يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تأثير الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة على تشكيل اوستيوكلاست وانتشار اوستيوكلاست السلائف في المختبر

5.5K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/59089

⸱

مارس 18, 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Division of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics, Department of Translational Medicine, Tohoku University Graduate School of Dentistry

في هذه المقالة

ملخص

ويشمل هذا البروتوكول تشريح العظام الطويلة موريني والعزلة نخاع العظام، توليد الضامة نخاع العظام وإنتاج الآكلة مستعمرة بلعم حفز المنشط مستقبلات ليجند العامل النووي كابا-ب (رانكل) وعامل (م-CSF) باستخدام أو ألفا عامل نخر الورم (تنف-α) واعتقالهم من قبل الأضداد المضادة-ج-fms، مستقبلات M-CSF.

الملخص

يعيد البناء العظام عملية معقدة، وأنها تنطوي على فترات للترسيب وارتشاف. ارتشاف العظام هو عملية بموجبها العظام هو موزعة حسب الآكلة في الاستجابة للمحفزات المختلفة. اوستيوكلاست السلائف تفرق في الآكلة مولتينوكلير ردا على مستعمرة بلعم حفز المنشط مستقبلات ليجند العامل النووي كابا-ب (رانكل) وعامل (م-CSF). تحت ظروف مرضية، الشخصية سيتوكين مختلفة وتنطوي على مزيج السيتوكينات الالتهابية. ألفا عامل نخر الورم (تنف-α) واحد من السيتوكينات الأكثر أهمية كما أنها وجدت بكميات كبيرة في المناطق المعنية مع عظام النهايات التحريضية. والغرض من هذا البروتوكول هو توفير أسلوب الذي يتم عزل مورين نخاع العظام لتوليد الآكلة عن طريق الاستقراء مع الخدمات القطرية م وأما رانكل أو تنف-α التي سوف تكون منعت في وقت لاحق بزيادة جرعة من الأضداد المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة، مستقبلات ل M-CSF. وتبرز هذه التجربة القيمة العلاجية للأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة في أمراض التهاب العظام ارتشاف.

المقدمة

الآكلة خلايا متخصصة للغاية، وأنها تفرق من الخلايا الجذعية المكونة للدم من خلال دمج متعددة اوستيوكلاست السلائف. أنها ضرورية لإعادة عرض العظام صحية والمساهمة في ارتشاف العظم باثولوجي المرتبطة بأمراض عظمية الالتهابات مثل التهاب المفاصل وأمراض اللثة1.

الدالة أوستيوكلاستوجينيسيس واوستيوكلاست هي توسط عاملين أساسيين؛ مستعمرة بلعم حفز المنشط مستقبلات للعامل النووي كابا-ب يجند (رانكل) وعامل (م-CSF). M-CSF ورانكل هامان ل التمايز اوستيوكلاست2. وثمة عامل آخر هو ما ثبت للحث على تشكيل اوستيوكلاست من نخاع العظم الضامة في المختبر هو عامل نخر الورم ألفا (تنف-α)3،،من45. تنف-α تشكيل اوستيوكلاست وساطة قد ثبت أن تكون حاسمة بالنسبة لعظام النهايات في أمراض العظام المدمرة مثل التهاب المفاصل6وامراض اللثة7و8من هشاشة العظام بعد سن إلياس.

ج-fms مستقبلات غشاء للخدمات القطرية م ويتوسط العمل به. دور ج-fms توثيقاً جيدا في الأدب كما أنها بينت أن إدارة جسم مضاد ضد ج-fms (الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة) تماما اعتقل أوستيوكلاستوجينيسيس في نموذج لالتهاب المفاصل كذلك في تنف-α التي يسببها تقرحات العظام بينما وكان أوستيوكلاستوجينيسيس بعيدة من المشترك ملتهبة قوية لا تزال9. الإدارة للأجسام المضادة-ج-fms تثبيط ارتشاف العظم وتشكيل اوستيوكلاست الناجمة عن lipopolysaccharide (LPS) في الماوس كالفاريا10 كذلك كما هو الحال في التهاب اللثة الناجم عن لبس نموذج11. وعلاوة على ذلك، أعاقت الأجسام المضادة-ج-fms ارتشاف الجذر الميكانيكية الناجمة عن الإجهاد أثناء حركة الأسنان تقويم الأسنان12، فضلا عن حركة الأسنان تقويم الأسنان وارتشاف العظام المرتبطة بتقويم الأسنان حركة13.

M-CSF أبلغ إلى الوظائف الأخرى التي تعتبر أساسية للاستجابة المناعية المضيف. نظراً لغياب م-CSF في الفئران op/op مع الالتهاب الرئوي البكتيري يؤدي إلى زيادة عبء البكتيرية ونشر البكتيريا للكبد مع نخر كبدي14. ولذلك، المهم M-CSF للاستجابة المناعية في الحماية من العدوى.

وتوضح هذه الدراسة بفعل تأثير الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة على م-CSF ورانكل أو تنف-α تشكيل اوستيوكلاست في المختبر والخدمات القطرية م التي يسببها انتشار السلائف اوستيوكلاست. هذا البروتوكول يوضح عزل خلايا نخاع العظام مورين من العظام الطويلة، والخطوات لتوليد الضامة نخاع العظام (بم) التي تعتبر كسلائف اوستيوكلاست والحث على التفريق بين بم في الآكلة مولتينوكلير اثنين الأساليب؛ أما رانكل أو تنف-α. ويقارن البروتوكول أيضا إلقاء القبض على أوستيوكلاستوجينيسيس في كلتا الطريقتين باستخدام الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة.

العملية التي انتزعت نخاع العظام واستخدامها لاحقاً لتوليد السلائف اوستيوكلاست يعول عليها في إنتاج كميات كبيرة من الثقافات اوستيوكلاست الصرفة التي يمكن استخدامها في العديد من التطبيقات المصب مثل اختبار المخدرات. استخدام رانكل أو تنف-α للحث على أوستيوكلاستوجينيسيس في هذا البروتوكول يميز أوستيوكلاستوجينيسيس كعملية الفسيولوجية (رانكل) من أوستيوكلاستوجينيسيس كعملية باثولوجي (تنف-α)، التي توفر بدورها اثنين من الإجراءات البديلة لتوجيه قرار منها واحد متفوقة من حيث المواد الكاشفة لاستخدامها في تطبيقات المتلقين للمعلومات. ويوفر هذا البروتوكول أيضا أسلوب الذي يمكن أن نحدد تركيز مناسب للأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة التي يمكن استخدامها بأمان للدراسات المعنية بارتشاف العظام وأمراض عظمية في وقت لاحق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

وأجريت جميع الإجراءات الحيوانية ورعاية الحيوانات وفقا لجامعة توهوكو القواعد والأنظمة.

1-مورين اللكتات التشريح والمناولة

  1. قبل التشريح، ملء صفيحة مع حوالي 50 مل من α-الفنزويلية تبعاً لحجم الحاوية ووضعه على الجليد. وهذا سيكون بمثابة وعاء جمع حتى اكتمال تشريح العظام جميع. لهذا، وبعد ذلك استخدام التجارب، α-الفنزويلية التي تحتوي على 10% الجنيني البقري المصل (FBS) و 100 وحدة دولية/مل البنسلين G 100 ميكروغرام/مل والستربتوميسين.
  2. Euthanize C57Bl/6J الماوس باستنشاق جرعة زائدة من إيسوفلوراني 5%.
  3. إصلاح الماوس في موقف ضعيف استخدام دبابيس اخترقت من خلال أشجار النخيل والقدمين ورذاذ دقيق مع الإيثانول 70%.
  4. جعل شق جلد باستخدام مقص الجراحية المعقمة وملاقط على مستوى الورك وتوسيعه وصولاً إلى القدمين تعريض العضلات.
  5. قطع وتر إرفاق في عضلة الفخذ ووتر إرفاق أوتار العضلات بالعظام. قشر خارج العضلات فضح مفاصل الورك والركبة. تحديد موقع هذه الأوتار سيخفف تحرير عضلات كلا من المرفقات بها دون ترك علامات الأنسجة اللينة. لا تقطع في العظام.
  6. ضع المقص بين رأس عظم الفخذ ومساحة مشتركة، ويقتطع من تحرير عظم الفخذ ولكن الحفاظ العظام سليمة. وهذا سيمكن مفرزة من العظام دون المخاطرة بتعريض نخاع العظام.
  7. وبالمثل قص بعيداً في عضلات إرفاق إلى الساق. قص الساق خالية من تمسكها في الكاحل الحفاظ العظام سليمة لتجنب التلوث.
  8. كشط أي الأنسجة اللينة المتبقية من عظم الفخذ والساق باستخدام شفرات مقص وكيمويبي ووضعه في لوحة مع α-الفنزويلية على الجليد.

2-موريني اللكتات العزلة نخاع العظام

  1. ملء حقنه إبرة ز 30 مع α-الفنزويلية.
  2. قطع الساق والفخذ بعيداً عن الركبة.
  3. قص نهايات العظام الطويلة من كلا الجانبين باستخدام مقص.
  4. عقد العظام من مدخل المنجم باستخدام الملقط وأدخل الإبرة في المساحة نخاع العظام وبطء تدفق محتوى النخاع في طبق ثقافة 6 سم. سوف تظهر العظام البيضاء، مشيراً إلى استخراج كافة المحتويات نخاع العظام. كرر كل العظام.
  5. استخراج سلالة نخاع العظام باستخدام مصفاة خلية نايلون ميكرومترات 40 إلى 50 مل الأنبوبة المخروطية أجهزة الطرد المركزي وأجهزة الطرد المركزي في 300 x ز لمدة 5 دقائق.
  6. تجاهل المادة طافية وتغسل مع 5 مل من α-الفنزويلية والطرد المركزي في 300 x غ 5 كحد أدنى لتكرار الغسيل لما مجموعة 2 مرات.
  7. ريسوسبيند بيليه في 10 مل من α-الفنزويلية وأداء عدد خلايا استخدام هيموسيتوميتير النحو التالي:
    1. جعل إضعاف 1:1 تعليق الخلية بإضافة 10 ميكروليتر من تعليق خلية إلى 10 ميكروليتر من 0.4% تريبان الأزرق في أنبوب 1.5 مل و "الماصة؛" مرة واحدة.
    2. تغطية قاعة هيموسيتوميتير مع غطاء شريحة ونقل تعليق صبغ هيموسيتوميتير. من المهم عدم أوفيرفيل أو أونديرفيل الدائرة وتسمح بتعليق لملء الدائرة بعمل شعري.
    3. مكان هيموسيتوميتير في مرحلة مجهر. استخدام 10 x الهدف، التركيز على ساحة مركز. حساب عدد الخلايا كل الالتزام بخطوط 3. للتأكد من أنه لا يتم حساب الخلايا مرتين، عد زوايا العلوي الأيمن والأيسر من كل مربع. ستظهر الخلايا الميتة زرقاء داكنة، وهذه مستبعدة من العد.
  8. اعتماداً على التطبيق المصب، بذور الخلايا إلى سفينة ثقافة مناسبة. لهذه التجربة خاصة، اتبع الباب 3.

3-توليد بم

  1. الثقافة الطبق البذور 1 × 107 خلايا/10 مل في 10 سم وإضافة 100 م-CSF نانوغرام/مليلتر. تركيز السائل النخاعي م النهائي 100 نانوغرام/مليلتر من الثقافة المتوسطة. احتضان ثقافة عند 37 درجة مئوية، 5% CO2 لمدة 3 أيام.
  2. بعد 3 أيام، إزالة المتوسطة الثقافة وغسل الخلايا بقوة مع 10 مل من الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) مرتين لإزالة الخلايا غير ملتصقة، إضافة 5 مل من درجة حرارة الغرفة 0.02% التربسين-يدتا في برنامج تلفزيوني واحتضان في 37 درجة مئوية، 5% CO2 لمدة 5 دقائق.
  3. فصل الخلايا من بيبيتينج شامل. تأكد من أنه قد تم فصل الخلايا بمراعاة ثقافة تحت مجهر (الخلايا يجب أن تظهر مستدير الزوايا والعائمة في وسائل الإعلام). إذا كانت الخلايا لا تزال تعلق، كرر بيبيتينج شامل لفصل لهم. عندما تم فصل الخلايا، إضافة 5 مل من α-الفنزويلية لإلغاء تنشيط رد فعل.
  4. جمع الخلايا في أنبوب 50 مل المخروطية وأجهزة الطرد المركزي في 300 غ س لأدنى 5 تجاهل المادة طافية، وتغسل مع 5 مل من α-الفنزويلية.
  5. الطرد المركزي في 300 x ز لمدة 5 دقائق وريسوسبيند بيليه في 10 مل من α-الفنزويلية.
  6. نفذ عدد خلايا كما تم وصفه سابقا في خطوة 2.7.1.
  7. الثقافة الطبق البذور 1 × 106 خلايا/10 مل في 10 سم وإضافة 100 م-CSF نانوغرام/مليلتر. تركيز السائل النخاعي م النهائي 100 نانوغرام/مليلتر من الثقافة المتوسطة. احتضان ثقافة عند 37 درجة مئوية، 5% CO2 لمدة 3 أيام.

4-توليد الآكلة من بم كسلائف اوستيوكلاست

  1. وبعد 3 أيام، حصاد الخلايا المرفقة التي تمثل بم كسلائف اوستيوكلاست، في أعقاب خطوات 3.2-3.7.
  2. بم البذور في 5 × 104 خلايا/200 ميكروليتر من α-الفنزويلية في صفيحة جيدا 96. إضافة رانكل لتركيز نهائي من 50 نانوغرام/مل أو تنف-α لتركيز نهائي من 100 نانوغرام/مليلتر. إضافة M-CSF لتركيز نهائي من 100 نانوغرام/مليلتر لكل بئر.
  3. إضافة الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة (تركيزات نهائية من 0، 1، 10، 100، 1000 نانوغرام/مل) لكل بئر.
  4. احتضان عند 37 درجة مئوية، 5% CO2 لمدة 4 أيام. تغيير وسائل الإعلام كل يوم لمدة 4 أيام.

5-طرطرات مقاومة حمض الفوسفاتيز (TRAP) وصمة عار

  1. وبعد 4 أيام حضانة، بلطف نضح المتوسطة الثقافة لكل بئر. تغسل كل مرة جيدا مع 200 ميكروليتر من درجة حرارة الغرفة 1 x برنامج تلفزيوني.
  2. إضافة 200 ميكروليتر من الفورمالين 10% لكل بئر للتثبيت واحتضانها ح 1 في درجة حرارة الغرفة. نضح في الفورمالين وغسل كل جيدا 3 مرات مع المياه..
  3. إضافة 200 ميكروليتر من 0.2% X-100 تريتون في برنامج تلفزيوني لكل خير بالنسبة بيرميبيليزيشن واحتضانها ح 1 في درجة حرارة الغرفة. نضح X-100 تريتون وغسل كل جيدا 3 مرات بالمياه.
  4. إضافة 200 ميكروليتر من فخ الحل وصمة عار لكل بئر. تصور وصمة عار تحت المجهر. وسوف يستغرق من 10-30 دقيقة لوصمة عار لتطوير بشكل صحيح.
  5. نضح بوصمة عار ويغسل كل جيدا 3 مرات مع المياه، والهواء الجاف. الحفاظ على درجة حرارة الغرفة لاستخدامها في مزيد من المراقبة.

6-انتشار الإنزيم

  1. بم البذور كسلائف اوستيوكلاست في 5 × 103 خلايا/200 ميكروليتر من α-الفنزويلية في صفيحة جيدا 96. إضافة M-CSF لتركيز نهائي من 100 نانوغرام/مليلتر لكل بئر.
  2. إضافة الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة (تركيزات نهائية من 0، 1، 10، 100، 1,000 نانوغرام/مل) واحتضان في 37 درجة مئوية، 5% CO2 لمدة 3 أيام دون تغيير المتوسطة.
  3. وبعد 3 أيام، غسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني 1 x. إضافة 100 ميكروليتر من α-الفنزويلية لكل بئر.
  4. إضافة 10 ميكروليتر خلية العد الحل كيت واحتضان في 37 درجة مئوية، 5% CO2 لح 2 وتحديد امتصاص لكل بئر في 450 نانومتر باستخدام قارئ ميكروسكوبية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

والغرض من هذا البروتوكول هو تقييم تأثير الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة على تشكيل اوستيوكلاست حضور رانكل أو تنف-α، وتحديد أثر م-CSF على انتشار السلائف اوستيوكلاست. وقد قدمنا في هذا البروتوكول، عملية موثوقة التي تتولد كميات كبيرة من الثقافات اوستيوكلاست نقية. لقد قدمنا أيضا طريقة لاختبار تركيز الأجسام المضادة-ج-fms مناسبة لتثبيط تشكيل اوستيوكلاست تحت ظروف ثقافة مختلفة.

تشكيل اوستيوكلاست في M-ثقافة الخدمات القطرية + رانكل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

في هذه الدراسة، ونحن التحقيق في تأثير الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة على تشكيل المستحثة رانكل اوستيوكلاست، اوستيوكلاست تنف α-المستحثة بتشكيل وانتشار السلائف اوستيوكلاست CSF المستحثة م. وجدنا أن المبلغ الفعلي للأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة لتثبيط أوستيوكلاستوجينيسيس بين تشكيل المستحثة رانكل اوستيوكلاست وتنف-α التي يسببها اوستيوكلاست تشكيل وانتشار الخدمات القطرية المستحثة م السلائف اوستيوكلاست مختلفة.

رانكل يتوسط أوستيوكلاستوجينيسيس حضور م الخدمات القطرية في المختبر، وتجربة ا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

هذا العمل كان تدعمها جزئيا كاكينهي JSPS منحة من "الجمعية اليابانية" "تعزيز العلوم" (رقم 16 ك 11776 إلى حاء ك، ك 17 رقم 17306 إلى ك. س.، رقم 16 ك 20637 إلى ك. ك.، رقم 16 ك 20636 إلى م. س.، رقم 18 ك 09862 م أولاً.).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
المضادة المضادة ل c-FmsAFS98 ، أحادية النسيلة للفئران ، مضادة للمورين ، الجسم المضاد c-Fms (IgG2a)
TNF- & alpha ؛الفئران المؤتلف TNF- & alpha; أعدت في مختبرنا. TNF- & ألفا; جزء (كدنا) مستنسخ بواسطة RT-PCR واستنساخه في pGEX-6P-I (Amersham Biosciences ، Piscataway ، NJ) لتوليد بروتين اندماج GST. ضريبة السلع والخدمات - TNF- & تم التعبير عنه في خلايا الإشريكية القولونية BL21 (ستراتاجين ، لا جولا ، كاليفورنيا). تم تحلل الخلايا في ظل ظروف غير تمسخ و GST-TNF- & alpha. تم تنقيتها فوق عمود الجلوتاثيون السيفاروسي. تم قطع ضريبة السلع والخدمات بواسطة PreScission Protease (Amersham Biosciences) من قبل الشركة المصنعة s الاتجاهات وتمت إزالته بواسطة عمود الجلوتاثيون-سيفاروس.
RANKLPEPROTECH315-11المؤتلف الفئران sRANK Ligand ، المصدر: E. القولوني< / em>
M-CSFالإنسان المؤتلف M-CSF. 1/10 المجلد من CMG14 &ndash ؛ 12 طافي لثقافة خط الخلية عند 5x106  الخلايا في طبق ثقافة معلق 10 سم.
&alpha ؛ -MEMWakoمع L-Glutamine والفينول
الأحمر مصل الأبقار الجنينيBiowests1820-500مصل الأبقار الجنيني طبق
ثقافةالفرنسي Corning100 مم × 20 مم طبق
نمط 96 بئرThermofischer ScientificNun clon Delta Surface
Cell Count Kit-8Dojindo ، Kumamoto ، اليابان
قارئ Microplateشروق الشمس REMOTE. تكان اليابان ، كاواساكي ، اليابان
مصفاة الخليةCorning40 & mu ؛ م أنبوب طرد مركزي من النايلون
كورنينج50 مل غطاء CentriStar
Triton X-100واكوبولي أوكسي إيثيلين (10) أوكتيفينيل الأثير
الأجسام الأصل

المراجع

  1. Crotti, T. N., Dharmapatni, A. A., Alias, E., Haynes, D. R. Osteoimmunology: Major and Costimulatory Pathway Expression Associated with Chronic Inflammatory Induced Bone Loss. Journal of Immunology Research. 2015, 281287(2015).
  2. Teitelbaum, S. L. Bone resorption by osteoclasts. Science. 289 (5484), 1504-1508 (2000).
  3. Azuma, Y., Kaji, K., Katogi, R., Takeshita, S., Kudo, A. Tumor necrosis factor-alpha induces differentiation of and bone resorption by osteoclasts. Journal of Biological Chemistry. 275 (7), 4858-4864 (2000).
  4. Kobayashi, K., et al. Tumor necrosis factor alpha stimulates osteoclast differentiation by a mechanism independent of the ODF/RANKL-RANK interaction. Journal of Experimental Medicine. 191 (2), 275-286 (2000).
  5. Kim, N., et al. Osteoclast differentiation independent of the TRANCE-RANK-TRAF6 axis. Journal of Experimental Medicine. 202 (5), 589-595 (2005).
  6. Redlich, K., et al. Osteoclasts are essential for TNF-alpha-mediated joint destruction. Journal of Clinical Investestigation. 110 (10), 1419-1427 (2002).
  7. Abu-Amer, Y., Ross, F. P., Edwards, J., Teitelbaum, S. L. Lipopolysaccharide-stimulated osteoclastogenesis is mediated by tumor necrosis factor via its P55 receptor. Journal of Clinical Investestigation. 100 (6), 1557-1565 (1997).
  8. Zha, L., et al. TNF-alpha contributes to postmenopausal osteoporosis by synergistically promoting RANKL-induced osteoclast formation. Biomedicine & Pharmacotherapy. 102, 369-374 (2018).
  9. Kitaura, H., et al. M-CSF mediates TNF-induced inflammatory osteolysis. Journal of Clinical Investigation. 115 (12), 3418-3427 (2005).
  10. Kimura, K., Kitaura, H., Fujii, T., Hakami, Z. W., Takano-Yamamoto, T. Anti-c-Fms antibody inhibits lipopolysaccharide-induced osteoclastogenesis in vivo. FEMS Immunology and Medical Microbiology. 64 (2), 219-227 (2012).
  11. Kimura, K., et al. An anti-c-Fms antibody inhibits osteoclastogenesis in a mouse periodontitis model. Oral Diseases. 20 (3), 319-324 (2014).
  12. Kitaura, H., et al. An M-CSF receptor c-Fms antibody inhibits mechanical stress-induced root resorption during orthodontic tooth movement in mice. Angle Orthodontist. 79 (5), 835-841 (2009).
  13. Kitaura, H., et al. An anti-c-Fms antibody inhibits orthodontic tooth movement. Journal of Dental Research. 87 (4), 396-400 (2008).
  14. Bettina, A., et al. M-CSF Mediates Host Defense during Bacterial Pneumonia by Promoting the Survival of Lung and Liver Mononuclear Phagocytes. Journal of Immunology. 196 (12), 5047-5055 (2016).
  15. Dougall, W. C., et al. RANK is essential for osteoclast and lymph node development. Genes & Develpoment. 13 (18), 2412-2424 (1999).
  16. Wiktor-Jedrzejczak, W., et al. Total absence of colony-stimulating factor 1 in the macrophage-deficient osteopetrotic (op/op) mouse. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 87 (12), 4828-4832 (1990).
  17. Yang, P. T., et al. Increased expression of macrophage colony-stimulating factor in ankylosing spondylitis and rheumatoid arthritis. Annals of the Rheumatic Diseases. 65 (12), 1671-1672 (2006).
  18. Takei, I., et al. High macrophage-colony stimulating factor levels in synovial fluid of loose artificial hip joints. The Journal of Rheumatology. 27 (4), 894-899 (2000).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

عزل نخاع العظمالمعالجة بعامل تحفيز مستعمرات البلعميات (M-CSF)تحفيز رابط نوى تفعيل NF-κB (RANKL)عامل نخر الورم ألفا (TNF Alpha)مقايسة تكوين ناقضات العظمتكاثر الخلاياالعظام الالتهابية
تأثير الأجسام المضادة-ج-المكتب الاتحادي للهجرة على تشكيل اوستيوكلاست وانتشار اوستيوكلاست السلائف في المختبر
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.