بروتوكول لالحاده والمزمنة اختبار السمية الإيكولوجية Killifish الفيروز فورزيري نوثوبرانتشيوس

Charlotte Philippe; Arnout F. Gregoir; Eli S. J. Thoré; Gudrun De Boeck; Luc Brendonck; Tom Pinceel

doi:10.3791/57308

مقالة منهجية

بروتوكول لالحاده والمزمنة اختبار السمية الإيكولوجية Killifish الفيروز فورزيري نوثوبرانتشيوس

DOI:

10.3791/57308

⸱

أبريل 24, 2018

Charlotte Philippe¹^,² , Arnout F. Gregoir¹ , Eli S. J. Thoré¹ , Gudrun De Boeck² , Luc Brendonck¹^,³ , Tom Pinceel¹^,⁴

¹Animal Ecology, Global Change and Sustainable Development, University of Leuven, ²Systemic Physiological and Ecotoxicological Research, University of Antwerp, ³Water Research Group, Unit for Environmental Sciences and Management, North-West University, ⁴Centre for Environmental Management, University of the Free State

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في هذا العمل، ويصف لنا الحشري الحاد والمزمن وبين الأجيال لدراسة آثار الإجهاد مفردة ومجتمعة على killifish الفيروز فورزيري نوثوبرانتشيوس. تم تصميم هذا البروتوكول لدراسة تاريخ حياة الصفات (معدل الوفيات، النمو، الخصوبة، الوزن) وأقصى الحرارية الحرجة.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Killifish فورزيري نوثوبرانتشيوس كائن حي نموذجية ناشئة في مجال علم السموم الإيكولوجية وقد ثبت انطباقه في اختبار السمية الحادة والمزمنة. عموما، حساسية الأنواع للمركبات السامة في النطاق مع، أو أعلى، من الأنواع النموذجية الأخرى.

ويصف هذا العمل البروتوكولات للمقايسة الحادة والمزمنة، وبين الأجيال من آثار الضغوطات مفردة ومجتمعة على فورزيري أ.. نظراً للوقت القصير نضوج ودورة الحياة، يسمح هذا النموذج الفقاريات دراسة نهايات مثل وقت النضج والخصوبة في غضون أربعة أشهر. يمكن أن يؤديها تخذها دورة الحياة الكاملة التعرض للمحاكمات في أقل من 8 أشهر. منذ هذه الأنواع تنتج البيض التي تقاوم الجفاف وتظل قابلة للاستمرار لسنوات، الثقافة في الموقع للأنواع غير مطلوبة ولكن يمكن تجنيد الأفراد عند الاقتضاء. البروتوكولات مصممة لقياس سمات تاريخ حياة (معدل الوفيات، النمو، الخصوبة، الوزن) والحرجة الحرارية كحد أقصى.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كانت ملامح حساسية طائفة واسعة من الأنواع إلى سميات استراتيجيا المحدد وصف¹ للتشريعات "الأوروبية تصل إلى" (التسجيل والتقييم وترخيص وتقييد المواد الكيميائية). اختبارات السمية الحادة أو قصيرة الأجل كانت تستخدم في الغالب لهذا الغرض كما أنها تعطي إشارة سريعة للحساسية هي من الأنواع. ومع ذلك، في بيئتها الطبيعية، تتعرض الكائنات الحية على مدى فترات أطول بكثير ودورات حياة كاملة أو حتى عدة أجيال يمكن أن المتضررة². وعلاوة على ذلك، يتعرض الكائنات الحية في البيئات الملوثة عادة إلى الضغوطات واحد أو أكثر في وقت، التي قد تتفاعل مع بعضها البعض، ربما ينتج عن آثار التآزر³. ومن ثم فقد نقلل من اختبارات السمية المحسوبة ع....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

جميع الأساليب الموصوفة هنا أقرتها اللجنة الأخلاقية من كوليوفين.

1-الفقس والصيانة العامة من فورزيري أ.

إعداد الأسماك المتوسطة (pH 7) عند درجة حرارة 14 درجة مئوية وإضافة تنقية المياه "من النوع الثاني"، مع إضافة أملاح موحدة، للتوصيل من 600 المايكروثانيه/سم (24 درجة مئوية).
حدد البيض من الخط المختبر جرز (الجونة-ستراتهم-تشو) التي تم تخزينها تحت ظروف قياسية¹³. حدد البيض في مرحلة ديي (أي استعداد للتظليل)، يمكن التعرف عليها بوجود العيون الذهبية⁹ ولطف نقلها مع زوج لينة من الملقط إلى خزان ل 2 بلاستيك (أي أكثر من حوالي 30 بيضة في خزان).
ملاحظة: من أجل الحصول على ع....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

حساب نتائج التعرض الحاد من فورزيري أ لتركيزات مختلفة من النحاس، كما هو الحال في 2.5.2، وإظهار العلاقات بين كليردوسي-الاستجابة (الشكل 1). وهناك زيادة في معدلات الوفيات مع زيادة تركيز السمية. إنقاص القيم LC₅₀ مع مرور الوقت، مما يعني أن المزيد من الوقت مع تناقص تركيزات، يمر قبل 50% يموت replicates. للحصول على النتائج التفصيلية في التعرض الحاد والمزمن من فورزيري أ للنحاس، فضلا عن المقارنة بين حساسية الأنواع مقارنة بالأنواع الأخرى، ونح.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف الحشري جديدة استخدام فورزيري نوثوبرانتشيوس، كائن حي نموذجية ناشئة، لدراسة الفرد هذا العمل والجمع بين الآثار الطويلة الأجل سميات والعوامل الأخرى المسببة للإجهاد. تم بنجاح تطبيق البروتوكولات المقدمة لقياس حساسية الأنواع إلى صفيف من سميات (النحاس، الكادميوم، 3 و 4-ديتشلوروانيليني ووالكلوربيريفوس). بسبب دورة حياتها سريعة، يسمح هذا الطراز الفقاريات لتقييم المقاسة وآثار تخذها في غضون أربعة أشهر. ميزة كبرى أخرى لاستخدام هذه الأنواع السمكية كنموذج لفحص سمية هو حقيقة أن تنتج البيض مقاومة للجفاف. وهذا يتيح للباحثين تخ.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نحن ممتنون لمجموعة المجال في أوانتويربين ودائرة حماية المحاصيل من أوجينة لتحليل عينات المياه. وقدمت الدعم المقدم من خلال هذا المشروع مركز التميز 'الإيكولوجية والديناميات الاجتماعية التطورية (PF/10/007) من"صندوق أبحاث وفين كو". الدخيل (11Q0516N) ومولت آسيت (فو-SB151323) الدكتوراه و TP (12F0716N) كزميل ما بعد الدكتوراه قبل "فو فلاندرز" (Fonds ويتينشابيليجك أونديرزوك).

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
المياه النقية النوع 1 (مللي Q)	Millipore
ملح البحر	Instant Ocean
2L خزان بلاستيكي	SAVIC		دائما مواد منفصلة للتحكم وعلاجات السمية
خزان بلاستيكي سعة 1 لتر (التفريخ)	Avamoplast		دائما مواد منفصلة لشبكات التحكم ومعالجة
السمية	Aqua bilzen		دائما مواد منفصلة للتحكم وعلاجات السمية
برطمانات زجاجية سعة 2 لتر	Sepac-Flacover		دائما مواد منفصلة للتحكم وعلاجات السمية
برطمانات زجاجية سعة 5.5 لتر	Sepac-Flacover		دائما مواد منفصلة للتحكم وعلاجات السمية
بيض الأرتيميا	تغذية المحيط
chironomus	Ocean Nutrition		المجمدة
أطباق tricaine	Sigma aldrich
Petri	VWR
Parafilm	VWR
الماصات	MLS
الملقط	FST
500 & micro ؛ منخل شبكي m	/
أنبوب طرد مركزي دقيق عصامي (2 مل)	العلامة		التجارية لتخزين الأسماك في
قوارير زجاجية	Sigma aldrich		لتحليل المياه
وزن قارب	MLS
Jiffy 7c الكريات	Jiffy
حمام مائي	جيلاك
للنيتروجين السائل Ctmax	رقمي
	السائل Testo AG	testo 926
HETO سخان حراري	Anker Schmitt
معايرة التوازن	Mettler-Toledo AG
الكاميرا	/
منصة للكاميرا	/
مجموعة متعددة المعلمات	ذاتية الصنع HACH
الفريزر (-80 درجة ؛ ج)			باناسونيك بدرجة حرارة منخفضة
للغاية <قوي > الاسم < / قوي >	<قوي > الشركة < / قوي >	< قوي > رقم الكتالوج < / strong >	التعليقات < / strong >
Fysio < / strong >
homogenization buffer	VWR		0.1 م تريس – حمض الهيدروكلوريك ، الرقم الهيدروجيني 8.5 ، 15 ؛ ٪ بولي فينيل بيروليدون ، 153 ؛ ومايكرو. م MgSO4 ؛ و 0.2 ;٪ تريتون X-100
كلوروفورم: الميثانول	سيجما ألدريتش
الجلسريل تري بالميتات	سيجما ألدريتش
أميلوجلوكوزيداز	سيجما ألدريتش	A7420
كاشف فحص الجلوكوز	سيجما ألدريتش	G3293
صبغة بروتين بيوراد	VWR
96 جيدا لوحة ميكروتيتر	Greiner Bio-one
384 لوحات ميكروتيتر	Greiner Bio-one
2 مل أنابيب زجاجية	Fiers		لتحليل الدهون
أنابيب eppendorf 2,5 مل	VWR
homogeniser	Ultra-turrax TP 18/10
الطيف الضوئي	Infinite M200 TECAN
سخان للأنابيب الزجاجية	Hach COD ACTOR
الطرد المركزي	Eppendorf الطرد المركزي 5415 R
حاضنة	بوماكو

للفريزر ميزان حرارة للهواء فريزر مقياس جهاز

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

European-Chemicals-Bureau. TAPIR Three point three-A Project for the Information Requirements of REACH. Final Report-2 August 2005. Scoping study on the development of a Technical Guidance Document on information requirements on intrinsic properties of substances (RIP 3.3-1). , (2005).
Philippe, C., et al.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

بروتوكول لالحاده والمزمنة اختبار السمية الإيكولوجية Killifish الفيروز فورزيري نوثوبرانتشيوس

في هذه المقالة

ملخص

الملخص

المقدمة

البروتوكول

النتائج

المناقشة

الإفصاحات

شكر وتقدير

المواد

المراجع

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

مقالات ذات صلة