الغرض من هذه الورقة هو تحديد التغيرات في مستويات الإجهاد بعد الزيارة إلى ثلاثة إعدادات مختلفة ووصف الأساليب المستخدمة في تحديد مستويات الإجهاد على أساس مقاييس الكورتيزول اللعابي، α-amylase، وتقرير ذاتي النفسي الصك.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الغرض من هذه الورقة هو تحديد التغيرات في مستويات الإجهاد بعد الزيارة إلى ثلاثة إعدادات مختلفة ووصف الأساليب المستخدمة في تحديد مستويات الإجهاد على أساس مقاييس الكورتيزول اللعابي، α-amylase، وتقرير ذاتي النفسي الصك.
وقد تم ربط زيارة البيئات الطبيعية بالحد من الإجهاد النفسي. على الرغم من أن معظم البحوث المتعلقة بالإجهاد اعتمدت على أشكال التقرير الذاتي، فإن عددا متزايدا من الدراسات يتضمن الآن الهرمونات والمحفزات البيولوجية المتصلة بالإجهاد، مثل الكورتيزول وα-amylase، لقياس مستويات الإجهاد. يعرض هنا بروتوكول لدراسة الآثار على مستويات الإجهاد البيوفيزيائي والنفسي بعد زيارة إلى ثلاثة مواقع مختلفة مع مستويات مختلفة من الطبيعة. وتقاس مستويات الإجهاد النفسي البيوفيزيائية والمبلغ عنها ذاتيا فور دخول المواقع المختارة وقبل مغادرة الزوار للموقع مباشرة. باستخدام طريقة "سال لعابه"، يتكون المقياس البيوفيزيائي من عينات 1-2 مل من اللعاب التي تقدمها مواضيع الدراسة عند الدخول إلى واحد من ثلاثة مواقع الدراسة. كما هو منصوص عليه في الأدب الموجود، يتم جمع اللعاب في غضون 45 دقيقة من الإطار الزمني بعد نهاية مشاركة الزائر في الموقع. بعد جمع اللعاب، يتم تسمية العينات ونقلها إلى مختبر بيولوجي. الكورتيزول هو المتغير البيوفيزيائي للاهتمام في هذه الدراسة وتقاس باستخدام عملية ELISA مع قارئ لوحة TECAN. لقياس الإجهاد المبلغ عنه ذاتياً، فإن استبيان الإجهاد المتصور (PSQ)، الذي يبلغ عن مستويات القلق والتوتر والفرح والمطالب المتصورة. ويتم جمع البيانات في جميع المواقع الثلاثة في وقت متأخر من بعد الظهر وحتى وقت مبكر من المساء. وعند مقارنتها في جميع البيئات الثلاثة، فإن مستويات الإجهاد، التي تقاس بالعلامات البيولوجية والتقارير الذاتية على حد سواء، أقل بكثير بعد الزيارة إلى البيئة الأكثر طبيعية.
وقد تم ربط مستويات الإجهاد المرتفعة منذ فترة طويلة إلى العديد منالظروف الصحية الخطيرة مثل أمراض القلب والسمنة والاضطرابات النفسية 1،2،3. وتشير مجموعة متزايدة من البحوث إلى أن القرب من البيئات الطبيعية أو زيارتها إلى البيئات الطبيعية مثل الحديقة والمناظر الطبيعية غير المتقدمة يمكن أن يكون لها تأثير ملحوظ على الرفاه النفسي وانخفاض مستويات الإجهاد1،4، 5،6،7،8،9،10. وقد شملت تفسيرات لآثار البيئات الطبيعية ومستويات الإجهاد ما يلي: (1) البيئات الطبيعية توفر أماكن للنشاط البدني8و11 و (2) زوار البيئات الطبيعية لديهم القدرة على التركيز على المزيد من العمليات الفكر غير المهمة، مما يؤدي إلى انخفاض في التعب الانتباه12. لتحديد آثار الطبيعة على الحد من الإجهاد، وتستخدم هذه الدراسة تقرير ذاتي من الإجهاد النفسي (PSQ) واثنين من المؤشرات الحيوية القائمة على اللعاب، الكورتيزول وα-amylase، بعد زيارة إلى ثلاثة مواقع ترفيهية مختلفة. وتختلف هذه المواقع بين مستويات "الطبيعة" وتشمل بيئة من نوع البرية، وحديقة البلدية، ومرافق اللياقة البدنية والترفيه المحلية.
تهدف هذه الدراسة إلى معالجة الأسئلةالبحثية التالية: (RQ 1) هل هناك اختلافات في مستويات الإجهاد البيوفيزيائي تقاس بالكورتيزول اللعابي وα-amylase عند مقارنتها عبر جميع المواقع الثلاثة (أي الطبيعية، شبه الطبيعية، بنيت)؟ (RQ2) هل هناك اختلافات في مستويات الإجهاد النفسي تقاس بـ PSQ (تتجلى في أربعة منشآت: المطالب، والمخاوف، والتوتر، والفرح) عند مقارنتها عبر جميع المواقع الثلاثة (أي الطبيعية، شبه الطبيعية، التي بنيت)؟
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وتتبع هذه الدراسة السياسات والمبادئ التوجيهية لبرنامج حماية البحوث البشرية التابع لمجلس الاستعراض المؤسسي لجامعة إنديانا.
1. اختيار الموقع
2- فرز المشاركين وإعدادهم
3. الظروف والتصميم التجريبي
4. عينات اللعاب
5. القياس الكمي α-amylase
ملاحظة: في هذا التبّع، فإن α-amylase hydrolyzes 2-chloro-p-nitrophenyl-α-D-maltotrioside to 2-chloro-nitrophenol وأشكال الجلوكوز، 2-كلورو-ف-نيتروفينل-α-D-مالتوزيد، مالتوتريو، الجلوكوز. يتم رصد رد الفعل عند امتصاص 405 نانومتر، والذي يتوافق مع نشاط α-amylase في العينة. يوضح هذا التبّاق الخطيّة بين 0 و2000 U/L.


6. القياس الكمي للكورتيزون
ملاحظة: في هذا الاختبار، يتم قياس الكورتيزول المجاني في اللعاب باستخدام منحنى قياسي الكورتيزول. يتم إضافة المعايير والعينات المخففة إلى لوحة ميكروتيدر التي هي مغلفة مسبقا مع الأجسام المضادة. يتم إضافة متقارن الكورتيزول بيروكسيداز إلى الآبار، تليها إضافة جسم مضاد أحادي النسيلة إلى الكورتيزول. كمية الكورتيزول / بيروكسيداز ربط المتقارن يقلل مع زيادة تركيز الكورتيزول في العينة.
| القياسيه | #1 | #2 | #3 | #4 | #5 | #6 | #7 |
| حجم المخزن المؤقت للتخزين (ميكرولتر) | 225 | 125 | 125 | 125 | 125 | 125 | 125 |
| الاضافه الي ذلك | مؤشر ستوك ستد | #1 | #2 | #3 | #4 | #5 | #6 |
| حجم الإضافة (μL) | 25 | 125 | 125 | 125 | 125 | 125 | 125 |
| التركيز النهائي (pg/mL) | 3200 | 1600 | 800 | 400 | 200 | 100 | 50 |
الجدول 1: جدول إعداد المنحنى القياسي.

الشكل 1 مثال تخطيط اللوحة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
7. القياس النفسي (استبيان الإجهاد المتصور)
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وصف العينة
وباستخدام تقنية أخذ عينات من الحصص، وظفت هذه الدراسة 35 زائرا من كل موقع من المواقع الثلاثة. وإجمالا، تم تعيين 105 مواضيع في هذه الدراسة، من بينهم 63 من الذكور و 42 من الإناث. وبلغ متوسط أعمار الزوار المعينين من ثلاثة مواقع مختلفة 25.9 سنة (الموقع ألف)، و 37.2 سنة (الموقع باء)، و 28.8 سنة (الموقع جيم). كما سُجلت ترددات زيارات الأشخاص إلى المواقع الثلاثة المختارة. بالنسبة للموقع ألف والموقع C، زار معظم المواضيع هذا الموقع مرة إلى ثلاث مرات في الأسبوع. وبالنسبة للمواضيع الموجودة في الموقع باء...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
والهدف من هذه الدراسة هو تحديد التغيرات المحتملة في الإجهاد باستخدام الأدوات البيوفيزيائية والنفسية بعد الزيارة الترفيهية إلى ثلاثة أماكن مختلفة مع مستويات مختلفة من الطبيعة. وقد ثبت كل من الكورتيزول وα-amylase لتكون مؤشرات موثوق بها لمستويات الإجهاد النفسي. وقد تم تكييف إجراء دراسة الأناليس الموصوفة في هذه الدراسة إلى شكل 96 جيدا. عندما تكون مستويات الأناليز في اللعاب مرتفعة ، تحدث تغيرات الامتصاص بسرعة. ولذلك، فمن الأهمية بمكان الحد من عدد العينات التي تم تحليلها في وقت واحد، حيث أن عدد العينات التي يمكن تحليلها في وقت...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ويعلن صاحبا البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
تم تمويل هذه الدراسة جزئيا من خلال برنامج منحة أبحاث الكلية (FRGP) برعاية من خلال كلية الصحة العامة في جامعة إنديانا، بلومينغتون، IN. ويود صاحبا البلاغ أن يشكرا الدكتورة أليسون فويت وميليسا بيج على مساعدتهما التحريرية وتعليقاتهما البناءة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مجموعة المقايسة المناعية لإنزيم الكورتيزول | DetectX | K003-H1 | تم تصميم مجموعة المقايسة المناعية لإنزيم الكورتيزول لقياس الكورتيزول الموجود كميا في مستخلصات البراز المجففة واللعاب والبول والمصل والبلازما وعينات وسائط الاستزراع. |
| ملصقات مبردة للتخزين المبرد | Fisherbrand | 5-910-A | مادة لاصقة فريدة تقاوم درجات الحرارة القصوى |
| مجموعة كاشف الأميليز السائل (CNPG3 | ) Pointe Scientific | A7564 | لتحديد الحركية الكمي لنشاط ألفا الأميليز في المصل البشري. |
| البولي بروبلين المستديرة السفلية 2 مل مع غطاء الخيط الخارجي | Greiner Bio-One | 07-000-257 | 2.0 مل U-BTM Cryo.s البولي بروبيلين المعقم |
| الإعداد قارئ صفيحة دقيقة متعدد الأوضاع | BioTek | إنه قارئ صفيحة دقيقة أحادي القناة ومضان وإضاءة يستخدم تصميم بصريات مزدوجة لإجراء قياسات العينات بتنسيق صفيحة دقيقة. |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.