وصول المواد الغذائية، والايضات الحجمية والأدوية بالتداول يسيطر عليه حاجز الدم القناة الهضمية في (جب). يصف لنا طريقة مباشرة لقياس جب النفاذية في فيفو، الذي، على النقيض من الأساليب غير المباشرة المستخدمة عادة، هو تقريبا لا تتأثر وظائف الكبد والكلى.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
وصول المواد الغذائية، والايضات الحجمية والأدوية بالتداول يسيطر عليه حاجز الدم القناة الهضمية في (جب). يصف لنا طريقة مباشرة لقياس جب النفاذية في فيفو، الذي، على النقيض من الأساليب غير المباشرة المستخدمة عادة، هو تقريبا لا تتأثر وظائف الكبد والكلى.
حاجز الدم القناة الهضمية في (جب) يتحكم في مرور المواد الغذائية ونواتج الأيض البكتيرية والعقاقير من التجويف المعوي إلى مجرى الدم. سلامة جب تشعر بالانزعاج في أمراض الجهاز الهضمي والقلب والأوعية الدموية والايض، مما قد يتسبب في وصول أسهل للمركبات النشيطة بيولوجيا، مثل الأمعاء البكتيرية والايضات، إلى مجرى الدم. وهكذا، قد تكون نفاذية جب علامة أمراض المعوية واكسترينتيستينال على حد سواء. وعلاوة على ذلك، تزايد تغلغل والايضات البكتيرية قد تؤثر على أداء الكائن الحي كامل.
هي أساليب شائعة لدراسة نفاذية جب المنجز السابقين فيفو. دقة تلك الأساليب محدودة، نظراً لأن أداء جب يعتمد على تدفق الدم المعوية. من ناحية أخرى، قد تكون متحيزة الأساليب استخداماً في فيفو بالكبد والكلى أداء، حيث تقوم هذه الأساليب على تقييم بول أو/وتركيزات الدم المحيطي من علامات خارجية. وهنا، نقدم مباشرة قياس النفاذية جب في الفئران باستخدام أسلوب في فيفو يستند المدخل الدم أخذ العينات، والذي يحافظ على تدفق الدم المعوية وهو تقريبا لا تتأثر وظيفة الكبد والكلى.
البولي يوريثان بالقسطرة تندس في الوريد البابي والاوردة أدنى الوريد الأجوف فقط أعلاه الكبد التقاء. يتم أخذ عينات الدم عند خط الأساس، وبعد إقامة علامة المحدد في جزء المرجوة من الجهاز الهضمي. هنا، فإننا نقدم العديد من التطبيقات لأسلوب بما في ذلك (1) تقييم نفوذية القولون للجمعية التونسية للأمهات، والأمعاء البكتيرية المستقلب، (2) تقييم لتطهير الكبد من الجمعية التونسية للأمهات، و (3) تقييم لمسار الدم الدم-الكبد-الطرفية مدخل القناة الهضمية للقناة الهضمية الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة المشتقة من البكتيريا. وعلاوة على ذلك، يمكن استخدام البروتوكول أيضا لتعقب امتصاص الأمعاء والكبد للمخدرات أو لقياسات ضغط الدم المدخل.
حاجز الدم القناة الهضمية (جب)، يعرف أيضا باسم الحاجز المعوي، هو نظام معقد متعدد الطبقات الذي يفصل التجويف القناة الهضمية من مجرى الدم بغية الحد من مرور المركبات الضارة بينما يسمح لامتصاص العناصر الغذائية1. وهو يتألف من ثلاث طبقات رئيسية: طبقة المخاط وظهاره والصفيحة بروبريا.
عوامل عديدة قد تؤثر على سلامتها والدالة جب2. فقد ثبت أن جب تشعر بالانزعاج في أمراض المعدة والأمعاء واكستراينتيستينال على السواء، بما في ذلك أمراض القلب والأوعية الدموية والايض3، مما قد يؤدي إلى ممر زيادة من نواتج الأيض البكتيرية الأمعاء إلى مجرى الدم4. قد تؤثر زيادة تغلغل من الأمعاء البكتيرية والايضات أداء الكائن الحي كامل. على سبيل المثال، تظهر الدراسات الأخيرة أثر كبير من نواتج الأيض البكتيرية، مثل indoles، H2S، والأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (الهيئة)، وتريميثيلاميني ن-أكسيد، على نظام الدورة الدموية وظائف5،،من67 ،،من89. وأخيراً، اقترح أن زيادة نفاذية جب تكون بمثابة علامة على أمراض القلب والأوعية الدموية، والتمثيل الغذائي التي ترتبط بالتغيرات المورفولوجية والوظيفية في الأمعاء10. ولذلك، قد يكون تتبع مسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية من نواتج الأيض البكتيرية من أهمية بالنسبة للعلوم الأساسية والسريرية على حد سواء.
الأساليب التجريبية المستخدمة عادة لتقييم نفاذية جب المنجز في المختبر باستخدام شرائح المعوية مستأصل، وأجزاء من الغشاء المخاطي، أو الأغشية الاصطناعية11،12. هو المساس بحقيقة أن الأداء السليم لجب يتطلب تدفق الدم المعوي المستمر بسبب دقة تلك الأساليب. من ناحية أخرى، تستند الأساليب المتاحة في فيفو تقييم البول أو الدم المحيطي تركيزات من علامات خارجية13. ومع ذلك، يتأثر تركيز البول والدم الطرفية الخارجية مركبات وظائف الكلي، أي معدل الترشيح الكبيبي والافراز الأنبوبي، فضلا عن التمثيل الغذائي في الكبد، أي أولاً تمرير الأيض. كل معلمات قد تختلف اختلافاً كبيرا بين مواضيع دراسة مستقلة عن الدالة جب.
وتصف هذه الورقة مباشرة قياس النفاذية جب في الفئران باستخدام عينات الدم المدخل. هذا الأسلوب في فيفو يحافظ على تدفق الدم المعوي، ويكاد لا يتأثر بوظيفة الكبد والكلى. وصف النهج الذي لا يستخدم عادة، ربما بسبب بعض الصعوبات المنهجية. يصف لنا بالتفصيل قسطرة الوريد البابي وأدنى الوريد الأجوف فقط فوق التقاء الوريد الكبدي. أخذ عينات من الدم من الوريد البابي وأدنى الوريد الأجوف يسمح تقييم تطهير جب النفاذية والكبد وكذلك تتبع مسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية للجزيئات ذات الاهتمام، مثل الأمعاء البكتيرية نواتج الأيض أو الأدوية. ونقدم أيضا العديد من التطبيقات للأسلوب الذي تم اختباره في المختبر. وهذه تشمل تقييم نفوذية القولون للجمعية التونسية للأمهات، المستقلب البكتيرية الأمعاء، والتقييم لتطهير الكبد من الجمعية التونسية للأمهات، وتقييم لمسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية للهيئة.
تقييم نفاذية حاجز الدم القناة الهضمية، ينبغي اتباع الخطوات التالية البروتوكول، بالترتيب: 1 (إدراج السطر للإدارات إينترينتيستينال)، 3 (قسطرة الوريد البابي)، 4 (أخذ عينات الدم الوريد البابي ), 6 (إقامة علامة نفاذية الأمعاء)، 4.
تقييم تطهير الكبد ومسار دم دم-كبد-منهجية مدخل القناة الهضمية، ينبغي اتباع الخطوات التالية البروتوكول، بالترتيب: 1 (إدراج السطر للإدارات إينتراينتيستينال)، 2 (الوريد الأجوف السفلي قسطرة)، 3 (قسطرة الوريد البابي)، 4 (أخذ عينات الدم من الوريد البابي)، 5 (أخذ عينات الدم من أدنى الوريد الأجوف)، 6 (إقامة علامة نفاذية الأمعاء)، 4، 5، 7 ( حساب إزالة الكبد).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
التجارب التي أجريت على الفئران الذكور كيوتو ويستار وفقا "الاتحاد الأوروبي" التوجيه 2010/63 المتعلق بحماية الحيوانات المستخدمة لأغراض علمية ووافقت عليها أنا "اللجنة المحلية لأخلاقيات علم الأحياء" في وارسو.
1-إدراج بند للإدارة إينتراينتيستينال
ملاحظة: ونقترح هنا الإدارة إينتراكولونيك علامة باستخدام قسطرة. أنه يجوز تعديله من قبل الإدارة عن طريق الفم أو تزقيمية مدتها على مستويات مختلفة من الجهاز الهضمي مثل المعدة أو العفج. تذكر أن استخدام الملابس الجراحية القابل للتصرف، بما في ذلك ثوب الجراحية وغطاء محرك السيارة والقفازات، وضمان اتباع احتياطات السلامة المتصلة بالأدوات الحادة المستخدمة في الجراحة (الإبر، إلخ) أثناء إجراءات 1-6.
2-أدنى الوريد الأجوف قسطرة
3. قسطرة الوريد البابي

الشكل 1 : مدخل القسطرة. القسطرة المدخل يتكون من إبرة OD: 0.9 مم بطول حوالي 25.0 مم [A]، OD قسطرة البولي يوريثان مرنة: 0.025 "، طول نحو 100.0 ملم [ب]، تلميح البولي إثيلين مرنة للقسطرة OD: 0.040"، نحو 15.0 مم طويلة [ج]، سد [د]. ، وحرف مزدوج 3-0 بطول مم 100.0 [ه]. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
4-الوريد البابي الدم أخذ العينات
| بروتوكول قصيرة | بروتوكول طويل |
| t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) | t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) |
| تي1 – 5 دقائق بعد الإدارة إينتراكولونيك | تي1 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك |
| تي2 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك | t2 -60 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك |
الجدول 1: بوابة الدم بروتوكولات أخذ العينات لتقييم نفاذية الأمعاء.
ملاحظة: الفترة الزمنية بين أخذ عينات الدم على التوالي يعتمد أساسا على التوافر الأحيائي للمواد التي تم اختبارها وموقع الإدارة (القولون، المعدة، إلخ).
5. أخذ عينات من الدم الأجوف فينا أدنى من
| الوريد البابي | أدنى الوريد الأجوف |
| t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) | t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) |
| تي1 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك | تي1 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك |
الجدول 2: بروتوكول الدم أخذ العينات للقياس تطهير الكبد، وتتبع مسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية.
6-إدارة علامة نفاذية الأمعاء
7-حساب لتطهير الكبد
8-تقييم عينات الدم ن تركيز مادة الاختبار
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وقد قمنا بقياس جب النفاذية والكبد تطهير للجمعية التونسية للأمهات في الفئران بنجاح. لقد أظهرنا أن الفئران ارتفاع ضغط الدم لديها نقطتين زيادة نفاذية للجمعية التونسية للأمهات بالمقارنة مع الفئران نورموتينسيفي (الشكل 2)4. وفي دراسة أخرى نجد أن تناول الملح عالية لا تؤثر على جب النفاذية والكبد تطهير الجمعية التونسية للأمهات (الشكل 3)14.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وصف مباشرة، في فيفو، تحتفظ طريقة قياس النفاذية جب شروط كلوسيتوفيسيولوجيكال في نظام الجهاز الهضمي (يحافظ على تدفق الدم المعوية)، وتقريبا لا يتأثر بوظيفة الكبد والكلى.
أن الخطوة الحاسمة لهذا الأسلوب هو إدخال القسطرة المدخل. وهذا يجب أن يتم بلطف وحزم في الوقت نفسه. نزيف خفيف، قصيرة قد تحدث من ثقب يؤديها بشكل صحيح من الوريد البابي؛ ومع ذلك، فإنه يتوقف عندما يتم إدخال الإبرة في السفينة. النزيف المستمر يشير إلى أن الوريد البابي هو مثقب. لتسهيل إدخال قسطرة، ينبغي أن تتعرض كذلك الوريد البابي....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
العمل معتمد من قبل وزارة العلوم والتعليم العالي جمهورية بولندا، منح الماس لا: DI2017 009247.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| إبرة OD: 9 مم | بيكتون ديكنسون & nbsp ؛ س. | 301300 | |
| معرف قسطرة البولي إيثيلين: 0.025", OD: 0.040" | شركة السلع العلمية | #BB520-40 | |
| معرف قسطرة البولي إيثيلين: 0.012", OD: 0.025" | شركة السلع العلمية | #BB520-25 | |
| أنابيب C-فليكس ، أبيض غير شفاف 1/50 بوصة معرف × 1/12 بوصة OD & nbsp ؛ | شركة كول بارمر للأدوات | 06424-59 | |
| قسطرة فولي للأطفال (مقاس 10F أو 8F) | Sigmed | 0000 80305 | |
| الأربطة الجراحية 3/0 | Yavo Sp. Z o.o. | P48JE | |
| خيوط جراحية قابلة للامتصاص - بولي جلاكتين 910 4/0 | KRUUSE Polska Sp. Zo.o. | 152336 | |
| غراء الأنسجة - Loctite 454Cyanoacrylate لاصق | Loctite | 1370127 | |
| بوفيدون اليود | EGIS Pharmaceuticals PLC | 4449 11 | |
| الهيبارين - الهيبارينيوم WZF | WZF Polfa S.A. | 02BK0417 | تمييع 10 مرات بالمحلول الملحي الفسيولوجي |
| الجلسرين 86٪ | مختبر Farmaceutyczne Avena | 5.90999E + 12 | يعمل كمواد تشحيم في قسطرة القولون |
| Xylocaine 2٪ | AstraZenca ؛ | 9941342 | |
| Urethane | Sigma-Aldrich (Merck) | U2500-500G | |
| محلول Trimethylamine 45٪ | Sigma-Aldrich (Merck) ؛ | 92262-1 لتر | |
| محاقن 2 مل | B.Braun Melsungen AG | 4606027V | |
| محلول ملحي 250 مل | Fraesenius Kabi Polska Sp. Z o.o. | 15LL707WL | |
| مقص جراحي ، مستقيم ، طول 115 مم ، 4 1/2 بوصة نهايات حادة | براون | NS-010-115-PKM | |
| ملقط شريان من نوع Micro-Adson عازمة ، طول 140 مم 5 1/2 " | ملقط تشريحي براون | KN-008-140-ZMK | |
| ، طول 95 مم ، 3 3/4 بوصة حاد 0.7x0.55 | براون | PO-001-007-ZMK | |
| نوع مقص مايكرو Vannas ، ؛ مستقيم ، الطول 85 مم ، 3 3/8 "طول الشفرات 6 مم | براون & nbsp ؛ | NO-010-085-PMK | |
| نوع المشابك منشفة Backhouse ، الطول 130 مم ، 5 1/8 بوصة ؛ | براون | HO-128-130-PMK | |
| ، الطول 150 مم ، 6 "t = 0.4 1/2 | براون | IM-927-150-PZMK | |
| مقص دقيق ، طول 110 مم ، مستقيم ، 4 3/8 بوصة حاد ؛ | من براون | NO-052-110-PMK | |
| ، الطول 95 مم ، 3 3/4 بوصة حاد | براون | PO-022-001-PMK |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.