابية وخفضت إنتاج اللعاب. وبالمثل، يتم إنتاج اللعاب لخطر شديد في المرضى الذين يتلقون العلاج الإشعاعي لسرطان الرأس والعنق. تسهيل فهم إمراضية المرض نماذج القوارض، وضعت لتقليد هذه الشروط السريرية، والسماح لوضع استراتيجيات علاجية جديدة. ولذلك، القدرة على دقة، وتكاثر، ومرارا وتكرارا قياس وظيفة الغدة اللعابية في نماذج حيوانية أمر بالغ الأهمية. وبناء على الإجراءات المذكورة سابقا في الأدب، وضعت أسلوب يفي بهذه المعايير وكان يستخدم لتقييم وظيفة الغدة اللعابية في الفئران. ميزة إضافية لهذا الأسلوب الجديد هو أنه يتقن بسهولة، وقد تباين بين المشغل صغيرة. يتم تقييم الدالة الغدة اللعابية كمبلغ (الوزن أو الحجم) أو معدل اللعاب تنتج استجابة للتحفيز pilocarpine (مل/دقيقة). تجمع اللعاب مصدر جيد لتحليل محتوى البروتين، وتركيزات الغلوبولين المناعي، والجزيئات الحيوية الأخرى.
المقدمة
تنتج الغدد اللعابية اللعاب في الاستجابة لمجموعة متنوعة من المحفزات العصبية والميكانيكية1. ويجري من خلال النظام العصبي متعاطفة والجهاز السمبتاوي مستقبلات ادريناليه واتروبين في الغدة المحفزات. بيلوكاربيني هو عامل اتروبين، الفقرة--مقلدات الذي يعمل أساسا على المستقبلات المسكارينيه. في الغدة اللعابية، فإنه يحفز إنتاج اللعاب بالنيابة على مستقبلات أستيل المسكارينيه M31. مؤشرا لقدرة الغدد اللعابية للاستجابة لتحفيز إنتاج اللعاب بعد الإدارة pilocarpine ويستخدم عادة كمقياس لوظيفة الغدة اللعابية.
القياس الدقيق لإنتاج اللعاب أمر بالغ الأهمية في دراسة أمراض الغدة اللعابية بما في ذلك متلازمة في سيورغن2 وإصابة الإشعاع عقب الرأس والرقبة علاج السرطان3. وقد وضعت عدة طرق مختلفة لقياس إنتاج اللعاب في القوارض. وتشمل هذه كانوليشن مباشرة من القناة اللعابية مطرح4، وجمع من اللعاب من تجويف الفم تحت فراغ5، وجمع باستخدام الزجاج الشعيرات الدموية6 أو7،ميكروبيبيتي8، 9-المباشر يوفر كانوليشن للقناة اللعابية اللعاب أكثر دقة ونقية. ومع ذلك، هذا إجراء تحديا من الناحية التقنية، ويحول دون إمكانية التسبب في إصابة الأقنية مجموعات اللعاب المتكررة من الحيوان نفسه. جمع اللعاب تحت فراغ يمكن أن يؤدي إلى نتائج متغير بسبب جفاف اللعاب من الأنبوب. زيادة مبالغ هذه الخسارة في الفئران مع انخفاض اللعاب. الزجاج الشعيرات الدموية تسمح جمع اللعاب للتحاليل اللاحقة، ولكن يمنع التغييرات في لزوجة اللعاب يفرز في حالة المريضة ملء الكفء شعري. علاوة على ذلك، محاولة اكتساح تجويف الفم لجمع بقايا اللعاب يمكن أن تؤدي إلى إصابات. الأسلوب بيبيت يسمح لمجموعة كاملة، والمشغل نفسه، أنها متسقة ملحوظ بين التجارب. ومع ذلك، لأسباب غير معروفة، هذا الأسلوب يظهر تباينا كبيرا بين مختلف العاملين. ولذلك، تسمح بإجراء مقارنات مناسبة، يصبح من المحتم أن المشغل نفسه ينفذ جميع التجارب ذات الصلة بمشروع معين. ومن الواضح أن هذا يمثل عائقا رئيسيا لمختبر.
ووضعت إجراء للتغلب على هذه المشكلات، أن يجمع بين أساليب جمع اللعاب تستخدم للبشر والقوارض. طريقة مسحه، الموصوفة أدناه لقياس حجم اللعاب الناجم عن بيلوكاربيني هو بسيط، واستنساخه، لا تتأثر بالمشغل، ويمكن أن يؤديها مرارا وتكرارا في الحيوان نفسه. وباﻹضافة إلى ذلك، فإنه يسمح جمع اللعاب للتحاليل اللاحقة من البروتينات المناعية أو الجزيئات الحيوية الأخرى.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وأقر البروتوكول، المذكورة أدناه برعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة وأنه يتبع المبادئ التوجيهية الأخلاقية التي وضعتها "المعاهد الوطنية للصحة". جميع البيانات الواردة في هذا التقرير تم إنشاؤها بواسطة استخدام الفئران الإناث التي كانت الأسابيع 10-12 من العمر. واستخدمت السلالات التالية من الفئران: C57BL/6، بالب/ج، DBA1، 129S، و F1 (B6XA/ي). جميع الفئران يسكنون في أقفاص الحاجز (5 الحيوانات في قفص) في ظروف معينة خالية من مسببات الأمراض وتوفير الأعلاف والمياه ad متواصلة.
1-إعداد
- لإعداد حل أسهم هيدروكلوريد pilocarpine، تزن 10 مغ المجمع وحل في 1.776 مل من المحلول الملحي متساوي التوتر العقيمة التي فورتيكسينج، تعطي حلاً أسهم من 5.63 mg/mL. ليس هناك حاجة لتعقيم هذا الحل. ولكن إذا رغبت في ذلك، تصفية عن طريق فلتر 0.2 ميكرون. تخزين هذا الحل الأسهم في مختبرين متعددة في ثلاجة-80 سج لمدة تصل إلى 3 أشهر. كل الأسهم المجمدة للاستخدام مرة واحدة. وبمجرد مذاب، لا تجميد الحل بيلوكاربيني.
- تأخذ 0.6 مل [ميكروفوج] أنابيب ولكمه ثقب صغير في الجزء السفلي من كل أنبوبة بعناية مع إبرة عيار 18 ساخنة. قم بتعيين هذه الأنابيب في أنابيب 2 مل. لا يلزم أن يكون الأنابيب معقمة.
- استخدام شفرة حلاقة حادة، عقيمة، قطع مسحات ماصة أسطواني إلى قطع طولها حوالي 2 سم. قص كل قطعة 2 سم قطرياً لإعطاء 2 مسحات على شكل مخروطي. ضع مسحه واحدة في كل من 0.6 مل [ميكروفوج] أنابيب.
- وزن 0.6 مل [ميكروفوج] أنابيب تحتوي على مسحه جافة.
- نقل الفئران دراستها في قفص نظيفة جديدة مع زجاجات المياه. تبقى الفئران دون طعام ح 2 على الأقل قبل بدء جمع اللعاب للحيلولة دون تلوث اللعاب جمع جزيئات الغذاء.
ملاحظة: ليس من الضروري للحفاظ على الماوس 1 كل قفص لهذا الإجراء. ومع ذلك، عدد الفئران التي وضعت في كل قفص يعتمد على المؤسسة المحددة في القواعد والأنظمة للاستخدام الحيواني. - فقط قبل نهاية ح 2، تعد الحل pilocarpine العامل (0.0563 mg/mL) بتمييع الحل الأسهم x 100 في المحلول الملحي المعقم. فإنه ليس من الضروري لمواصلة تصفية تعقيم هذا الحل. دائماً الحل pilocarpine العامل على الجليد.
ملاحظة: ويورد الجدول 1 مقدار بيلوكاربيني بالحقن لمجموعة من أوزان الجسم الماوس إعطاء جرعة نهائي 0.375 مغ/كغ من وزن الجسم.
2-الإجراء
- تزن كل الماوس وتحديد جرعة مزيج مخدر لكل الماوس باستخدام الجدول 1. حقن أول ماوس بحجم مناسب لمزيج مخدر عن طريق داخل. تعيين جهاز ضبط الوقت لمدة 2 دقيقة (معظم سلالات الماوس اختبارها في هذا البروتوكول الذهاب إلى النوم قبل 2 دقيقة). تأكد من أن الماوس يتم تخديره بشكل صحيح بسبب الافتقار إلى المشي عند وضعه على سطح مستو. إذا كان الماوس لا يزال يسير، انتظر 2 دقيقة إضافية قبل المتابعة إلى الخطوة التالية. تطبيق قطره من زيوت التشحيم مرهم العيون لكلتا العينين لمنع التجفيف.
ملاحظة: في الجدول 1، جرعة مزيج مخدر مل 0.007/غرام من وزن الجسم. النطاق الأمثل لهذا الإجراء مل 0.006 إلى 0، 008/غرام من وزن الجسم. ومع ذلك، بعد دقيقة 4، إذا كان الماوس لا يزال المشي أو نستعرض الحركات متشنج، أن يتشاور مع الطبيب البيطري المؤسسية لزيادة جرعة المخدر على نحو ملائم. - تحديد جرعة pilocarpine للماوس باستخدام الجدول 1 وحقن كمية مناسبة من داخل المسار. تعيين جهاز ضبط الوقت لمدة 2 دقيقة وأدخل الماوس في أنبوب 50 مل ريسترينير حتى الرأس والاذنين عصا من نهاية قص. ضع الأنبوب بزاوية 45 درجة، مع الرأس إلى أسفل، والسطح البطني الأعلى. الشريط على أنبوب للمجلس الداخلي لمنعها من التحرك.
ملاحظة: يوفر الجدول 1 الجرعة للفئران أكثر من 17 ز، كما لا محاولة هذا الإجراء على الفئران وزنها أدناه ز 17. - في نهاية 2 دقيقة، إدراج زوج مغلقة من تشريح الملقط في الفم الصغير برفق ورفع الفك السفلي إلى الأعلى لفتح الفم. ادفع الملقط 1-2 ملم زيادة في الفم، والتأكد من أن ينظر اللسان يستريح في أعلى الذراع الملقط. مع زوج آخر من الملقط غرامة، عقد مسحه جافة قبل موزون قريبة من طرفها المخروطي.
- حرك المخروطية تلميح المسحة برفق في الفم. سحب الملقط مع ترك الحافة المسحة في تجويف الفم.
- فهم أوسع نهاية مسحه تمتد خارج الفم وتدوير للسماح الحد الأقصى للمساحة للاتصال مع الفم. الاحتفاظ المسحة في هذا المنصب لمدة 15 دقيقة.
ملاحظة: وهذا ما يضمن أن يبقى المسحة في الفم للمدة جمع. لاحظ أن تلميح المخروطية المسحة بمثابة الفتيل والجزء الأوسع من مسحه ما زال خارج الفم. - في نهاية مدة 15 دقيقة، تدوير مسحه لجمع أي اللعاب التي استوعبت لا برفق ووضع مسحه الرطب في 0.6 مل [ميكروفوج] أنابيب. إغلاق الأنبوب ووضعه في أنبوب 2 مل على الجليد.
ملاحظة: في هذا الوقت، سوف تظهر الغشاء المخاطي للفم جافة تماما. الماوس يمكن الآن نقل العودة إلى قفصة للتعافي من التخدير. - نقل الماوس في القفص. مكان مبلل الكريات الغذاء في القفص بعد جمع اللعاب للمساعدة الإماهة أسرع.
ملاحظة: الفئران يستيقظ داخل 10 دقيقة بعد نهاية المجموعة. قد تمنح أيضا تحت الجلد حقن المحلول الملحي متساوي التوتر تحسنت قبل 0.2 مل لتسريع الانتعاش. - المضي قدما بالماوس القادم. الجميع ينبغي أن ترصد الفئران حتى أنهم استعادوا تماما وهي الإسعافية.
3-القياسات
- في نهاية كافة المجموعات، تزن أنابيب 0.6 مل مع مسحه الرطب. حساب الفرق بين الوزن الرطب والوزن الجاف للحصول على وزن اللعاب المنتجة. ضع الأنبوب 0.6 مل مع اللعاب إلى أنبوب 2 مل.
- قطع قبعات أنابيب 2 مل. ثم الطرد المركزي أنابيب 2 مل لمدة 2 دقيقة في ز 7500 x، في 4oC في أجهزة الطرد مركزي الصغرى لاسترداد اللعاب. قياس حجم اللعاب الحصول عليها باستخدام ميكروبيبيتي.
- التعبير عن النتائج كاللعاب الوزن (mg)10 أكثر من 15 دقيقة، أو كنسبة من وزن اللعاب (ملغ)/الماوس من وزن الجسم (ز).
ملاحظة: إذا تم قياس حجم اللعاب المستخرجة من أصل المسحة، التعبير عن النتائج كحجم اللعاب المستردة (mL) أو النسبة من حجم اللعاب (mL)/الماوس من وزن الجسم (ز).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
في النظم النموذجية التجريبية الماوس، يتم استخدام القدرة على إنتاج اللعاب استجابة للتحفيز بيلوكاربيني كمؤشر لوظيفة الغدة اللعابية. في الفئران الإناث C57BL/6 عمره 11 أسبوع تقاس طريقة مسحه إنتاج اللعاب. الشكل 1A، يتم التعبير عن النتائج بكمية اللعاب (mg) جمعت بعد جرعات متزايدة من بيلوكاربيني. في الجرعة 1 ملغ/كغ من وزن الجسم، بدأ بعض الفئران العارضة الشدة (تهز غير الطوعي ويرتجف). ومن ثم لم يتم اختبار الجرعات العالية من pilocarpine، تتجاوز 1 مغ/كغ من وزن الجسم في ه...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
إنتاج اللعاب هو عملية معقدة، ويتأثر بعوامل عديدة. ولذلك، يمكن قياس وظيفة الغدة اللعابية في الحيوانات المختبرية تحديا. تحديا إضافيا أن القياسات المتكررة لوظيفة الغدة اللعابية في الحيوان نفسه المطلوب لإثبات ظهور المرض أو إظهار الاسترداد بعد العلاج.
الأسلوب مسحه الموصوفة في هذا التقرير بسيطة من الناحية التقنية للقيام بخيارات متعددة لتمثيل البيانات. النتائج التي تم الحصول عليها يتم استنساخه، مع اختلاف بسيط بين المشغل. الأسلوب يمكن الكشف عن انخفاض في إنتاج اللعاب في نماذج مختلفة من اختلال وظيفي في ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب قد لا يوجد تضارب في الكشف عن.
شكر وتقدير
وأيد هذه الدراسة منحة من المعاهد الوطنية للصحة، والمعهد الوطني لطب الأسنان والجمجمة البحوث (DE025030).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <>مواد كيميائية قوية لجمع اللعاب< / قوي> | |||
| بيلوكاربين هيدروكلوريد | ألفا إيسار ، توكسبري ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية | B21410 | مخفف في محلول ملحي معقم متساوي التوتر. قم بتخزين كميات الاستخدام الفردي من مخزون 100X بسعر -80oC |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anesthesia Mix Solution | امزج 1 مل من هيدروكلوريد الكيتامين + 0.5 مل زيلازين + 8.5 مل من محلول ملحي معقم متساوي التوتر في قارورة معقمة. يمكن استخدامه لمدة 3 أشهر. | ||
| زيتامين (هيدروكلوريد الكيتامين) | Vet One ، Boise ، Idaho ، الولايات المتحدة الأمريكية | C3N VT1 | المخزون هو 100 مجم / مل |
| Anased (Xylazine) | Med-Vet International ، Metawa ، IL ، الولايات المتحدة الأمريكية | RXANASED-20 | المخزون هو 20 مجم / مل |
| محلول ملحي معقم متساوي التوتر | Vet One ، Boise ، أيداهو ، الولايات المتحدة الأمريكية | 501032 | يستخدم |
| كمخفف دموع اصطناعية (مرهم تشحيم للعيون) | هنري شين ، دبلن ، أوهايو ، الولايات المتحدة الأمريكية | 48272 | تستخدم لمنع العينين من الجفاف أثناء الإجراء |
| <قوي>الاسم | Company | Catalog Number | Comments |
| مواد لجمع اللعاب | |||
| SalivaBio مسحة للأطفال | Salimetrics، LLC Carlsbad، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | N / A | مسحات ملفوفة بشكل فردي |
| 50 مل أنابيب البولي بروبلين | VWR ، Radnor ، PA ، الولايات المتحدة الأمريكية | 89004-364 | قطع الجزء السفلي من 1 سم من الأنبوب. تأكد من أن الحافة المقطوعة ناعمة. |
| أنابيب الطرد المركزي الدقيقة 0.6 مل | VWR ، رادنور ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 87003-290 | قم بعمل ثقوب في الجزء السفلي من الأنبوب بإبر قياس 18 ساخنة |
| الطرد المركزي الدقيقة 2 مل | VWR ، رادنور ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 87003-298 | |
| محاقن الأنسولين مع إبر متصلة بشكل دائم | Becton Dickinson and Company ، Franklin Lakes ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | 324702 | |
| 18 قياس إبر | مخروطية عاديةبكتون ديكنسون وشركاه ، فرانكلين ليكس ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | 305195 | |
| شفرة مشرط معقمة # 11 | Integra York Inc PA ، الولايات المتحدة الأمريكية | 4-311 | |
| ملقط تشريح دقيق | Roboz ، Gaithersburg ، MD ، الولايات المتحدة الأمريكية | RS-5139 | زاوي مسنن 0.8 مم ، شريط ملصق بطول 4 بوصات |
| سانتا كروز للتكنولوجيا الحيوية ، دالاس ، تكساس ، الولايات المتحدة الأمريكية | SC-224487 | ||
| مؤقت 3 قنوات | Amazon.com ، سياتل ، واشنطن ، الولايات المتحدة الأمريكية | B06W2KCYVN | |
| الميزان التحليلي | Mettler توليدو ، كولومبوس أوهايو ، الولايات المتحدة الأمريكية | ||
| strong>Name< / strong> | Company | Catalog Number | Comments |
| Chemicals / الكواشف لإحداث الخلل الوظيفي في اللعاب< / قوي> | |||
| LPS | Invivogen ، سان ديجو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | tlrl-b5lps | يذوب في الماء الخالي من السموم الداخلية ، ويخزن محلول المرق بمعدل 5 مجم / مل. يخفف في HBSS معقم 100 ميكروغرام / مل - حقن 100 ميكرولتر / moue ip |
| Imject Alum adjuvant | Thermo Scientific | 77161 | تمييع 1: 1 في محلول ملحي معقم. حقن داخل الصفاق 0.1 مل / فأر |
| أرنب مضاد مضاد ل Ro52 | تم إنشاؤه في المختبر | تحصين الأرانب بالفأر المؤتلف Ro52 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chemicals/ Kits لتحليلات اللعاب | |||
| <قوي >تقدير ليزوزيم اللعاب< / قوي> | |||
| EnzChek Lysozyme Assay Kit | المجسات الجزيئية ، يوجين ، أوريغون ، الولايات المتحدة الأمريكية | E-22013 | تستخدم وفقا لتعليمات الشركة المصنعة |
| Name< / strong> | Company | Catalog Number | Comments |
| <قوي > تقدير اللعابي IgA بواسطة شطيرة ELISA< / strong> | |||
| Mouse IgA | Southern Biotech ، برمنغهام ، AL ، الولايات المتحدة الأمريكية | 0106-01 | معايير شطيرة ELISA - نطاق 30 نانوغرام / مل إلى 0.5 نانوغرام / مل |
| الماعز المضادة للفأر IgA غير المسمى | Southern Biotech ، برمنغهام ، AL ، الولايات المتحدة الأمريكية | 1040-01 | معطف عند 1 ميكروغرام / مل في عازلة بيكربونات |
| الماعز المضادة للفأر IgA HRP | Southern Biotech ، برمنغهام ، AL ، الولايات المتحدة الأمريكية | 1040-05 | الجسم المضاد للكشف المستخدم في 1: 4000 |
| TMB الركيزة | Becton Dickinson and Company ، Franklin Lakes ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | 555214 | تستخدم وفقا لتعليمات الشركة المصنعة |
| Immulon 4HBX Microtiter 96 ألواح بئر | Thermo Scientific ، روتشستر ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية | 3855 | |
| Name | Company | < قوي > رقم الكتالوج < قوي > | < قوي > تعليقات < / قوي > |
| < قوي > تقدير البروتين اللعابي < / قوي > | |||
| Bio-Rad بروتين فحص صبغ كاشف الصبغة مركز | BioRad ، هرقل ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 5000006 | لتقدير البروتين وفقا لتعليمات الشركة المصنعة |
المراجع
- Proctor, G. B. The physiology of salivary secretion. Periodontol 2000. 70 (1), 11-25 (2016).
- Fox, R. I. Sjögren's syndrome. Lancet. 366 (9482), 321-331 (2005).
- Eisbruch, A., Kim, H. M., Terrell, J. E., Marsh, L. H., Dawson, L. A., Ship, J. A. Xerostomia and its predictors following parotid-sparing irradiation of head-and-neck cancer. Int J Radiat Oncol Biol Phys. 50 (3), 695-704 (2001).
- Marmary, Y., Fox, P. C., Baum, B. J. Fluid secretion rates from mouse and rat parotid glands are markedly different following pilocarpine stimulation. Comp Biochem Physiol A Comp Physiol. 88 (2), 307-310 (1987).
- Lin, A. L., Johnson, D. A., Wu, Y., Wong, G., Ebersole, J. L., Yeh, C. K. Measuring short-term gamma-irradiation effects on mouse salivary gland function using a new saliva collection device. Arch Oral Biol. 46 (11), 1085-1089 (2001).
- Scofield, R. H., Asfa, S., Obeso, D., Jonsson, R., Kurien, B. T. Immunization with short peptides from the 60-kDa Ro antigen recapitulates the serological and pathological findings as well as the salivary gland dysfunction of Sjogren's syndrome. J Immunol. 175 (12), 8409-8414 (2005).
- Deshmukh, U. S., Nandula, S. R., Thimmalapura, P. R., Scindia, Y. M., Bagavant, H. Activation of innate immune responses through Toll-like receptor 3 causes a rapid loss of salivary gland function. J Oral Pathol Med. 38 (1), 42-47 (2009).
- Deshmukh, U. S., Ohyama, Y., Bagavant, H., Guo, X., Gaskin, F., Fu, S. M. Inflammatory stimuli accelerate Sjögren's syndrome-like disease in (NZB x NZW)F1 mice. Arthritis Rheum. 58 (5), 1318-1323 (2008).
- Szczerba, B. M., et al. Interaction between innate immunity and Ro52-induced antibody causes Sjögren's syndrome-like disorder in mice. Ann Rheum Dis. 75 (3), 617-622 (2016).
- Takakura, A., Moreira, T., Laitano, S., De Luca Júnior, L., Renzi, A., Menani, J. Central muscarinic receptors signal pilocarpine-induced salivation. J Dent Res. 82 (12), 993-997 (2003).
- Yao, C., et al. Lipopolysaccharide-induced elevation and secretion of interleukin-1beta in the submandibular gland of male mice. Immunology. 116 (2), 213-222 (2005).
- Knudsen, J., Nauntofte, B., Josipovic, M., Engelholm, S. A., Hyldegaard, O. Effects of isoflurane anesthesia and pilocarpine on rat parotid saliva flow. Radiat Res. 176 (1), 84-88 (2011).
- Kohrs, R., Durieux, M. E. Ketamine: teaching an old drug new tricks. Anesth Analg. 87 (5), 1186-1193 (1998).
- Cold Spring Harbor Protocols. Cold Spring Harb Protoc. , Available from: http://cshprotocols.cshlp.org/ (2006).
- Kozaki, T., Hashiguchi, N., Kaji, Y., Yasukouchi, A., Tochihara, Y. Effects of saliva collection using cotton swab on cortisol enzyme immunoassay. Eur J Appl Physiol. 107 (6), 743-746 (2009).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
