Method Article

بيوينديكيشن اختبار لمدى ملاءمة البيئة تيار للشباب المياه العذبة بيرل بلح البحر باستخدام طرق التعرض في الموقع

DOI:

10.3791/57446

⸱

September 5th, 2018

 ,  ,  ,  ,  , 
1Faculty of Environmental Sciences, Czech University of Life Sciences Prague, 2T. G. Masaryk Water Research Institute, 3Department of Zoology and Fisheries, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمكين بيوينديكيشنز في الموقع تحديد مدى ملاءمة بيئة للأنواع المهددة بالانقراض من بلح البحر. يصف لنا طريقتين استناداً إلى الأحداث تعرض بلح البحر لؤلؤة المياه العذبة في أقفاص للموائل نهر أوليجوتروفيك. وتنفذ كلا الأسلوبين في المتغيرات للمياه المفتوحة والبيئات المائية هيبورهيك.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

معرفة مدى ملاءمة الموئل بلح البحر في المياه العذبة خطوة هامة في الحفاظ على هذه المجموعة من الأنواع المهددة بالانقراض. يمكننا وصف بروتوكول لتنفيذ في الموقع اختبارات التعرض للأحداث ضمن مستجمعات نهر أوليجوتروفيك على مدى فترات مدتها شهر واحد وثلاثة أشهر. يتم عرض طريقتين (في كل التعديلات) لتقييم معدل النمو والبقاء على قيد الحياة قضاء الأحداث. تختلف الأساليب والتعديلات في قيمة بيوينديكيشن المكان ولكل منها فوائد، فضلا عن القيود. يعمل الأسلوب قفص الرملية مع مجموعة كبيرة من الأفراد، ولكن فقط لبعض الأفراد الذين يتم قياس ويتم تقييم النتائج بكميات كبيرة. في أسلوب القفص مش، أبقى الأفراد وقياسها بشكل منفصل، ولكن يتم تقييم عدد فردي منخفض. تعديل التعرض للمياه المفتوحة من السهل نسبيا على تطبيقها؛ يظهر نمو الأحداث المحتملة للمواقع، ويمكن أيضا أن تكون فعالة بالنسبة لاختبار السمية المائية. تعديل التعرض داخل سرير يحتاج ارتفاع عبء عمل ولكن هو أقرب إلى ظروف بيئة الأحداث الطبيعية وأنه من الأفضل للإبلاغ عن مدى ملاءمة الحقيقية للمحليات. من ناحية أخرى، يلزم تكرار أكثر في هذا التعديل بسبب قابليته البيئة عالية-هيبورهيك.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التعرض للكائنات الحية التجريبية في الموقع مع التقييم اللاحق لحالتهم هو أحد السبل الممكنة للحصول على معلومات حول الجودة البيئية، ومدى ملاءمة الموقع (خاصة) لأنواع. ضمن الحيوانات، مثل بيوينديكيشن ينطبق أساسا على اللافقاريات الصغيرة التي قادرة على العيش في مساحة محدودة يحدها. مراحل الشباب من الأصداف (Bivalvia) هي واحد مثل هذا الكائن الحي مناسبة المجموعة1.

ذات الصدفتين أونيونيداي الأسرة عنصر هام جداً للنظم الإيكولوجية المائية2. ومع ذلك، هذه الأنواع هي غالباً خطيرة المهددة بالانقراض، لا سيما في الجداول والأنهار. البعض منهم تتسم بأنها 'مظلة الأنواع' الحفظ الذي يرتبط ارتباطاً وثيقا بالمحافظة تيار كامل [بيوتوب] والتي تتطلب نهج شامل3. هذه الحيوانات لديها دورة الحياة المرتبطة بالعديد من العناصر المتعلقة بالبيئة، من المياه الكيمياء4،5 إلى التغيرات في سكان الأسماك التي تكون بمثابة المضيفين يرقات بلح البحر6. لأن الأحداث بلح البحر كثيرا ما تمثل مرحلة حرجة من بلح البحر دورة الحياة، ومدى ملاءمة الموقع لتنميتها في هذه المرحلة أمر حاسم لتنمية السكانية أنواع ناجحة في منطقة محلية.

بلح البحر لؤلؤة المياه العذبة (فوبم، مارغاريتيفيرا مارغاريتيفيرا؛ أونيونيدا، بيفالفيا) حدوث ذات الصدفتين المهددة في تيارات الأوروبية أوليجوتروفيك. أعدادهم وقد انخفض بشكل كبير خلال 20 القرنالسادس عشر عبر منطقة التواجد. ويبدو أن الانخفاض الحالي في استنساخ الأنواع في أغلبية السكان في أوروبا الوسطى أساسا يسببه منخفض جداً لبقاء صفر من الأحداث خلال السنوات القليلة الأولى من حياتهم. ويفترض أن الأحداث فوبمس العيش لسنوات عديدة في هيبورهيك الضحلة المنطقة7، منها الظروف وتغيراتها لا تزال غير وصفاً جيدا. وعلاوة على ذلك، حتى السنة الثانية من العمر، الأحداث فقط بعد ليصل إلى حوالي 1 ملم، حيث أنهم من الصعب جداً العثور على كميات كبيرة من الرواسب تحت الظروف الطبيعية8. ولذلك، تجارب مع الأحداث الأسير ضرورية لدراسة تلك البيئة.

هناك آلاف الأحداث داخل "التشيكية خطة العمل" المتعلقة "المياه العذبة بيرل بلح"9، ارتفاع كل عام من برنامج تربية شبه طبيعية. ومع ذلك، هناك مسألة منها الموائل والمحليات مناسبة لدعم السكان ناجحة من هذه الأحداث، أو لإعادة إدخال الأنواع في نهاية المطاف. بيوينديكيشنز في الموقع الحالي وسيلة لإيجاد الجواب.

على الرغم من أن معدلات بقاء غير متناسقة من بلح البحر الأحداث في أقفاص التعرض لوحظت في بعض الأعمال السابقة التي تساءلت عن مدى ملاءمة الأحداث بلح البحر بيوينديكاتورس10، وقد أكدت عدة دراسات أجريت مؤخرا تطبيق أساليب الأحداث من التعرض لاختبار11،،من1213جودة المياه. بالإضافة إلى ذلك، وقد ثبت أن هناك عدة عوامل تحتاج إلى أخذها في الاعتبار عند تفسير نتائج هذه الدراسات خاصة، مثل الأسهم من أصل14 والآثار المستمرة لظروف اليرقات15.

تبرز المسألة كيفية تثبيت الأحداث التجريبية في المحليات المختبرة والأكثر فعالية تقييم حالتهم. ونشرت أول تطبيق صارم في الموقع طرق التعرض مع الأحداث فوبمس بودينسيك16. الأحداث فوبم الأفراد وأبقى في أقفاص ورقة، يتعرض في المياه التدفق الحر لتيارات، والبقاء والنمو فقد حددت كميتها بعد عدة أسابيع من التعرض. النهج الذي وضعت أصلاً كأسلوب تربية شبه الصناعية، ولكن أبرز صاحب البلاغ أيضا قابليته لتقييم متطلبات الموئل ونوعية المياه. على الرغم من بقاء الأحداث فوبم بطبيعة الحال منخفضة جداً على مقياس من أشهر/سنوات وإلا عدد قليل جداً من الحيوانات سوف البقاء على قيد الحياة، وأن معدل البقاء على قيد الحياة يمكن أن تكون علامة جيدة للتأثير البيئي على نطاق من عدة أسابيع16. على مدى سنوات بحوث، وطرق التعرض وضعت عملا بعقد بلح البحر الأحداث التجريبية في تيار الموائل، وتقييم معدلات النمو والبقاء على قيد الحياة؛ وتشمل هذه المربعات الرملية17، الصوامع بلح البحر على أساس مبدأ القاع18، وشتى أخرى التعرض أقفاص (تلخيص بالصمغ والزملاء)11. لأن الأحداث تحدث طبيعيا في المنطقة الضحلة هيبورهيك7، تطبيق أجهزة تجريبية داخل أسفل تيار من المرغوب فيه جداً.

في المادة، يصف لنا استخدام جهازين التعرض فوبمس: أنا) تعديل بودينسيك ورقة أقفاص ("أقفاص مش") أيضا تمكين بيوينديكيشن الاختبار في ظروف هيبورهيل؛ وثانيا) مربعات Hruška الرملية ("أقفاص الرملية"). البروتوكول ويصف تطبيق كلا الأسلوبين في ظروف المياه وهيبورهيك المفتوحة (أيالمتغيرات الأربعة للتعرض هي وصف). الأساليب تعديل تدريجيا وتوسعت على مدى أكثر من 15 عاماً تطبيق ضمن "خطة العمل التشيكية" "المياه العذبة بيرل بلح"9 والتحقق من قبل مجموعة من التجارب.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. مش القفص

ملاحظة: انظر الشكل 1.

  1. إعداد المواد
    1. إعداد المواد للجزء في المختبر من التجربة: ~ 1-2 لتر نهر المياه الواحدة مش القفص أقفاص مش (1 الجسم الرئيسي من البلاستيك، والأغطية البلاستيكية 2، 2 ورقة من ثقب سيتا التقنية الخاصة مع المسام ميكرومتر 340، 4 البراغي والمكسرات 4 في قفص)، كماشة , المفك، الماصات باستور، مصفاة، كاميرا رقمية، وترينوكولار تشريح مجهر التكبير ستيريو، شبكة معايرة (مجهر المعدات)، 5 أطباق بيتري قطرها 50 مم والأكواب والاطباق البلاستيكية 2 (~ 25 سم × 15 سم × 3-5 سم)، وعلبة بلاستيكية.
    2. لتنفيذ التثبيت هيبورهيل، إعداد شبكة 100-ميكرومتر-المسامية، خرطوم مطاط وزجاجة بخ. لتشييد الجهاز، راجع التكميلية ملف 1: ت-1. مش بناء أقفاص.
  2. تجميع السفلي والجزء المركزي من أقفاص مش. قم بتجميع الجزء من القفص الذي يحمل الأفراد. إدراج غطاء بلاستيكي واحد أولاً، ثم منخل ورقة واحدة من البلاستيك، وأخيراً الهيئة الرئيسية في الأعلى. استخدم البراغي الأربعة لضمان الحصول عليها.
  3. إعداد المواد البيولوجية
    1. وضع القفص مش الطبق البلاستيك التي تحتوي على مياه النهر. التأكد من وجود الدوائر نصف كامل. تأخذ الأحداث فوبم (انظر التكميلية ملف 1: S.6. المواد البيولوجية) للخروج من مربع معزول حرارياً ووضعها في طبق بتري.
      ملاحظة: تأكد من أن التغيرات في درجات الحرارة المفاجئة لا يتجاوز ~ 2 درجة مئوية.
    2. باستخدام زجاجة بخ ومصفاة، التدقيق من خلال الأحداث لمسح المخلفات.
  4. قم بإعداد المجهر والكاميرا. إجراء معايرة للصكوك (انظر File1 التكميلية: س. 5- مجهر والتصوير الفوتوغرافي). ضع طبق بتري تحتوي على القليل من الماء تحت المجهر.
  5. وضع الأحداث في أقفاص (عمل مختبر تجريبي)
    1. استخدام ماصة باستور إزالة أحد الأفراد من طبق بيتري ووضعه بعناية في صحن بتري تحت المجهر.
    2. فحص اللياقة البدنية للفرد بالنظر إلى العدسة (~ 40 X التكبير).
      ملاحظة: اللياقة البدنية "جيدة" يدل على أن الفرد يتحرك، بالتناوب من جانب إلى آخر، يدفع القدم من شل، إلخ إزالة اللياقة البدنية ميتة أو منخفضة للأفراد مع باستور "الماصة؛" ووضعها في طبق بتري منفصلة (فوبم الأحداث مع فتح شل، لا حركة، القدم هو عدم سحب، قذيفة مجزأة، والأحداث الذين تعدت حسيب في الماء، تحلل مرئية لشل، ديكالسيفيكاتيون الجزئية).
    3. التقاط صور فوتوغرافية اثنين من فوبم الفردية عرض لياقة بدنية جيدة استخدام تكبير مستمر من ~ 80 X. انظر الملف التكميلي 1: S.5. مجهر والتصوير الفوتوغرافي. حفظ الصور الفوتوغرافية.
      ملاحظة: لقياس الطول جيد، الحدث ويجب وضع الطول (طريقة العرض الأفقي). والهدف الرئيسي هو التقاط صورة عالية الجودة لشل أقصى الطول جيدة بما يكفي لتمكين إجراء تحليل صورة بعد ذلك.
    4. إدراج الأحداث في الدائرة المناسبة في القفص حالما يتم التقاط الصور. سجل عدد الصور والدائرة.
    5. كرر هذه الخطوة مع كل فرد لجميع الدوائر المستخدمة في القفص مش.
      ملاحظة: انظر التكميلية ملف 1: ت-1. مش بناء أقفاص.
    6. وبمجرد جميع الدوائر المستخدمة بلح البحر اللؤلؤ، وضع غربال البلاستيك في القفص، ثم بلطف وضع الغطاء من البلاستيك على وتأمين جميع أجزاء جنبا إلى جنب مع المكسرات.
    7. في حالة تثبيت إلى منطقة هيبورهيك، تمرير أحد طرفي خرطوم من خلال إحدى الدوائر وإصلاحه في هذا الموقف، ثم تأخذ الشبكة المناهضة انسداد وربطه في نهاية الجزء السفلي (انظر التكميلية ملف 1: ت-1. مش بناء أقفاص).
  6. الأحداث مخزن
    1. وضع القفص في علبة بلاستيكية مع مياه النهر، حيث أن الأحداث هي مغمورة تماما، والاحتفاظ به في ثيرموبوكس. قبل التثبيت، السماح للأحداث تتكيف في الموقع نهر درجة حرارة الماء في مكان التثبيت (تدريجي التبريد، بحد أقصى 5 درجة مئوية في 24 ساعة).
  7. تثبيت الأقفاص مش
    1. إعداد مجال المواد بما في ذلك أقفاص مش مع الأحداث، والمسامير الصلب، مسامير وصواميل معدنية، المفك، وحقل داتالوجيرس درجة الحرارة (انظر الجدول للمواد و التكميلية ملف 1: S.4.2. المياه قياس)، سلسلة، وكاميرا، حقل البروتوكول، مطرقة، وأسمائها.
    2. نقل الأحداث فوبم إلى الموقع في ثيرموبوكس ميدانية (مربع معزول)، الحفاظ على درجة حرارة مياه مستقرة مع الاختلافات < ~ 2 درجة مئوية. وضع ثيرموبوكس مع أقفاص مش في النهر في الموقع للسماح للأحداث تتكيف مع الظروف البيئية المحلية (درجة الحموضة، الموصلية، إلخ).
    3. تثبيت القفص مش.
      1. إزالة القفص مش من ثيرموبوكس الميدانية. تزويده باثنين من المسامير الصلب وربط datalogger الميدانية. مرساة القفص إلى موئل مع شروط نموذجية فوبمس في منطقة الدراسة (مثلاً، عند الحافة من تدفق التيار الرئيسي، لا في تدفق المياه مباشرة، لا في المياه الراكدة، لا في ضوء الشمس المباشر).
        1. للمياه المفتوحة، باستخدام زوج من المسامير الصلب، إصلاح القفص إلى أسفل النهر؛ وضع على الجانب، ومستوى مع قاع النهر، المصب بزاوية مقدارها 45 درجة لتدفق النهر، نحو وسط النهر. يجب أن تكون الحافة الأفقية أقل بحوالي 10-15 سم فوق سطح قاع النهر. الحفاظ على الحد أدنى من مسافة 2 متر بين كل قفص في محله واحدة (انظر التكميلية ملف 1: المادة 4. أقفاص الصيانة).
        2. لمنطقة هيبورهيك، وحفر في الأقفاص في قاع النهر في وضع عمودي أفقي، عمودي لتيار المياه، حيث أن الحافة الأفقية العلوية من القفص موازية لسطح قاع النهر والدوائر وتقع في هيبورهيك العمق الذي ينبغي اختبار. تأخذ بها الحد الأعلى لخرطوم مطاطي فوق السطح السفلي لإمكانية أخذ عينات المياه أثناء التجربة (انظر التكميلية ملف 1: S.4.2. المياه قياس).
          ملاحظة: من المستحسن القيام بعمليات تفتيش منتظمة وصيانة على الأقفاص (انظر التكميلية ملف 1: س. 4. أقفاص الصيانة).
  8. إلغاء تثبيت الأقفاص ونقل الأحداث بعد التعرض. لذلك، سحب الأقفاص خارج الماء، واضحة لهم من الرواسب الدقيقة كذلك اعتبارا من المواد تنجرف ووضعها في ثيرموبوكس الحقل مملوءة بمياه النهر. نقل الأقفاص فورا إلى المختبر والبدء في تقييم معدل الوفيات والنمو.
    ملاحظة: انظر الملف التكميلي 1: ت-3. مدة التعرض. في حالة فرق درجة حرارة أكثر من 5 درجة مئوية بين الأقفاص ومختبر البيئة، من الضرورة الأولى للسماح للحرارة مساواة.
  9. تقييم التجربة عن طريق التحقق من الحياة/اللياقة البدنية لكل الأحداث (انظر الخطوات 1.5.2 و 1.5.3) والتقاط صور 2 لكل الأحداث الحية في طبق بتري استخدام تكبير مستمر من ~ 80 X. سجل اللياقة البدنية وإعداد الصور والدوائر.
  10. إكمال هذه التجربة (مشترك لجميع الأساليب)
    1. إجراء القياسات في برمجيات تحليل الصورة. استخدام برمجيات تحليل الصورة لتحديد حجم الجسم كل الأحداث المقيمة على كلا الصور الإدخال (الخطوة 1.5.3) وعلى إخراج الصور (الخطوة 1، 9). استخدام طول شل مجموع الحد الأقصى المسجلة في كل الصور كقيم حجم الجسم في كل من الإدخال والإخراج.
    2. إدراج القيم المقاسة في المعالج الجدول وحساب زيادة النمو (%) للباقين على قيد الحياة كل الأحداث.
    3. تقدير معدل البقاء على قيد الحياة (نسبة مئوية) كل القفص مش استخدام نسبة عدد الأفراد الباقين على قيد الحياة لجميع الأفراد التجريبية في القفص مش.
      ملاحظة: بعد التجربة، عودة الباقين على قيد الحياة إلى برنامج تربية
      (انظر التكميلية ملف 1: S.6. المواد البيولوجية).

2-ساندي القفص

ملاحظة: انظر الشكل 2.

  1. إعداد المواد
    1. إعداد المواد للجزء في المختبر من التجربة: أطباق بيتري 2 (قطر ~8.5 سم)، الماصات باستور، مصفاة، 25 لتر من مياه النهر، وعلبة بلاستيكية، ثقب سيتا (مش حجم 1 و 2 مم)، علبة بلاستيكية كبيرة (25 لتر)، وقفص رملية (انظر التكميلية ملف 1 : ت-2. ساندي أقفاص البناء)، كاميرا رقمية، ترينوكولار تشريح التكبير ستيريو المجهر، شبكة معايرة (مجهر المعدات)، فرز نهر الرمال من منطقة الدراسة (راجع الخطوة 2.1.3)، والبروتوكول. راجع الملف التكميلي جدول المواد و 1: س. 2. ساندي أقفاص البناء.
    2. إعداد المواد اللازمة لعملية العزل: جولة الحاويات (1 لكل قفص زائد 1 إضافية)، أطباق بيتري 2 (القطر ~ 14 سم)، ماصة باستور والنظارات المكبرة و 1 لتر من مياه النهر.
    3. غربلة الرمال نهر غربال 2 مم ثم الجاف للرمال من خلال غربال 1 ملم الحصول على حجم الحبوب من 1-2 مم. وحفظه في شكل جاف حتى المطلوبة.
  2. تأخذ الأحداث (انظر التكميلية ملف 1: S.6. المواد البيولوجية) للخروج من ثيرموبوكس ووضعها في طبق بتري. باستخدام زجاجة بخ ومصفاة، التدقيق من خلال الأحداث لمسح المخلفات.
  3. إعداد المجهر والكاميرا (انظر التكميلية ملف 1: S.5- مجهر والتصوير الفوتوغرافي).
  4. وضع الأحداث في أقفاص (عمل مختبر تجريبي)
    1. ضع القفص الرملية في علبة بلاستيكية. مبعثر الرمال تم فرزها (راجع الخطوة 2.1.3) يصل إلى ثلث ارتفاع القفص الرملية. صب الماء في المربع. تأكد من سطح الرمال حوالي 10 ملم تحت مستوى المياه. أدخل القفص الرملية في مربع 25 لتر من مياه النهر وتعريضها لنفس درجة الحرارة فوبمس الأحداث (انظر التكميلية ملف 1: S.6.2. تخزين المواد البيولوجية) 12 حاء لتجنب أي التعرض للرمل لأشعة الشمس.
    2. تأخذ طبق بيتري مع الأحداث فوبم المعدة.
    3. فحص اللياقة البدنية للأفراد بالنظر إلى العدسة (راجع الخطوة 1.5.2).
    4. تنفيذ الوثائق الفوتوغرافية كما يلي. التقاط صورة واحدة لجميع الأفراد اكتشف (راجع الخطوة 1.5.3) واختر 10 الأفراد أكبر. وبدلاً من ذلك، التقاط صور لجميع الأحداث جنبا إلى جنب مع التكبير المنخفض (~ 40 X) لتقييم السائبة واختيار الأفراد أكبر 10. حفظ كافة الصور الفوتوغرافية وتسجيل أرقامها.
    5. استخدام زجاجة بخ، نقل الأحداث فوبم في قفص الرملية المعدة.
  5. الأحداث مخزن
    1. وضع القفص في علبة بلاستيكية كبيرة مع مياه النهر حتى هي مغمورة تماما في القفص والاحتفاظ به في ثيرموبوكس. واسمحوا الأحداث تتكيف في الموقع نهر درجة حرارة الماء (تدريجي التبريد، بحد أقصى 5 درجة مئوية ح 24) قبل التثبيت.
  6. تثبيت الأقفاص رملي
    1. إعداد المواد اللازمة لتركيب الحقل: أقفاص الرملية، ثيرموبوكس ~ 25-L حقل، حجر مسطح (الحد الأدنى وزن 1 كغم)، صافي (مش حجم 10 × 10 مم)، زجاجة بخ، حقل درجة الحرارة داتالوجيرس (انظر الجدول للمواد و التكميلية ملف 1: قياس الماء S.4.2.)، بأسمائها، وفي حقل البروتوكول.
    2. النقل في الأقفاص مع الأحداث إلى الموقع في ثيرموبوكس الميدانية، الحفاظ على درجة حرارة مياه مستقرة (تغيير ~ 2 درجة مئوية). وضع ثيرموبوكس الميدانية مع أقفاص الرملية في النهر في موقع حقل للسماح للأحداث فوبم على التكيف مع الظروف البيئية المحلية (درجة الحموضة، الموصلية، إلخ).
    3. تثبيت الأقفاص الرملية في الموائل مع شروط نموذجية فوبمس (مثلاً، عند الحافة من تدفق التيار الرئيسي في تسكع، ليس في تدفق المياه مباشرة، وليس في المياه الراكدة، لا في ضوء الشمس المباشر).
      1. للمياه المفتوحة، ربط الأقفاص الرملية إلى حجر مسطح باستخدام الشباك ووضعه في قاع النهر. تأكد من أن الجانب الأكبر من القفص يشكل زاوية مقدارها 45 درجة مع التدفق.
      2. هيبورهيال، حفر في الأقفاص في قاع النهر عمودي لتدفق المياه حيث أن غطاء القفص مستوى مع سطح قاع النهر.
        ملاحظة: من المستحسن القيام بعمليات تفتيش منتظمة وصيانة على الأقفاص (انظر التكميلية ملف 1: س. 4. 1-عمليات تفتيش للموقع).
  7. إلغاء تثبيت الأقفاص والأحداث النقل بعد التعرض
    ملاحظة: انظر التكميلية ملف 1: ت-3. مدة التعرض.
    1. سحب الأقفاص خارج الماء، وواضحة لهم المواد تنجرف ووضعها في ثيرموبوكس الحقل مملوءة بمياه النهر.
    2. نقل الأقفاص للمختبر والبدء في تقييم معدل الوفيات والنمو.
      ملاحظة: في حالة فرق درجة حرارة أكثر من 5 درجة مئوية بين الأقفاص ومختبر البيئة، من الضروري السماح لتحقيق التكافؤ في درجات الحرارة.
  8. الأحداث فوبم منفصلة من الرمال
    1. تعد جولة حاوية مع عمق مياه من 50 مم (لكل قفص على حدة) وحاوية جولة إضافية واحدة. نقل الرمال من القفص إلى الحاوية جولة. تستخدم حركة دوامات لتغسل الجزيئات الأخف في حاوية إضافية.
    2. عينة المحتوى من هذه الحاوية تدريجيا والبحث عن الأحداث خطوة بخطوة باستخدام ماصة باستور وعدسة مكبرة. وضع الأحداث في طبق بتري استخدام ماصة باستور. كرر هذه الخطوة حتى تم العثور على الأحداث الأخيرة وآخر ثم x 10 بعد النتيجة السلبية الأولى. بعد كل خطوة الغسيل، إضافة مياه النهر النظيفة إلى الحاوية الأصلية مع الرمال.
      ملاحظة: لا سيما بعد الغسيل الأولى، بشكل صحيح فحص المحتوى وتنظيفه من الصابورة مثل الرواسب الدقيقة والأخرى اللوفيا.
  9. تقييم التجربة
    1. فحص اللياقة البدنية لكل الأحداث (انظر الخطوات 2.4.3 و 1.5.2) وعدد من الناجين.
    2. التقاط صورة (راجع الخطوة 2.4.4.) لكل فرد على حدة، على الرغم من أن هذا يعني هناك لا هوية واضحة لكل فرد. وبدلاً من ذلك، التقاط صور السائبة واختيار مجموعة فرعية من 10 أفراد نمت أفضل من النتائج النهائية.
      ملاحظة: كلا الاحتمالين يكون قيمة إبلاغ مماثلة. وقد 1 إمكانية حد عبء عمل أعلى ولكن أيضا الاستفادة من أعلى الصورة التكبير، وهكذا أيضا قدر أكبر من الدقة.
  10. إكمال التجربة
    1. إجراء القياسات في برمجيات تحليل الصورة. إكمال هذه التجربة كما فعل في أقفاص مش (راجع الخطوة 1، 10) مع الاستثناء التالي: عدم تقييم معدل النمو (%) لكل الأحداث ولكن تقييم المجموعة ككل في تجربة القفص الرملية.
      ملاحظة: بعد التجربة، الباقين على قيد الحياة ينبغي أن تعاد إلى برنامج تربية
      (انظر التكميلية الملف S.6.1. سراج الدينليكتيون مادة بيولوجية).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وطبقت الطرق بيوينديكيشن الأربعة (أقفاص المياه المفتوحة الرملية، أقفاص الرملية داخل سرير وفتح أقفاص شبكة المياه واقفاص مش داخل سرير) للتحقيق في مدى ملاءمة البيئة شرط فوبمس في "حوض نهر فلتافا" العلوي (غابة بوهيميا، التشيكية جمهورية). ويمثل هذا النهر فوبم منطقة المتبقية داخل أوروبا الوسطى19. وهنا، نقدم مجموعة مختارة خصيصا للنتائج التي توضح أهم جوانب الطرق الأربع. وترد تفاصيل أخرى في دراسة شاملة Černá et al. 13.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقت التعرض:

شهر واحد حتى مكشوف مش أقفاص إظهار نمو مرئية تعكس الاختلافات بين المحليات (الشكل 3)، حيث تكون صالحة للاستعمال جداً لكشف سريعة وسهلة لتوصيف المكان. ومع ذلك، أهمية النتائج تعتمد على حالة قصيرة الأجل من الشروط، التي يمكن أن يتذبذب. على وجه الخصوص، أحداث الأمطار القصير يمكن أن تلعب دوراً. وفي المقابل، التلوث العرضي لا يمكن التنبؤ بها قد لا تكون تسجل دائماً. في الموقع الخامس (الشكل 4A)، كشف تحليل كيمياء المياه موجه قصيرة من الأموني...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وأيد Bílý ميكال وسيمون Ondřej ص المنح من "الجامعات التشيكية لعلوم الحياة" [الداخلية منحة الوكالة من كلية العلوم البيئية، براغ كولس (42110 1312 3175 (20164236))]. وجاء الدعم للدودة كاريل من "مؤسسة العلوم التشيكية" (13-05872S). وجمعت بيانات عن بيوينديكيشن والتواجد الحالي من بلح البحر اللؤلؤ أثناء تنفيذ "خطة العمل التشيكية" "المياه العذبة بيرل بلح" تديره وكالة المحافظة على الطبيعة من الجمهورية التشيكية، الذي تموله الحكومة الجمهورية التشيكية، وهو متاح في

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
<قوي > بيولوجي صيانة المواد والعناية بها < / قوي>
صغار بلح البحر اللؤلؤي في المياه العذبةأيNAمن صناديق بلاستيكية لبرنامج تربية FWPM
أي
MERCI212،070،600،030هناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط.
صندوق حراري للحقل (Ca25 لتر)أيصندوق بارد NA (صندوق معزول) يشيع استخدامه لنقل الأغذية
ومياهالنهر أي
Petriأي
مع لمبة بالون (قطارات)أيقطر ثقب NA 1 مم
بيروكسيد الهيدروجينأي
(حوالي 50 لتر) لمياه النهرأي
أيNAيشيع استخدامها في المطبخ
< قوي > شبكة أقفاص البناء < / قوي >
الأجسام البلاستيكية الرئيسيةأي
plactic يغطيأي
340 & micro ؛ مالحرير & أمبير تقدمUHELON 20 T
المناخل التقنية الخاصة 100 & مايكرو; مالحرير & أمبير تقدمUHELON 67 M
خرطوم مطاطي (قطر 5.5 مم)أي
أي
أيNA
أيمسامير
أي
أي
(حوالي 25 × 15 × 3-5 سم)أي
، أي
،أي
، أي
، أيNA
أي
، أيNA
< أقفاص قوية > رملية البناء والاستخدام < / قوي >
غربال 1 ممأي
2 ممأي
340 & مايكرو ؛ مالحرير & أمبير تقدمUHELON 20
T صناديق بلاستيكية بغطاء محكمأي
أي
(حوالي 250 × 150 × 100 سم) صندوق
بلاستيكي كبير (حوالي 25 لتر)أيمسطح NA
أي
NA netأيNA
رمل النهرأي
أي
كارسونكارسون CP 60هناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط
< قوي > تركيب وصيانة الأقفاص < / قوي >
مجال مسجلات بيانات درجة الحرارةONSETUA-001-64http://www.onsetcomp.com/products/data-loggers/ua-001-64
مجرفةأي
أيNA
< قوي > تجربة تقييم < قوي>
تشريح ثلاثي العينيات تكبير مجهر ستيريوBresser البصريICD 10x-160xهناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط.
الكاميرا الرقمية / العدسة الإلكترونيةBresser البصريةMikroCamLab 5Mهناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط.
المعايرةAm ScopeSKU: MR100هناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط.
مصدر طاقة خارجي مع دليلين للضوء المتحركينأرسنالK1309010150021هناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط.
برنامج الصوربرنامج ImageJهناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط.
معالج الجدولMS Excelهناك العديد من الاحتمالات. هذا مثال واحد فقط.
صندوق حراري NA أطباق NA ماصات باستور بلاستيكية NA حاوية بلاستيكية NA مصفاة شاي بلاستيكية NA NA مناخل تقنية خاصة NA مسامير فولاذية NA صواميل فولاذية NA مفتاح ربط فولاذية NA كماشة NA أكواب NA أطباق بلاستيكية NA زجاجة بخاخ NA بروتوكولات ميدانية NA قرطاسية NA حاوية بلاستيكية NA سلسلة ، مطرقة NA غربال NA مناخل تقنية خاصة NA مادة لاصقة تذوب الساخنة NA صندوق بلاستيكي NA حجر حاويات مستديرة NA نظارات مكبرة NA فرشاة أسنان NA تقييم حزام

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Goldberg, E. D. The mussel watch-a first step in global marine monitoring. Marine Pollution Bulletin. 6 (7), 111-114 (1975).
  2. Vaughn, C. C. Ecosystem services provided by freshwater mussels. Hydrobiologia. , In Press (2017).
  3. Lopes-Lima, M., et al. Conservation status of freshwater mussels in Europe: state of the art and future challenges. Biological Reviews. 92 (1), 572-607 (2017).
  4. Strayer, D. L., Malcom, H. M. Causes of recruitment failure in freshwater mussel populations in southeastern New York. Ecological Applications. 22 (6), 1780-1790 (2012).
  5. Douda, K. Effects of nitrate nitrogen pollution on Central European unionid bivalves revealed by distributional data and acute toxicity testing. Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems. 20 (2), 189-197 (2010).
  6. Modesto, V., et al. Fish and mussels: importance of fish for freshwater mussel conservation. Fish and Fisheries. , In Press (2017).
  7. Ecology and evolution of the freshwater mussels Unionoida. Bauer, G., Wächtler, K. 145, Ecological Studies. 1-394 (2001).
  8. Neves, R. J., Widlak, J. C. Habitat ecology of juvenile fresh-water mussels (Bivalvia, Unionidae) in a headwater stream in Virginia. American Malacological Bulletin. 5, 1-7 (1987).
  9. Švanyga, J., Simon, O. P., Mináriková, T., Spisar, O., Bílý, M. Záchranný program pro perlorodku říční v ČR (Action plan for the endangered freshwater pearl mussel in the Czech Republic). , NCA CR. Prague, Czech Republic. (2013).
  10. Schmidt, C., Vandré, R. Ten years of experience in the rearing of young freshwater pearl mussels (Margaritifera margaritifera). Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems. 20 (7), 735-747 (2010).
  11. Gum, B., Lange, M., Geist, J. A critical reflection on the success of rearing and culturing juvenile freshwater mussels with a focus on the endangered freshwater pearl mussel (Margaritifera margaritifera L.). Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems. 21 (7), 743-751 (2011).
  12. Denic, M., Taeubert, J. E., Lange, M., Thielen, F., Scheder, C., Gumpinger, C., Geist, J. Influence of stock origin and environmental conditions on the survival and growth of juvenile freshwater pearl mussels (Margaritifera margaritifera) in a cross-exposure experiment. Limnologica. 50, 67-74 (2015).
  13. Černá, M., Simon, O. P., Bílý, M., Douda, K., Dort, B., Galová, M., Volfová, M. Within-river variation in growth and survival of juvenile freshwater pearl mussels assessed by in situ exposure methods. Hydrobiologia. , In Press (2017).
  14. Denic, M., Taeubert, J. E. Trophic relationships between the larvae of two freshwater mussels and their fish hosts. Invertebrate Biology. 134 (2), 129-135 (2015).
  15. Douda, K. Host-dependent vitality of juvenile freshwater mussels: implications for breeding programs and host evaluation. Aquaculture. 445, 5-10 (2015).
  16. Buddensiek, V. The culture of juvenile freshwater pearl mussels Margaritifera margaritifera L. in cages: a contribution to conservation programmes and the knowledge of habitat requirements. Biological Conservation. 74 (1), 33-40 (1995).
  17. Hruška, J. Experience of semi-natural breeding program of freshwater pearl mussel in the Czech Republic. Die Flussperlmuschel in Europa: Bestandssituation und Schutzmaßnahmen. , Albert-Ludwigs Universität: Freiburg. Kongressband. WWA Hof 69-75 (2001).
  18. Barnhart, M. C. Buckets of muckets: a compact system for rearing juvenile freshwater mussels. Aquaculture. 254 (1), 227-233 (2006).
  19. Simon, O. P., Vaníčková, I., Bílý, M., Douda, K., Patzenhauerová, H., Hruška, J., Peltánová, A. The status of freshwater pearl mussel in the Czech Republic: several successfully rejuvenated populations but the absence of natural reproduction. Limnologica. 50, 11-20 (2015).
  20. R Core Team. A language and environment for statistical computing. , R Foundation for Statistical Computing. Vienna, Austria. Available from: https://www.r-project.org/ (2013).
  21. Hastie, L. C., Yang, M. R. Conservation of the freshwater pearl mussel I: captive breeding techniques. 2, Natural England. Peterborough, UK. Conserving Natura 2000 Rivers Conservation Techniques Series No. 2 (2003).
  22. Hruška, J. Nahrungsansprüche der Flußperlmuschel und deren halbnatürliche Aufzucht in der Tschechischen Republik. Heldia. 4 (6), 69-79 (1999).
  23. Scheder, C., Lerchegger, B., Jung, M., Csar, D., Gumpinger, C. Practical experience in the rearing of freshwater pearl mussels (Margaritifera margaritifera): advantages of a work-saving infection approach, survival, and growth of early life stages. Hydrobiologia. 735 (1), 203-212 (2014).
  24. Braun, A., Auerswald, K., Geist, J. Drivers and spatio-temporal extent of hyporheic patch variation: implications for sampling. PLoS ONE. 7 (7), e42046(2012).
  25. Franken, R. J. M., Storey, R. G., Williams, D. D. Biological, chemical and physical characteristics of downwelling and upwelling zones in the hyporheic zone of a north-temperate stream. Hydrobiologia. , 183-195 (2001).
  26. Roley, S. S., Tank, J. L. Pore water physicochemical constraints on the endangered clubshell mussel (Pleurobema clava). Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 73 (12), 1712-1722 (2016).
  27. Larson, J. H., Eckert, N. L., Bartsch, M. R. Intrinsic variability in shell and soft tissue growth of the freshwater mussel Lampsilis siliquoidea. PLoS ONE. 9 (11), e112252(2014).
  28. Lavictoire, L., Moorkens, E., Ramsey, A. D., Sinclair, W., Sweeting, R. A. Effects of substrate size and cleaning regime on growth and survival of captive-bred juvenile freshwater pearl mussels, Margaritifera (Linnaeus, 1758). Hydrobiologia. 766 (1), 89-102 (2015).
  29. Hruška, J. Experience of semi-natural breeding programme of freshwater pearl mussel in the Czech Republic. Die Flussperlmuschel in Europa: Bestandssituation und Schutzmassnahmen. , 69-75 (2000).
  30. Bayne, B. L. Physiological components of growth differences between individual oysters (Crassostrea gigas) and a comparison with Saccostrea commercialis. Physiological and Biochemical Zoology. 72 (6), 705-713 (1999).
  31. Tamayo, D., Azpeitia, K., Markaide, P., Navarro, E., Ibarrola, I. Food regime modulates physiological processes underlying size differentiation in juvenile intertidal mussels Mytilus galloprovincialis. Marine Biology. 163 (6), (2016).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Freshwater Pearl MusselsIn Situ ExposureJuvenile GrowthSurvival RateSandy Cage MethodMesh Cage MethodHyporheic ZoneOpen Water ExposureWithin Bed ExposureRiver Bottom Installation

Related Articles