والهدف من هذه المادة توفير تمهيدي لتطوير واستخدام نموذج أرنب سرطان VX2 لسرطان الكبد.
مقالة منهجية
والهدف من هذه المادة توفير تمهيدي لتطوير واستخدام نموذج أرنب سرطان VX2 لسرطان الكبد.
ورم VX2 الأرنب نموذج حيوانية المستخدمة عادة للبحوث متعدية الجنسيات فيما يتعلق بسرطانه الخلية الكبدية (HCC) في مجال "الأشعة التداخلية". ويستخدم هذا النموذج المتحولة الخلايا الحرشفية التي يتم نشرها بسهولة وبشكل موثوق في العضلات الهيكلية من الأرانب المانحة لزرع الحصاد و allograft في نهاية المطاف في الكبد من السذاجة المستلمين. سرعة ينمو هذا الاختلاس الورم داخل كبد الأرانب المتلقية في ورم أنجيوجرافيكالي شخصية تتميز بنواة نخرية محاطة بكبسولة هايبرفاسكولار قابلة للحياة. الحجم الفعلي لتشريح الأرنب غير كافية لتيسير الأجهزة والأوعية الدموية يسمح بتطبيق واختبار مختلف التقنيات التداخلية. وعلى الرغم من هذه الفوائد، هناك ندرة في الموارد التقنية بمثابة إشارة ملموسة للباحثين العاملين مع النموذج. وهنا، نقدم مخطط بصرية شاملة للجوانب التقنية للتنمية والنمو، ونشر، واستخدام angiographic من طراز الورم VX2 أرنب للاستخدام من قبل المبتدئين والباحثين ذوي الخبرة على حد سواء.
نموذج الورم VX2 أرنب لعبت دوراً في علاج الأورام التجريبية منذ تطويره في عام 19351،2. هذا الورم هو التي يسببها فيروس المتحولة الخلايا الحرشفية تتميز هايبرفاسكولاريتي، والنمو السريع، ونشر سهلة في الهيكل العظمى والعضلات3،4. وفي حين استخدمت نموذج الورم الأرنب VX2 للتحقيق في عدد كبير من أنواع السرطان5،6،،من78؛ تركز هذه الورقة هو سرطان الكبد9.
وغرض الأسلوب الموصوفة هو تقديم نموذج لسرطان الكبد الأولية، أو سرطانه الخلية الكبدية (HCC)، التي يمكن أن يستخدمها "الأشعة التداخلية" للبحوث متعدية الجنسيات. يمكن استخدامه لدراسات الحرائك الدوائية والعلاجية التحقيقات والجر أسلوب اختبار10،11،،من1213،،من1415.
الطريقة بالتفصيل هنا غلة مزايا متعددة على نماذج أخرى داخل نفس المجال مثل نماذج القوارض مثل الفئران، الفئران، ووودتشوكس، أو نماذج أكبر مثل الرئيسات16. إحدى الفوائد الرئيسية هي نمو الورم السريع والموثوق بها التي يسمح للباحثين بإنشاء خط ورم نشط في غضون شهر من أطرافهم هند أول نشر17. بالإضافة إلى ذلك، يحتوي هذا الورم واضحة الرؤية سونوجرافيك وهامش هايبرفاسكولار الذي يسمح لكل من ترانسارتيريال لوكوريجيونال العلاجات والعلاجات الجر. وأخيراً، والأهم من ذلك، يسمح حجم المفرج أرنب استخدام مجدية وسهلة من الناحية التقنية للأجهزة والأوعية الدموية18.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ويتبع البروتوكول التالي جميع المتطلبات والمبادئ التوجيهية التي أقرتها جامعة إلينوي-شيكاغو. أنه تم استعراض وموافقة المحلية رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة قبل التنفيذ.
1-VX2 أطرافهم هند الورم التنمية
2-VX2 أطرافهم هند نمو الورم والحصاد
ملاحظة: افتراض تلقيح ناجحة، يجب أن يكون هناك ملموس العقيدات الورم (3\u20124 سم) في موقع الحقن في غضون أسابيع 2. عادة، هذه العقيدات سيكون ملموسا حوالي أسبوع. ومع ذلك، فمن الأفضل السماح للورم ينمو للسماح لجمع الأنسجة كافية. عادة، تكون هذه العقيدات مرتفعة فوق مستوى عضلة مدورة والراسخ. إذا كان
3. زرع الورم الكبد عن طريق فتح البطن
4-VX2 الورم إعداد تعليق
5-أنجيوجرافيك استخدام VX2 ورم في الكبد
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
عند النظر إلى الشكل 1، فمن الواضح أن كوادريسيب الأرنب هو الموسع. بالإضافة إلى ذلك، متعددة العقيدات الصغيرة المنفصلة، ربط عادة مع نمو الورم عن طريق اللفافة، مرئية. عند ملامسة، يجب أن تظهر أطرافهم حقن من أطرافهم غير مدخلة. إذا كان باحث يتطلب تأكيد نهائي أكثر من وجود الورم، يمكن استخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية لتحديد الورم جزءا لا يتجزأ من العضلات. إذا لم يتم الكشف عن وجود ورم، ينبغي إعادة حقن مع تعليق خلية ورم أطرافهم هند.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الخطوة الأولى الحاسمة في منهجية الورم VX2 نشر ناجحة لورم في أطرافهم هند أرنب المانحين. الرجوع إلى الفقرة الأولى في المقطع "النتائج ممثلة" لمزيد من المعلومات بشأن هذه الخطوة.
الخطوة الحاسمة التالية، هو ضمان أن الكبسولة الورم قابلة للتطبيق يتم التعرف بشكل صحيح. سوف يكون هذا ضروريا لإعداد تعليق الورم، بل من المهم أيضا لتحديد وتوليد قطع الورم لزرع الكبد. الفاصل بين الورم قابلة للاستمرار والأنسجة العضلية المحيطة هو مشروح في الشكل 4. إذا كان هو كشط عينة الأنسجة غير صحيح...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وأيد منحة بحثية من ذ جربة العمل المبينة في هذا التقرير.
ونود أن نعترف بموظفي الطب البيطري في جامعة إيلينوي-"مختبر" شيكاغو الموارد البيولوجية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| MethoCult (Methycellulose) | Stemcell Technologies | M3134 | |
| VX2 Cell Line | NCI | VX-2 | |
| 5 مل حقنة | BD | 309646 | |
| 16 جرام إبرة | BD | 305197 | |
| 22 جرام إبرة | BD | 305155 | |
| ماكينة قص الشعر | Wahl | 41870-0438 | |
| رغوة صندوق معزول | مستر بوكس أون لاين | 10 × 10 × 4 | |
| أسيبرومازين | هنري شاين | 003845 | |
| بوبرينورفين | بار | 42023-179-05 | |
| ميلوكسيكام | هنري شاين | 049755 | |
| فوط كحول | Covidien | 5033 | |
| كيتامين | هنري شاين | 056344 | |
| زيلازين | Akorn | 59399-110-20 | |
| Pentobarbital (Fatal-Plus) | Vortech | 9373 | |
| طبق بتري معقم | ثيرمو فيشر | 172931 | |
| DMEM | Gibco | 11965092 | |
| Saline | Baxter | 2F7124 | |
| 15 شفرة | Steris | 02-050-015 | |
| مقبض مشرط × 2 | Steris | 22-2381 | |
| ملقط Hemostat المنحني | WPI | 501288 | |
| ملقط غير رضحي | Sklar | 52-5077 | |
| شاش | Medline | NON21430LF | |
| 11 شفرة | Steris | 02-050-011 | |
| Surgicel | Ethicon | 1951 | |
| 3-0 PDS / Taper | Ethicon | Z305H | |
| 4 - 0 فيكريل / قطع | إيثيكون | J392H | |
| 40 & مصفاة m | BD | 352340 | |
| 50 مل أنبوب مخروطي | Thermo Fisher | 339652 | |
| ماصة بلاستيكية | توماس ساينتفيك | HS206371B | |
| الطرد المركزي | سورفال | 75004240 | |
| أنابيب 1.40 مل (خيط داخلي) | Micronic | MP32131-Z20 | |
| 3-F VSI Micro-HV Introducer Kit | حلول | الأوعية الدمويةطلب مخصص (P15180391) | |
| .018 45 درجة ؛ زاوية انزلاقية | Terumo | RG * GA1818SA | |
| قسطرة دقيقة على شكل ديريكسيون | بوسطن ساينتفيك | M001195230 | |
| أومنيباك | GE | Y510 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن