يقدم هنا بروتوكول لجمع وتحليل الحركية ثلاثية الأبعاد من الحركة الرباعية في القوارض للدراسات ما قبل السريرية.
مقالة منهجية
يقدم هنا بروتوكول لجمع وتحليل الحركية ثلاثية الأبعاد من الحركة الرباعية في القوارض للدراسات ما قبل السريرية.
فائدة أنظمة تحليل الحركة الحركية ثلاثية الأبعاد (ثلاثية الأبعاد) محدودة في القوارض. ويرجع جزء من سبب هذا القصور إلى استخدام خوارزميات معقدة ونمذجة رياضية تصاحب إجراءات جمع البيانات ثلاثية الأبعاد وتحليلها. يوفر هذا العمل منهجية مفصلة بسيطة وسهلة الاستخدام وخطوة بخطوة لتحليل مشية الحركة ثلاثية المفعول أثناء حركة المشي في الفئران الصحية والعصبية الصادمة باستخدام نظام التقاط الحركة من ست كاميرات. كما تقدم تفاصيل عن 1) معايرة النظام في إعداد تجريبي مخصص للحركة الرباعية، 2) جمع البيانات لحركة المشي الحركة في الفئران الكبار باستخدام علامات المتمركزة على جميع الأطراف الأربعة، 3) الخيارات المتاحة لتتبع الفيديو ومعالجة، و 4) الأساسية 3D توليد البيانات الحركية والتصور والقياس الكمي للبيانات باستخدام المدمج في برامج جمع البيانات. وأخيرا، يقترح أن يتم توسيع فائدة هذا النظام التقاط الحركة لدراسة مجموعة متنوعة من السلوكيات الحركية قبل وبعد الصدمات العصبية.
في القوارض، يتم تقييم العجز الحركي في الأطراف الخلفية والخلفية بعد الاضطرابات العصبية عادة باستخدام أنظمة تسجيل ذاتية1. تم اعتماد الأنظمة الآلية2 و3و4 و5 لتحليل المشية ولكنها تعاني من العيوب، لأن النتائج الأولية تستند إلى تحليل البصمة وتفشل في التقاط الأهمية الحاسمة المتغيرات الحركية القطاعية والمشتركة التي يمكن أن تكشف عن حركية حقيقية لحركات الأطراف2. وبما أن معظم بارامترات المشي مترابطة، فإن هناك حاجة إلى مجموعة من بارامترات المشي لفهم التعويضات التي تعتمدها الجرذان لتقييم العجز الحركي تقييماً كاملاً.
في العقد الماضي، تم تطوير العديد من أنظمة تحليل الحركة ثلاثية الدناق6 للبحوث الطبية الحيوية في البشر. وقد نجحت هذه النظم وأثبتت فعاليتها في التقاط العجز في الحركة في البالغين الأصحاء من البشر، فضلا عن الحركة المتحركة المتغيرة للمشي6،7. في القوارض، تتوفر حاليا أنظمة الحركة الحركية ثلاثية الأبعاد تعتمد خوارزميات معقدةونمذجة لسلوك الحركة وتستخدم تقنيات تحليل البيانات المتطورة 8،9،10،11 ، والتي تحد في نهاية المطاف من تعدد استخداماتها. وعلاوة على ذلك، فإن الأساليب المستخدمة لجمع البيانات مع معظم أنظمة التقاط الحركة ثلاثية المدة غير موضحة بشكل كاف في المؤلفات. ولا توجد تفاصيل عن إجراءات جمع البيانات وتحليلها، والقيود، والتقنيات التي ينطوي عليها استخدام النظام بفعالية.
وبالتالي، فإن أحد المفاهيم المشتركة بين الباحثين هو أن التقييمات الحركية لتتبع الحركة ثلاثية الجوانب هي إجراءات جهدية وتستغرق وقتا طويلا تحتاج إلى الخبرة التقنية وتحليل البيانات تفصيلا. والغرض من هذا العمل هو تقسيم بروتوكولات جمع البيانات وتحليلها ووصف المنهجية من خلال عملية تدريجية بحيث تكون موضوعية وسهلة التعلم ويمكن تناولها بصورة منهجية. اليوم، هناك تركيز ناشئ على تقييم السلوك الحركي الوظيفي بطريقة أكثر شمولا ومنهجية بعد الإصابات العصبية والتدخلات في الدراسات ما قبل السريرية.
في مجال الحركة الرباعية، المعروضة هنا هو استخدام نظام تتبع الحركة ثلاثية الأبعاد التي يمكن أن توفر معلومات إضافية مثل وضع الجسم، ودوران مخلب فيما يتعلق محاور الجسم، والعلاقات بين المفاصل، ومعلومات أكثر دقة فيما يتعلق بالتنسيق، كل ذلك في حين تصور في الوقت نفسه الحيوان كله من جميع الطائرات. وهذا، بدوره، يمكن أن تكشف عن الاختلافات الحرجة في السلوك الحركي داخل وبين الفئران صحية والمصابة من خلال نتائج متعددة. مع تحليل حركي أكثر دقة ودقيقة وموضوعية، يتم تقليل خطر الاستدلال خطأ من آثار التدخل. يتم تصور البيانات التي تم إنشاؤها من هذا البرنامج التقاط الحركة إطار بإطار لنوعية الحركة ويمكن تعقبها تلقائيا، وجمع البيانات أو القياس الكمي لا يتطلب أي خوارزميات إضافية أو النمذجة. والهدف من هذا العمل هو توفير التفاصيل والاعتبارات المنهجية التي ينطوي عليها جمع البيانات وتحليل الجوانب الحركية للمشية ثلاثية الجوانب أثناء حركة المشي في الفئران السليمة والمصابة بالحبل الشوكي. هذا البروتوكول مخصص للاستخدام من قبل الباحثين قبل السريرية الذين يستخدمون نماذج الفئران العصبية في التجارب.
وقد أجريت هذه الدراسة وفقا لتوصيات المعاهد الوطنية للدليل الصحي لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية. تمت الموافقة على البروتوكول من قبل لجنة البحوث الحيوانية في جامعة ستوني بروك.
1. إعداد نظام التقاط الحركة
2. معايرة نظام التقاط الحركة
3. تدريب وإعداد الحيوان لحركة المطحنة
4. التقاط الحركة
5. تتبع الحركة
6- التحليل الحركي
يوضح هذا البروتوكول منهجية لجمع البيانات الحركية ثلاثية الدناتيك الكمية وتحليلها لحركية المطحنة في القوارض باستخدام برنامج بسيط مدمج. وتظهر النتائج أن البروتوكول ممكن في جمع وتحليل الحركية الحركية الحركية الرباعية الحركة في الفئران السليمة والمصابة بالحبل الشوكي. يجب على الباحثين الذين لديهم خبرة في التعامل مع الفئران وضع علامات على الفئران، ثم معايرة واستخدام نظام التقاط الحركة دون أي قضايا حرجة. يتم إنشاء البيانات بسهولة دون استخدام خوارزميات معقدة.
هنا، تم تنفيذ البروتوكول في صحة والحبل الشوكي المصابة (C5 الحق استئصال) الفئران. ولأغراض هذه المخطوطة، لا تظهر سوى النتائج التمثيلية. بشكل عام، كان من السهل الحصول على مختلف الحركية لحركة الجزء المشترك والأطراف من الإحداثيات ثلاثية الجوانب لكل علامة. تم الكشف بسهولة عن الاختلافات الحرجة بين المشية غير الطبيعية ودورات المشي الصحي مع نتائجمتعددة، بما في ذلك (على سبيل المثال لا الحصر) مقاييس ارتفاع الخطوة، سرعة المفاصل، زاوية المفاصل (الشكل 9)، فترات مرحلة دورة الخطوة لجميع الأطراف الأربعة، وتنسيق الأطراف(الشكل 10). تحليل البيانات النوعية في شكل قطع ورسومات تخطيطية عصا يمكن أن توجه تحديد الأدوات الكمية المستخدمة لتنفيذ للنتائج النهائية لهذا النهج التحليل (الشكل11).
في الفئران صحية ممثل، وأظهرت لمحة زاوية الكوع على نحو سلس، قمم واحدةمع دورات مشية متجاورة متسقة التي عرضت مجموعة كاملة من الحركة (الشكل 9). اقترح ال يتناوب موقف طور وأرجوحة طور مدى من الآثار تنسيق ثابتة داخل الأطراف. وعلى النقيض من ذلك، أظهر ملف زاوية الكوع للفأر المصاب في الحبل الشوكي قمم مشوهة متعددة، كانت أقل اتساقا ً ونطاقات أصغر من الحركة. وبالإضافة إلى التعديلات في مرحلة الموقف المطول وتقصير فترات مرحلة التأرجح، كان هناك قصور في التنسيق داخل الأطراف بالنسبة لجبهة تحرير الكونغو.
في البيانات التمثيلية المقدمة المرسومة للتنسيق، وجد أن قطع العمل (الشكل10)الناتجة عن فئران صحية تمثيلية أظهرت تنسيقاً إيقاعياً متناوباً ومحدداً في الأطراف ipsilateral أثناء المشية دورات (نمط على شكل حرف L) وفي المرحلة D على شكل نمط مع أطرافه المضادة. في المقابل، أظهر فأر مصاب بالحبل الشوكي (C5 الحق) ضعف التنسيق غير المتناوب وغير الإيقاعي في الأطراف ipsilateral والتنسيق الإيقاعي غير عادية بالتناوب (نمط على شكل حرف L) في واحدة من الاضلاع المضادة الاقتران الأطراف(الشكل 10). وبالنظر إلى العجز الملحوظ في الطرف السفلي الأيمن في شريط الفيديو الحركة المسجلة، وهذا يشير إلى أن RFL وLHL لم يتمكنوا من تحمل الوزن الكامل دون دعم إما من LFL أو RHL في أي وقت من الأوقات. ويشير هذا الاتجاه إلى وجود آلية تعويضية للتعامل مع سرعة المشي القسري على جهاز المشي.
تم إنشاء بيانات قابلة للقياس الكمي بسهولة من استخدام النظام ثلاثي الجوانب، ولكن هذا ينطوي على الوصول إلى علامات تبويب منفصلة والاختيار من بين العديد من الخيارات المتاحة داخل البرنامج. هناك عمل حالي على وضع نموذج آلي من شأنه أن يولد بيانات كمية ونوعية في تقرير واحد لأوضح نتائج الاهتمام (دون الحاجة إلى توليد نتائج مختلفة بشكل فردي)، كما هو الحال بشكل روتيني مع نظام الحركية المستخدمة للدراسات السريرية. وبالتالي، يمكن تجميع عدة نقاط نهاية وتصديرها في تنسيق تقرير يمكن تصورها بسهولة بعد التجربة مباشرة.

