Method Article

بالقطع وأسلوب عائم للأنسجة جزءا لا يتجزأ من البارافين لتقطيع

DOI:

10.3791/58288

⸱

September 5th, 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Institute of Life Science, Nanchang University, 2Queen Mary School, Medical Department, Nanchang University, 3School of Life Science, Nanchang University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نقدم هنا، وضع بروتوكول لتحسين البارافين تمزيقها. ويجمع هذا الأسلوب قطع والعائمة باستخدام دائرة ترموستاتي بسيطة لتجنب عملية التحويل المطلوبة بالطريقة التقليدية. نتيجة لذلك كانت إلى حد كبير تحسين الكفاءة وعدد المقاطع البارافين سليمة.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تقطيع الأنسجة جزءا لا يتجزأ من البارافين يستخدم على نطاق واسع في علم الأنسجة وعلم الأمراض. ومع ذلك، أنها مملة. لتحسين هذا الأسلوب، وضعت العديد من الشركات التجارية أنظمة نقل قسم معقدة باستخدام الماء السائل. لتبسيط هذه التكنولوجيا، أنشأنا طريقة بسيطة باستخدام معدات محلية الصنع الذي يجمع بين قطع والعائمة داخل دائرة ترموستاتي بسيطة؛ ولذلك، أدخل المقاطع تلقائياً حمام الماء على سطح الماء. وقطعت الحصين من العقول الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار وادمغة الفأر الجنينية وعيون الزرد الكبار باستخدام البارافين التقليدية تمزيقها وطريقة عرضها للمقارنة. ويبين التحليل الإحصائي أن لدينا طريقة تحسين حفظ الوقت وإنتاج أعلى جودة المقاطع. وباﻹضافة إلى ذلك، البارافين تقطيع العينة كلها في فترة زمنية قصيرة من السهل لصغار المشغلين.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

من المهم دراسة الخصائص المورفولوجية في الأبحاث البيولوجية. على الرغم من أن التكنولوجيا الجديدة قد سمح الباحثين مراعاة أهدافها مباشرة من الأنسجة كاملة أو الكائنات الحية1،2،3، قطع العينة إلى أجزاء رقيقة، متبوعاً تلطيخ، تبقى المرحلة الابتدائية الأسلوب فورنوت مورفولوجيا الأنسجة فقط ولكن أيضا البروتين تستهدف مباشرة في الأنسجة. الخفيفة الميكروسكوب يستخدم ثلاثة أنواع المقاطع: البارافين، المجمدة، وسيميثين. على الرغم من أن كريوسيكتيونينج المشتركة لحماية أنتيجينيسيتي الأنسجة، وإعداد نموذج بسيط، مورفولوجيا الأنسجة المحتفظ بها الفقراء وغير مناسب لتقطيع رقيقة4....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

عليها جميع الأساليب الموصوفة هنا بالعناية بالحيوان واستخدام اللجنة لجامعة نانتشانغ.

1-تجميع المعدات والاتصال مبضع

  1. تصميم المعلمة كل المتطلبات (الملحق الرقم 1).
  2. تقديم المعلمة لمصنع محلي لتصنيع لوحات اﻷكريليك.
  3. تجميع جميع أنحاء في التسلسل: استخدام كلوروفورم لضم 7 لوحات اﻷكريليك التجارية في دبابة مع قسم حمام القناة والمياه (الشكل 1).
    تنبيه: كلوروفورم تنتج مواد سامة عندما يجتمع الضوء والأكسجين. قم بتجميع الجهاز في غطاء دخان.
  4. تثبيت الكهربائية والتدفئة من خلال الثقب في المجلس اﻷكريليك #1 (الشكل 2A

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

طريقة تحسين زيادة عدد المقاطع البارافين سليمة. نحن اختبار هذا الأسلوب الجديد في الأنسجة هيبوكامبال الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار وادمغة الفأر الجنينية وعيون الزرد. تم إضافة المياه إلى الخزان، وتمت المحافظة على درجة حرارة الماء بين 38.0 درجة مئوية إلى 40.0 ° C. بعد نحو متسلسل إعداد عينات الأنسجة، وقد مقطوع ومقارنة بتقطيع التقليدية. تجنب فقدان قسم الأسلوب الجديد وزيادة نسبة الأقسام سليمة في الحصين الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار، E15.5 الماوس العقول، وعيون الزرد الكبار (

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لتحسين البارافين قسم التشكل وإيجاد حل لمشكلة الوقت الضائع أثناء تقطيع البارافين التقليدية، أنشأنا تحسين بارافين تمزيقها الأسلوب الذي يجمع بين القطع وتتكشف. يعتمد هذا الأسلوب محسنة على المعدات البسيطة التي تضم قناة قسم وحمام مائي وسخان مع تبديل الكشف عن درجة حرارة. الشريط قسم يدخل حمام المياه عن طريق القنوات قسم وتتكشف تلقائياً أثناء القطع. ولذلك، هذا الأسلوب يحسن البارافين تمزيقها الجودة والكفاءة التي تم التحقق منها بتقطيع البارافين الحصين الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار، E15.5 الماوس العقول، وعيون الزرد الكبار.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب على براءة اختراع هذا الجهاز وتعلن لا تضارب المصالح.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هذا العمل كان تدعمها "مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية" (المنحة رقم 31400936، 31460260) و "العلوم الطبيعية مؤسسة جيانغشي مقاطعة من الصين" (20171BAB215020). ونشكر أيضا البرنامج المشترك بين جامعة نانتشانغ، وجامعة الملكة ماري في لندن لدعم هذا العمل.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
حاضنةBoekel Scientific133000-2
Ethanol Sinopharm كاشف كيميائي Co.,غطاء64-17-5
Xylene Sinopharm Chemical Reagent Co. ، غطاء1330-20-7
ParaplastLeica39601006
وحدة تضمين البارافين الساخنةLeica
لوحة
ثلاثي كلورو الميثانSinopharm الكاشف الكيميائي Co. ، غطاء67-66-3
عنصر تسخين كهربائي أنبوبي (12 فولت 200 واط)
تحكم في درجة الحرارة (12 فولت 120 واط)MingsuoXH-W3002
ميكروتوم دوار   ؛لايكا
لايكا مانعاربط قناة المياه بحامل السكين الميكروتوم
محول الجهدDearllS-250-12
شفرة يمكن التخلص منهاAccu-Edge4689
HematoxylinBaso Diagnostics Inc.BA-4025
Eosin باسو للتشخيصBA-4025
MicroslideSail Brand7105
بلسم محايدSinopharm Chemical Reagent Co.، غطاء10004160
Coverslip   ؛Citoglas10212424C
مجهركارل زايس
حمض الهيدروكلوريكXilong Chemical7647-01-0
حمام مائي لأقسام البارافينLeica
HistoCore Arcadia C - لوحة باردةLeica
Paraffin طارد للبارافين 9990420العلمي الحراري
الأكريليك التجارية التسرب المحايد شركة

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chung, K., Deisseroth, K. CLARITY for mapping the nervous system. Nature Methods. 10 (6), 508-513 (2013).
  2. Fujita, S. Analysis of neuron differentiation in the central nervous system by tritiated thymidine autoradiography. Journal of Comparative Neurology. 122 (3), 311-327 (1964).
  3. Mironov, V., Boland, ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Paraffin SectioningTissue SectioningCutting Floating MethodWater Bath SectioningMicrotome SectioningSection Transfer SystemThermostatic ChamberSection Quality AnalysisHematoxylin Eosin StainingWhole Specimen Sectioning

Related Articles