وتصف هذه الورقة بروتوكول مفصل وفعالة للغاية لتسجيلات سينسيلوم واحد من باسيكونيكا سينسيلا على بالبس من الحشرات فمها.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تسجيلات سينسيلوم واحدة للجراد المالي سينسيلا باسيكونيكا
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تعتبر بالبس فمها الجراد الأجهزة تطرب التقليدية، التي تلعب دوراً مهما في اختيار الأغذية الجراد، وبخاصة للكشف عن الإشارات الكيميائية غير متغير عن طريق تشايتيكا سينسيلا (المسمى سابقا سينسيلا المحطة الطرفية أو متوج سينسيلا). وهناك الآن تزايد الأدلة على أن هذه بالبس لها أيضا وظيفة حاسة الشم. مستقبلات الرائحة (LmigOR2) وملزم الرائحة بروتين (LmigOBP1) قد تم مترجمة في الخلايا العصبية والخلايا التبعي، على التوالي، في باسيكونيكا سينسيلا بالبس. واحد سينسيلوم تسجيل (SSR) يستخدم لتسجيل استجابات الخلايا العصبية مستقبلات الرائحة، وهو وسيلة فعالة لفحص يغاندس النشطة على مستقبلات الرائحة محددة. وتستخدم الاشتراكية السوفياتية في الدراسات الفنية من مستقبلات الرائحة في سينسيلا المالي. هيكل باسيكونيكا سينسيلا الموجود على قبة بالبس تختلف بعض الشيء عن هيكل تلك على الهوائيات. ولذلك، عند القيام إصلاح قطاع الأمن أودورانتس، بعض النصائح محددة قد تكون مفيدة للحصول على أفضل النتائج. في هذه الورقة، هو عرض بروتوكول مفصلة وفعالة للغاية إصلاح قطاع الأمن من الحشرات المالي سينسيلا باسيكونيكا.
المقدمة
وقد تطورت الحيوانات مجموعة من أجهزة تشيموسينسوري أن معنى الرموز الكيميائية خارجية. في الحشرات، هي أهم الأجهزة تشيموسينسوري الهوائيات وبالبس. في هذه الأجهزة، يتم معصب عدة أنواع من الشعر تشيموسينسوري، سينسيلا تشيموسينسوري، ودعا بالخلايا العصبية تشيموسينسوري (المذكرات) داخل الشعر. مذكرات في سينسيلا تشيموسينسوري الاعتراف بالإشارات الكيميائية المحددة عن طريق توصيل الإشارة من المحفزات الكيميائية بالإمكانات الكهربائية التي يتم نقلها في وقت لاحق حتى أنظمة العصبي المركزي1،2،3 .
مذكرات التعبير عن مختلف تشيموسينسوري مستقبلات [مثلاً، مستقبلات الرائحة ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1-إعداد الصكوك والحشرات
-
إعداد التنغستن الأقطاب الكهربائية والمحفزات الحلول
- إصلاح سلك تنغستن جديدة (قطر 0.125 مم وطول 75 مم) إلى ميكرومانيبولاتور وشحذ في محلول 10% (w/v) والنتريت (نانو2) صوديوم في حقنه في 10 الخامس المقدمة من إمدادات طاقة لحوالي 1 دقيقة تحت ستيريوميكروسكوبي (40 X التكبير).
- تراجع سلك التنغستن شحذ مرارا وتكرارا إلى 10% نانو2 الحل، حوالي 4 ملم في 5 الخامس في < 1 دقيقة (الشكل 1A).
- دراسة قطر تلميح التنغستن شحذ غالباً تحت ستيريوميكروسكوبي حتى أنه بخير ما فيه الكفاية لاختراق بشرة الجراد المالي سينسيلوم حاسة الشم (الشكل 1B
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
يتم تحديد اثنين من المخططات سينسيلا (pb1 و pb2) على المالي فكي علوي الجراد تقوم على ديناميات مختلفة استجابة ل odorants الكيميائية (10% 1-نونانول وحمض نونانويك 10%). الخلايا العصبية في pb1 تنتج أكثر بكثير من طفرات إلى 1-نونانول مما لحمض نونانويك بينما الخلايا العصبية في pb2 هي إلى حد كبير أقل تنشيطه بواسطة 1-نونانول مقارنة مع حمض نونانويك (الشكل 4). يمكن أن تثير هيكسانال وهاء-2-هيكسينال المالي الجراد فتح استجابة (البرتغال)26. هيكسانال ج.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الحشرات تعتمد على بالبس لكشف روائح المواد الغذائية، وبها بالبس ويعتقد أن تلعب دوراً هاما في انتواع13،27. Palps أجهزة الشم بسيطة وهي تلقي اهتماما متزايداً كنموذج جذاب للاستكشاف نيوروموليكولار الشبكات الأساسية تشيموسينسيشن28.
حشرة لأبيلار و SSRs المالي قد أجريت بنجاح على melanogaster المورفولوجيةو Anopheles gambiae Culex quinquefasciatus13،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
ويدعم هذا العمل بمنحه من "مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية" (No.31472037). أي ذكر للأسماء التجارية أو المنتجات التجارية في هذه المادة هو فقط لغرض توفير معلومات محددة ولا ينطوي توصية.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| سلك التنغستن | ADVENT | W559504 | تستخدم لصنع القطب الكهربائي وتثبيت Palp |
| NaNO 2< / sub> | Sigma-aldrich | 563218-25G | تستخدم لشحذ سلك التنغستن |
| AC مصدر طاقة | Syntech | A2-70 | توفير الجهد في شحذ سلك التنغستن |
| مجسم | Motic | SMZ-163 | يستخدم لمراقبة شحذ مجهر سلك التنغستن |
| أوليمبوس | W-51 | يستخدم لمراقبة الحسية على الجراد الفكي | |
| العلوي وحدة التحكم الذكية في الحصول على البيانات | Syntech | IDAC-4 | الوقت الحقيقي على شاشة عرض جميع الإشارات قبل وأثناء التسجيل |
| وحدة تحكم التحفيز | Syntech | CS-55 | تستخدم للتحكم في تطبيق التحفيز |
| الإلكتروني معالج دقيق | C.M.D.T | CFT-8301D | يستخدم للحركة الطفيفة لقطب التسجيل |
| Micromanipulator | Narishige | MN-151 | يستخدم للحركة الطفيفة للقطب المرجعي |
| مكبر | الصوت EDIFIER | R101T06 | متصل ب IDAC-4 ويوفر الصوت |
| للإشارة القاعدة المغناطيسية | PDOK | PD-101 | تستخدم لحمل القطب الكهربائي وأنبوب توصيل التحفيز |
| طاولة عزل الاهتزاز | TianHe | HAP-100-1208 | تستخدم لعزل الاهتزاز عن المعدات شريحة |
| زجاجية | CITOGLAS | ZBP-407 | تستخدم لصنع قاعدة MPH |
| Blu-tack | Bostik | Blu-tack-45g | تثبيت سلك التنغستن |
| أنبوب باستور | YARE | WITEG | وضع ورق الترشيح الذي يحتوي على محاليل تحفيز التحفيز |
المراجع
- Carey, A. F., Carlson, J. R. Insect olfaction from model systems to disease control. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (32), 12987-12995 (2011).
- Leal, W. S.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
