تحليل تركيز الكورتيزول الشعر ويوفر بديلاً للتدابير التقليدية لهرمون الكورتيزول؛ ومع ذلك، لجمع عينات الشعر من الأمريكيين من أصل أفريقي، يحتاج العلماء إلى يكون على علم ثقافيا والمختصة. والغرض من هذا البروتوكول إظهار تقنية علم ثقافيا لجمع عينات الشعر لتحليل هرمون الكورتيزول من الأمريكيين من أصل أفريقي.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
جمع عينات من الشعر للشعر الكورتيزول التحليل في الأمريكيين من أصل أفريقي
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
عادة ما يتم تقييم هرمون الكورتيزول في اللعاب أو مصل الدم أو عينات البول. في الآونة الأخيرة، الكورتيزول تم استخراجها بنجاح من الشعر، بما في ذلك البشر. ميزة تركيز الكورتيزول الشعر هو أن يعكس تمثيل استعادي لطائي-الغدة النخامية-الغدة الكظرية (HPA) محور الدالة على مر الزمن، والكثير من مثل الهيموغلوبين A1C يمثل مراقبة نسبة السكر في الدم. ومع ذلك، الحصول على عينات الشعر يمكن أن يكون تحديا، بسبب المعتقدات الثقافية وممارسات الرعاية الشعر للمشاركين من الأقليات. على سبيل المثال، الأمريكيين من أصل أفريقي قد تكون راغبة في تقديم عينات. بالإضافة إلى ذلك، يتم تدريب عدد قليل من الباحثين لجمع عينات الشعر من الأمريكيين من أصل أفريقي. والغرض من هذه الورقة تقديم بروتوكولا ثقافيا مستنيرة لمساعدة الباحثين الحصول على عينات الشعر من الأمريكيين من أصل أفريقي. لتوضيح نتائج تمثيلية لتنفيذ هذا البروتوكول، يتم توفير البيانات المحددة الرفع من الأمريكيين من أصل أفريقي التي شاركت في دراسة المجتمع المحلي عن الإجهاد المزمن. ويتم تقييم تفضيلات الممارسة الشعر. المشاركون مصنوعة مريحة بعرض صور لعينات الشعر قبل قص شعرهم. الواحد سلالة تويست ولطف يستخدم طريقة السحب لجمع حوالي 30-50 خصلة شعر من منطقة الرأس الخلفية لفروة الرأس. سيحسن هذا البروتوكول بجمع عينات الشعر من الأمريكيين من أصل أفريقي.
المقدمة
جمع عينات من اللعاب أو الدم أو البول لتحليل الكورتيزول قد التحديات الإجرائية فريدة من نوعها وعبء أكبر مشارك، كما يتطلب الإجراءات عدة عينات اللعاب أو عينات فينيبونكتوري تجميع البول 24 ساعة. الحصول على هرمون الكورتيزول من عينات الشعر بديل بسيط ومقبول لاستخدام اللعاب أو المصل أو البول عينات1،2. يوفر الكورتيزول الشعر تمثيل أثر رجعي طائي-الغدة النخامية-الغدة الكظرية (HPA) محور الدالة على مر الزمن. حوالي 3 سم شعر جمعها من فروة الرأس يساوي متوسط الإصدار الكورتيزول للماضي1من 3 أشهر. الباحثين ومع ذلك، تواجه تحديات فريدة من نوعها عند محاولة لجمع عينات من الشعر عبر السكان متنوعة. وتشمل هذه التحديات المعتقدات الدينية أو الروحية، بما في ذلك تعريض الشعر (مثلاً، المرأة المسلمة)، الشعر المقدسة (جماعات الهنود الأمريكيين)، أو الأعراف الثقافية التي تربط الشعر بمعايير الجمال والصورة الذاتية.
في الثقافة الأمريكية الأفريقية، لا سيما بين النساء، والشعر فروة الرأس جانب الشخصي وهامة جداً على صورة الجسد3،4. التجارب التاريخية، وأخرى (مثلاً، تجارب توسكيجي) مواصلة تعزيز الثقة في عملية البحث5. بعض الفولكلور الأمريكيين من أصل أفريقي والمعتقدات الثقافية تشير أيضا إلى أن عينة الشعر يمكن أن تستخدم في الطقوس التي يمكن أن تسبب الضرر6،7. الباحثين ينبغي أن تدرك التحديات المحتملة التي قد يواجهونها في الدراسات عندما يطلب إلى توفير عينات الشعر المشاركين الأمريكيين من أصل أفريقي.
