الكشف عن أولتراسينسيتيفي للمؤشرات الحيوية باستخدام طابعة جزيئية أساس Biosensor سعوية

ويستخدم التقدير الكمي للجزيئات الحيوية في العديد من المجالات البحثية المختلفة في العلوم، واستخدام أساليب مثل radioimmunoassay (RIA) أو أليسا¹. وتتطلب بعض هذه الأساليب المسمى كاشف مثل النظائر المشعة أو الإنزيم المسمى جسم/مستضد، مما يجعلها ذات العمالة الكثيفة وتستغرق وقتاً طويلاً مع الإجراءات المعقدة². علاوة على ذلك، متانة، والانتقائية، والحساسية من هذه الأساليب لا تكفي لجميع التحليلات؛ لا سيما أنها ليست كافية عند كميات أتوجرام بحاجة إلى تحليل، بدلاً من الرسم التخطيطي كميات³. لهذا الغرض، اكتسبت أجهزة استشعار العوامل البيولوجية اهتماما كبيرا^4،5، وبخاصة في تركيبة مع طابعة الجزيئية لزيادة متانة.

الطباعة الجزيئية تعتمد على خلق تجاويف مبلمرة مونومرات الفنية حول قالب⁶، إنشاء مواقع الاعتراف الاصطناعية التي تشبه تماما في قالب⁷. وقد استخدم هذا الأسلوب للعديد من التطبيقات، بما في ذلك نظم إيصال المخدرات والفصل التحليلي، ولكن أيضا كعناصر بيوريكوجنيشن في أجهزة استشعار العوامل البيولوجية^8،،من⁹¹⁰. ومع ذلك، لا تزال هناك بعض الصعوبات في تصميم مطبوع جزيئيا البوليمرات (MIPs) لقوالب الجزيئات مثل البروتينات والخلايا^11،12. ونتيجة لهذا، ركزت العديد من الباحثين على ولﻷخذ البروتين القالب مباشرة على الركازة، وبالتالي إنشاء سطح سوف يتم التعرف عليه بواسطة البروتين الهدف¹². وتسمى هذه التقنية طلاء السطح المستخدمة لتوظيف تجاويف الاعتراف للجزيئات الكبيرة والجمعيات بما في ذلك البروتينات ميكروكونتاكت ولﻷخذ^13،14. الإجراءات العامة للأسلوب يعتمد على البلمرة بين الأسطح اثنين-طابع قالب ودعم بوليمر-التي تمتز على السطح^15،واحد¹⁶هو القالب، وأحضر في اتصال مع مونومر المعالجة السطحية. بهذه الطريقة، يتم تشكيل فيلم بوليمر رقيقة على الدعم عن طريق الأشعة فوق البنفسجية--البلمرة. وأخيراً، تتم إزالة القالب، تاركين وراءهم تجاويف القالب محددة على سطح القطب مطبوع. هذا الأسلوب له بعض المزايا بما في ذلك خسارة انخفاض نشاط في جزيء مطبوع، عملية، فضلا عن أنها تتطلب كميات صغيرة جداً من جزيئات قالب للطباعة^16،17. وهكذا، يمكن أن تنشأ هذه الأسطح الفعالة من حيث التكلفة، ومستقرة وحساسة، وانتقائية على السطوح الاستشعار، استهداف أي قالب من اختيار المستخدم.

يمكن استخدامها في بيوسينسور للكشف عن البروتينات وحيدة وبيوماكروموليكوليس أكبر بكثير، بما في ذلك الفيروسات. مجموعة محددة من الفيروسات اكتساب الفائدة الأخيرة هو عاثية، وهو فيروس الذي يصيب البكتيريا. المهم الكشف السريع وحساسة من باكتيريوفاجيس خلال البيوتكنولوجية والعمليات الصيدلانية البيولوجية من أجل تحديد حالات العدوى البكتيرية الثقافات مع باكتيريوفاجيس¹⁸. المقايسة البيولوجية الأكثر استخداماً للكشف عن عاثية هو أسلوب طبقة مزدوجة أجار¹⁹، شاقة وتستغرق وقتاً طويلاً. بذلت عدة محاولات لتطوير أدوات تشخيص الرواية للفيروسات (بما في ذلك باكتيريوفاجيس) مثل القوة الذرية مجهرية (فؤاد)²⁰وقياس التداخل²¹، كهربية²²واستشعار النظام^{23، 24}-وركزت الكثير من العمل على أجهزة استشعار العوامل البيولوجية نظراً لمزاياها أنها سهلة التشغيل وحساسة للغاية، وقادرة على قياس الوقت الحقيقي^15،25. يستند نوع معين من بيوسينسور إلى التغيرات في السعة. هذه السعة من أجهزة استشعار العوامل البيولوجية هي أجهزة الاستشعار الكهروكيميائية بقياس التغيرات في خصائص العزل الكهربائي عند أكثر يتفاعل مع عنصر بيوريكوجنيشن على سطح جهاز الاستشعار، مما تسبب في حدوث انخفاض في السعة^2،4 . وقد استخدمت أجهزة استشعار العوامل البيولوجية بالسعة للكشف عن مختلف التحاليل مثل المستضدات والأجسام المضادة، والبروتينات والمعادن الثقيلة أيونات^6،26،،من²⁷²⁸. هذه الأنواع من أجهزة استشعار العوامل البيولوجية لها العديد من المزايا مثل السرعة المتأصلة وحساسية عالية، والبساطة، والتلاعب منخفضة التكلفة وسهلة والقياس في الوقت الحقيقي دون وسم²⁹.

الأسلوب الموصوفة في هذه الوثيقة تهدف إلى تمكين الكشف والتحديد الكمي للجزيئات الحيوية المنخفضة وفيرة في عينات معقدة للغاية، دون الحاجة إلى استخدام أي تسمية. على وجه الخصوص، الأسلوب الأكثر فائدة في مجموعة حلول أتو من الجزيئات الحيوية، حيث فشل غيرها من الصكوك القائمة تجارياً لدقة كوانتيتاتي هدفهم.

1-تعديل غطاء من الزجاج ينزلق (أختام القالب)

1. لتنظيف كشوف غطاء الزجاج، تزج لهم التتابع في 10 مل من HCl والمياه 1.0 متر من هيدروكسيد الصوديوم، 1.0 متر على التوالي، لمدة 10 دقائق في كل خطوة في منظف الموجات فوق الصوتية في درجة حرارة الغرفة.
   1. الجاف لكشوف غطاء الزجاج مع غاز النيتروجين.
      ملاحظة: يتم المجففة كشوف الغطاء بالتبخر تحت تيار من غاز النيتروجين.
2. تزج كشوف غطاء تنظيفها والمجفف في 10% (v/v)، حل 10 مل من 3-أمينو-بروبيل-تريثوكسيسيلاني (أبتيس) في الإيثانول ح 1 لعرض المجموعات الأمينية على سطح الزجاج غطاء، في درجة حرارة الغرفة.
   1. شطف كشوف الغطاء مع المياه.
   2. الجاف لكشوف الغلاف مع غاز النيتروجين.
3. تزج كشوف غطاء تعديل أبتيس في 5% (v/v)، حل 10 مل من جلوتارالديهيدي في 10 ملم الفوسفات المخزن المؤقت (درجة الحموضة 7.4) لح 2 بغية تنشيط المجموعات الأمينية الموجودة على السطح، وفي درجة حرارة الغرفة^6،15.
   1. شطف كشوف الغطاء مع المخزن المؤقت للفوسفات 10 مم (درجة الحموضة 7.4) من أجل إزالة glutaraldehyde الزائدة من على سطح الأرض.
   2. الجاف لكشوف الغلاف مع غاز النيتروجين.
4. إعداد 1.0 مل من محلول قالب (بروتين/عاثية) في المخزن المؤقت الفوسفات 10 مم (درجة الحموضة 7.4) في تركيز 0.1 مغ/مل.
   ملاحظة: حل 0.1 ملغ بروتين في 1.0 مل من المخزن المؤقت للفوسفات (10 ملم، ودرجة الحموضة 7.4). إذا لزم الأمر، جهاز المطياف الضوئي (280 nm) يمكن أن تستخدم لتحديد تركيز البروتين.
   1. قطره 200 ميليلتر هذا الحل قالب على كشوف غطاء معدلة واحتضان في 4 درجات مئوية بين عشية وضحاها.
      ملاحظة: يمكن استخدام الحل قالب الزائدة لإعداد طوابع قالب أكثر 1-2 لاستخدامها في دراسات التوصيف.
   2. شطف كشوف الغطاء مع المخزن المؤقت للفوسفات 10 مم (درجة الحموضة 7.4) من أجل إزالة القالب غير منضم من على سطح الأرض.
      ملاحظة: شطف الأقطاب، يغسل لهم مع العازلة الفوسفات (10 ملم، ودرجة الحموضة 7.4) لمدة 30 ثانية.
   3. الجاف لكشوف الغلاف مع غاز النيتروجين.
      ملاحظة: يجب تخزين كشوف الغطاء عند 4 درجة مئوية حتى يتم استخدامها في الخطوة البلمرة.

2-تعديل سعوي أقطاب الذهب

1. لتنظيف أقطاب كهربائية، وتزج الأقطاب في كوب صغير، التتابع، التي تحتوي على 5 مل إيثانول (70 في المائة)، منزوع الماء، الأسيتون، المياه، حل البيرانا الحمضية (3:1، ح₂هكذا₄: ح₂س₂، v/v)، ومنزوع المياه، على التوالي لمدة 10 دقيقة في كل خطوة، الموجات فوق الصوتية أنظف في درجة حرارة الغرفة.
   1. الجاف للأقطاب مع غاز النيتروجين.
2. من أجل إجراء اليكتروبوليميريزيشن الثيامين، إعداد 8 مل من 10 ملم الثيامين الحل في 10 ملم الفوسفات المخزن المؤقت (درجة الحموضة 7.4) الإيثانول (2 مل) تحتوي على¹⁵.
   ملاحظة: يجب أن يكون الحجم الإجمالي للحل الثيامين مل 8 في المجموع بما في ذلك 2 مل إيثانول.
   1. أداء دوري بالأشعة المهبطي (15 دورة) في هذا الحل باستخدام بوتينتيوستات تغطي محتملة تتراوح ما بين 0-1.5 V (Ag/AgCl) والمسح الضوئي بمعدل 50 mV/s³⁰.
   2. شطف الأقطاب مع المياه.
   3. الجاف للأقطاب مع غاز النيتروجين.
3. تزج أقطاب كهربائية في محلول يحتوي على كلوريد أكريلويل 30 ملم و trimethylamine 30 ملم في التولوين (الخامس_{المجموع} = 5 مل) في درجة حرارة الغرفة^6،،من¹⁵³⁰بين عشية وضحاها.
   1. شطف الأقطاب مع المياه.
      ملاحظة: لضمان إزالة أفضل من أكريلويل الممتص بقايا كلوريد و trimethylamine، من الممكن أيضا أن يغسل السطح مع هيدروكسيد الصوديوم بعد المياه.
   2. الجاف للأقطاب مع غاز النيتروجين.

3-إعداد قالب مطبوع أقطاب الذهب بالسعة

1. إعداد عاثية مطبوع أقطاب الذهب بالسعة
   1. قبل البلمرة، إعداد محلول مونومر يحتوي على مركب (N-هيدروكسيميثيل اكريلاميد) وكروسلينكير (البولي إيثيلين جليكول-400-ديميثاكريلاتي) بنسبة 1:5 (مول/مول) في 1 مل من المخزن المؤقت للفوسفات 10 مم (درجة الحموضة 7.4).
      ملاحظة: يمكن استخدام الحل مونومر يحتوي على مونومر وكروسلينكير في نسب مختلفة، أو يمكن تغيير أنواع مونومر وكروسلينكير وفقا للقالب للاستغلال الأمثل لتفاعل معين.
   2. أضف 1 مغ من صور-البادئ في هذا الحل.
      ملاحظة: إذا كان يتم إجراء البلمرة تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية، ثم الصور-البادئ يجب استخدام الشروع في البلمرة. إذا كان يتم إجراء البلمرة واسطة البلمرة الراديكالية الحرة، يجب تغيير نوع البادئ.
   3. "الماصة؛" 1.5 ميليلتر لهذا الحل على سطح الذهب القطب الذهب المعدلة.
      ملاحظة: سيظهر على سطح الذهب القطب تخطيطياً في الشكل 1.
   4. إحضار ختم قالب على اتصال مع الحل مونومر على رأس السطح القطب الذهب.
   5. بدء البلمرة الأشعة فوق البنفسجية (365 نانومتر، 400 W) وتستمر لمدة 15 دقيقة³¹.
      ملاحظة: يتم تنفيذ عملية البلمرة الأشعة فوق البنفسجية داخل خزانة تبريد التي يتم تعيين إلى-25 درجة مئوية قبل بدء البلمرة. ثم، يتم تشغيل ضوء الأشعة فوق البنفسجية علاج النظام والبلمره هو استمر لمدة 15 دقيقة قبل إيقاف تشغيل ضوء الأشعة فوق البنفسجية في علاج النظام.
   6. إزالة الطابع القالب من على سطح الأرض باستخدام الملقط.
      ملاحظة: أثناء إزالة الطابع القالب من على سطح الأرض، الفيلم البوليمرية على السطح قد يكون معطوباً. ولذلك، الختم يجب إزالة من على سطح الأرض بعناية فائقة وبطء دون استخدام القوة.
   7. شطف سطح القطب مع المياه والجافة مع غاز النيتروجين.
   8. تزج الأقطاب في 1 مل من 10 ملم 1-دوديكانيثيول التي أعدت في الإيثانول لمدة 20 دقيقة من أجل تغطية الثقوب على سطح القطب.
   9. شطف الأقطاب مع المياه وتجفيف الأقطاب مع غاز النيتروجين.
2. إعداد البروتين مطبوع أقطاب الذهب بالسعة
   1. قبل البلمرة، إعداد محلول مونومر يحتوي على مونومرات (الاكريلاميد: 54 ملغ؛ ن-هيدروكسيميثيلاكريلاميدي: 140 ميليلتر؛ نيسوبروبيلاكريلاميدي: 85.6 مغ) وكروسلينكير (ميثيلينيبيساكريلاميدي: 9.5 ملغ) في 820 ميليلتر من الماء النقي فائقة^30،32.
   2. إعداد 5% (v/v) N، N، N '، ن'--تيتراميثيليثيلدياميني (تيميد) في المياه النقية فائقة.
   3. إضافة 20 ميليلتر تيميد الحل إلى الحل مونومر وتطهير مع غاز النيتروجين لمدة 5 دقائق.
   4. إعداد بيرسولفاتي الأمونيوم 10% (w/v) (الجزائرية) في المياه النقية فائقة.
   5. إضافة 20 ميليلتر من وكالة الأنباء الجزائرية الحل إلى الحل مونومر.
   6. "الماصة؛" 1.5 ميليلتر من حل مركب على سطح القطب الذهب المعدلة.
   7. إحضار ختم القالب مع السطح يعامل مونومر.
   8. بدء البلمرة عند درجة حرارة الغرفة وتستمر ح 5.
      ملاحظة: لإعداد مطبوع البروتين أقطاب الذهب، بدلاً من الأشعة فوق البنفسجية-البلمرة، يتم إجراء البلمرة الجذور الحرة في درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية) باستخدام تيميد APS البادئ حفازاً.
   9. إزالة الطابع القالب من على سطح الأرض بدقة باستخدام الملقط.
   10. شطف مسرى مع المياه وجاف مع غاز النيتروجين.
   11. تزج الأقطاب في 1 مل من 10 ملم 1-دوديكانيثيول التي أعدت في الإيثانول لمدة 20 دقيقة من أجل تغطية الثقوب على سطح القطب.
   12. شطف الأقطاب مع المياه وتجفيف الأقطاب مع غاز النيتروجين.

4-توصيف سطح القطب بالمسح الضوئي المجهر الإلكتروني (SEM)

1. تحميل العينات على أصحاب الألومنيوم بشريط لاصق الكربون.
2. معطف الأقطاب مع 10 نانومتر البلاديوم/الذهب.
3. بحث الأقطاب مع وزارة شؤون المرأة.

