نيوفاسكولاريزيشن آيريس، مضاعفة شائعة لترويه الشبكية، قد يؤدي إلى الزرق نيوفاسكولار تهدد البصر. هنا، يمكننا وصف بروتوكول مورين لحمل neovascularization آيريس التجريبية التي يمكن استخدامها لتقييم موسع للأوعية تحوير المواد.
مقالة منهجية
نيوفاسكولاريزيشن آيريس، مضاعفة شائعة لترويه الشبكية، قد يؤدي إلى الزرق نيوفاسكولار تهدد البصر. هنا، يمكننا وصف بروتوكول مورين لحمل neovascularization آيريس التجريبية التي يمكن استخدامها لتقييم موسع للأوعية تحوير المواد.
يصف لنا نموذج نيوفاسكولاريزيشن التي يسببها ثقب القزحية كنموذج عام لتقييم موسع للأوعية. هذا النموذج أيضا ذات الصلة لاستهداف نيوفاسكولار الزرق، مضاعفات التي تهدد البصر لاعتلال الشبكية السكري. هذا الأسلوب يرتكز على استحثاث آيريس استجابة الأوعية الدموية بسلسلة من ثقوب uveal الختم الذاتي على الفئران بالب/ج، ويستفيد من نضوج المفرج العين الماوس بعد الولادة. ويخضع الجراء الماوس ثقوب uveal من يوم الولادة 12.5، عندما فتح الجراء عيونهم، حتى يوم الولادة 24.5 بطبيعة الحال. نظراً لشفافية القرنية، القزحية المفرج يمكن تحليلها بسهولة عبر الزمن بأساليب موسع في فيفو . علاوة على ذلك، يمكن أن يكون شبه شفاف قزحية بالب/ج الفئران فلاتمونتيد لتحليل إيمونوهيستولوجيك مفصلة مع تلوين الخلفية غير محددة الحد الأدنى. في هذا النموذج، تولد الأوعية هو أساسا مدفوعا التحريضية وتفعيل نظم البلاسمينوجين. نموذج المستحثة بثقب هو الأول من حمل neovascularization آيريس في القوارض الصغيرة، وفي الاستفادة من السماح المباشر موسع في فيفو تحليل عملية الأوعية. وعلاوة على ذلك، يمكن ضم النموذج مع الأوعية تحوير المواد، الذي يسلط الضوء على إمكاناتها في دراسة الأوعية مع وجهة نظر في فيفو .
وتضم قزحية العين، جنبا إلى جنب مع الجسم الهدبي والمشيميه، عنبية، الذي هو أكثر vascularized أنسجة العين. المفرج آيريس ضروري للحفاظ على التوازن في الغرفة الأمامية للعين. نتيجة لوفرة اتصالات أناستوموتيك بين الشرايين والاوردة، الأوعية الدموية آيريس توفير المواد الغذائية وإمدادات الأوكسجين إلى قزحية العين نفسها، بل في كامل الجزء الأمامي من العين1.
تشكيل أوعية دموية جديدة، أو الأوعية من تلك القائمة من قبل، هو أمر أساسي في العمليات الفسيولوجية، مثل التنمية والجرح الشفاء2. وتولد الأوعية ناعما ينظم العديد من العوامل المتعارف عليه، مثل عامل نمو الأوعية الدموية غشائي (VEGF) ومثبط منشط البلاسمينوجين (PAI)، فضلا عن عدة عوامل الالتهابات، واختلال هذه العوامل يمكن أن تؤدي إلى باثولوجي 3من الأوعية.
في العين، وهو نيوفاسكولاريزيشن سبب الأمراض التي تهدد البصر، مثل اعتلال الشبكية السكري التكاثري (PDR) والزرق نيوفاسكولار (نفج). في هذه أمراض العين، neovascularization التنسيق يقع عادة في أنسجة الشبكية، إلا أن عدم التوازن في الالتهابات والعوامل الأوعية في كلا الأمامي والخلفي العين دوائر العين ارتبط إيريديس روبيوسيس، مصطلح السريرية لايريس نيوانجيوجينيسيس المرضية4. وتبين هذه الأمراض قدرة القزحية الكبار الخضوع لتولد الأوعية. في الفئران، غير ناضجة المفرج العين بعد الولادة ويستمر نضج بعد الولادة. هو استغلال هذا خصوصية للتنمية في طراز الماوس الأوكسجين الناجم عن اعتلال الشبكية، نموذج الذي يحاكي عن كثب الحالة السريرية لاعتلال الشبكية الخداج5. وباﻹضافة إلى ذلك، تولد الأوعية والتهاب تلعب دوراً محوريا في الجرح الشفاء الآليات6، والجرح شفاء نفسها تم إقرانها مع الأوعية نماذج7.
في هذه الدراسة، يصف لنا نموذج نيوفاسكولاريزيشن التي يسببها ثقب القزحية. وتجري ثقوب uveal قرب الحد الخارجي ليمبوس، الذي حمل neovascularization آيريس بأحداث الجرح الشفاء النظام. يمكن أن يكون سبب شفافية القرنية، القزحية المفرج تحليلها بسهولة في فيفو بأساليب موسع. عيون ثقب الحالي أي بزيادة قدرها سرير الأوعية الدموية في القزحية، التي ارتبطت بزيادة تنشيط البلاسمينوجين وعلامات التهابات8. نموذج عرض إمكانات كبيرة كأداة جديدة لدراسة الأوعية وفحص المركبات الأوعية، ويسمح مباشرة في فيفو التصور عمليات الأوعية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
استخدمت الماوس بالب/ج الجراء من أي من الجنسين وفقا للبيان "استخدام الحيوانات" في أوفثالمولوجيك والبحوث الرؤية، والبروتوكولات كانت وافقت عليها اللجنة في ستوكهولم "بحوث الحيوان الأخلاقية". كانت الفئران في ليتر، جنبا إلى جنب مع الأم المرضعة، مع دورة اليوم/الليل ح 12، وحرية الوصول إلى الغذاء والماء، وترصد يوميا.
ملاحظة: لإجراء العمليات الجراحية، أبقيت الفئران تحت التخدير مع isoflurane متقلبة. يتم تثبيط المراهم العينية خلال إجراءات العين، كما أنها قد تتداخل مع العلاجات والمواد المستخدمة. إذا لزم الأمر، لمنع العين الجاف، يمكن تطبيق قطره المحلول الملحي العادي العقيمة. على الرغم من ثقوب uveal الشفاء الذاتي، تم الحرص خلال ثقوب uveal ضمان العقم مع الأدوات الجراحية. العلاج بعد الجراحة وشملت الماء مع المحلول الملحي العادي تحت الجلد، والتسكين مع الإدارة الموضعية العين هيدروكلوريد جهاز. الجراء سمح باسترداد إلى ريكومبينسي القصية على وسادة تدفئة قبل إعادتهم إلى الأم المرضعة، في قفص نظيف. وأبقى ليتر مع نفس الأم المرضعة لتجنب الإجهاد.
1-التخدير
2-الثقب الداخلي تحت ستيريوسكوبي الجراحية
3-موسع في فيفو الرصد
4-بعد العمليات الجراحية الرعاية
5-العين انوكلييشن
6-آيريس التشريح الداخلي تحت ستيريوسكوبي
7-إمكانية Read-Outs التجريبية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ألبينو بالب/ج الماوس الجراء في P12.5 تعرضوا لثقوب uveal، يتكرر كل يوم الرابع (تجريبي اليوم 0، 4، 8، 12)، حتى P24.5. في P27.5، كانت euthanized الفئران وقزحيات بعناية تشريح (15 يوم تجريبي). تم التقاط الصور لعيون الماوس مع كاميرا تعلق على ستيريوسكوبي جراحية قبل كل سلسلة الثقب في كل يوم تجريبية لتقييم تقييم موسع لاستجابة الأوعية الدموية آيريس. حمل ثقوب uveal استجابة الأوعية الدموية من قزحية العين بأحداث الجرح الشفاء نظام (الشكل 1). نظراً لشفافية القرنية وتفتقر إل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ويرد في هذا البروتوكول، طريقة جديدة لتحريض آيريس استجابة الأوعية الدموية بثقب uveal. يقوم بتشغيل آليات شفاء الجرح الثقب ويعزز استجابات الأوعية الدموية في10،آيريس11. وهذا ما يتفق مع أمراض العين، مثل الديمقراطية الشعبية ونفج، حيث تتوج استجابات الأوعية تفاقم من الشبكية في الجزء الخلفي للعين في حالة سريرية روبيوسيس إيريديس، الأوعية الدموية زيادة القزحية12 ،13.
القرنية هي أفاسكولار...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
يشكر المؤلفون ينيا تانكرد وريدهولم ديانا لتربية الحيوانات.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مقص عين بون | Bausch & Lomb | 23060 | |
| مقص منحني Clayman-Vannas | Bausch & amp Lomb | E3383 C | |
| مقص مستقيم Clayman-Vannas | Bausch & amp Lomb | E3383 S | |
| محول موضوعي للكاميرا | مصنوع يدويا | N / A | أو أي نظام يسمح بتكييف الكاميرا مع المجهر |
| وسادة تسخين 100-110 واط | غير قابل للتطبيق | غير | في متاجر الأليفة / الطبيب البيطري |
| تحت الجلد 30 جرام إبرة مشطوفة | KDM GmBH ألمانيا | 911914 | |
| iPhone 4S | أبل | غير قابل للتطبيق | أو جهاز آخر للحصول على صور عالية الدقة |
| Isoflurane | Baxter | KDG 9623 | |
| McPherson ملقط ربط | Bausch & Lomb | E1815 S | |
| ملقط ربط دقيق | Bausch & لوب | 63140 | |
| الحد الأدنى من رباعي الكلائين هيدروكلوريد | Bausch & Lomb | N / A | 1٪ (وزن / حجم) قطرات العين |
| الفورمالين المحايد | المخزن Bioreagens | 0018-40 | |
| محلول ملحي عادي | Fresenius Kabi | 210352 | 0.9٪ (وزن / حجم) كلوريد الصوديوم في الماء القابل للحقن |
| محلول ملحي مخزن بالفوسفات | ThermoFisher Scientific | 10010023 | PBS متوازن ومخزن درجة الحموضة 7.4 |
| طبق بتري 10 سم | Starstedt | 83.3902 | |
| طبق بتري 3 سم | Starstedt | 83.3900 | |
| أنبوب مانع للتسرب 2.0 مل | Starstedt | 72.685.200 | أو أي أنابيب على غرار eppendorf |
| لوحة TC 96 بئر | Starstedt | 83.3924 | |
| ماصة نقل 3.5 مل | Starstedt | 86.1171 | أو أي وحدة |
| تخدير | Univentor 400 على غرار باستورأو منظم تدفق مكافئ مع غرفة الحث وقناع للتخدير المتطاير | ||
| المجهر الجراحي البري M650 | Wild Heerbrugg | N / A | أو مجسم جراحي أو مكبر آخر |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن