مقالة منهجية

زرع صفحة الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للحد من تسرب بعد Colectomy الجزئية في نموذج الفئران

7K مشاهدات

DOI:

10.3791/57213

أغسطس 11, 2018

في هذه المقالة

ملخص

ويرد في إعداد وزرع الأنسجة الدهنية المستمدة الخلايا الجذعية (ASC) أوراق على القدر الكافي خياطة أناستوموسيس القولون في نموذج الفئران. ويظهر هذا الطلب الرواية أن أوراق ASC يمكن الحد من تسرب ملامسة القولون والمستقيم.

الملخص

أناستوموتيك التسرب مضاعفات كارثية بعد جراحة القولون والمستقيم. على الرغم من أن الأساليب الحالية لمنع التسرب من مستويات مختلفة من الفعالية السريرية، وهم حتى الآن ناقصة الحلول. العلاج بالخلايا الجذعية باستخدام أوراق الرابطة يمكن أن توفر حلاً لهذه المشكلة. وتعتبر الخزفية المرشحين الواعدين، لتعزيز الأنسجة الشفاء بسبب خصائصها التغذوية وإيمونومودولاتوري. هنا، نحن نقدم طرق لإنتاج أوراق ASC عالي الكثافة، التي يتم زرعها على ملامسة القولون في نموذج الفئران للحد من التسرب. وشكلت الخزفية أوراق الخلية في الأطباق الحرارية المراعية الثقافة التي يمكن أن تفصل بسهولة. في اليوم لزرع الأعضاء، أنجز colectomy جزئي مع 5-خياطة مفاغره القولون والمستقيم. تم زرع الحيوانات فورا مع 1 ASC الورقة الواحدة والفئران. أوراق ASC الالتزام تلقائياً بملامسة دون أي الغراء أو خياطة أو أي مادة بيولوجية. المجموعات الحيوانية ضحى 3 و 7 أيام بعد. بالمقارنة مع الحيوانات المزروعة، حدوث تسرب والخراجات أناستوموتيك كان أعلى في مراقبة الحيوانات. في نموذجنا، زرع أوراق ASC بعد ملامسة القولون كانت ناجحة ومقترنة بانخفاض معدل تسرب.

المقدمة

هو colectomy الجزئي مع ملامسة الأولية جراحة عادة يؤديها يمكن القيام به لكثير من الأمراض التي تؤثر على القولون مثل سرطان القولون ومرض كرون وانسدادات1،2. اللعين الأكثر تعقيداً بعد ملامسة القولون والمستقيم هو تسرب أناستوموتيك3. على الرغم من أن قد تم تحديد عدة عوامل الخطر المرتبطة بتسرب أناستوموتيك، لا تزال الحلول لمنع تسرب قاسي4،5.

الخلايا اللحمية المستمدة من الأنسجة الدهنية (الخزفية) ترتبط بخصائص مضادة للالتهابات والمستوى الغذائي6،7، مما يجعل هذ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم الحصول على الأنسجة الدهنية تحت الجلد للبطن من المانحين البشرية بموافقة "لجنة الأخلاقيات الطبية" (#MEC-2014-092)، والمركز الطبي في جامعة إيراسموس مولودية، روتردام، هولندا. ووافقت "اللجنة الأخلاقية للتجارب الحيوانية"، المركز الطبي في جامعة إيراسموس مولودية، روتردام، "هولندا" (133-14-01) جميع التجارب على الحيوانات.

1-الإنسان الخزفية العزلة والثقافة

  1. إعداد 3 مل من العزلة متوسطة 1 غرام أنسجة الدهنية. مزيج منخفضة الجلوكوز دولبيكو للمتوسطة "تعديل النسر" (جي-دميم) مع 10 غرام/لتر الأبقار ألبومين المصل (BSA) وكولاجيناز 1 غرام/لتر، اكتب 1.
  2. تشريح الأنسجة الدهنية تحت الجلد البطني البشرية (n = 8، جميع الإناث، متوسط العمر 40 ± 9 سنوا....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

مخطط تدفق هذه الدراسة التي تصور الرابطة ورقة الثقافة وإجراء استئصال القولون وملامسة يرد في الشكل 1. ويبين الشكل 2 ASC ورقة مورفولوجيا المجهرية والعيانية مظهر الورقة ASC أثناء وبعد المفرزة. ويبين الشكل 3 الخطوات المختلفة لمفرزة ورقة ASC وزرع الأعضاء. ويبين الشكل 4 وجود ورقة ASC في خط أناستوموتيك والوقاية من التسرب 3 أيام بعد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أناستوموتيك التسرب هو أخطر حادث المعاكسة بعد استئصال القولون مع ملامسة الأولية. تزال تفتقر إلى الأساليب المثلى للحيلولة دون انقطاع أناستوموتيك والتسرب. وأجرى التطبيق المحلي لمجموعة واسعة من المواد الحيوية، مع نتائج متفاوتة25،،من2627. خلية العلاج يهدف إلى تسهيل إصلاح الأنسجة باستبدال الأنسجة أو الحث على شفاء المحلية عن طريق إفراز باراكريني.

في هذا النموذج الفئران، ASC ورقة الزرع كان ناجحاً من الناحية ا.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب يعلن أن أجرى هذا البحث نظراً لعدم وجود أي علاقة تجارية أو مالية يمكن أن يفسر تضارب المصالح محتملة.

شكر وتقدير

الكتاب نشعر بالامتنان للأستاذ الدكتور هوفيوس S.E.R.، والدكتور M.A.M. ماريو وجميع الجراحين في قسم الجراحة التجميلية لجمع الأنسجة الدهنية تحت الجلد. ص سوكو معتمد من قبل منحة من برنامج "الزمالة هولندا" (البرامج الوطنية للغابات-12/435)، أثناء إجراء الدراسة. Y.M. باستيانسين-جينيسكينس معتمد من المنح المقدمة من "مؤسسة التهاب المفاصل الهولندية" (LP11).

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
LG DMEMGibco ، تقنيات الحياة22320022عزل واستزراع ASC
كولاجيناز النوع الأولجيبكو ، تقنيات الحياة17100-01ASC عزل
مصل الأبقار الألبومينسيجما-ألدريتشA9418عزل ASC
مصل الأبقار الجنينيجيبكو ، تقنيات الحياة10270-106FBS ، عزل ASC والثقافة
3٪ خليك حمض معتقنيات الخلايا الجذعيةالميثيلين 7060عزل ASC
GentamicinGibco ، تقنيات الحياة15750-037عزل ASC واستزراعه
أمبثة المصابين BGibco ، تقنيات الحياة15290-018عزل ASC وشاكر
الثقافة (Gallenkamp Shaker Environmental Shaker Model 10X 400)عزل
Akribis Scientific F240 ASCجهاز الطرد المركزيHettichlabRotina380عزل واستزراع ASC
محلول ملحي للفوسفاتGibco ، تقنيات الحياة14190-094PBS ، عزل وزراعة ASC
حمض الأسكوربيك -2 فوسفاتسيجما ألدريتشA8960عزل واستزراع ASC
نمو الخلايا الليفية المؤتلفة البشرية 2AbD SerotecAF-100-15FGF2 ، عزل واستزراع ASC
Trypsin EDTAGibco ، تقنيات الحياة25200-056ثقافة ASC
ميثيل سلفوكسيدSigma-AldrichD2650-5xDMSO ، تجميد ASC
أطباق الثقافة المستجيبة للحرارةNunc Thermo Scientific174904ASC إعداد ورقة
الحرير المضفر غير القابل للامتصاص 4/0B جراحة براون21151042
الشعيرات الأحادية غير القابلة للامتصاص جراحة G1118170 بولي أميد 8/0ب براون
حمض البولي جليكوليك المضفر القابل للامتصاص 5/0ب جراحة C1048207 براون
الزرقاء عامل ثنائي

المراجع

  1. Kawahara, H., et al. Single-incision laparoscopic right colectomy for recurrent Crohn's disease. Hepatogastroenterology. 57 (102-103), 1170-1172 (2010).
  2. Saia, M., Buja, A., Mantoan, D., Agresta, F., Baldo, V. Colon Cancer Surger....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة