بنيومونيكتومي اليسرى القوارض أسلوب قيمة في الأبحاث ارتفاع ضغط الدم الرئوي. نقدم هنا، بروتوكولا لوصف الإجراء pneumonectomy الفئران والرعاية بعد العملية الجراحية لضمان الحد الأدنى من معدلات الاعتلال والوفيات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
بنيومونيكتومي اليسرى القوارض أسلوب قيمة في الأبحاث ارتفاع ضغط الدم الرئوي. نقدم هنا، بروتوكولا لوصف الإجراء pneumonectomy الفئران والرعاية بعد العملية الجراحية لضمان الحد الأدنى من معدلات الاعتلال والوفيات.
في هذا البروتوكول، ونحن بالتفصيل الخطوات الإجرائية الصحيحة والاحتياطات اللازمة لنجاح أداء بنيومونيكتومي اليسرى وحمل الهيئة العامة للإسكان في الفئران مع إدارة إضافية مونوكروتاليني (MCT) أو SU5416 (سكر). ونحن أيضا مقارنة هذين النموذجين لنماذج أخرى من الهيئة العامة للإسكان استخداماً في البحوث. في السنوات القليلة الماضية، قد نقل تركيز نماذج حيوانية من الهيئة العامة للإسكان نحو دراسة إليه أنجيوبروليفيريشن آفات بليكسيفورم، التي تدفق الدم الرئوية زيادة يعتبر الدور كمشغل هام في التنمية للالتهاب الرئوي إعادة عرض الأوعية الدموية. واحد من النماذج القوارض الواعدة أكثر من غيرها لزيادة تدفق الرئوي هو pneumonectomy اليسرى الانفرادية جنبا إلى جنب مع "ضربة ثانية" MCT أو سكر. إزالة الرئة اليسرى ويؤدي إلى تدفق الدم الرئوي المضطرب وزيادة وإعادة عرض الأوعية الدموية. حاليا، لا يوجد أي إجراء مفصل لجراحة بنيومونيكتومي في الفئران. هذه المادة تفاصيل بروتوكول خطوة بخطوة لإجراء العمليات الجراحية pneumonectomy والرعاية اللاحقة للعمليات الجراحية في ذكور الفئران سبراغ داولي. باختصار، تم تخديره من الحيوان ويتم فتح الصدر. حالما يتم تصور الشريان الرئوي الأيسر والاوردة الرئوية والقصبات الهوائية، كانت هي متصلة وهو إزالة الرئة اليسرى. صدره ثم إغلاقه وتعافي الحيوان. واضطر الدم لتعميم فقط في الرئة اليمنى. هذا ارتفاع ضغط الأوعية الدموية يؤدي إلى انسداد الشرايين الرئوية الصغيرة ويعيد البناء التدريجي. ضرب الثاني MCT أو سكر هو جراحة بعد أسبوع واحد المستخدمة للحث على الخلل في بطانية. المزيج من زيادة تدفق الدم في الرئة والخلل غشائي تنتج الهيدروكربونات شديدة. الحد الأساسي من هذا الإجراء أنه يتطلب مهارات الجراحة العامة.
ارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي (PAH) مرض تدريجي وقاتلة تتميز بزيادة في تدفق الدم الرئوي وزيادة مقاومة الأوعية الدموية، والتهاب، ويعيد البناء من الأوعية الدموية الرئوية الصغيرة1. هذا يعيد البناء عادة ينتج آفات الأوعية الدموية التي تعرقل وطمس الشرايين الرئوية الصغيرة، تسبب تضيق الأوعية وزيادة afterload البطين الأيمن2. توجد بعض العلاجات الدوائية الناجحة للهيئة العامة للإسكان؛ نتيجة لذلك، معدل الوفيات المتصلة بالهيئة العامة للإسكان ما زال عاليا. في الآونة الأخيرة، انتقل تركيز البحث على بل من ارتفاع ضغط الدم الرئوي صوب إليه الانتشار angio التي تدفق الدم الرئوية زيادة يعتبر الدور كمشغل هام في تنمية الرئوية والأوعية الدموية إعادة عرض3،4.
وقدمت نماذج حيوانية لارتفاع ضغط الدم الرئوي الأفكار الهامة التي تساعد على شرح الفسيولوجيا المرضية لهذا المرض، وكانت بمثابة منصة للمخدرات والخلية والجينات والبروتين التسليم. تقليديا، كانت ضغط الدم المزمن الرئوي الناجم عن نقص والنموذج MCT الرئة الإصابة النماذج الرئيسية المستخدمة لدراسة الهيدروكربونات الفيزيولوجيا المرضية5. ومع ذلك، أنها ليست كافية لإنتاج نمط الدموية الرئوية زيادة تدفق ونيوينتيمال لإعادة عرض مقارنة بالتغييرات الموصوفة في المرضى البشرية. نموذج نقص مزمن في نتائج القوارض في سماكة جدران الأوعية مع تضيق الأوعية التاكسج دون محو angio الأوعية الرئوية الصغيرة6. بالإضافة إلى ذلك، حالة نقص عكسها. وهكذا، نموذج نقص أيضا غير كافية لإنتاج الهيدروكربونات شديدة. نموذج إصابة الرئة MCT استخلاص بعض الخلل في بطانية ولكن لا تتطور الآفات أوبليتيراتيفي الأوعية الدموية المعقدة الموجودة في البشر مع الهيدروكربونات الأولية شديدة في الفئران2. بالإضافة إلى ذلك، تميل الجرذان المعالجة MCT يموت من السمية التي يسببها MCT الرئة وأمراض الكبد مسد الانسداد والتهاب العضلة القلبية وليس من الهيئة العامة للإسكان2. وأخيراً، بنيومونيكتومي وحدها لا يكفي لإنتاج آفات نيوينتيمال في الأوعية الرئوية الصغيرة في فترة قصيرة من الزمن. وبعد بنيومونيكتومي، هناك الحد الأدنى من ارتفاع في الضغط الشرياني الرئوي7. في البشر، وهو جيد التحمل في pneumonectomy عندما تكون الرئة contralateral صحية7.
ومع ذلك، الإجراء pneumonectomy اليسرى جنبا إلى جنب مع MCT أو سكر مفيد نظراً لأنه يحاكي زيادة انسداد تدفق الدم، ويؤدي إلى انسداد الأوعية الدموية يعيد البناء مماثلة للهيئة العامة للإسكان السريرية الشديدة. يتم تنفيذ في بنيومونيكتومي في الرئة اليسرى، الذي أفشل 1 فقط، بدلاً من التركيز على الحق، الذي قد الفصوص الأربعة. إذا تمت إزالة الرئة اليمنى، سيكون غير قادر على التعويض عن قصور تنفسي الحيوان. في طراز بنيومونيكتومي-MCT، يطور نمط نيوينتيمال يعيد البناء في أكثر من 90% من الحيوانات تعمل معاملة7. وبالمثل، مزيج النتائج سكر وبنيومونيكتومي في الهيئة العامة للإسكان الحادة، تتميز بآفات الأوعية الدموية angio أوبليتيراتيفي والانتشار والمبرمج و RV الخلل الوظيفي8. الإجراء pneumonectomy غادر أيضا فائدة مقارنة بسائر الإجراءات الجراحية للحث على الهيئة العامة للإسكان. سابقا تتضمن النماذج الموصوفة في الفئران لزيادة تدفق الدم الرئوي إلى الرئتين التحويلة كابل أورتو أو مفاغره الشريان الرئوي سوبكلافيان. هذه النماذج هي معقدة للغاية7،9،،من1011. للقيام تحويله كابل أورتو، قد البطن للحيوان ليتم فتحه. يتم وضعها التحويلة في الشريان الاورطي البطني، مما يزيد من تدفق الدم إلى كل أجهزة البطن بدلاً من مجرد الرئتين، وبالتالي، وقتاً أطول بكثير لتطوير الهيئة العامة للإسكان. بالإضافة إلى ذلك، من الصعب تحديد تدفق الدم عن طريق التحويلة، بينما مع بنيومونيكتومي تدفق الدم للزوجي الرئة المتبقية. وقد مفاغره الشريان الرئوي subclavian أيضا العديد من المضاعفات. يمكن أن يؤدي تدفق الدم الشرياني الوريد تجلط الدم من ملامسة والنزيف. مثل التحويلة كابل أورتو، من الصعب تحديد تدفق الدم من خلال ملامسة. وعلاوة على ذلك، هو أسلوب مكلفة وصعبة تتطلب مهارات جراحية الأوعية الدموية. بنيومونيكتومي اليسرى الانفرادية يتضاعف تدفق الدم وإجهاد القص في الرئة كونترالاتيرال، وفي تركيبة مع MCT أو سكر، الأسباب النتائج الفسيولوجية والتشريحية المرضية نموذجية من الهيئة العامة للإسكان وهو الخلية البطانية تلف8، 12.
ويرد الجدة من هذه المخطوطة في البروتوكول الجراحية مفصلة وشاملة جداً من بنيومونيكتومي اليسرى في الفئران ومناقشة التحديات التقنية والفسيولوجية لهذه النماذج. لأن هذا البروتوكول غير متوفر حاليا، يعتقد المحققون الكثير من هذا النموذج استخدام صعبة جداً. قد تواجه المحققين الذين أدوا pneumonectomy اليسرى ارتفاع معدلات الوفيات ومعدلات الإصابة بالأمراض المرتبطة بخسارة لا داعي لها من الحيوانات، والمساس بالتقييم العلمي. بدلاً من ذلك، سيستخدم العديد من النماذج الكلاسيكية مثل حقن MCT أو نقص مزمن أو فقط بنيومونيكتومي لإنشاء الهيئة العامة للإسكان. بيد أن هذه النماذج أقل فعالية بكثير من المزيج من MCT أو سكر مع بنيومونيكتومي اليسرى. والغرض الأساسي من هذه المادة هو تقديم البروتوكول الجراحية أولاً مفصلة واستنساخه ل pneumonectomy أحادية الجانب الأيسر في الفئران وتوفر أفضل نموذج الجراحية من الهيئة العامة للإسكان. الجمع بين هذا البروتوكول بالنسبة بنيومونيكتومي أحادية الجانب الأيسر مع MCT أو SU5416 سيتم السماح لمحققين بإنشاء نموذج أكثر فعالية بكثير وذات الصلة سريرياً لقصف شديد لدراسة الآلية المرضية لهذا المرض القاتل.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
عليها الإجراءات الواردة أدناه "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) من "كلية الطب آيكان" في جبل سيناء. وتلقى جميع الفئران الرعاية الإنسانية امتثالا لجبل سيناء "دليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية".
1-التحضير لعملية جراحية
2-إعداد وتنبيب للفئران
3-إعداد بيئة معقمة
4-غادر Pneumonectomy إجراء العمليات الجراحية
5-بعد العمليات الجراحية الانتعاش
6-إدارة "ضرب الثاني" MCT أو سكر
7-محطة الحصاد
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وفقا لنظام تصنيف المقبولة، وارتفاع ضغط الدم الرئوي تتميز بضغط شريان الرئوي يعني (مباب) تتجاوز الحدود القصوى لضغط الشريان الرئوي العادي (أي 25 مم زئبق). في بنيومونيكتومي + مجموعة MCT، وضعتها الهيئة العامة للإسكان الشديدة يوم 21 مع مباب زيادة (الشكل 1). ويحسب مباب بالصيغة:

الضغو...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في الرئتين المتضررة من الهيئة العامة للإسكان، وانتشار الأوعية الدموية مع تشكيل نيوينتيمال والطمس للشرايين الرئوية نتيجة التغيرات الفسيولوجية الشديدة، وفشل البطين الأيمن والوفيات المبكرة7،8. التغييرات التي أدخلت على جدران السفينة زيادة المقاومة لتدفق الدم، زيادة الضغط الشرياني والبطين الأيمن. في المراحل المبكرة من الهيئة العامة للإسكان، عادة 3 أسابيع بعد إدارة MCT أو سكر، وضعت الفئران تغييرات نسيجية غير محدد مثل تضخم الآنسي وسماكة أدفينتيتيال موسكولاريزيشن الشرايي...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وقد المؤلفون لا تضارب محتمل في المصالح.
هذه المخطوطة وأيده المعاهد الوطنية للصحة منح 7R01 HL083078-10 المنح المقدمة من "جمعية القلب الأمريكية" AHA-17SDG33370112 والوطنية معاهد للصحة المعاهد الوطنية للصحة K01 HL135474 إلى Y.S. ومن HL133554 R01 معاهد الصحة الوطنية بام
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الشفرة الجراحية | Bard-Parker | 371215 | شق |
| Forane (Isoflurane ، USP) | Baxter | NDC 10019-360-40 | التخدير |
| BD 16 G | BD | 381157 | أنبوب التنبيب ، أنبوب الصدر |
| BD 1 مل حقنة الأنسولين | BD | 329652 | إعطاء buprinex بعد الجراحة |
| Biogel Surgeons القفازات الجراحية | Biogel | 30460-01 | قفازات جراحية معقمة |
| Wahl BravMini + Trimmer | Braintree Scientific | CLP-41590 P | موقع جراحي للحلاقة |
| SU5416 | Cayman Chemical | 13342 | Sugen ؛ |
| الألياف البصرية | Cole-Parmer | EW-41723-02 | ضوء للتنبيب |
| Surgipro II 4-0 خياطة | Covidien | VP831X | إغلاق العضلات الوربية |
| Polysorb 5-0 خياطة | Covidien | GL-885 | إغلاق الجلد |
| متوسط الشريحة أعلى غرفة الحث | DRE البيطرية | 12570 | توصيل الأكسجين والأيزوفلوران |
| DRE Compact 150 القوارض آلة التخدير | DRE البيطرية | 373 | توصيل الأكسجين والأيزوفلوران |
| للأوعية الصغيرة | أدوات العلوم الدقيقة | 18000-00 | لتقليل النزيف |
| جهاز التنفس الصناعي للحيوانات الصغيرة VentElite | جهاز هارفارد | 55-7040 | جهاز التنفس |
| ماوس STAT Jr | كينت العلمي | MSTAT-JR | التأكسج النبضي وجهاز مراقبة معدل ضربات القلب |
| مستشعر مقياس التأكسج النبضي بمخلب الماوس كينت | Scientific | SPO2-MSE | التأكسج النبضي ومستشعر مخلب معدل ضربات القلب |
| PhysioSuite RightTemp | Kent Scientific | PS-02 | وسادة درجة الحرارة |
| PVP الإعدادية الحل | Medline | MDS093944 | تنظيف الموقع الجراحي |
| ثنى مبطن | بولي مدلاين غطاء NON21002Z | للحيوان | |
| 3 مل حقنة | Medline | SYR103010 | إدارة السوائل بعد الجراحة |
| مجموعات الجراحة المجهرية ، Integra & nbsp ؛ | الأدوات الجراحية Miltex | 95042-540 | : منظار سلكي عادي ، مسبار مزدوج الأطراف ، مقص قزحية ماكفرسون فاناس مستقيم ، مقص قزحية مستقيم |
| ملقط مرقئ - مايكرو جاكوبسون موسكيتو | ميلتكس | 17-2602 | البعوض |
| بوبرينورفرين حمض الهيدروكلوريك 0.3 مجم / مل | Par Pharmaceutical | NDC 42023-179-01 | مسكنات الآلام |
| مقص كولي مايو المنحني | بيلينغ | 352090 | مقص كبير |
| ملقط جيرالد للأنسجة | بيلينغ | 351900 | ملقط |
| Wangesnsteen ملقط الأنسجة | بيلينغ | 342929 | ملقط غير رضحي |
| بيلينغ حامل إبرة الأوعية الدموية الرقيقة | بيلينغ | 354962DG | حامل إبرة |
| كروتالين | سيجما ألدريتش | C2401-1G | MCT |
| Surflash 20 G قسطرة IV | Terumo | SR * FF2051 | لقراءة الضغط أثناء حصاد الأعضاء |
| ADVantage PV System مع 1.2 Fr القسطرة | Transonic Inc | ADV500 | سجل الشريان الرئوي وضغط البطين الأيمن |
| متوسط Hemoclip | Weck | 523700 | أوعية ربط |
| مفتوحة ربط مشبك الربط ؛ قضيب | مشبك | الدم Weck Horizon | 237081 |
| مجهر جراحي | تكبير Zeiss OPMI MD | 1808 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.