Transcranial التحفيز التيار المباشر (تدكس) أسلوب علاجية المقترحة لعلاج الأمراض النفسية. نموذج حيوان ضروري لفهم التغيرات البيولوجية محددة أثارت من قبل تدكس. ويصف هذا البروتوكول طراز ماوس تدكس يستخدم قطب كهربائي مزروع مزمن.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
Transcranial التحفيز التيار المباشر (تدكس) أسلوب علاجية المقترحة لعلاج الأمراض النفسية. نموذج حيوان ضروري لفهم التغيرات البيولوجية محددة أثارت من قبل تدكس. ويصف هذا البروتوكول طراز ماوس تدكس يستخدم قطب كهربائي مزروع مزمن.
Transcranial التحفيز التيار المباشر (تدكس) أسلوب غير الغازية نيورومودوليشن اقترحت كعلاج بديلة أو تكميلية للعديد من الأمراض العصبية. الآثار البيولوجية تدكس هي لا يفهم تماما، مما يفسر جزئيا بسبب صعوبة الحصول على أنسجة المخ البشري. ويصف هذا البروتوكول طراز ماوس تدكس يستخدم قطب مزمن مزروع السماح لدراسة الآثار البيولوجية طويلة الأمد من تدكس. في هذا النموذج التجريبي، تدكس يتغير التعبير الجيني القشرية، ويقدم مساهمة بارزة في الفهم الأساس المنطقي للاستخدام العلاجي.
Transcranial التحفيز التيار المباشر (تدكس) هو أسلوب غير الغازية، منخفضة التكلفة، والعلاجي، الذي يركز على تعديل الخلايا العصبية من خلال استخدام التيارات المنخفضة الحدة المستمر1. وهناك حاليا اثنين من الأجهزة (أنودال وكاثودال) تدكس. بينما تمارس التحفيز أنودال ضعيفة جداً لتحريك إمكانات العمل الحالي في حقل الكهربائي، وقد أظهرت الدراسات الكهربية أن ينتج هذا الأسلوب التغييرات في اللدونة متشابك2. على سبيل المثال، تبين الأدلة أن تدكس يستحث الآثار التقوية (الكمونية) الطويلة الأجل مثل ذروة زيادة السعة من3،إمكانات بوستسينابتيك ضادات4 والتحوير لاستثارة القشرية5.
على العكس من ذلك، يدفع التحفيز كاثودال تثبيط، أسفر عن غشاء فرط الاستقطاب6. فرضية لهذه الآلية يستند إلى النتائج الفسيولوجية حيث يتم وصف تدكس تعدل التردد إمكانات العمل والمدة في الجسم العصبية3. جدير بالذكر أن هذا التأثير لا مباشرة استحضار إمكانات العمل، على الرغم من أنه يمكن إزاحة عتبة depolarization وتيسير أو تعرقل إطلاق العصبية7. وقد تجلى هذه الآثار المتناقضة سابقا. على سبيل المثال، أنتجت التحفيز أنودال وكاثودال آثار معارضة في الردود مشروط المسجلة عن طريق النشاط الكهربائي في الأرانب8. ومع ذلك، أظهرت الدراسات أيضا أن دورات التحفيز أنودال المطول قد إنقاص استثارة بينما تزايد التيارات كاثودال قد تؤدي إلى استثارة، عرض الآثار الذاتية المتناقضة3.
تجميع المحفزات أنودال وكاثودال على السواء استخدام أزواج قطب كهربائي. على سبيل المثال، يوضع القطب في التحفيز أنودال، "نشطة" أو "اﻷنود" على منطقة الدماغ يكون التضمين حين مسرى "مرجع" أو "كاثود" يقع على منطقة فيها أثر التيار يفترض أن تكون تافهة9. في تحفيز كاثودال، والتصرف في القطب هو المقلوب. كثافة التحفيز تدكس الفعال يعتمد على كثافة الحالية وأبعاد القطب، الذي يؤثر على الكهرباء الميدانية بطريقة مختلفة10. في دراسات نشرت آخر، متوسط كثافة الحالية بين 0.10 إلى 2.0 mA و 0.1 mA mA للإنسان والفئران، على التوالي6،110.8. على الرغم من أن حجم القطب 35 سم2 يستخدم عادة في البشر، هناك لا الفهم الصحيح فيما يتعلق بإبعاد القطب للقوارض وإجراء تحقيق أكثر دقة هو المطلوب6.
وقد اقترح تدكس في الدراسات السريرية بمحاولة تقديم معاملة بديلة أو تكميلية لعدة اضطرابات عصبية والعصبية11 مثل الصرع1213من اضطراب ثنائي القطب، السكتة الدماغية5 ، الاكتئاب14، مرض الزهايمر15،16 من التصلب المتعدد ومرض باركنسون17الرئيسية. وعلى الرغم من تزايد الاهتمام في تدكس واستخدامها في التجارب السريرية، والخلوية مفصلة والتعديلات مقولة الجزيئية في أنسجة المخ والقصير والآثار طويلة الأمد، فضلا عن النتائج السلوكية، هي حتى الآن إلى أن تكون أكثر شدة التحقيق18، 19-نهج البشري مباشر لدراسة مستفيضة تدكس ليست قابلة للتطبيق، استخدام نموذج الحيوان تدكس قد تقدم أفكاراً قيمة في الأحداث الخلوية والجزيئية الكامنة وراء الآليات العلاجية من تدكس نظراً لإمكانية الوصول إلى أنسجة المخ في الحيوانات.
ويقتصر الأدلة المتوفرة بشأن النماذج تدكس في الفئران. تستخدم معظم النماذج التي تم الإبلاغ عنها تخطيطات ترسيخ مختلفة وأبعاد القطب والمواد. على سبيل المثال، وينكلر et al. (2017) مزروع الكهربائي الرئيسي (Ag/AgCl، قطرها 4 ملم) مملوءة بالمياه المالحة، وأنها ثابتة للجمجمة مع الأسمنت ومسامير اﻷكريليك20. يختلف عن النهج الذي نتبعه، كان على قطب الصدر مزروع (البلاتين، 20 x 1.5 مم). نزهي et al. (2017) يستخدم إجراء مشابه جداً لبلدنا، على الرغم من أن الصدر الكهربائي كانت مصنوعة من الأسفنج غارقة في المياه المالحة (الكربون شغلها، 9.5 سم2)21. دراسة أخرى زرعها كل أقطاب في رأس هذا الحيوان، الذي تم التوصل إليه عن طريق استخدام لوحات ثابتة ويغطي رأسه الحيوان الموصلات المائية22. وهنا يصف لنا طراز ماوس تدكس يستخدم قطب مزروع المزمن عن طريق بسيطة إعداد الإجراءات وتدكس الجراحية (الشكل 1).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
واستخدمت مساكن منفردة الذكور البالغين (8-12 أسبوعا) الفئران C57BL/6 في هذه التجربة. الحيوانات تلقي الرعاية المناسبة قبل وأثناء وبعد الإجراءات التجريبية بالطعام والماء متواصلة ad- وافق جميع الإجراءات لجنة الأخلاقيات الحيوان من "الجامعة الاتحادية في ميناس" جيرايس (البروتوكول رقم 59/2014)-
1. وضع قطب كهربائي
2-تدكس الإعداد والتحفيز
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
عرض البروتوكول الجراحية زرع الاستقرار طويل الأجل لمدة شهر واحد على الأقل، مع لا إشارات تحريضية في الموقع تحفز ولا أي تأثير غير مرغوب فيه. نجا جميع الحيوانات الإجراءات الجراحية الدورتين تدكس (n = 8). في هذه التجربة، تم وضع يزرع تدكس عبر كورتيسيس M1 و M2 (مم +1.0 الأمامي الخلفي والجانبي 0.0 ملم إلى بريجما). أسبوع واحد في وقت لاحق، تدكس (n = 3-4) والشام (n = 3) الفئران قد حفز لمدة خمسة أيام متتالية خلال 10 دقائق في 0.35 اماه. وسجلت قيم جودة الاتصال (CQ) لتقييم جدوى عملية الزرع وتم العثور على...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في السنوات الأخيرة، إدخال تقنيات نيوروستيموليشن الممارسة السريرية كإجراء واعدة لعلاج الاضطرابات النفسية العصبية23. للحد من القيود المفروضة بسبب عدم معرفة آليات نيوروستيموليشن، قدمنا هنا نموذجا ماوس تدكس تحمل قطب التي يمكن استهداف مناطق الدماغ. منذ مسرى مزمن القابلة للغرس، يتيح هذا النموذج الحيواني التحقيق في الآثار البيولوجية طويلة الأمد أثارت من قبل تدكس (على الأقل 1 في الشهر) في أنماط التحفيز المعقدة. ويعرض نموذج الحيوان تدكس وصف التسامح عالية الزرع، وفرصة ضئيلة للإصابة إذا نفذ بشكل صحيح. عموما،...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ونحن نشكر السيد رودريغو دي سوزا للمساعدة في الحفاظ على المستعمرات الماوس. L.A.V.M وزميل ما بعد الدكتوراه الرؤوس. أيد هذا العمل منحة بروني (فابيميج: أبك-00476-14).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| BD Ultra-Fine 50U حقنة | BD | 10033430026 | للحقن داخل الصفاق. |
| ماكينة حلاقة (Philips Multigroom) | Philips (البرازيل) | QG3340/16 | لتشذيب موقع الجراحة. |
| < قوية > معدات جراحية < / قوية > | |||
| موديل 940 أداة تجسيمية للحيوانات الصغيرة مع وحدة تحكم العرض الرقمية | KOPF | 940 | للتقييد الجراحي للحيوانات وتحديد المواقع. |
| موديل 922 قضبان أذن غير ممزقة 60 درجة | KOPF | 922 | للتقييد الجراحي للحيوانات وتحديد المواقع. |
| حامل القنية | KOPF | 1766-AP | لتحديد موضع الزرع. |
| ذو تكبير ستيريو دقيق (III) على حامل ذراع الرافعة | WPI | PZMIII-BS | لتوطين بريجما وتحديد موضع الزرع. |
| نموذج نظام التحكم في درجة الحرارة | KOPF | TCAT-2LV | للتحكم الحراري للحيوانات. |
| مصدر الضوء البارد | WPI | WA-12633 | المنضدي للسطوع البؤري |
| مع Scavenging | VetEquip | 901820 | لتوصيل الأيزوفلوران وسلامته. |
| VaporGuard فلتر امتصاص الفحم المنشط | VetEquip | تدابير | سلامة نظام التسليم 931401. |
| موديل 923-B حامل رأس تخدير غاز الماوس | KOPF | 923-B | لتقييد و O2< / sub > وتسليم الأيزوفلوران. |
| منظم الأكسجين ، اسطوانة إلكترونية ؛ | VetEquip | 901305 | ل O2< / sub> التنظيم والتسليم. |
| خرطوم الأكسجين – أخضر | VetEquip | 931503 | لتسليم O2< / sub> والإيزوفلوران. |
| معقم الأشعة تحت الحمراء 800 & ordm; C | Marconi | MA1201 | لتعقيم الأدوات. |
| <أدوات جراحية قوية > < / قوية > | |||
| مقص ناعم - | أدوات العلوم الدقيقة | 14058-11 | للشق. |
| الخطافات الجراحية | INJEX | 1636 | في المنزل المصنعة - تستخدم لتنظيف موقع الجراحة من الجلد والفراء. |
| ملاقط قياسية أو ملقط | - | لإمساك الجلد. | |
| <مستهلكات جراحية قوية> < / قوية> | |||
| Vetbond | 3M | SC-361931 | لإغلاق الشق. |
| مجموعة الأسمنت والحفاز (Duralay) | Reliance | 2OZ | لتثبيت الزرع. |
| مسحات قطنية معقمة (تعقيم) | JnJ | 75U | لمطهر موقع الجراحة. |
| 24 لوحة بئر (لوحة زراعة الأنسجة) | SARSTEDT | 831،836 | لتحضير الأسمنت. |
| تطبيق فرشاة | parkell | S286 | لخلط الأسمنت وتطبيقه. |
| <قوي > صيدلانيات < / قوي > | |||
| زيلازين (أناسيدان 2٪) سيفا | للأدوية (البرازيل) | P10160 | لتحريض التخدير. |
| الكيتامين (دوبالين 10٪) سيفا | للأدوية (البرازيل) | P30101 | لتحريض التخدير. |
| إيزوفلوران (100٪) كريست | & aacute ؛ ليا (البرازيل) | 100 مل | لصيانة التخدير. |
| ليدوكائين (XYLESTESIN 5٪) | Cristal Pharma | - | لرعاية ما بعد الجراحة. |
| كيتوبروفين (بروفينيد 100 مجم) | سانوفي أفينتيس | 20 مل | لرعاية ما بعد الجراحة. |
| اللاكتات من Ringer's | SANOBIOL LAB | 7898153652145 | لرعاية ما بعد الجراحة. |
| TobraDex (ديكساميثازون 1 مجم / جم) | Alcon | 631 | لتشحيم العين وحمايتها. |
| <قوي > تحفيز < / قوي > | |||
| محفز عبر الجمجمة للحيوان | Soterix Medical | 2100 | للجيل الحالي. |
| حامل قطب كهربائي من نوع الدبوس (قاعدة حامل أسطواني) دعم | الكهربائي Soterix Medical | 2100 | (الزرع). |
| قطب كهربائي من نوع الدبوس (Ag / AgCl) | Soterix Medical | 2100 | للتسليم الحالي (قطب كهربائي). |
| غطاء قطب كهربائي من نوع الدبوس | Soterix Medical | 2100 | لحماية الزرع. |
| قطب الجسم (Ag / AgCl المغلفة) | Soterix Medical | 2100 | للتسليم الحالي (القطب). |
| محلول ملحي (0.9٪) | FarmaX | 7896902206441 | إجراء وسيط للتسليم الحالي. |
| الملقط القياسي أو الملقط | - | لإعداد tDCS. | |
| <قوي > في الوقت الحقيقي تفاعل البوليميراز المتسلسل < / قوي > | |||
| BioRad CFX96 نظام الوقت الحقيقي | BioRad | C1000 | ل qPCR |
| SsoAdvancedTM Universal SYBR Green Supermix (5 × 1 مل) | BioRad | 1725271 | ل qPCR |
| Hard Shell PCR Plates PCT COM 50 p / CFX96 | BioRad | HSP9601 | ل qPCR |
| Microseal "B" seal pct c / 100 | BioRad MSB1001 | ل qPCR |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.