بالإضافة إلى القضايا المحيطة بصورة الجسد، قد تختلف أساليب محددة لجمع ومعالجة عينات الشعر من الأمريكيين من أصل أفريقي من أن الأميركيين الأوروبية6،7. على سبيل المثال، قد يكون الأمريكيين من أصل أفريقي مستقيمة، رقيقة، مجعد، غريب، الخشنة، أو مزيجاً من هذه الأنواع من الشعر، يتطلب تقنيات مختلفة لجمع وتأمين الشعر كافية كل العينات للمعالجة. الدراسات التي أجريت مؤخرا على عينة من المراهقين الأمريكيين من أصل أفريقي8، فضلا عن9من عينات متعددة الأعراق، أظهرت أن جمع الشعر لقياس مستوى الكورتيزول مقبول بين المشاركين الأمريكيين من أصل أفريقي. وفي الوقت الحاضر، لا توجد البصرية التدريب إجراءات تهدف إلى تزويد الباحثين بالمهارة والمعرفة الثقافية جمع عينات الشعر في الأمريكيين من أصل أفريقي. والغرض من هذه الورقة تقديم بروتوكولا ثقافيا مستنيرة لمساعدة الباحثين الحصول على عينات الشعر الكافي من المشاركين الأمريكيين من أصل أفريقي. تم تطوير هذا الأسلوب مع النظر بعناية في الخصائص المادية والنفسية والاجتماعية والثقافية ذات الصلة بجمع عينات الشعر من البالغين الأمريكيين من أصل أفريقي. وحتى الآن، لا توجد أية أساليب البصرية لجمع العينات من هذه، وهذا البروتوكول سوف تكون الأول دليل أن جمع العينات الشعر السليم التفاصيل من البالغين الأمريكيين من أصل أفريقي. لتوضيح نتائج تمثيلية لتنفيذ البروتوكول، تعرض بيانات الرفع المحددة من الأمريكيين من أصل أفريقي التي شاركت في دراسة المجتمع المحلي عن الإجهاد المزمن التي كانت أعمارهم 65 وكبار السن. واتصلت مساعدي البحوث الذكور والإناث على حد سواء من مجموعة متنوعة من الخلفيات العرقية المشاركين المحتملين من قائمة إنشاء عيادة والنشرات. المحقق الرئيسي، الذي امرأة أميركية أفريقية، تكلم في المراكز المجتمعية وكبار شقق الإسكان المدعوم لكبار السن الأمريكيين من أصل أفريقي الكبار عن الدراسة، بما في ذلك وصفاً لأساليب جمع الشعر.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
هو الموافقة على الدراسة "جامعة مستشفيات كليفلاند مركز المؤسسية استعراض المجلس الطبي"، والبروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية لسلامة البيانات وحماية المشاركين كما ورد من لجنة الاستعراض.
1. إعداد المشاركين لعينات الشعر والشعر عينة جمع الأسئلة
- تفسير للمشاركين أن الشعر العينة التي تم جمعها من الشعر أقل من أن يضيع عادة في كل يوم من الجزء الخلفي الرأس (مؤخرة الرأس) بالفرشاة. أقول المشارك أن الموقع للحصول على نموذج الشعر تم إخفاؤها بواسطة المحيطة بالشعر، وهكذا، لا يكون مرئياً بعد جمع. أبلغ المشاركين أن العينة ستستخدم لقياس هرمون يسمى الكورتيزول موجودة في ال10،الشعر11.
- إخراج الصورة العينة وإظهار المشارك كمية الشعر التي سيتم جمعها (خيوط 30-50).
ملاحظة: انظر الشكل 1 لصور عينة الشعر. - اسأل المشارك على الأسئلة12 ممارسة الرعاية الشعر المدرجة في الجدول 1.
2-جمع عينات الشعر
- أقول المشارك أن يتم جمع العينة في منطقة خاصة وراء قسم المحمولة، والستار، أو مغلقا. أؤكد للمشاركين، إذا أنهم ارتداء شعر مستعار أو هايربيسي، هو قص شعرهم ليس في منطقة حيث قد يرى آخرون. قياس طول الشعر من فروة الرأس نهاية طريق سحب الشعر بلطف ومشدود.
- إذا كان الشعر القصير (أقل من 3 سم)، يتبع البروتوكول الشعر القصير في الخطوة 3 (على الرغم من إذا كان الشعر طويل أقل من 1 سم، لا يمكن أن تجمع العينة، ومن الناحية المثالية، ينبغي أن يكون الشعر الطويل 3 سم على الأقل). للشعر أطول من 6 سم، يتبع البروتوكول الشعر الطويل في الخطوة 4. وبخلاف ذلك، الاستمرار في الخطوة التالية.
- التأكد من أن المواد جاهزة عن طريق وضع إمدادات قطع الشعر (ورقة من رقائق الألومنيوم ومغلف الأعمال وصالون الصف مقص، مشط فراق الأسنان الكبيرة والصغيرة، محضرات الكحول، الشريط الرسامين، علامة دائمة، وقفازات غير مطاط [اختياري] والشعر مقاطع)10 على سطح بجوار المشارك. تنظيف المقص ومشط مع لوحة الإعدادية الكحول قبل جمع العينة. قطع ورقة 8 × 10 "من رقائق الألومنيوم لاستخدامها للعينة.
- وضع قفازات غير المطاط. تأخذ المشط والشعر أفقياً على طول الرأس الخلفي لفروة الرأس بين نصائح الأذنين.
- يأخذ قصاصة ونقل الشعر من الجزء العلوي من الجزء، ثم ضع مقطع آخر في الجزء السفلي لفضح مستطيل 5 × 10 سم بين قصاصتي الشعر فضفاضة (حول حجم سطح السفينة من أوراق اللعب).
- اسأل المشاركين إذا أنهم يفضلون استخدام الأسنان واسعة أو مشط ضيق الأسنان من خلال الشعر مستطيل 2-3 ". اسأل المشاركين كيف أنها أو أنه يود أن يكون الشعر المتبقية في مشط إهمالها. إعطاء الشعر بالمشط للمشترك، أو، إذا (وفقط إذا) الدول المشارك أنه لا بأس لتجاهل الشعر فضفاضة، وتجاهل باقي الشعر من المشط إلى سلة المهملات.
- فهم حوالي 30-50 خصلة شعر بحق المستطيل 2-3 "وسحب بلطف وتطور الشعر بعيداً عن فروة الرأس في اقتراح متداول بين الأصابع.
- ضمان أن يتم جمع العينة قريبة من فروة الرأس ممكن، لكن عدم قص فروة الرأس. استخدام مقص صالون-الصف وجعل قطع نظيفة على التوالي.
- فهم نموذج الشعر وضمان اتساق نهاية الجذر بعناية على طول القص.
- إرفاق الشعر بورقة رقائق الألومنيوم بتسجيل مع الشريط في الرسام. ولا تغطي نهاية فروة الرأس، ولا تستخدم الشريط الرسام على الشعر الذي هو أقل من أو تساوي 3 سم. مكان فضفاضة قص الشعر داخل مركز إحباط وإضعاف في ساحة، ضمان أن الشعر لا تسقط من إحباط.
- تأخذ العلامة وعلامة نهاية فروة الرأس على رقائق الألومنيوم. استخدام تسميات شريط مشفر premade لإرفاقها بإحباط ومغلف.
- طي رقائق الألومنيوم دون طي الشعر في نهاية فروة الرأس لمنع رئيس السرير (تكوم وبنت الشعر)، وضعه في مغلف حجم الأعمال التجارية، وختم.
- تسمية خارج المغلف مع رقم تعريف الدراسة فريدة من نوعها للمشترك والتاريخ واسم المحقق الرئيسي، أو استخدام تسمية رمز الشريطي إذا كانت متوفرة.
- تخزين العينة في منطقة جافة في درجة حرارة الغرفة.
3-المجموعة عينة للشعر القصير (1-3 سم)
- اتبع الخطوات 2، 3 و 2-4.
- بعد فراق، أطلب من المشاركين لعقد الشعر افترقنا قريبة من فروة الرأس. قص الشعر على طول الجزء، حين عقد الشعر محكم مع السبابة والإبهام10.
- ضع الشعر فضفاضة في إحباط وقم بطيها بشكل أمن. الشريط لا الشعر لإحباط.
- اتبع الخطوات 2.11 من خلال 2.14.
4-المجموعة عينة "الشعر الطويل" (أطول من 6 سم)
- الجزء الشعر من اليسار إلى اليمين في الذروة الخلفي.
- استخدام قصاصات الشعر لكبح الشعر الإضافية.
- إنشاء تويست شعر وعقد محكم مع السبابة والإبهام حتى لا يؤدي إلى إسقاط عينة10.
- جعل قطع مستقيمة نظيفة قريبة من فروة الرأس قدر الإمكان. جمع 30-50 خصلة شعر.
- إذا كان المشارك الشعر رقيقة، ثم قطع 2-3 المناطق الصغيرة (عدا 1 سم) عبر الذروة الخلفي لإخفاء موقع القص.
- اتبع الخطوات 2.10 من خلال 2.14.
5-تجهيز عينة
- تخزين إحباط الحزم التي تحتوي على عينة الشعر في درجة حرارة الغرفة إلى أجل غير مسمى حتى التحليل.
ملاحظة: الشعر الكورتيزول مستقر للغاية في الشعر ويمكن تخزينها لسنوات. وفي الواقع، قد تم قياس هرمون الكورتيزول في عينات الشعر من بقايا المحنط11. - تحليل الشعر الكورتيزول كما تم نشرها في السابق12. يمكن شحن العينات بين عشية وضحاها في درجة حرارة الغرفة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
وفي دراستنا، واحد وعشرون الأمريكيين من أصل أفريقي (متوسط عمر = 75؛ SD = 6.9؛ 85 ٪ من الإناث) وافقت على المشاركة. أربعة مشاركين (19 في المائة) ورفض تقديم عينة شعر واثنان (9.5 في المائة) لم تتمكن من تقديم عينة لأن شعرهم كان قصيراً للغاية. تم الحصول على ما مجموعة 15 عينات الشعر ومعالجتها (الجدول 2). كانت سيئة الانحياز طول عينات الشعر التي جهزت تراوحت من 1 سم إلى المشاكل التقنية التي شملت عينات 4.8 سم. في نهاية فروة الرأس، متشابكة، أو مجعد، والشريط الرسام يتم وضعها فوق نهاية ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الخطوات الأساسية في البروتوكول جمع الشعر تشمل توفير مثال سوف تؤخذ مقدار الشعر، عرض الموقع عينة (دوامة الخلفي)، استخدم لتطور سلالة واحدة واجذب الأسلوب، وتأمين العينة مع الشريط الرسام بعيداً عن نهاية فروة الرأس. بلطف التواء وسحب العينة، هو إطالة شعر مجعد والحفاظ على محاذاة نهاية فروة الرأس. وهذا يقلل الوقت مختبر بحاجة إلى محاذاة نهايات فروة الرأس، والتدبير، وقطع العينة. على الرغم من أن قد استخدمت مقص رقيق في البحوث السابقة، فهي ليست الأداة المفضلة لقص الشعر بسبب محاذاة نهاية فروة الرأس غير متكافئ وزيادة الوقت لإعداد نموذج ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
مختبر علم الغدد الصماء وعلم المناعة السلوكية المعينة "المختبرات للتميز" حسب ساليميتريكس، شركة ذات مسؤولية محدودة.
شكر وتقدير
وأمكن هذا المنشور قبل السريرية ومتعدية العلوم التعاونية كليفلاند؛ KL2TR000440 من المركز الوطني للنهوض بالعلوم متعدية الجنسيات (نكتس) مكون من "المعاهد الوطنية للصحة"؛ وخارطة الطريق المعاهد الوطنية للصحة لإجراء أبحاث طبية. الدكتور جودي فورد في العمل في هذا المجال وقد مولت معاهد المعهد الوطني للصحة الوطنية عن "تعاطي المخدرات" (1R21DA034960) ومعهد جامعة أوهايو الدولة البذور "البحوث السكانية" منح تمويل من "المعهد الوطني لصحة الطفل" و التنمية (2P2CHD058484). المحتوى هي المسؤولة الوحيدة عن المؤلفين ولا تمثل بالضرورة وجهات النظر الرسمية "المعاهد الوطنية للصحة". الدكتور لاودينسلاجير من العمل في هذا المجال وقد مولت عقدا من معهد بحوث نتائج باتينتسينتيريد (CE-1304-6208)، ومنحة من الإدارة للأطفال والأسر (90 سنة 0058)، ومنحة من "علم الإنمائية" مجموعة بحوث صندوق المنح التابع لقسم الطب النفسي، جامعة كولورادو دنفر الطبي Anschutz الحرم الجامعي.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مقص صالون | الصف Cricket | S-3 550 | مقص شعر احترافي مقنب ، مشط أسنان كبير مقاس 5.5 بوصة |
| Goody | No catalog number__Goody Stylista Rake Comb ؛ | رابط إلى موقع الشركة http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| مشط أسنان صغير | قودي | لا كتالوج number_ قودي ستارت ستايل.فنيش. رابط إلى موقع الشركة http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| Alcohol preps | Kendall Webcol Alcohol Preps | لا يوجد رقم كتالوج. كيندال ويكول الكحول الإعدادية | https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps |
| شريط الرسام | 3M سكوتش | سكوتش الأزرق الرسام الأصلي s الشريط | https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/ |
| دائمة | Sharpie | Black Sharpie Fine Point | http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html |
| قفازات غير مطاطية | Prot & eacute ؛ ز & إيكوت. | 93997 | Protege® قفازات فحص خالية من مسحوق النتريل http://aureliagloves.com/product/protege/ |
| مشابك الشعر | قودي | قودي ستارت.ستايل.إنشال. كليب الضفيرة | http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips |
| المغلف | مكتب ديبو | 330808 | مكتب مستودع & ريج ؛ مغلفات مشبك العلامة التجارية ، 9 × 12 بوصة ، بني ، علبة من 100 |
| ورقة رقائق معدنية ؛ | الاختيار | 1229105 | صندوق من 500 ورقة من صفائح رقائق الغذاء المنبثقة المتشابكة ؛ |
| 2 مل من Wheaton المبردة | ، ميلفيل ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | W985902 | |
| 100٪ isopropanol | Spectrum | I1275 | 67-63-0 | |
| النيتروجين السائل ؛ | ولاية أوهايو تخزن | أسطوانة الغاز | http://osustores.osu.edu/prodservices/liquidnitrogen.aspx |
| محمل كروي من الفولاذ المقاوم للصدأ ؛ | McMasterCarr | 9291K42 | https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0 |
| أشرطة الألمنيوم المطحونة خصيصا | FisherScientific | Retsch 20.745.0001 | |
| HPLC الصف الميثانول | FisherScientific | A452N1-19 | https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129 |
| أنبوب الطرد المركزي | الدقيق Eppendorf أمريكا الشمالية | 22363352 | https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212 |
| Cortisol ELISA Kit | Salimetrics LLC ، ستيت كوليدج ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 1-3002 (5PK 1-3002-5) | https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit |
| جهاز طرد مركزي لأنبوب الطرد المركزي | بيكمان كولتر | ميكروفيوج 20 سلسلة | http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge |
المراجع
- Sauve, B. K. G., Walsh, G., Tokmakejian, S., Van Uum, S. H. Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure. Clin Invest Med. 30 (5), 183-191 (2007).
- Wright, K. D., Hickman, R., Laudenslager, M. L. Hair cortisol analysis: a promising biomarker of HPA activation in older adults. Gerontologist. 55, Suppl 1 140-145 (2015).
- Awad, G. H., et al. Beauty and body image concerns among African American college women. J Black Psychol. 41 (6), 540-564 (2015).
- Capodilupo, C. M., Kim, S. Gender and race matter: the importance of considering intersections in Black women's body image. J Couns Psychol. 61 (1), 37-49 (2014).
- Miracle, V. A. The Belmont Report: the triple crown of research ethics. Dimens Crit Care Nurs. 35 (4), 223-228 (2016).
- Fishman, B. M., Bobo, L., Kosub, K., Womeodu, R. J. Cultural issues in serving minority populations: emphasis on Mexican Americans and African Americans. Am J Med Sci. 306 (3), 160-166 (1993).
- Webb, J. Y. Louisiana voodoo and superstitions related to health. HSMHA Health Rep. 86 (4), 291-301 (1971).
- Ford, J. L., Boch, S. J., McCarthy, D. O. Feasibility of hair collection for cortisol measurement in population research on adolescent health. Nurs Res. 65 (3), 249-255 (2016).
- Wosu, A. C., et al. Hair cortisol in relation to sociodemographic and lifestyle characteristics in a multiethnic US sample. Ann Epidemiol. 25 (2), 90-95 (2015).
- Laudenslager, M. L. Hair collection and shipping instructions. , Available from: http://www.ucdenver.edu/academics/colleges/medicalschool/departments/psychiatry/Research/biel/Pages/Overview.aspx (2016).
- Webb, E., et al. Assessing individual systemic stress through cortisol analysis of archaeological hair. J Archaeolog Sci. 37 (4), 807-812 (2010).
- Russell, E., et al. Toward standardization of hair cortisol measurement: results of the first international interlaboratory round robin. Ther Drug Monit. 37 (1), 71-75 (2015).
- Bosley, R. E., Daveluy, S. A primer to natural hair care practices in black patients. Cutis. 95 (2), 78-80 (2015).
- Loussouarn, G. African hair growth parameters. Brit J Derm. 145 (2), 294-297 (2001).
- Hoffman, M. C., Karban, L. V., Goodteacher, A., Laudenslager, M. L. Chemical processing and shampooing impact cortisol measured in human hair. Clin Invest Med. 37 (4), 252-257 (2014).
- Ramirez, J., Elmofty, M., Castillo, E., DeRouen, M., Shariff-Marco, S., Allen, L., et al. Evaluation of cortisol and telomere length measurements in ethnically diverse women with breast cancer using culturally sensitive methods. J Community Genet. 8, 75-86 (2017).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
