هذا الأسلوب من المثقبيات انفصال الدم يعتمد على تهمة السطحية يجري أقل سلبية من الثدييات خلايا الدم. وضع الدم الملوث ويعامل على عمود مبادل شاردة. يوفر هذا الأسلوب، الأكثر ملائمة في التشخيص لداء المثقبيات الأفريقي، الطفيليات المنقي للتحقيقات المناعية، والبيولوجية، والكيميائية الحيوية، الصيدلة والبيولوجيا الجزيئية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تنقية مثقبيات خارج الخلية، بما في ذلك البلدان الأفريقية، من الدم بشاردة-مبادلات (ديثيلامينوثيل-السليلوز أعمدة)
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
هذا الأسلوب يتيح فصل مثقبيات، الطفيليات المسؤولة عن داء المثقبيات الأفريقي البشري والحيواني (قبعة)، من الدم الملوث. وهذا هو أفضل طريقة لتشخيص المرحلة الأولى قبعة وعلاوة على ذلك هذا الأسلوب تنقية الطفيلي تصاريح المصلية والبحوث التحقيقات.
قبعة بسبب ذبابة التسي تسي أحال المثقبيات البروسية الغامبية و رهوديسينسي ت.. مثقبيات ذات الصلة هي العوامل المسببة لداء المثقبيات الحيواني. الكشف عن المثقبيات ضروري للقبعة التشخيص والعلاج والمتابعة. الأسلوب الموصوفة هنا هو أسلوب الكشف عن الطفيليات الأكثر حساسية، تتكيف مع الظروف الميدانية لتشخيص الغامبية ت. قبعة ويمكن أن تنجز في غضون ساعة واحدة. الطبقات الدم على عمود مبادل شاردة (دي السليلوز) سبق تعديلها لدرجة الحموضة 8، وتتم إضافة شطف المخزن المؤقت. مشحونة سلبا على درجة عالية من خلايا الدم هي تمتز فوق العمود بينما يمر مثقبيات مشحونة بأقل تأثيراً سلبيا. مثقبيات جمعها القريبون من الطرد المركزي والتقيد بالفحص المجهري. وعلاوة على ذلك، تعد الطفيليات دون الأضرار الخلوية مع الحفاظ على هذه العدوى.
مثقبيات المنقي مطلوبة لاختبار المناعية؛ وتستخدم في الفحص تريبانوليسيس، معيار الذهب في الأمصال قبعة. الطفيليات الملون تستخدم في اختبار تراص بطاقة (كات) لحقل علم الأمصال. مولدات المضادات من مثقبيات المنقي، مثل بروتين سكري السطحي البديل، اكسوانتيجينس، تستخدم أيضا في تحديدكم المختلفة. ويهدف الإجراء الموضح هنا المثقبيات الأفريقي؛ ونتيجة لذلك، يضطر شروط الفصل اللوني لتكييفها لكل سلالة المثقبيات، وبشكل أعم، للدم من كل الأنواع من الثدييات المضيفة.
هذه رائعة مسببات الأمراض سهولة المنقي ومتاحة للاستخدام في الجزيئي، والكيمياء الحيوية وخلية دراسات علم الأحياء بما في ذلك ثقافة المشارك مع الخلايا المضيفة للتحقيق في علاقات الطفيلي المضيف على مستوى مستقبلات الغشاء، والإشارات، والجينات التعبير؛ المخدرات في المختبرمن الاختبار؛ التحقيق حذف الجينات أو طفرة أو overexpression على العمليات الأيضية ونشوء حيوي سيتوسكيليتال وبقاء الطفيلي.
المقدمة
طريقة عرض وصف هنا يسمح فصل مثقبيات، الطفيليات المسؤولة عن داء المثقبيات الأفريقي البشري والحيواني (قبعة) من الدم. وهذا هو أفضل طريقة لتشخيص المرحلة الأولى قبعة وعلاوة على ذلك يسمح هذا الأسلوب تنقية الطفيلي التحقيق المصلية وبحوث قوية.
قبعة بسبب ذبابة التسي تسي أحال المثقبيات البروسية الغامبية و rhodesiense ت1. تتكاثر هذه الطفيليات الأوالي اكستراسيلولارلي في مجرى الدم والليمفاوية، وسوائل الخلالي خلال المرحلة الأولى من المرض (المرحلة هيموليمفاتيك). تبدأ المرحلة الثانية (مرحلة مينينجونسيفاليتيك) عند الطفيليات عبور حاجز الدم في الدماغ؛ علامات عصبية، بما في ذلك اضطراب نوم، التي أعطت لهذا المرض باسم "مرض النوم"، نموذجية لهذه المرحلة الثانية2. مثقبيات ذات الصلة (افانسي ت.، النشيطة ت. ت. ب-البروسية، كونجولينسي ت.) هي العوامل المسببة للحيوان المثقبيات الأفريقي (محكمة الاستئناف الإدارية)3.
وتهدف منظمة الصحة العالمية (WHO) للقضاء على قبعة كمشكلة من مشاكل صحة العامة بحلول عام 2020، والتوقف عن الإرسال بحلول عام 20304. وقد الأخذ في الآونة الأخيرة من اختبارات التشخيص السريع تحسين التشخيص المصلية1،،من45. وضعت العديد من الاختبارات التشخيصية الجزيئية ولكن دورها في مجال التشخيص لم المنشأة5. يتم استخدامها لتحديد الأنواع الفرعية للمجموعة البروسية وداء المثقبيات شاذة الناجمة عن الطفيليات المسؤولة عن المثقبيات الحيواني6.
الكشف عن الطفيليات ضروري للتشخيص والعلاج والمتابعة، كما علم الأمصال يمكن أن تعطي نتائج سلبية كاذبة إيجابية وكاذبة للأسف1. الملاحظة المباشرة تقنيين من الاولانيات هيموفلاجيلاتي هذه يصعب في حالات القبعة التي تسببها الغامبية. ت.، (أكثر من 95% حالات) كما باراسيتيمياس المنخفضة هي القاعدة، بينما للقبعة الناجمة عن ت. رهوديسينسي، كبير عدد الطفيليات موجودة غالباً في الدم. وقد استخدمت تقنيات تركيز مختلفة، مثل إسقاط سميكة والأنبوبة الشعرية الطرد المركزي (مكافحة الإرهاب)، ولكن فصل الطفيليات من الدم بعمود شاردة-مبادل (دي السليلوز) متبوعاً بالطرد المركزي والمراقبة المجهرية بيليه، وهو الأسلوب الأكثر حساسية (ويمكن الكشف عن الطفيليات حوالي 50 مليلتر من الدم)1،7. ونتيجة لذلك، هو تنقية مثقبيات بهذا الأسلوب شاردة-مبادلات (السليلوز دي) الأفضل، وحتى هذا التاريخ، أسلوب المرجع لتصور وعزل الطفيليات من الدم لتشخيص القبعة. في الظروف الميدانية، عمود صغير من السليولوز دي قد استخدمت بنجاح وسهلت العديد من التحسينات الملاحظة تقنيين7،8.
يعتمد الأسلوب الفصل المثقبيات من الدم، المبينة أدناه، في مقابل سطح الطفيلي، الذي أقل سلبية من الثدييات خلايا الدم9. من المثير للاهتمام، هذا الأسلوب قد وضعت قبل 50 عاماً، في عام 1968 بالدكتورة شيلا لنهام، ويظل معيار الذهب للكشف وإعداد مثقبيات مجرى الدم. فسريع واستنساخه مثقبيات ساليفاريان من مجموعة واسعة من الثدييات، وتسمح بتشخيص داء المثقبيات الحيوانية والبشرية على حد سواء10.
للحصول على الطفيليات الحية، وتنقية، تتم إضافة الدم المصاب على عمود مبادل شاردة. الظروف اللوني (أساسا درجة الحموضة، القوة الأيونية للمخازن المؤقتة/وسائل الإعلام) لها لكي تلائم كل الأنواع المثقبيات، وبصورة أعم، كل مزيج من الثدييات خلايا الدم ومثقبيات10. يتم ضبط العازلة شطف تحديداً على درجة الحموضة 8 لمعظم الأفارقة مثقبيات10. هذا الأسلوب يفضل تركيز الطفيليات في الدم للمرضى، ونظرا لأن باراسيتيمياس يمكن أن تكون منخفضة للغاية للكشف عنها بواسطة المراقبة المجهرية وحدها، وكما أنها تمكن الفحوص المختبرية. العمل مع مثقبيات طازجة المعزولة وفي الدم من الحيوانات المصابة باستخدام هذا الأسلوب، أكثر صلة بالموضوع للتحقيقات المختلفة من الدراسات مع الطفيليات التي قد تم مثقف في ظروف أكسينيك في المختبر لأجل غير مسمى.
علاقات الطفيلي المضيف يتم دراسة أفضل مع طفيلي إصابة المضيف الطبيعي، ولذلك، ت. موسكولي، طفيلي مورين طبيعية، وهو ممثل مثقبيات خارج الخلية، مزايا عديدة تنطوي الإصابة مورين في الحيوانات المختبرية الصغيرة ولا تتطلب واقية شروط السلامة المستوى (BSL). موسكولي ت. لا تقتل الفئران الأشخاص، خلافا لكثير من الأنواع مثقبيه الأخرى، بما فيها مسببات الأمراض البشرية. لا يتم القضاء موسكولي ت. في الفئران المحرومين من خلية تي ويمكن زيادة باراسيتيمياس في الفئران المصابة بتعديل كمية الغذاء والمغذيات11. ينظم هذا الطفيلي الاستجابة المناعية في التهابات المشارك مع مسببات الأمراض الأخرى12. هو التعبير عن مستقبلات Fc غشاء موسكولي ت من الفئران المصابة معرض الاختلافات من مثقف ت. موسكولي، على سبيل المثال، فقدت في الثقافات موسكولي ت. أكسينيك، مقارنة بالطفيليات تنقيته من الفئران المصابة13 , 14-العوامل التي تفرز اكسكريتيد (كلية العلوم التربوية) هي أيضا نوعيا وكمياً أقل المعرب عنه في الثقافات المثقبيات أكسينيك وتختلف بين السلالات المعزولة في15من المناطق الموبوءة. كلية العلوم التربوية هي المستضدات الأولى عرض لاستضافة الجهاز المناعي وذلك تلعب دوراً هاما في المضيف الأولى الاستجابة المناعية16.
ويسهل هذا البروتوكول في الحيوانات المصابة تجريبيا للفحوص المختبرية، التجريب على عدد أكبر من الطفيليات، والتقليل من عدد الفئران المطلوبة لا سيما عند استخدام الحيوانات إيمونوسوبريسيد. لا يزال يتم تنقيته glycoproteins السطحي البديل (فسجس) التي يتم استخدامها في "اختبار تراص بطاقة" "داء المثقبيات" (كات) في الفحص الشامل من المثقبيات التي تم نشرها في الفئران. هما الاختبارات التشخيصية السريعة (شرائط ملفوفة على حدة) التي أصبحت الآن متاحة للاستخدام في الميدان، تزال تستخدم مصدر معدية نموذج أصلي فسجس ولا في المختبر مثقف مثقبيات1،4، 5. وقد تيسر النهوض بالدراسة من المثقبيات علم المناعة وعلم الأحياء منذ هذه الطفيليات السليلوز تنقية دي يمكن بسهولة الحصول على كميات كبيرة من المضيفين المصابة طبيعيا أو تجريبيا، وفي القوارض خاصة،.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
التحقيقات مطابقة للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (المعاهد الوطنية للصحة المنشور رقم 85±23، تنقيح عام 1996). بروتوكولات وافق لجنتنا الأخلاقيات المحلية.
1-الحيوانات
- تبقى الإناث الفئران السويسرية (من-1) الذين تتراوح أعمارهم بين ثمانية إلى عشرة أسابيع من العمر، 20-25 غ، في حيوان الإسكان مرفق خمسة عشر يوما قبل كل تجربة. بيت لهم في خانات مهواة التي يحتفظ بها في المحمية، درجة الحرارة (22 درجة مئوية) والرطوبة (50%) التحكم في الغرفة، مع 12 ساعة تشغيل/إيقاف تشغيل دائرة الضوء.
- تعطي الحيوانات حرية الوصول إلى الغذاء والماء. التقليل من الألم والمعاناة والشدة وتوفر الإثراء للبيئة.
- للإسكان، واستخدام الجدران واضحة أقفاص، الإثراء بالعصي الخشبية والورق المقوى الإنفاق. رسم حيوان برفق في نفق بنقلها من القفص إلى كف اليد.
- القيام بالمراقبة اليومية لتقييم علامات السجود، والعزلة الاجتماعية، وإصابة الجسم، تكدرت الشعر، أو الافتقار إلى الاستمالة.
- تزن كل الحيوانات مرة واحدة في الأسبوع. إجراء عمليات تفتيش منتظمة من قبل طبيب بيطري.
- للطفيليات الطبيعية، جمع الدم في ذروة تطفلن والطفيليات التي تسبب وفاة الحيوان، وجمع الدم في اليوم قبل الوفاة المفترضة.
ملاحظة: يتم تنفيذ جميع التجارب مع العوامل المعدية في غرف مخصصة، وفقا للمبادئ التوجيهية جامعة وافق.
2-المخازن المؤقتة، وسائل الإعلام الأعمال التحضيرية
- تزن من كل مادة وإضافة الماء المقطر للمخازن المؤقتة التالية:
- إعداد تركيز المحلول الملحي مخزنة الفوسفات (2x):
غ2هبو4 (لا مائي) (MW 141.96 ز) ز 10.14
نة2بو4∙2H2س (MW 156.01 ز) ز 0.62
كلوريد الصوديوم (MW 58.44 ز) ز 2.55
المقطر ح2س إلى 1 لتر - إعداد الفوسفات مخزنة المالحة-الجلوكوز:
غ2هبو4 (لا مائي) (MW 141.96 ز) ز 5.39
نة2بو4∙2H2س (MW 156.01 ز) ز 0.31
كلوريد الصوديوم (MW 58.44 ز) ز 1.70
الجلوكوز (ز 180 ميغاواط) 10 جرام
المقطر ح2س إلى 1 لتر - تحضير 1 م خ2ص4.
- إعداد المخزن المؤقت شطف: تكملة مخزنة الفوسفات المالحة-الجلوكوز مع
البنسلين (100 U/mL)، ستربتوميسين (100 ميكروغرام/مل)، والفينول الأحمر (5 ميكروغرام/مل).
- إعداد تركيز المحلول الملحي مخزنة الفوسفات (2x):
3-إعداد دي-السليلوز
- خطة حوالي 5 ساعات لإعداد دي-السليلوز.
- أغسل 100 غ دي-السليلوز مع الماء المقطر في قارورة مع رقبة ضيقة والسماح لتسوية، ثم تجاهل الجسيمات الدقيقة. كرر يغسل حتى المادة طافية الواضح.
- إضافة ل 3 من مركزة 2 × "فوسفاتيبوفيريد المالحة" وآثاره.
- ضبط الأس الهيدروجيني إلى 8.0 مع 1 م خ2ص4 ، وتجاهل المادة طافية.
- تغسل مرتين بالماء المقطر ويترك لتسوية.
- أغسل والسماح لتسوية مرتين مع 3 لتر فوسفاتيبوفيريد المالحة-الجلوكوز وتجاهل في supernatants.
- قياس حجم السليلوز وإضافة وحدة تخزين متساوية من المحلول الملحي-الجلوكوز فوسفاتيبوفيريد وتوزيعها في زجاجات بلاستيكية وتخزينها في-20 درجة مئوية.
4-الطفيليات
- جمع السلالات المثقبيات في المناطق الموبوءة لداء المثقبيات البشري والحيواني. الاحتفاظ بالطفيليات تجميدها في نيتروجين سائل.
ملاحظة: موسكولي مثقبيه غير ممرضة للبشر وهو المثقبيات خارج الخلية المستخدمة لاستبدال بأمان مثقبيات المسببة للأمراض في مختلف التجارب المختبرية. - في حالة التحاليل المختبرية التي تتطلب مسببات الأمراض البشرية، التعامل مع تجارب مع العناية في واقية مناسبة مخصصة سلامة المستوى (BSL) شروط وإجراءات وقائية؛ BSL2 ت. الغامبية و BSL3 ل rhodesiense ت.. في الظروف الميدانية، يتم تأسيس معيار الممارسة الميكروبيولوجية: تأمين أخذ العينات، بيبيتينج الميكانيكية، متكررة إزالة تلوث الأسطح، وتعقيم النفايات.
5-الماوس العدوى
- سرعة ذوبان الجليد الطفيليات في حمام مائي عند 37 درجة مئوية.
- نلاحظ قطره دم المصابين المذابة مجهر. تقييم جدوى الطفيلي بقياس النسبة المئوية لأشكال متحركة17.
- حقن الطفيليات إينترابيريتونيلي في الفئران (0.5 مل في الماوس). كل يوم، ما بعد الإصابة، جمع 20 ميليلتر من الدم ذيل بثقب الإبرة، ومراقبة تحت مجهر. تقييم تطفلن وفقا هربرت ولومسدين18 عد الطفيليات في العديد من المجالات المجهر، أو باستخدام هايموسيتوميتير.
- عندما يصل تطفلن عتبة المحددة لكل سلالة، جمع الدم (1 مل/الماوس) في المخزن المؤقت شطف (5 مل/الماوس) التي تحتوي على الهيبارين (10 U/mL).
ملاحظة: عن العمل الأصلي ورواية لنهام وغودفري الأمثل قوة الأيونية للفوسفات مخزنة المالحة الجلوكوز للعديد من الأنواع المضيفة/الطفيلي من حل أسهم pH 8.0.
6-الفصل الطفيلي
ملاحظة: يجب القيام بتجارب كل من هذه النقطة فصاعدا في غطاء زراعة الأنسجة ارتداء القفازات. درجة حرارة الغرفة والرطوبة في المختبرات المستخدمة كانت 22 درجة مئوية و 45 في المائة على التوالي. في الظروف الميدانية، تم فصل الطفيلي يؤديها بنجاح في 34 درجة مئوية.
- ضع حقنه 10 مل في دعم عمودي وإضافة تعميما سابقا قطع قطعة من ورق الترشيح أو الصوف الزجاجي أو الأسفنج السليلوز.
- صب السليلوز دي في المحاقن حتى يتم التوصل إلى مستوى 8 مل، ثم يغسل مع 25 مل من المخزن المؤقت شطف.
- إضافة 2 مل دم المخفف بعناية في أعلى العمود ثم قم بإضافة شطف المتوسطة. إضافة شطف المخزن المؤقت وفقا لعبور المثقبيات بانتظام.
- جمع قطرات النفايات السائلة من الأعمدة في أنبوب الطرد مركزي والتحقق بشكل منتظم لوجود الطفيليات مع مجهر.
- عندما لم يعد يتم الكشف عن الطفيليات في النفايات السائلة العمود، الطرد المركزي الأنبوب (1,800 س ز، 10 دقائق، في 4 درجات مئوية في المختبر وفي درجة الحرارة المحيطة في ظروف ميدانية).
- إزالة المادة طافية وتعليق الطفيليات في 1 مل المتوسطة ذات الصلة المطلوبة للخطوة التالية في التحقيق.
- عد الطفيليات مع هيموسيتوميتير وتمييع لهم في المتوسط المناسبة إذا لزم الأمر.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
وقد استخدمت مثقبيات المنقاة في الاختبارات الصيدلانية. يتم نقل الطفيليات في آبار الثقافة التي تتضمن تخفيف المسلسل محددة المخدرات، أما وحدها أو مختلطة19. الملاحظات المجهرية، تقييم حركية هو علامة على استمرارية، يمكن أن يؤديها عندما يجري اختبار دوجس قليلة فقط، بينما الاماربلوي خلية تحليل الجدوى هو وسيلة ممتازة لفحوصات حركية كبيرة خلال فحص20المخدرات. يتم عرض تأثير pentamidine، مرجع المخدرات المستخدمة في العلاج بقبعة، في الشكل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
مثقبيات المنقي تمثل وسيلة قوية لدراسة علم المناعة، والكيمياء الحيوية، والخلوية والبيولوجيا الجزيئية. وحصلت مساحات كبيرة من البيانات والنتائج من المثقبيات، ثم مما ساعد على الحصول على المعلومات من خلايا حقيقية النواة الأخرى30. مثقبيات هي أيضا موضوع بحوث هامة ومثيرة للاهتمام لأنه قد وضعت العديد من الآليات التي تسمح لهم بالبقاء على قيد الحياة وتنمو في بيئات مختلفة جداً: ناقل ذبابة التسي تسي و الثدييات المضيفة23، 31. وقد تم الإبلاغ عن تقنيات م...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
ونشكر جميع أعضاء 177 قاسم أغا إينتيرتريب سيراد IRD جامعة بوردو دي. هذا البحث كان يدعمها التمويل الداخلي من جامعة بوردو والدعم من وكالة الاستخبارات الوطنية، لابيكس ANR بارافراب-11-لابكس-0024، والرابطة من أجل le التنمية de la البحوث في باراسيتولوجي et تروبيكال الطب والخدمات التعاون والعمل الثقافي de لعمباسادي à فرنسا دي بانغي (أفريقيا الوسطى).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 10 مل ماصات | فالكون | 357,551 | |
| 2 مل ماصات | Falcon | 352،507 | |
| أنبوب الطرد المركزي 50 مل | Falcon | 352،070 | |
| جهاز طرد مركزي | Sigma Aldrich | 4K15 | |
| DEAE السليلوز | سانتا كروز | s / c- 211213 | 100 |
| G ورق ترشيح ؛ | Whatman | 1,001,125 | |
| قارورة ذات ياقة ضيقة | القاع Duran | 21 711 76 | 6000 mL |
| Glucose | VWR | 101174Y | 500 G |
| Heparin | Sigma Aldrich | H3149-50KU | 5 000 U |
| KH2< / sub>PO4< / sub> | VWR | 120 26936.260 | 500 G |
| مجهر | أوليمبوس | CH-20 | |
| أغطية مجهر | شرائح CB00100RA020MNT0 | ||
| المجهر العلميThermofisher العلمية | AGAA000001 | ||
| Na2HPO4 | VWR | 100 28026 ؛ 260 | 500 جم |
| كلوريد الصوديوم | VWR | 27800.291 | 1 كجم |
| NaH2PO4 | VWR | 110 33616; 262 | 500 جرام |
| زجاجات وسائط بلاستيكية Nalgene مقاس 125 مل | Thermofisher Scientific | 342024-0125 | |
| زجاجات الوسائط البلاستيكية Nalgene حجم 500 مل | Thermofisher Scientific | 342024-0500 | |
| Pasteur Pipette | VWR | BRND125400 | |
| Penicillin 10,000 UI / Streptomycin 10,000 & micro ؛ ز | EUROBIO | CABPES01 OU | 100 مل |
| فينول أحمر | سيجما ألدريتش | P0290 | 100 مل |
| حقنة ؛ | Dutscher | SS + 10S21381 | |
| غطاء لثقافة الأنسجة | Thermoelectro Corporation | MSC-12 | |
| Trypanosoma brucei brucei< / em> | معهد الطب الاستوائي (أنتويرب ، بلجيكا). | ANTAT 1.1 | |
| Trypanosoma brucei gambiense | معهد الطب الاستوائي (أنتويرب، بلجيكا). | ITMAP 1893 | |
| المثقبية العضلية < / em> | كلية لندن للصحة والطب الاستوائي (المملكة المتحدة) | بارتينيكو الثاني |
المراجع
- Büscher, P., Cecchi, G., Jamonneau, V., Priotto, G. Human African trypanosomiasis. Lancet. 390 (10110), 2397-2409 (2017).
- Lejon, V., Bentivoglio, M., Franco, J. R. Human African trypanosomiasis. Handbook of Clinical Neurology. 114, 169-181 (2013).
- Giordani, F., Morrison, L. J., Rowan, T. G., De Koning, H. P., Barrett, M. P. The animal trypanosomiases and their chemotherapy: a review. Parasitology. 143 (14), 1862-1889 (2016).
- Aksoy, S., Buscher, P., Lehane, M., Solano, P., Van Den Abbeele, J. Human African trypanosomiasis control: Achievements and challenges. PLoS Neglected Tropical Diseases. 11 (4), e0005454(2017).
- Büscher, P., Deborggraeve, S. How can molecular diagnostics contribute to the elimination of human African trypanosomiasis? Expert Review of Molecular Diagnostics. 15 (5), 607-615 (2015).
- Truc, P., et al. Atypical human infections by animal trypanosomes. PLoS Neglected Tropical Diseases. 7 (9), e2256(2013).
- Lumsden, W. H., Kimber, C. D., Evans, D. A., Doig, S. J. Trypanosoma brucei: miniature anion-exchange centrifugation technique for detection of low parasitaemias: adaptation for field use. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 73 (3), 312-317 (1979).
- Büscher, P., et al. Improved Models of Mini Anion Exchange Centrifugation Technique (mAECT) and Modified Single Centrifugation (MSC) for sleeping sickness diagnosis and staging. PLoS Neglected Tropical Diseases. 3 (11), e471(2009).
- Lanham, S. M. Separation of trypanosomes from the blood of infected rats and mice by anion-exchangers. Nature. 218 (5148), 1273-1274 (1968).
- Lanham, S. M., Godfrey, D. G. Isolation of salivarian trypanosomes from man and other mammals using DEAE-cellulose. Experimental Parasitology. 28 (3), 521-534 (1970).
- Humphrey, P. A., Ashraf, M., Lee, C. M. Growth of trypanosomes in vivo, host body weight gains, and food consumption in zinc-deficient mice. Journal of the National Medical Association. 89 (1), 48-56 (1997).
- Lowry, J. E., Leonhardt, J. A., Yao, C., Belden, E. L., Andrews, G. P. Infection of C57BL/6 mice by Trypanosoma musculi modulates host immune responses during Brucella abortus cocolonization. Journal of Wildlife Diseases. 50 (1), 11-20 (2014).
- Vincendeau, P., Daëron, M., Daulouede, S. Identification of antibody classes and Fc receptors responsible for phagocytosis of Trypanosoma musculi by mouse macrophages. Infection and Immunity. 53 (3), 600-605 (1986).
- Vincendeau, P., Daëron, M. Trypanosoma musculi co-express several receptors binding rodent IgM, IgE, and IgG subclasses. Journal of Immunology. 142 (5), 1702-1709 (1989).
- Holzmuller, P., et al. Virulence and pathogenicity patterns of Trypanosoma bruceigambiense field isolates in experimentally infected mouse: differences in host immune response modulation by secretome and proteomics. Microbes and Infections. 10 (1), 79-86 (2008).
- Holzmuller, P., et al. How do parasites and their excreted-secreted factors modulate the inducible metabolism of L-arginine in macrophages? Frontiers in Immunology. 9, 778(2018).
- Abrahamson, I. A., Da Silva, W. D. Antibody-dependent cytotoxicity against Trypanosoma cruzi. Parasitology. 75 (3), 317-323 (1977).
- Herbert, W. J., Lumsden, W. H. Trypanosoma brucei: a rapid "matching" method for estimating the host's parasitemia. Experimental Parasitology. 40 (3), 427-431 (1976).
- Dauchy, F. A., et al. Trypanosoma brucei CYP51: Essentiality and Targeting Therapy in an Experimental Model. PLoS Neglected Tropical Diseases. 10 (11), e0005125(2016).
- Raz, B., Iten, M., Grether-Bühler, Y., Kaminsky, R., Brun, R. The Alamar Blue assay to determine drug sensitivity of African trypanosomes (T. b. rhodesiense and T. b. gambiense) in vitro. Acta Tropica. 68 (2), 139-147 (1997).
- Albright, J. W., Albright, J. F. In vitro growth of Trypanosoma musculi in cell-free medium conditioned by rodent macrophages and mercaptoethanol. International Journal for Parasitology. 10 (2), 137-142 (1980).
- Gobert, A. P., et al. L-Arginine availability modulates local nitric oxide production and parasite killing in experimental trypanosomiasis. Infection and Immunity. 68 (8), 4653-4657 (2000).
- De Muylder, G., et al. A Trypanosoma brucei kinesin heavy chain promotes parasite growth by triggering host arginase activity. PLoS Pathogens. 9 (10), e1003731(2013).
- Nzoumbou-Boko, R., et al. Trypanosoma musculi Infection in Mice Critically Relies on Mannose Receptor-Mediated Arginase Induction by a TbKHC1 Kinesin H Chain Homolog. Journal of Immunology. 199 (5), 1762-1771 (2017).
- Bonhivers, M., Nowacki, S., Landrein, N., Robinson, D. R. Biogenesis of the trypanosome endo-exocytotic organelle is cytoskeleton mediated. PLoS Biology. 6 (5), e105(2008).
- Albisetti, A., et al. Interaction between the flagellar pocket collar and the hook complex via a novel microtubule-binding protein in Trypanosoma brucei. PLoS Pathogens. 13 (11), e1006710(2017).
- Cross, G. A. M., Klein, R. A., Linstead, D. J. Utilization of amino acids by Trypanosoma brucei in culture: L-threonine as a precursor for acetate. Parasitology. 71 (2), 311-326 (1975).
- Bringaud, F., Rivière, L., Coustou, V. Energy metabolism of trypanosomatids: adaptation to available carbon sources. Molecular and Biochemical Parasitology. 149 (1), 1-9 (2006).
- Mazet, M., et al. Revisiting the central metabolism of the bloodstream forms of Trypanosoma brucei: production of acetate in the mitochondrion is essential for the parasite viability. PLoS Neglected Tropical Diseases. 7 (12), e2587(2013).
- Coutton, C., et al. Mutations in CFAP43 and CFAP44 cause male infertility and flagellum defects in Trypanosoma and human. Nature Communications. 9 (1), 686(2018).
- Cnops, J., Magez, S., De Trez, C. Escape mechanisms of African trypanosomes: Why trypanosomosis is keeping us awake. Parasitology. 142 (3), 417-427 (2015).
- Barrett, M. P., et al. Microfluidics-Based Approaches to the Isolation of African Trypanosomes. Pathogens. 6 (4), (2017).
- Taylor, A. E., Lanham, S. M., Williams, J. E. Influence of methods of preparation on the infectivity, agglutination, activity, and ultrastructure of bloodstream trypanosomes. Experimental Parasitology. 35 (2), 196-208 (1974).
- Gutteridge, W. E., Cover, B., Gaborak, M. Isolation of blood and intracellular forms of Trypanosoma cruzi from rats and other rodents and preliminary studies of their metabolism. Parasitology. 76 (2), 159-176 (1978).
- Cruz-Saavedra, L., et al. Purification of Trypanosoma cruzi metacyclic trypomastigotes by ion exchange chromatography in sepharose-DEAE, a novel methodology for host-pathogen interaction studies. Journal of Microbiological Methods. 142, 27-32 (2017).
- Lemesre, J. L., et al. Long-lasting protection against canine visceral leishmaniasis using the LiESAp-MDP vaccine in endemic areas of France: double-blind randomised efficacy field trial. Vaccine. 25 (21), 4223-4234 (2007).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