5. القياسات بالسعة في الوقت الحقيقي مع قالب مطبوع أقطاب الذهب بالسعة

1. إدراج أقطاب الذهب بالسعة مطبوع في الخلية الكهروكيميائية تدفق متكامل بيوسينسور بالسعة.
2. تحضير 100 مل من التجدد العازلة (25 مم جليكاين-HCl، الأس الهيدروجيني 2.5، بما في ذلك 50 مم توين-20) و 1 ل تشغيل المخزن المؤقت (عاثية مطبوع النظام: الفوسفات 10 ملم، ودرجة الحموضة 7.4؛ لنظام مطبوع البروتين: 50 مم تريس-HCl، درجة الحموضة 7.4).
3. بدء تشغيل التحليل مع حقن المخزن المؤقت للتجديد إعادة تكوين النظام وتشغيل المخزن المؤقت إعادة توازن النظام لمدة 25 دقيقة.
4. إعداد قالب قياسي الحلول في نطاق التركيز المطلوب في تشغيل المخزن المؤقت.
   ملاحظة: أولاً إعداد مخزون من حل القالب بتذويب البروتين 0.1 مغ، أو ما يقارب 10⁸ بفو bacteriophages، في المخزن المؤقت للفوسفات مل 1.0 (الفوسفات 10 ملم، ودرجة الحموضة 7.4). ثم، إعداد الحلول القياسية لمنحنى المعايرة بجعل عشرة تخفيف إذ متسلسلة من الحل الأسهم. وسيتم تحليل هذه الحلول مع بيوسينسور بالسعة في الخطوة 5، 5. يمكن قياس تركيز البروتين باستخدام جهاز المطياف الضوئي (280 nm). ولقياس تركيز عاثية، أسلوب أجار طبقة مزدوجة يمكن استخدامها، الذي يرد في تفاصيل سبق¹⁹.
5. ضخ 250 ميليلتر من هذه الحلول القياسية تسلسلياً إلى النظام في الظروف المثلى (معدل التدفق: 100 ميليلتر في الدقيقة، درجة الحرارة: 25 درجة مئوية).
   ملاحظة: في هذا التطبيق، تم إعداد الحلول القياسية البروتين في تركيز يتراوح بين 1.0 × 10^-4 -1، 0 × 10^-14، بينما كانت التركيزات عاثية في نطاق 1.0 × 10¹ -1.0 × 10⁵ بفو/مل. الحلول التي وضعت في صمام حقن وحقن التتابع في النظام، والحقن العينات في تريبليكاتيس من خلال ضخ حقنه واحدة وصمام متعدد المنافذ. رصد الانخفاض في السعة بعد الحقن الحلول القياسية الناجمة عن ربط القالب إلى تجاويف مطبوع تلقائياً البرمجيات الصك.

باتباع البروتوكول، طبقاً التخطيطي في الشكل 1، سوف مطبوع قطب الذهب عارية مع قالب، تمثل بنية بيوماكروموليكولي. يمكن تطبيق هذا القطب في بيوسينسور بالسعة (الشكل 2)، مما يتيح تطبيق قالب على مسرى مستقرة، وقياس التغيرات في السعة عند ربط القالب.

ويرد تمثيل تخطيطي بيوسينسور بالسعة في الشكل 2. ويمكن رؤية المضخة centris، والمسؤولة عن الحقن المستمر من المخزن المؤقت قيد التشغيل (الفوسفات 10 ملم، ودرجة الحموضة 7.4)، وتجديد المخزن المؤقت (25 مم جليكاين-HCl، الأس الهيدروجيني 2.5) أثناء التجديد في الخلية تدفق، بوضوح في الشكل. تدفق الخلية يتكون من العامل، ومرجع، وعداد كهربائي. يتكون صمام حقن الحلول القياسية البروتين/عاثية، الذي يمر ديجاسير أولاً وثم حقن التتابع في النظام. أقرب الحلول التي تصل إلى مسرى العامل إدراجها في الخلية التدفق، ويتم رصد النتيجة في الوقت الحقيقي. ويمكن تسجيل قيم السعة باتباع سينسورجرامس على شاشة الكمبيوتر.

رقم 3 و رقم 4 تصور الاختلافات بين سطح أقطاب الذهب العارية ومطبوع. تعد هذه الخطوة توصيف مهمة لضمان أن هناك تجاويف البوليمرية، ينظر إليه خشونة على سطح القطب بعد الطباعة. وبصرف النظر عن وزارة شؤون المرأة، وهناك أيضا أساليب توصيف الأخرى بما في ذلك فؤاد، قياسات زاوية الاتصال، ellipsometry إلخ، التي يمكن استخدامها لتحديد خصائص السطح بعد الطباعة. بهذه الطريقة، فإنه يمكن ضمان أن عملية الطباعة ناجحة، وأن يتم تشكيل تجاويف القالب على السطح. داخل هذه التجاويف، يمكن ربط القالب مع خصوصية عالية وتقارب.

بعد حقن الحلول القياسية في النظام بالسعة، تم حساب متوسط القراءات الخمس الأخيرة تلقائياً بالبرنامج، وتم الحصول على الرسوم البيانية المعايرة برسم التغيير في السعة مقابل التركز أكثر. نشأ الانخفاض في السعة المسجلة من ربط القالب. الجزيئات أكثر أن الربط الكهربائي الذهب السطحي، ارتفاع الحد من السعة الإجمالية، وفقا للمبدأ العام للقياسات بالسعة. الرقم 5 و الرقم 6 تبين أن ΔC يزيد مع زيادة التركيز أكثر، كما هو متوقع. ويمكن تقييم النطاق الديناميكي (بين الذي هو نطاق التركيز فيها النظام مفيد للكشف عن هدف معين) والحد من الكشف عن (اللد) من خلال تحليل هذه الرسوم البيانية. وفقا الرقم 6، بيوسينسور بالسعة عاثية مطبوع يمكن اكتشاف bacteriophages بتركيز يتراوح بين 101 -بفو5 10/مل، مع قيمة اللد بفو 10/مل في هذه الدراسة. الرقم 5 و 6 الشكل أيضا تسليط الضوء على ضرورة قياس منحنى المعايرة في نفس الفترة الزمنية اللازمة لتركيز قالب من المفترض، حيث قد تختلف الخطي للانحدار على التركيزات ( 5 الرقم)، أو منحدرات مختلفة (الشكل 6). تجدر الإشارة أيضا إلى أنه نظراً لتركيزات منخفضة المستخدمة، النظام حساس جداً للتقلبات (التعكر في عينة، مشروع الهواء، إلخ)، وذلك، فمن المستحسن لتشغيل على الأقل تريبليكاتيس للحد من إمكانيات بما في ذلك القيم المتطرفة . لنفس السبب، الانحراف المعياري يمكن أن تكون كبيرة جداً للعينات مخففة جداً، كما هو موضح في الشكل 6.

الشكل 1 . التمثيل التخطيطي من ميكروكونتاكت ولﻷخذ الأسلوب. (أ) إعداد كشوف غطاء الزجاج (قالب الطوابع)، (ب) إعداد أقطاب الذهب بالسعة، (ج) ميكروكونتاكت الطباعة من القالب على سطح القطب الذهب عن طريق الأشعة فوق البنفسجية--البلمرة، و (د) إزالة قالب من سطح القطب (مستنسخة من إرتورك et al.، التكنولوجيا الحيوية تقارير 2014 (3): 65-72 مع إذن). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الرقم 2. التمثيل التخطيطي ل biosensor سعوي. التخطيط العام بيوسينسور بالسعة المستخدمة في هذه الدراسة (مستنسخة من إرتورك et al.، التكنولوجيا الحيوية تقارير 2014 (3): 65-72 مع إذن). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 3. "فحص المجهر الإلكتروني" للبروتين مطبوع أقطاب. صور SEM من (أ) قطب الذهب عارية (شريط مقياس = 20 ميكرومتر)، و (ب) بروتين مطبوع القطب الذهب بالسعة (شريط مقياس = 10 ميكرومتر). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 4. "المسح الضوئي المجهر الإلكتروني" من عاثية مطبوع أقطاب. صور SEM القطب الذهب العارية (شريط مقياس = 20 ميكرومتر) (A)، ومطبوع عاثية القطب الذهب بالسعة في تكبير مختلفة (6600 x، مقياس بار = 10 ميكرون) (ب)، و 11، 500 X، مقياس بار = 5 ميكرومتر) (ج)؛ سهام الدلالة bacteriophages التقيد بها). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 5. تأثير تكوين المخزن المؤقت للرسوم البيانية المعايرة. معايرة رسم بياني يبين التغيير في السعة مقابل تركيز بروتين في الظروف المثلى (تشغيل المخزن المؤقت: 50 مم تريس-HCl، درجة الحموضة 7.4؛ المخزن المؤقت للتجديد: 25 مم جليكاين-HCl، الأس الهيدروجيني 2.5 بما في ذلك 50 مم توين-20؛ معدل التدفق: 100 ميليلتر في الدقيقة، وحجم العينة: 250 ميليلتر؛ T: 25 درجة مئوية). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 6. منحنى المعايرة الممثل لكبير بيوماكروموليكوليس- الرسم البياني المعايرة التي يظهر التغيير في السعة مقابل تركيز عاثية في الظروف المثلى (تشغيل المخزن المؤقت: الفوسفات 10 ملم، ودرجة الحموضة 7.4؛ المخزن المؤقت للتجديد: 25 مم جليكاين-HCl، الأس الهيدروجيني 2.5 بما في ذلك 50 مم توين-20؛ معدل التدفق: 100 ميليلتر في الدقيقة، وحجم العينة: 250 ميليلتر؛ T: 25 درجة مئوية) الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.