يمكن استخدام المسرعات الخطية السريرية لتحديد الآثار البيولوجية لمجموعة واسعة من معدلات الجرعة على الخلايا السرطانية. نناقش كيفية إعداد مسرّع خطي للتشخيصات القائمة على الخلايا والاختبارات للخلايا الجذعية السرطانية التي نمت كأورام في التعليق وخطوط الخلايا نمت كثقافات ملتصقة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
استخدام مسرّع خطي لإجراء تجارب البيولوجيا الإشعاعية في المختبر
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يبقى العلاج الإشعاعي أحد الأركان الأساسية لإدارة السرطان. بالنسبة لمعظم أنواع السرطان، هو العلاج غير الجراحي الأكثر فعالية لأورام debulk. هنا، ونحن نصف طريقة لتشعيع الخلايا السرطانية مع مسرع خطي. وقد أدى تقدم تكنولوجيا المسرع الخطي إلى تحسين دقة وكفاءة العلاج الإشعاعي. ولا تزال الآثار البيولوجية لمجموعة واسعة من الجرعات الإشعاعية ومعدلات الجرعات مجالا مكثفا للتحقيق. استخدام المسرعات الخطية يمكن أن يسهل هذه الدراسات باستخدام جرعات ذات صلة سريريا ومعدلات الجرعة.
المقدمة
العلاج الإشعاعي هو علاج فعال لأنواعكثيرة من السرطان 1،2،3،4. التشعيع معدل جرعة عالية اضافية جديدة نسبيا في العلاج الإشعاعي ويتحقق من خلال التطورات التكنولوجية الأخيرة في المسرعات الخطية5. وتشمل المزايا السريرية لمعدل جرعة عالية اضافية على التشعيع معدل الجرعة القياسية تقصير وقت العلاج وتحسين تجربة المريض. كما توفر المسرّعات الخطية إعدادًا سريريًا لدراسات بيولوجيا الإشعاع القائمة على ثقافة الخلايا. وكانت الآثار البيولوجية والعلاجية لمعدلات الجرعة الإشعاعية والجرعة محور اهتمام أخصائيي الأورام الإشعاعية وعلماء الأحياء على....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. إعداد الخلية لثقافة الخلية تعليق
- ثقافة الخلايا الجذعية الورم الدبقي في وسائل الإعلام ثقافة الخلايا الجذعية في ما يقرب من 5 × 106 خلية / 10 سم لوحات في حاضنة ثقافة الخلية مع 5٪ CO2،95٪ الرطوبة النسبية في 37 درجة مئوية.
ملاحظة: شرط ثقافة الخلية هو نفسه خلال كافة الإجراءات. وسائط الإعلام المستخدمة في البروتوكول هي وسائط كاملة. - قبل يومين من التشعيع المقرر، جمع الخلايا الجذعية الورم الدبقي من لوحة الثقافة مع ماصة معقمة 5 مل في أنبوب الطرد المركزي 15 مل في غطاء محرك السيارة الثقافة.
- طرد مركزي الخلايا التي تم جمعها في 200 × ز لمدة 3 دقائق في جهاز طرد مركزي كونترتوب.
