هنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة Aeromonas في C. ايليجانس. باستخدام هذه الأساليب ملائمة، فمن السهل تقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas .
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تقييم الفوعة والمرضية للعدوى أيروموناس في نموذج ايليجانس كاينورهابديتيس
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
مسببات الأمراض البشرية Aeromonas ثبت سريرياً يسبب التهاب المعدة والأمعاء، وعدوى الجرح، وتسمم الدم، والتهابات المسالك البولية. قد أبلغ معظم البشرية من الأمراض تترافق مع أربعة أنواع من البكتيريا: Aeromonas دهاكينسيس هيدروفيلا Aeromonasو بروني Aeromonasو كافي أيروموناس. نموذج الكائن الحي ايليجانس كاينورهابديتيس هو باكتيريفوري الذي يوفر نموذج عدوى ممتازة لدراسة الآلية المرضية البكتيرية من أيروموناس. وهنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة أيروموناس باستخدام نموذج C. ايليجانس ، بما في ذلك البقاء على قيد الحياة وسمية سائلة وفحوصات نخر العضلات. وكانت نتائج ثلاثة أساليب تحديد ضراوة Aeromonas متسقة. وأبدى دهاكينسيس (أ) أن تكون الأكثر سمية بين 4 أهم الأنواع Aeromonas تسبب العدوى السريرية. وترد هذه الأساليب لتكون وسيلة مريحة لتقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas وتسهم في فهمنا للآلية المرضية للإصابة أيروموناس .
المقدمة
مسببات الأمراض البشرية، Aeromonas، ثبت سريرياً يسبب التهاب المعدة والأمعاء، وعدوى الجرح، وتسمم الدم، والتهابات المسالك البولية1،2. أبلغ معظم الأمراض البشرية المرتبطة بها لتكون مرتبطة مع أربعة أنواع من البكتيريا: 2، دهاكينسيس أيروموناس، هيدروفيلا Aeromonasو بروني Aeromonasو كافي Aeromonas 3 , 4 , 5-من بين الأمراض المعدية أيروموناس ، يمكن أن يسبب التهابات الأنسجة اللينة حادة في معدلات الاعتلال والوفيات في البشر. ملاحظة، نخر العضلات ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1-إعداد متوسطة الثقافة
ملاحظة: انظر الجدول 1 لإعداد الحل.
- إعداد M9 المتوسطة12، حل 1.5 ز خ2ص4، ز 5.66 Na2هبو4و 2.5 g من كلوريد الصوديوم في 500 مل مياه.. انتظر حتى تبرد بدرجة حرارة الغرفة اﻷوتوكﻻف في 121 درجة مئوية عن 20 دقيقة ثم قم بإضافة 0.5 مل من 1 م MgSO4 قبل أول استخدام.
- إعداد السلكية النمو المتوسطة (NGM)12، يحل الجيل الثالث 3g كلوريد الصوديوم، ببتون البكتيرية 2.5 g، واجار ز 20 في 1 لتر مياه.. انتظر حتى تبرد إلى 55 درجة مئوية في حمام مائي اﻷوتوكﻻف في 121 درجة مئوية عن 20 دقيقة ثم قم بإضافة 1 مل م 1 كاكل2، ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
عن طريق اتباع البروتوكولات المذكورة أعلاه، فمن السهل للتفريق بين السمية من أربع سلالات أيروموناس . ويرد في الشكل 1مقايسة البقاء على قيد الحياة من C. ايليجانس . كانت معدلات البقاء على قيد الحياة من C. ايليجانس المصابين بالأنواع Aeromonas ، سيظهر في الترتيب من عالية إلى منخفضة: كافياي أ، فيروني أ، هيدروفيلا (أ)، ودهاكينسيس (أ). على الرغم من أن هناك تنوع من حيث السمية بين وداخل الأنواع Aeromonas ، أظ.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
C. ايليجانس ديدان أسطوانية باكتيريفوروس بطبيعة الحال أن مأخذ البكتيريا كغذاء، وقد وضعت حصانة فطرية تعقيداً للبكتريا أثناء عملية تطورية. اثنين من الأجهزة الرئيسية للحفاظ على ودعم الحصانة هي9،البشرة والأمعاء13. البشرة وعصابات من العضلات C. ايليجانس تشبه هياكل الأنسجة اللينة في الثدييات والبشر6. وبسبب هذه الخصائص، C. ايليجانس قابل للتطبيق ككائن نموذج لدراسة الآلية المرضية للإصابة أيروموناس .
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
ونحن ممتنون للمساعدة من مرفق الأساسية C. ايليجانس في تايوان والميكروبيولوجيا التشخيصية ويعزل "مضادات الميكروبات المقاومة المختبر من الوطني تشنغ الكونغ المستشفى الجامعي" لتقديم أيروموناس . ونعترف أيضا مركز علم الوراثة كاينورهابديتيس (كجك)، وفي وورمباسي. ونشكر أيضا مور سفانا لتحرير المخطوطة.
وأيد هذه الدراسة جزئيا المنح المقدمة من وزارة العلوم والتكنولوجيا من تايوان (آخر 105-2628-B-006-017-MY3) والمستشفى الوطني لجامعة الكونغ تشنغ (نكوه-10705001) بفضل تشن.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| حاضنة شاكر | YIH DER | LM-570R | حضانة البكتيريا |
| K2HPO4 | J.T.Baker | MP021519455 | إعداد متوسط ثقافة |
| KH2PO4 | J.T.Baker | 3246-05 | إعداد متوسط الاستزراع |
| Na2HPO4 | J.T.Baker | MP021914405 | إعداد متوسط ثقافة |
| كلوريد الصوديوم | SIGMA | 31434 | إعداد وسط الاستزراع |
| MgSO4 | SIGMA | M7506 | إعداد متوسط ثقافة |
| أجار | ديفكو | 214530 | إعداد وسط ثقافة |
| CaCl2 | SIGMA | C1016 | إعداد متوسط الاستزراع |
| الكوليسترول | SIGMA | C8503 | إعداد متوسط ثقافة |
| الإيثانول | SIGMA | 32205 | إعداد وسط الثقافة |
| KOH | SIGMA | P5958 | إعداد متوسط الاستزراع |
| 6 سم لوحة بتري | ALPHA PLUS | 46 | إعداد لوحة أجار |
| 96 بئر لوحة | فالكون | 353072 | فحص السائل |
| الببتون البكتيري | Affymetrix / USB | AAJ20048P2 | إعداد متوسط الثقافة |
| مستخلص الخميرة | SIGMA | 92144 | إعداد وسط الثقافة |
| حامض الستريك & H2O | SIGMA | C1909 | إعداد متوسط الاستزراع |
| سترات ثلاثي البوتاسيوم & H2O | SIGMA | 104956 | إعداد متوسط ثقافة |
| FudR | وسيط 1271008 | ثقافة SIGMA | |
| ثنائي الصوديوم EDTA | SIGMA | E1644 | إعداد وسط الاستزراع |
| FeSO4• 7 H2O | SIGMA | 215422 | إعداد وسط ثقافة |
| MnCl2& bull; 4 H2O | SIGMA | 221279 | وسط الاستزراع |
| ZnSO4• 7 H2O | SIGMA | 204986 | إعداد المتوسطة |
| CuSO4< / sub>& bull; 5 H2O | SIGMA | C8027 | إعداد وسط الاستزراع |
| التربتون | SIGMA | 16922 | إعداد متوسط الثقافة |
| نظام المجهر | نيكون | كليس Ti مقلوب | التصوير المجهري |
| كاميرا CCD العلمية | QImaging | Retiga-2000R Fast 1394 | التصوير المجهري |
المراجع
- Parker, J. L., Shaw, J. G. Aeromonas spp. clinical microbiology and disease. Journal of Infection. 62 (2), 109-118 (2011).
- Chao, C. M., Lai, C. C., Tang, H. J., Ko, W. C., Hsueh, P. R. Skin and soft-tissue infections caused by Aeromonas species.....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
