تسرب أناستوموتيك أو انهيار بعد الجراحة سبب رئيسي للوفيات والمراضة بعد العملية الجراحية. لدينا الجراحة لخلق ملامسة colonic طريقة موثوقة واستنساخه لدراسة آليات الشفاء من أناستوموسيس.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
تسرب أناستوموتيك أو انهيار بعد الجراحة سبب رئيسي للوفيات والمراضة بعد العملية الجراحية. لدينا الجراحة لخلق ملامسة colonic طريقة موثوقة واستنساخه لدراسة آليات الشفاء من أناستوموسيس.
أناستوموسيس المعوية تتم عادة في العمليات الانتخابية والناشئة على حد سواء. وحتى مع ذلك، تسرب أناستوموتيك مضاعفات شديدة يخشى العمليات الجراحية colonic ويمكن أن يحدث في تصل إلى 26% أناستوموسيس الجراحية، مع معدل الوفيات التي تصل إلى 39 في المائة للمرضى الذين يعانون من تسرب من هذا القبيل. حاليا، لا يزال هناك ندرة في البيانات تفاصيل الآليات الخلوية للشفاء أناستوموتيك. وضع استراتيجيات وقائية وأساليب العلاج لتسرب أناستوموتيك يمكن أن تكون إلى حد كبير بوتينتياتيد بفهم أفضل للشفاء أناستوموتيك المناسبة.
مورين نموذج مثالي كما أظهرت الدراسات السابقة أن ملامسة مورين هو الأكثر سريرياً مماثلة للحالة البشرية مقارنة بنماذج حيوانية أخرى. نحن نقدم نموذجا مورين استنساخه بسهولة من ملامسة colonic في الفئران التي ستسمح لمزيد التوضيح للشفاء أناستوموتيك.
مضاعفات شديدة يخشى من ملامسة الجراحية من الأمعاء هو انهيار أناستوموتيك أو تسرب. تسرب أناستوموتيك، الذي يسبب تسرب محتويات إينترالومينال في تجويف البطن، وهو يهدد الحياة ويمكن أن تؤدي بسرعة إلى الانتان داخل البطن؛ صدمة أسعار تتفاوت من 0.3% إلى 5.5% بعد أناستوموسيس الأمعاء، وترتفع إلى بين 0.5% و 26%1،أناستوموسيس colonic2. يمكن أن تكون معدلات الوفيات بعد تسرب يصل إلى 39% بسبب بداية سريعة للانتان والتقدم السريع للموت بعد تلوث إينترابدومينال3. حاليا تستند استراتيجيات وقائية وطرائق العلاج الفيزيولوجيا المرضية التي ليست مفهومة تماما.
حاليا، شفاء أناستوموتيك هو غالباً مقارنة بشفاء الجروح الجلدية درس على نطاق واسع، مما يبرهن على أنه رسالة بفاكس فقيرة نسبيا. الشفاء يحدث في سلسلة من المراحل المتداخلة، بدءاً بالمرحلة الأولى متخلفة. خلال أيام 0-4 بعد إنشاء مفاغره معوية، يعرف استجابة التهابات حادة أن يزيل جرح الحطام الخلوية مرحلة انتقالية. المقبل، على مدى أيام 3-4، يجسد انتشار الليفية وإنتاج الكولاجين في مرحلة فيبروفاسيا. وأخيراً، بعد يوم 10، المعروف فترة طويلة من إعادة عرض الكولاجين مرحلة النضج. من المهم أن نلاحظ أن قوة أناستوموتيك منخفضة جداً، ويعتمد على دعم خارجية من دبابيس توضع جراحيا أو خياطة حتى الكولاجين هو المودعة4. فهم الدور وتوقيت كل طبقة جدار الأمعاء يلعب في التئام الجروح أناستوموتيك والمشاركة في أنواع الخلايا الملتهبة بوساطة مثل الضامة، فضلا عن توضيح علامات بديلة للتنبؤ بالفشل أناستوموتيك أو يمكن النجاح يقلل كثيرا من الاعتلال والوفيات، ونفقات الرعاية الصحية في أعقاب عمليات القولون5.
نموذج مورين ثبت في دراسات سابقة مفيدة في محاكاة ملامسة الإنسان6. وفي حين توجد أمثلة شعبية ومجربة ومدروسة من طراز أناستوموتيك colonic مورين، ولا سيما الطريقة الموضحة كومن et al. 7، لصالح هذه النماذج اللفائفيه أو تصاعدي كولوكولونيك تقنيات أناستوموتيك8. وقد أثبتت الدراسات السابقة للمرضى البشر اختلاف كبير في معدلات التسرب بين اللفائفيه وكولوكولونيك وأناستوموسيس القولون والمستقيم، تسليط الضوء على الحاجة إلى المزيد من النماذج التجريبية في مختلف المواقع التشريحية. أساليب إضافية، وتستخدم شعبيا تهدف إلى تطوير نموذج الذي يقوم عمدا تسرب أناستوموتيك بدلاً من توضيح الآليات الخلوية اللازمة للجرح أناستوموتيك الطبيعي شفاء9. نماذج الفئران حاولت في الماضي ولكن لديها معدلات ديهيسسينسي أناستوموتيك و/أو علامات تسرب (أي تشكيل الخراج) أقل بكثير من البشر والفئران6،7. بالإضافة إلى ذلك، تتوفر خطوط تجريبية أكثر وراثيا في الفئران من الفئران. وهذا يجعل من نموذج الفئران أقل فائدة لطراز أناستوموتيك. وبالإضافة إلى ذلك، كان الخنزير والكلاب نماذج التحقيق السريرية أقل من6،النموذجي موريني7.
ونحن نقترح إجراء آمنة وبسيطة من الناحية التقنية، واستنساخه بسهولة وسرعة لإنشاء أناستوموسيس colonic في نموذج مورين ينبغي تسهيل التحقيق في إليه التبليغ من الجرح أناستوموتيك الشفاء10 .
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول التالية قد تم بموافقة جامعة أوكلاهوما العلوم المركز المؤسسي الحيوان الرعاية الصحية واستخدام اللجنة (IACUC) ويتوافق مع جميع المبادئ التوجيهية الأخلاقية المؤسسية فيما يتعلق باستخدام الحيوانات في البحوث. بالإضافة إلى ذلك، أجريت جميع التجارب وفقا للأنظمة المؤسسية والدولة الاتحادية فيما يتعلق بالبحوث الحيوانية التجريبية.
ملاحظة: لهذا البروتوكول، استخدمنا الفئران C57BL6/ي ولدت في كونجينيك الذكور والإناث في 12 إلى 72 أسبوعا عمر. وأبقى جميع الفئران المستخدمة لهذا الإجراء في منشآتنا غير الحاجز لمدة أسبوع واحد على الأقل قبل العملية للتكيف مع المنطقة الأحيائية المحلية. سمح للحيوانات بالأعلاف لوقت العملية وقمنا باستخدام إعداد الأمعاء الميكانيكية عن طريق الفم لا بيغ المستقيم قبل الإجراء.
1) إنشاء أناستوموسيس
2) حصاد الأنسجة أناستوموتيك
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في 7 أيام بعد الجراحة، وينبغي أن تلتئم ملامسة جيدا. يمكن أن تحصد ملامسة النقاط الزمنية قبل وبعد سبعة أيام لأفضل توضيح مراحل الشفاء أناستوموتيك. في الشكل 9، يبين التحليل النسيجي تليفية (الكولاجين تصور تلطيخ trichrome) توسط استجابة العضلات الملساء ألفا-أكتين ميوفيبروبلاستس إيجابية. ومع ذلك، وجدنا أن تختلف النتائج من تحليلات النسيجي بين الفئران، على وجه التحديد درجة إعادة ابيثيلياليزيشن وتركيز ميوفيبروبلاستس في الموقع أناستوموتيك. نحن تقرير الوفيات اتباع هذا الإ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وهناك العديد من الخطوات الرئيسية لضمان النجاح والحد من معدلات الاعتلال/الوفيات المرتبطة بهذا الإجراء. أولاً، ضمان المعالجة الدقيقة للأنسجة المعوية والعناية لمنع الإصابة الجر عند الدورية الأحشاء لفضح القولون. التوتر لا مبرر له في الأمعاء أو مساريق يمكن الإصابة نخر الأمعاء الأمعاء أو المفرج والسبب بعيداً عن موقع ملامسة. بالإضافة إلى ذلك، ينبغي عدم استخدام الملقط حادة أو الملقط مع الأسنان للتعامل مع الأمعاء.
إصابة الأمعاء منفصلة من موقع ملامسة المخططة، أما أثناء الدوران الحشوي أو تثقيب مع التحقيق...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب يعلن أن لديهم لا تضارب المصالح المالية.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| C57BL6 / J الفئران | جاكسون | لابس # 00664 ؛ | |
| وسادات سفلية ماصة من Fisherbrand ، 20 × 24 بوصة | فيشر ساينتفيك | 14-206-62 | |
| حقل معقم متعدد البطانات ، 18 × 24 بوصة | مستهلكان مستشفى Busse | 696 | قطع ثقب مستطيل ؛ |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| وسادة شاش قطنية معقمة من Fisherbrand ، 4 × 4 بوصة | ، Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| مرهم العيون Puralube petrolatum ، 1/8 أونصة أنبوب | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| كريم مزيل الشعر Nair | Church & amp شركة دوايت | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 ملغ/مل | ريكيت بينكيزر فارما إنك | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 سم مكعب حقنة الأنسولين, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol مسحات الكحول الإعدادية | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI القفازات الجراحية | M & ouml; lnlycke الرعاية الصحية | ALA42675Z | |
| ملقط دقيق مع أسنان | Roboz | RS-5150 | |
| مقص ناعم - أدوات العلوم الدقيقة الحادة | 14060-09 | ||
| ملقط مسنن مستقيم | أدوات العلوم الدقيقة | 11050-10 | |
| سائق إبرة Castro-Viejo | أدوات العلوم الدقيقة | 12565-14 | |
| 0.9٪ ري كلوريد الصوديوم | باكستر | BHL2F7121 | دافئ إلى 37 درجة ؛ C قبل استخدام |
| حقنة 10 مل | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 خياطة مضفرة قابلة للامتصاص Vicryl ، 18 بوصة ، إبرة PS-2 | Henry Schein ؛ | 6546037 | |
| خياطة أحادية الشعيرات الزرقاء 24 بوصة إبرة BV-1 | Henry Schein | 8305H | عادة ما يأتي بذراعين مزدوجين. اقطع الخيط عند نقطة المنتصف لتوليد خيوط جراحية قابلة للاستخدام. |
| مقص كول بارمر ، درجة قياسية ، مستقيم ، 4 بوصات | كول- بارمر | EW-10818-06 | |
| مدلين جيلي تشحيم معقم | Medline | MDS032273H |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.