مقالة منهجية

الإرسال المتعدد وركزت التحفيز بالموجات فوق الصوتية مع الفحص المجهري الأسفار

8K مشاهدات

DOI:

10.3791/58781

يناير 7, 2019

في هذه المقالة

ملخص

التحفيز بالموجات فوق الصوتية نابض المنخفضة الكثافة (لبوس) وسيلة لتحفيز ميكانيكية غير الغازية من الخلايا الذاتية أو هندسيا مع عالية الدقة المكانية والزمانية. توضح هذه المقالة كيفية تنفيذ لبوس إلى مجهر برنامج التحصين الموسع-الأسفار وكيفية التقليل من عدم تطابق مقاومة الصوتية على طول المسار بالموجات فوق الصوتية لمنع القطع الميكانيكية غير المرغوب فيها.

الملخص

من خلال التركيز نبضات الموجات فوق الصوتية المنخفضة الكثافة التي تخترق الأنسجة الرخوة، يمثل لبوس تكنولوجيا الطب الحيوي واعدة للتلاعب بأمان وعن بعد إطلاق العصبية وإفراز الهرمونات والخلايا التي أعيدت برمجتها وراثيا. ومع ذلك، ترجمة هذه التكنولوجيا لأغراض التطبيقات الطبية حاليا يعوقها الافتقار إلى الآليات الفيزيائية الحيوية التي تستهدف أنسجة الإحساس والاستجابة للبوس. سيكون نهجاً مناسباً لتحديد هذه الآليات لاستخدام أجهزة الاستشعار البصرية في تركيبة مع ليبوس لتحديد الكامنة وراء مسارات الإشارات. ومع ذلك، يجوز الأخذ بتنفيذ لبوس مجهر الأسفار القطع الميكانيكية غير مرغوب فيه بسبب وجود واجهات المادية التي تعكس، واستيعابها وينكسر الموجات الصوتية. تعرض هذه المقالة إجراء خطوة بخطوة لإدماج لبوس للمجاهر المتوفرة تجارياً تستقيم برنامج التحصين الموسع-الأسفار مع التقليل من تأثير واجهات البدنية على طول المسار الصوتي. ويرد وصف إجراءات بسيطة لتشغيل محول عنصر مفرد بالموجات فوق الصوتية وإدخال المنطقة المحورية لمحول في جهة موضوعية. ويتضح استخدام ليبوس مع مثال للعابرين التي يسببها ليبوس الكالسيوم في الخلايا المستزرعة جليوبلاستوما البشرية تقاس باستخدام التصوير بالكالسيوم.

المقدمة

العديد من الأمراض تتطلب شكلاً من أشكال التدخل الطبي الغازية. هذه الإجراءات غالباً ما تكون باهظة الثمن، ومحفوفة بالمخاطر وتتطلب فترات الانتعاش وهكذا إضافة عبئا على نظم الرعاية الصحية. الطرائق العلاجية عدم الغازية لديها القدرة على توفير بدائل أرخص وأكثر أمنا للإجراءات الجراحية التقليدية. ومع ذلك، هي غالباً ما تكون محدودة النهج غير الغازية الحالية مثل العلاج الصيدلاني أو transcranial التحفيز المغناطيسي بالمفاضلة بين اختراق الأنسجة والقرار الزمانية المكانية والآثار غير المرغوب فيها خارج الهدف. وفي هذا السياق، يشكل الموجات فوق الصوتية مركزة تكنولوجيا غير الغازية واعدة مع القدرة على التعامل مع الوظائف البيولوجية داخل الأنسجة بدرجة عالية من الدقة الزمانية المكانية ومحدودة خا....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1-زراعة الخلايا على فيلم البوليستر سمعيا شفافة

  1. التصفح بحجم 12 مم ثقب في الجزء السفلي من صحن الثقافة القياسية 35 ملم باستخدام الصحافة-حفر عمودي. نقل التدريبات ببطء وملابس حماية العين. إزالة قطعة من البلاستيك تعلق على الجزء السفلي من الطبق باستخدام شفرة لإنشاء سطح أملس على الجانب الخارجي (الشكل 2).
  2. تطبيق طبقة رقيقة من الإيبوكسي البحرية-الصف أو الغراء في السطح السفلي الخارجي للطبق.
  3. وضع فيلم بوليستر (2.5 ميكرون سمك) ضد السطح السفلي الخارجي للطبق، واضغط بشدة للتأكد من الإيبوكسي/الغراء ينتشر بالتساوي بين الفيلم وسطح البلاستيك السميك. اجذب الفيلم بطريقة الطرد مركزي بأصابع الاتهام إنشاء سطح مستو (

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

الرقم 5 مثال عن تجربة ليبوس متعدد مع تصوير الكالسيوم. جليوبلاستوما الخلايا (A-172) كانت تزرع على امبم المغلفة البوليستر الفيلم في مستنبت القياسي (تستكمل مع المضادات الحيوية المصل و 1% 10%) والمحتضنة مع المراسل المراعية للكالسيوم الفلورية فلوو-4 صباحا. الخلايا تم تصويرها باستخدام عدسة غمر X 10 ومضيئة مع مصدر ضوء LED بيضاء والإضاءة الفلورية تم تجميعها باستخدام مجموعة موحدة من تصفية بروتينات فلورية خضراء. وكان يطبقها لبوس يدوياً قبل القيادة محول 4 ميغاهرتز مع ال.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

مزايا رئيسية لمركزه بالموجات فوق الصوتية هو قدرته على توصيل الطاقة الميكانيكية أو الحرارية غير إينفاسيفيلي للعينات البيولوجية مع عالية الدقة الزمانية. تقنيات أخرى تهدف إلى حفز ميكانيكيا الخلايا عادة ما توظف الغازية المسابير المادية (على سبيل المثال، الخلية دس) أو يتطلب تفاعل أشعة الليزر ذات الطاقة العالية مع الأشياء الخارجية (مثلاً، ملاقط بصرية). تدفئة المغناطيسي يمكن الحرارة المواقع المكانية محددة داخل عينات بيولوجية ولكن يتطلب وجود جسيمات نانوية مغناطيسية الخارجية. من ناحية أخرى، التدفئة غير الغازية ا.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

ونحن نشكر الدكتور ميخائيل شابيرو ورزنيك نيكيتا لمناقشات مثمرة. هذا العمل كانت تدعمها أموال بدء التشغيل من "الغربية جامعة ل" العلوم الصحية، والمعاهد الوطنية للصحة منح R21NS101384.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مجهر عمودي بحجم عمل كبيرمجهر عمودي ThorlabsCERNA
مع حجم عمل كبيرScientificaSliceScope
مكونات بصرية ميكانيكيةThorlabsn / a
إبرة هيدروفونONDA Corporationسلسلة HNP / C / R / A / T + AH / G مضخم
مسبق إبرة هيدروفونالدقة الصوتياتn / a
الألياف البصرية الهيدروفونONDA CorporationHFO سلسلة
الألياف البصرية الهيدروفونالدقة الصوتياتn / a
راسم الذبذباتKeysight TechnologyDSOX2004A (4 قنوات 70 ميجا هرتز)
مولد وظيفةKeysight Technology33500B (20 ميجا هرتز أحادي القناة) مضخم
طاقة RFصناعات الملاحة الإلكترونية (ENI)325LA ، 525LA ، 240L ، 350L ، A075 ، 2100L ، 3100LA
مضخم طاقة RFإلكترونيات & الابتكار (E& ; I)
محول طاقة بالموجات فوق الصوتية الغاطسةأوليمبوسمركز محول
الغمر بالموجات فوق الصوتية محولBenthowave أداةHiFu محول الطاقة سلسلة BII-76
محول طاقة بالموجات فوق الصوتية الغاطسةالصوتيات الدقيقةبيزو سيراميك أو HiFu
محول طاقة بالموجات فوق الصوتية الغمرمختبر الموجات فوق الصوتيةمحولات الطاقة HiFu المصنوعة لطلب
فيلم MatrigelCorningVWR 80094-330
فيلم مايلر 2.5 ميكرونChemplexCAT.NO:107
مكونات بصرية طاقة محولات الطاقة

المراجع

  1. Elhelf, I. A. S., et al. High intensity focused ultrasound: The fundamentals, clinical applications and research trends. Diagnostic and Interventional Imaging. 99 (6), 349-359 (2018).
  2. Toccaceli, G., Delfini, R., Colonnese, C., Raco, A., Peschillo, S.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة