يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

القمع لنمو الخلايا الورم النخاعي المتعدد في فيفو بالكربون واحد-جدار أنبوب نانوي (سوكنت)--تسليم العقاقير أوليجوس MALAT1

5.9K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/58598

⸱

ديسمبر 13, 2018

 ,  , 
1Department of Cancer Biology, Lerner Research Institute, Cleveland Clinic, 2Department of Medical Oncology, Dana-Farber Cancer Institute, Harvard Medical School

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

توضح هذه المخطوطة توليف أنبوب نانوي واحد-الجدار الكربون (سوكنت)-مترافق MALAT1 جابمير العقاقير الحمض النووي اليغنوكليوتيد (سوكنت-ضد-MALAT1)، مما يدل على إيصال موثوقة سوكنت وقوية التأثير العلاجي ل مكافحة--MALAT1 في المختبر والمجراه. الأساليب المستخدمة للتوليف، والتعديل، والتصريف، وشرح لحقن سوكنت-مكافحة--MALAT1.

الملخص

أنبوب نانوي واحد-الجدار الكربون (سوكنت) هو نوع جديد من نانوحبيبات، التي كانت تستخدم لتقديم أنواع متعددة من المخدرات داخل الخلايا، مثل البروتينات والنوكليوتيد والعقاقير الاصطناعية جزيء صغير. سوكنت أبعادا قابلة للتخصيص، مساحة سطحية كبيرة، ويمكن ربط مرونة مع المخدرات من خلال تعديلات مختلفة على سطحه؛ ولذلك، نظام مثالي لنقل الأدوية إلى خلايا. الكشف فضله منذ فترة طويلة (لنكرناس) مجموعة من الجيش الملكي النيبالي فضله أطول من 200 nt, التي لا يمكن ترجمتها إلى البروتين ولكنها تلعب دوراً هاما في العمليات البيولوجية والفيزيولوجية المرضية. الرئة المرتبطة بورم خبيث غدية نسخة 1 (MALAT1) لنكرنا عالية مصانة. وثبت أن مستويات أعلى من MALAT1 المرتبطة بسوء التشخيص لأنواع السرطان المختلفة، بما في ذلك الورم النخاعي المتعدد (مم). ونحن قد كشفت عن أن ينظم MALAT1 الموت خلية وإصلاح الحمض النووي في مم؛ وهكذا، يمكن اعتبار MALAT1 كهدف علاجي ملم. ومع ذلك، الكفاءة في تقديم اليغو العقاقير لتمنع/ضربة قاضية MALAT1 الحية في ما زال مشكلة. في هذه الدراسة، نحن تعديل سوكنت مع الوتد-2000 ومترافق اليغو MALAT1 المضادة لأنه اختبار إنجاز هذا المركب في المختبر، حقن الوريد مع نموذج ماوس مم نشرها والتقيد تثبيط كبيرة لتطور مم، مما يشير إلى أن سوكنت مكوكية تسليم مثالي لمكافحة MALAT1 جابمير الحمض النووي.

المقدمة

سوكنت هو نانوماتيريال رواية التي يمكنها توفير أنواع مختلفة من المخدرات، مثل البروتينات، والجزيئات الصغيرة، والأحماض النووية، ستابلي وكفاءة مع قابلية التحمل مثالية وسمية الحد الأدنى في المختبر1 و المجراة في2. سوكنت فونكتيوناليزيد كبيرة ذات قابلية الذوبان في توافق مع الحياة والمياه ويمكن استخدامها مكوك لجزيئات أصغر، ويمكن حملها على اختراق غشاء الخلية3،،من45.

لنكرناس مجموعة من الحمض النووي الريبي (> 200 nt) التي يتم نسخها من الجينوم مرناً ولكن لا يمكن ترجمتها إلى بروتينات. تزايد الأدلة أظهرت أن لنكرناس المشاركة في تنظيم التعبير الجيني6 ويشاركون في البدء والتقدم لمعظم أنواع السرطان، بما في ذلك مم7،8،9. MALAT1 نسخة فضله التخصيب النووي 2 (NEAT2) و حفظت عاليا لنكرنا10. MALAT1 معترف بها في البداية في المنتشر الخلية الصغيرة غير الرئة السرطان (NSCLC)11، ولكن قد تم overexpressed في عدة أورام5،،من1213؛ هو واحد من لنكرناس أعرب عن أشد ويرتبط مع سوء تشخيص في مم8،14. مستوى التعبير MALAT1 أعلى بكثير في دورة فادح extramedullary مم المرضى مقارنة بتلك التي شخصت فقط ملم15.

في دراسة سابقة، وقد أكدنا أن أوليجوس MALAT1 مكافحة قوة تؤدي إلى تلف الحمض النووي والمبرمج في مم16 باستخدام الحمض النووي جابمير النوكليوتيد العقاقير تستهدف MALAT1 (مكافحة-MALAT1) في الخلايا ملم. الحمض النووي جابمير تتألف من الحمض النووي العقاقير وربط 2 '--OMe-الكشف، الذي يمكن أن يدفع الانقسام MALAT1 ب النشاط مرة ملزمة"رناسي ح"17. لا تزال حدود كفاءة المجراة في تسليم العقاقير أوليجوس في الاستخدام السريري.

لاختبار أداء فونكتيوناليزيد أثر سوكنت لمكافحة MALAT1 جابمير أوليجوس، جابمير MALAT1 المضادة هو مترافق الحمض النووي إلى دسبي-PEG2000-أمين سوكنت. ثم يتم حقن سوكنت-ضد-MALAT1 عن طريق الوريد في نموذج نشر ماوس مم؛ ويلاحظ تثبيط ملفتة للنظر بعد أربعة علاجات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

ووافق جميع التجارب التي تنطوي على الحيوانات قبل IACUC عيادة كليفلاند (رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة).

1-تجميع سوكنتس فونكتيوناليزيد

  1. ميكس 1 ملغ من سوكنتس و 5 ملغ من دسب-PEG2000-أمين و 5 مل من الماء المعقم نوكلاس خالية في قنينة زجاج التﻷلؤ (20 مل). اهتز جيدا لحل جميع المواد الكاشفة تماما.
  2. Sonicate القنينة في سونيكاتور حمام مياه على مستوى سلطة من 40 ث عن ح 1 في درجة حرارة الغرفة (RT، 20 دقيقة × 3، تغيير الماء كل 20 دقيقة لتجنب ارتفاع درجة الحرارة). ثم الطرد المركزي أنه في 24,000 س ز ح 6 وجمع الحل طافية. ويمكن تخزين هذا الحل سوكنت الوظيفية عند 4 درجة مئوية لمدة شهرين.
  3. أضف 1 مل من محلول سوكنت من الخطوة 1، 2 إلى جهاز الطرد مركزي تصفية موكو كاتشين 100، تليها 4 مل الماء المعقم نوكلاس مجاناً. أجهزة الطرد المركزي لمدة 10 دقائق في 4,000 س ز على RT لإزالة الزائدة دسب-PEG2000-أمين. كرر إضافة 4 مل من الماء والطرد المركزي 5 x. سوف يترك أكثر من 0.5 مل من بقايا سوكنت الحل في عامل التصفية بعد كل استخدام الطرد المركزي.
  4. قياس تركيز الحل سوكنت بقايا في عامل التصفية باستخدام مطياف الأشعة فوق البنفسجية/VIS في 808 نانومتر بعد الغسيل النهائي. عادة ما يكون التركيز النهائي حوالي 50 مغ/لتر (المحسوب وفقا لطريقة وضعها كام et al.18).
    ملاحظة: ضمان أن SWCNTs دسب-شماعة-فونكتيوناليزيد هي للذوبان في الماء بعد الخطوة 1، 4 ومستقرة في مختلف الحلول البيولوجية دون تجميع مرئية بعد بضعة أسابيع.

2- تصريف MALAT1 مكافحة جابمير الحمض النووي يحف به 2 '-O الكشف المعدلة إلى سوكنت فونكتيوناليزيد

  1. إضافة 0.5 ملغ من سالفو-LC-سبدب إلى 450 ميليلتر من دسب-PEG2000-أمين فونكتيوناليزيد سوكنت. إضافة 50 ميليلتر من برنامج تلفزيوني x 10 وثم احتضانها ح 2 في الرايت
  2. لإزالة الزائدة سالفو-LC-سبدب، إضافة رد فعل من الخطوة 2، 1 إلى جهاز الطرد مركزي تصفية موكو كاتشين 100، تليها 4 مل مياه خالية من نوكلاس. الطرد المركزي ل 10 دقيقة في س 4,000 ز في تكرار الرايت إضافة 4 مل من الماء والطرد المركزي 5 س.
  3. إضافة 200 نانومتر تعديل ثيول المضادة-MALAT1-Cy3 جابمير الحمض النووي إلى 1.5 مل حل القيمة التجارية، واحتضان لمدة 90 دقيقة في نق الرايت المنتج مع عمود 5 برنامج العمل الوطني، أثر البروتوكول الخاص بالشركة المصنعة. الوت مكافحة--MALAT1--Cy3 مع 500 ميكروليتر معقمة خالية من نوكلاس 1 × برنامج تلفزيوني.
    ملاحظة: ويمكن تخزين سوكنت فونكتيوناليزيد مع القيمة المضافة، التي قد تنشق سندات ثنائي كبريتيد شكلت أثناء تخزين جابمير MALAT1 مكافحة ثيولاتيد الحمض النووي. يمكن إزالة القيمة المضافة حسب العمود 5 مرشحيه قبل الاقتران مع سوكنت.
  4. جمع الحل دسبي-PEG2000-أمين سوكنت سولفو-LC-سبدب-تعامل اليسار في عامل التصفية، وتمييع مع 500 ميليلتر من حل مكافحة--MALAT1-Cy3. ثم احتضان أنه في 4 درجات مئوية عن 24 ساعة. ويمكن تخزين MALAT1 سوكنت المضادة مترافق عند 4 درجة مئوية لمدة 3 أسابيع. عقب الإجراء نفسه، يمكن توليفها سوكنت مترافق مع التدافع اليغو العقاقير واستخدامها كعنصر تحكم سوكنت.

3-الذيل حقن الوريد من سوكنت--مكافحة--MALAT1

  1. إنشاء نموذج نشر ماوس ملم.
    1. لتحقيق أفضل النتائج للمقارنة، ترتيب عشوائي إيماءة 14. CB17-بركدكسسيد/ي الفئران (8 أسابيع) في مجموعات المحاكمة أو عنصر تحكم (سبعة في كل مجموعة) مع نفس نسبة الذكور والإناث.
    2. مقاعد البدلاء عملية تنظيف وتعقيم أنه مع الكحول 70%.
    3. استخدام مصباح تدفئة الحارة الماوس لتساعد في ذيل الوريد لتظهر. كبح جماح الماوس بشكل صحيح مع ريسترينير حقن ذيل.
    4. حقن الخلايا 5 × 106 MM.1S-لوك-مشري في 50 ميليلتر من برنامج تلفزيوني عن طريق الوريد الذيل دون تخدير. اضغط مكان الحقن بمسحه الكحول لمارك س. 30 الماوس حقن وإعادته إلى قفص نظيفة.
  2. يبدأ العلاج في اليوم السابع بعد حقن الخلايا MM.1S.
    1. حقن 50 ميليلتر من برنامج تلفزيوني يحتوي على MALAT1-سوكنت-مكافحة الوريد ذيل الماوس. استخدم برنامج تلفزيوني يحتوي على سوكنت-عنصر التحكم كعنصر تحكم.
    2. اضغط على مكان الحقن بمسحه الكحول لمدة 30 ثانية.
    3. مراقبة النزيف المحلية في الذيل والسلوك العام للماوس لمدة 1 دقيقة، وثم إعادته إلى قفص نظيف. مراقبة جميع حقن الفئران مرة أخرى قبل العودة القفص على الرف، للتأكد من أن يتم التسامح مع الحقن جيدا.
  3. تكرار الحقن كل 7 أيام حتى انتهاء التجربة.
    1. إنهاء هذه التجربة عندما يتحلل الصحة العامة للماوس: عند عدم الأكل أو الشرب، مظهر شاحب آثار أقدام، أي نزيف تحت الجلد، ضيق في التنفس، انخفاض النشاط، شل السفلية، و/أو كتلة ملموس في ويلاحظ البطن.

4-تقييم تطور المرض

  1. تقييم الحالة العامة للفئران كل يوم بعد حقن الخلايا MM.1S-لوك-مشري. إيلاء اهتمام خاص إذا وضع الفئران يشل أطرافهم السفلي.
  2. تقييم نمو الورم باستخدام نظام تصوير المجراة في 1 × أسبوع قبل الحقن سوكنت-مكافحة--MALAT1.
    1. إعداد جديدة 15 ملغ/مل د-لوسيفرين مع برنامج تلفزيوني 1 x.
    2. تخدير الفئران مع isoflurane المبخر (3-5% لتحريض و 1 – 3% للصيانة، تبعاً لحالة الفئران).
    3. ضخ 150 مغ/كغ لوسيفرين د في كل الماوس إينترابيريتونيلي، 5 دقيقة قبل التصوير؛ ثم، صورة الفئران في موقف معرضة مع طيف نظام التصوير.
    4. جمع صور متسلسلة من الفئران كل 2 دقيقة، حتى يتم التوصل إلى تشبع التﻷلؤ. قم بضبط الوقت الفاصل الزمني وفقا للامتصاص د-لوسيفرين/الإشارة.
  3. استخدام CO2 التضحية الفئران حالما يتم التوصل إلى إنهاء هذه التجربة.
  4. أن هذا نموذج نشر مم، عملية الفئران كما يلي.
    1. وزن الماوس قبل التشريح.
    2. جمع الدم من القلب لفحص تعداد الدم الكامل (CBC) يقوم بها جهاز عداد خلايا الدم. التهم من خلايا الدم البيضاء وخلايا الدم الحمراء، وكذلك نسبة الخلايا الليمفاوية، هي المؤشرات الأولية.
    3. عزل الطحال وتزن عليه. حساب نسبة وزن الطحال/الجسم؛ تنظر > 0.5% كتوسيع الطحال.
    4. جمع أنسجة نخاع العظم والطحال، والعقدة الليمفاوية والكلى والأنسجة مع ورم خبيث مرئية.
    5. جمع العمود الفقري إذا كان الماوس المتقدمة شلل من السفلية.
    6. استخراج البروتين والحمض النووي الريبي من عينات نخاع العظام.
    7. إصلاح جميع الأنسجة المتبقية في الفورمالين.
    8. ديكالسيفيكيشن، تزج عينات العظام في 0.25 م يدتا الحل (pH 8.0) لمدة 5 أيام بعد 24 ساعة تثبيت.
    9. تزج جميع العينات في الكحول 75% للتخزين على المدى الطويل.
  5. قارن قوة الإشارة من لوسيفراس في نفس الوقت النقاط في المجموعتين. من كلا الفريقين، سجل تواريخ تضحية كل الماوس وحساب منحنيات البقاء على قيد الحياة من الفريقين مع البرمجيات.
    ملاحظة: ويرد في الشكل 1جميع الإجراءات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

لإظهار تأثير تثبيط المضادة-MALAT1 جابمير الحمض النووي في مم، نحن ترسيتها على التعبير عن MALAT1 واستخدمه في الخلايا H929 و MM.1S. ثمان وأربعين ساعة في وقت لاحق، تم جمع الخلايا لتحليل كفاءة تدق لأسفل ووضع المبرمج في الخلايا transfected مع المضادة-MALAT1 جابمير أو مراقبة الحمض النووي. وأظهرت أن الحمض النووي جابمير مكافحة MALAT1 ترسيتها عن التعبير MALAT1 في خلايا H929 و MM.1S كفاءة نتائج qRT PCR (الشكل 2أ). تم تحديد مركز المبرمج بالتدفق الخلوي، ا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

وتبين الأدلة أن لنكرناس المشاركة في تنظيم العديد من إجراءات الفسيولوجية والفيزيولوجية المرضية في حالات السرطان، بما في ذلك مم7،،من89؛ لديهم القدرة على أن تكون هدفا لعلاج السرطان، التي يمكن أن تتحقق بالعقاقير النوكليوتيد20،،من2122. وافق العديد من العقاقير اليغنوكليوتيد العقاقير، بما في ذلك فوميفيرسين للفيروس المضخم للخلايا التهاب الشبكية...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون بمعهد أبحاث ليرنر البروتين، الجينوم، وأساسيات التصوير لما قدمته من المساعدة ودعم. التمويل: كان يؤيد هذا العمل ماليا بالمعاهد الوطنية للصحة/NCI منحة R00 CA172292 (J.J.Z.) وأموال بدء التشغيل (ل J.J.Z.) والسريرية ومتعدية العلوم التعاونية (كتس) قضية Western Reserve جامعة الأساسية استخدام الطيار غرانت (إلى J.J.Z.). هذا العمل استخدام المجهر SP8 إيكا [كنفوكل] التي تم شراؤها بتمويل من "المعاهد الوطنية للصحة سيج" المنح 1S10OD019972-01.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
SWCNTsMillipore-Sigma704113
DSPE-PEG2000-AmineAvanti Polar Lipids880128
حمام سونيكاتيرVWR97043-992
4 مل مرشح الطرد المركزيMillipore-SigmaZ740208-8EA
UV / VIS مطيافThermo Fisher ScientificaccuSkan GO UV / Vis Microplate Spectrophotometerمعامل الانقراض 0.0465 لتر / مجم / سم عند 808 نانومتر
Sulfo-LC-SPDPProteoChemc1118
محلول DTTMillipore-Sigma43815
NAP-5 عمودGE Healthcare17-0853-01
في الجسم الحي نظام التصويرPerkinElmer
NOD. CB17-Prkdcscid / J الفئرانمختبر نهر تشارلز250
مقياس التدفق الخلويBecton Dickinso
LipofectamineInvitrogen11668019Lipofectamine2000
مصل الأبقار الجنيني (FBS)Invitrogen10437-028
RMPI-1640 متوسطInvitrogen11875-093
MALAT1-QF:تم تصنيعه بواسطة IDT الشركة5 '- GTTCTGATCCCGCTGCTATT - 3'
MALAT1-QR:تم تصنيعه بواسطة شركة5 '- TCCTCAACACTCAGCCTTTATC - 3 '
GAPDH-QF:تم تصنيعه بواسطة شركة5 '- CAAGAGCACAAGAGGAAGAGAGAGAG - 3'
GAPDH-QR:تم تصنيعه بواسطة شركة5 '- CTACATGGCAACTGTGAGGAG - 3'
تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي باستخدام SYBR Green PCR Master mixThermo Fisher ScientificA25780
RevertAid طقم تخليق cDNA للوقوف الأولThermo Fisher ScientificK1621
anti-MALAT1تم تصنيعه بواسطة شركة5'-mC * mG * mA * mA * mA * C * A * T * T
* G * G * C * A * C * A * mC * mA * mG * mA - mA - mA - 3 '
طقم فحص قابلية الخليةPromega CorporationG7570CellTiter-GloLuminescent Cell Zaability Kit
accuSkan GO UV / Vis Microplate SpectrophotometerThermo Fisher مرشح الطرد المركزي العلمي
Millipore-SigmaUFC910008
SPSS برنامجIBMالإصدار 24.0
D-LuciferinMillipore-SigmaL9504
IDT IDT IDT IDT

المراجع

  1. Jiang, X., et al. RNase non-sensitive and endocytosis independent siRNA delivery system: delivery of siRNA into tumor cells and high efficiency induction of apoptosis. Nanoscale. 5 (16), 7256-7264 (2013).
  2. Murakami, T., et al. Water-dispersed single-wall carbon nanohorns as drug carriers for local cancer chemotherapy. Nanomedicine (Lond). 3 (4), 453-463 (2008).
  3. Kam, N. W., Dai, H. Carbon nanotubes as intracellular protein transporters: generality and biological functionality. Journal of the American Chemical Society. 127 (16), 6021-6026 (2005).
  4. Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. Functionalization of carbon nanotubes via. cleavable disulfide bonds for efficient intracellular delivery of siRNA and potent gene silencing. Journal of the American Chemical Society. 127 (36), 12492-12493 (2005).
  5. Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. Carbon nanotubes as intracellular transporters for proteins and DNA: an investigation of the uptake mechanism and pathway. Angewandte Chemie International Edition in English. 45 (4), 577-581 (2006).
  6. Ntziachristos, P., Abdel-Wahab, O., Aifantis, I. Emerging concepts of epigenetic dysregulation in hematological malignancies. Nature Immunology. 17 (9), 1016-1024 (2016).
  7. Evans, J. R., Feng, F. Y., Chinnaiyan, A. M. The bright side of dark matter: lncRNAs in cancer. Journal of Clinical Investigation. 126 (8), 2775-2782 (2016).
  8. Ronchetti, D., et al. Distinct lncRNA transcriptional fingerprints characterize progressive stages of multiple myeloma. Oncotarget. 7 (12), 14814-14830 (2016).
  9. Wong, K. Y., et al. Epigenetic silencing of a long non-coding RNA KIAA0495 in multiple myeloma. Molecular Cancer. 14, 175(2015).
  10. Schmidt, L. H., et al. The long noncoding MALAT-1 RNA indicates a poor prognosis in non-small cell lung cancer and induces migration and tumor growth. Journal of Thoracic Oncology. 6 (12), 1984-1992 (2011).
  11. Ji, P., et al. MALAT-1, a novel noncoding RNA, and thymosin beta4 predict metastasis and survival in early-stage non-small cell lung cancer. Oncogene. 22 (39), 8031-8041 (2003).
  12. Luo, J. H., et al. Transcriptomic and genomic analysis of human hepatocellular carcinomas and hepatoblastomas. Hepatology. 44 (4), 1012-1024 (2006).
  13. Guffanti, A., et al. A transcriptional sketch of a primary human breast cancer by 454 deep sequencing. BMC Genomics. 10, 163(2009).
  14. Cho, S. F., et al. MALAT1 long non-coding RNA is overexpressed in multiple myeloma and may serve as a marker to predict disease progression. BMC Cancer. 14, 809(2014).
  15. Handa, H., et al. Long non-coding RNA MALAT1 is an inducible stress response gene associated with extramedullary spread and poor prognosis of multiple myeloma. British Journal of Haematology. 179 (3), 449-460 (2017).
  16. Hu, Y., et al. Targeting the MALAT1/PARP1/LIG3 complex induces DNA damage and apoptosis in multiple myeloma. Leukemia. , (2018).
  17. Lennox, K. A., Behlke, M. A. Cellular localization of long non-coding RNAs affects silencing by RNAi more than by antisense oligonucleotides. Nucleic Acids Research. 44 (2), 863-877 (2016).
  18. Kam, N. W., O'Connell, M., Wisdom, J. A., Dai, H. Carbon nanotubes as multifunctional biological transporters and near-infrared agents for selective cancer cell destruction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102 (33), 11600-11605 (2005).
  19. Zeineldin, R., Al-Haik, M., Hudson, L. G. Role of polyethylene glycol integrity in specific receptor targeting of carbon nanotubes to cancer cells. Nano Letters. 9 (2), 751-757 (2009).
  20. Amodio, N., D'Aquila, P., Passarino, G., Tassone, P., Bellizzi, D. Epigenetic modifications in multiple myeloma: recent advances on the role of DNA and histone methylation. Expert Opinion on Therapeutic Targets. 21 (1), 91-101 (2017).
  21. Ahmad, N., Haider, S., Jagannathan, S., Anaissie, E., Driscoll, J. J. MicroRNA theragnostics for the clinical management of multiple myeloma. Leukemia. 28 (4), 732-738 (2014).
  22. Amodio, N., et al. Drugging the lncRNA MALAT1 via. LNA gapmeR ASO inhibits gene expression of proteasome subunits and triggers anti-multiple myeloma activity. Leukemia. , (2018).
  23. Highleyman, L. FDA approves fomivirsen, famciclovir, and Thalidomide. Food and Drug Administration. BETA. 5, (1998).
  24. Smith, R. J., Hiatt, W. R. Two new drugs for homozygous familial hypercholesterolemia: managing benefits and risks in a rare disorder. JAMA Internal Medicine. 173 (16), 1491-1492 (2013).
  25. Aartsma-Rus, A. FDA Approval of Nusinersen for Spinal Muscular Atrophy Makes 2016 the Year of Splice Modulating Oligonucleotides. Nucleic Acid Therapeutics. 27 (2), 67-69 (2017).
  26. Nelson, S. F., Miceli, M. C. FDA Approval of Eteplirsen for Muscular Dystrophy. The Journal of the American Medical Association. 317 (14), 1480(2017).
  27. Liu, Z., Sun, X., Nakayama-Ratchford, N., Dai, H. Supramolecular chemistry on water-soluble carbon nanotubes for drug loading and delivery. American Chemical Society Nano. 1 (1), 50-56 (2007).
  28. Ali-Boucetta, H., et al. Multiwalled carbon nanotube-doxorubicin supramolecular complexes for cancer therapeutics. Chemical communications (Cambridge). (4), 459-461 (2008).
  29. Bianco, A., Kostarelos, K., Partidos, C. D., Prato, M. Biomedical applications of functionalised carbon nanotubes. Chemical communications. (5), Cambridge. 571-577 (2005).
  30. Hadidi, N., Kobarfard, F., Nafissi-Varcheh, N., Aboofazeli, R. Optimization of single-walled carbon nanotube solubility by noncovalent PEGylation using experimental design methods. International Journal of Nanomedicine. 6, 737-746 (2011).
  31. Padilla-Parra, S., et al. Quantitative imaging of endosome acidification and single retrovirus fusion with distinct pools of early endosomes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (43), 17627-17632 (2012).
  32. Wu, H., Zhu, L., Torchilin, V. P. pH-sensitive poly(histidine)-PEG/DSPE-PEG co-polymer micelles for cytosolic drug delivery. Biomaterials. 34 (4), 1213-1222 (2013).
  33. Oishi, M., Nagatsugi, F., Sasaki, S., Nagasaki, Y., Kataoka, K. Smart polyion complex micelles for targeted intracellular delivery of PEGylated antisense oligonucleotides containing acid-labile linkages. Chembiochem. 6 (4), 718-725 (2005).
  34. Dong, H., Ding, L., Yan, F., Ji, H., Ju, H. The use of polyethylenimine-grafted graphene nanoribbon for cellular delivery of locked nucleic acid modified molecular beacon for recognition of microRNA. Biomaterials. 32 (15), 3875-3882 (2011).
  35. Arunachalam, B., Phan, U. T., Geuze, H. J., Cresswell, P. Enzymatic reduction of disulfide bonds in lysosomes: characterization of a gamma-interferon-inducible lysosomal thiol reductase (GILT). Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (2), 745-750 (2000).
  36. Lelimousin, M., Sansom, M. S. Membrane perturbation by carbon nanotube insertion: pathways to internalization. Small. 9 (21), 3639-3646 (2013).
  37. Thomas, M., Enciso, M., Hilder, T. A. Insertion mechanism and stability of boron nitride nanotubes in lipid bilayers. J Phys Chem B. 119 (15), 4929-4936 (2015).
  38. Jin, H., Heller, D. A., Strano, M. S. Single-particle tracking of endocytosis and exocytosis of single-walled carbon nanotubes in NIH-3T3 cells. Nano Letters. 8 (6), 1577-1585 (2008).
  39. Jin, H., Heller, D. A., Sharma, R., Strano, M. S. Size-dependent cellular uptake and expulsion of single-walled carbon nanotubes: single particle tracking and a generic uptake model for nanoparticles. American Chemical Society Nano. 3 (1), 149-158 (2009).
  40. Ruggiero, A., et al. Paradoxical glomerular filtration of carbon nanotubes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (27), 12369-12374 (2010).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

MALAT1 QRT PCR
القمع لنمو الخلايا الورم النخاعي المتعدد في فيفو بالكربون واحد-جدار أنبوب نانوي (سوكنت)--تسليم العقاقير أوليجوس MALAT1
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.