- تخلص من ثقب وهضم بيليه الخلية (حو....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
للتحقيق في تأثير دورة الخلية من معدل الجرعة القياسية والأشعة معدل جرعة عالية اضافية من قبل مسرع خطي، تم إعداد ثلاث عينات من الخلايا الجذعية الورم الدبقي باستخدام هذا البروتوكول وجمع 24 ساعة بعد التشعيع17: عينة تحكم واحدة التي لم تكن مشعة (الشكل2ألف)، عينة واحدة مشعة بـ 400 م/دقيقة (وحدة رصد، 4.2 غراي/دقيقة معدل الجرعة القياسية، الشكل 2باء)إلى 4 غراي، وعينة أخرى تشعع بـ 2100 MU/min (21.2 غراي/دقيقة معدل جر.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
العلاج الإشعاعي هو جزء لا يتجزأ من إدارة السرطان. وتسعى الجهود الجارية إلى تحسين فعالية وكفاءة العلاج الإشعاعي. وقد أتاحت التطورات في تكنولوجيا المسرع الخطي الفرصة لعلاج المرضى بدقة وسلامة لم يسبق لهما مثيل. لأن معظم المرضى يتم التعامل مع الأشعة السينية عالية الطاقة من المسرّعات الخطية، يمكن تطبيق الدراسات التي تدرس الآثار البيولوجية لمجموعة كبيرة من معدلات الجرعة التي أجريت على المسرعات الخطية بسهولة على المرضى. كانت هناك عدة تقارير تطبق المسرعات الخطية على بحوث البيولوجيا الإشعاعية، ولكن النتائج مختلطة وهناك حاجة إلى د.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
نشكر قسم الأورام الإشعاعية في كليفلاند كلينك على استخدام المسرعات الخطية. نشكر الدكتور جيرمي ريتش على موهبته السخية من الخلايا الجذعية الشبيهة بالورم الدبقي. وقد تم دعم هذا البحث من قبل كليفلاند كلينك.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <قوي > مادة < / قوي > | |||
| خلية شبيهة بالورم الدبقي 387 | هدية من الدكتور جيريمي ريتش | ||
| 293 خلية | ATCC | CRL-1573 | |
| وسائط ثقافة الخلايا الجذعية العصبية | Thermo Fisher Scientific | 21103049 | Neurobasal < sup>TM < / sup> media |
| DMEM | Thermo Fisher Scientific | 10569044 | |
| مصل الأبقار الجنيني | ثيرمو فيشر العلمي | 16000044 | |
| البنسلين / الستربتومايسين | ثيرمو فيشر العلمي | 15140-122 | |
| المؤتلف البشري EGF البروتين | R & D Systems | 236-EG-01M | |
| المؤتلف البشري FGF الأساسي | R & أنظمة D | 4114-TC-01M | |
| B-27 ™ مكمل | حراري فيشر العلمي | 17504044 | |
| الصوديوم بيروفات | ثيرمو فيشر العلمي 11360070 | ||
| L-Glutamine | Thermo Fisher Scientific | 25030164 | |
| Tripsin-EDTA | Thermo Fisher | 25200056 | |
| مصفوفة البروتين خارج الخلية | Corning | 354277 | MatrigelTM< / sup> |
| كيميائية من الإيثانول | فيشر | A4094 | |
| <قوي> معدات< / قوي> | |||
| 10 سم طبق ثقافة الخلية | Denville | T1110 | |
| 3.5 سم طبق ثقافة | الخلية الولايات المتحدة الأمريكية Scientific Inc. | CC7682-3340 | |
| 22 × 22 مم غطاء زجاجي زلة | المجهر الإلكتروني | 72210-10 | |
| 15 مل أنبوب الطرد المركزي | توماس Scientific | 1159M36 | |
| 50 مل أنبوب الطرد المركزي | توماس Scientific | 1158R10 | |
| 5 مل ماصة | فيشر Scientific | 14-955-233 | |
| مساعدة الماصة | فيشر Scientific | 13-681-06 | |
| خلاط دوامة | فيشر Scientific | 02-215-414 | |
| جهاز طرد مركزي | Eppendorf | 5810R | |
| مسرع خطي | Varian | n / a | |
| مادة مكافئة للماء | شركة Sun Nuclear | Corporation 557 | ماء صلب TM< / sup> |
| <قوي >إعداد الكاشف< / قوي> | |||
| DMEM وسائط | 10٪ مصل بقري للجنين (FBS) ، 2 ملي ل-جلوتامين ، 100 وحدة / مل بنسلين G ، 100 ميكرو ؛ جم / مل من الستربتومايسين في 500 مل وسائط زراعة | ||
| 10 مل B27 الملحق ، 20 & ز hFGF ، 20 وميكرو ؛ ز hEGF ، 2 ملي ل-جلوتامين ، 100 وحدة / مل بنسلين G ، 100 وميكرو ؛ جم / مل من الستربتومايسين في 500 مل من الوسائط |
المراجع
- Stupp, R., et al. Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma. The New England Journal of Medicine. 352 (10), 987-996 (2005).
- Stupp, R., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