الشكل 1 الإعداد التجريبي: (أ) تخطيطي لمجموعة جمع البيانات الحركية المكونة من ست كاميرات لمهمة المشي في المطحنة. يتم وضع مجموعة من ثلاث كاميرات على كلا الجانبين من المطحنة لالتقاط (إطار بإطار) حركات علامة اليسار واليمين أثناء الحركة. (ب) رسم بياني يصور وضع علامة على المعالم العظمية على الأطراف الأمامية والأطراف الخلفية القوارض لالتقاط الحركية الحركية الحركية الحركية الرباعية الحركة. يتم وضع ما مجموعه 11 علامات على كل جانب من الفئران. تُظهر المناطق المظللة المنطقة التي يُحلق فيها الجرذ. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2 علامات للمعايرة: (أ) تعيين علامة لنظام معايرة العصا، وذلك باستخدام إطارين معايرة: L-الإطار والعصا (B) يتم تعريف نظام الإحداثيات بواسطة L-Frame، حيث يتم تعريف أصل الإطار L (تقاطع ساقين من الإطار) على أنه (0,0). يحدد الطرفان من الإطار L وL-Frame القصير وL-Frame المحورين x وy على التوالي، ويتم تعريف المحور z على أنه عمودي على مستوى XY. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 3 أنواع العلامات: (أ) صورة لجذع الجرذ السفلي تظهر نوعين من العلامات المستخدمة. (باء) تظهر الصورة علامة عاكسة وضعت على قمة الحرقفي مع شريط على الوجهين التي تم تصميمها للتمسك الجلد (دائرة الأحمر). (جيم) تُظهر الصورة وضع علامة القلم فوق المفصل الأيمن (الأحمر الدائري). الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 4 تتبع الحركة. (أ) تظهر الصورة واجهة تتبع الحركة حيث يمكن تتبع علامات متعددة في وقت واحد باستخدام وظائف "تتبع تلقائيا" و "تتبع باستخدام مطابقة نمط". (B) يتم الكشف عن طريقة عرض مكبرة لعلامة عاكسة كبقعة دائرية بيضاء زاهية في وظيفة "المسار تلقائياً" أثناء تعيين العلامة. البرنامج يتعرف على هذه البقعة كبقعة دائرية زرقاء زاهية. يتم التعرف على النقطة الحمراء في نهاية المطاف كمركز للعلامة المنصوص عليها. تقلل البقعة الحمراء المركزة داخل العلامة الدائرية من فرص الأخطاء التجريبية أثناء تتبع البيانات. ويشير الانحراف عن المركز إلى أن القياس والتحليلات اللاحقة من المرجح أن تكون غير دقيقة. (جيم) عرض مكبر لعلامة عاكسة للانعكاس تم تحديدها لمطابقة النقش. استنادًا إلى حجم العلامة المحددة وشكلها ولونها، يحدد البرنامج تلقائيًا علامات مطابقة للوصف في إطارات الفيديو اللاحقة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 5 خيارات التتبع الأساسية والمتقدمة. (أ) يمكن معالجة مقاطع الفيديو داخل البرنامج بالنقر بزر الماوس الأيمن فوق الفيديو أثناء التحليل بحيث يتم تصور علامات غير واضحة أو ضبابية بوضوح للسماح بالتتبع التلقائي. لأغراض العرض التوضيحي، يتم عرض نوعين من إعدادات معالجة الصور التي يتم تعديلها لاستيعاب ظروف الإضاءة المحيطة المختلفة أثناء جمع البيانات لسهولة التتبع. (B) إطار فيديو تمثيلي قبل معالجة الصور. (C) لمعالجة الصور الأساسية (نوع المعالجة I)، يتم ضبط السطوع وإعدادات التباين لعرض أكثر وضوحًا. (D) باستخدام إعدادات معالجة الصور المتقدمة (نوع المعالجة الثاني)، يتم عكس علامة المفصل metatarsophalangeal المناسبة (علامة سوداء) ويمكن بعد ذلك تعقبها تلقائيًا. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 6 تعيينات المرحلة: يمكن تقسيم دورة مشية لكل طرف إلى مراحل منفصلة وفقا للتصميم التجريبي. لأغراض البيان العملي، يتم عرض ثلاث مراحل دورة مشية. (أ) يتم تعريف مرحلة الموقف على أنها الإطار الأول الذي يتصل فيه الطرف بسطح المطحنة. (ب) يتم تعريف مرحلة التأرجح على أنها الإطار الأول الذي يترك فيه الطرف سطح المطحنة (C) مرحلة التأرجح المتوسط هي الإطار الأول بعد إزالة الأطراف حيث يبدأ مخلب في النزول. في(D)، يتم تعريف دورة مشية كاملة من بداية الموقف الأولي إلى تعيين مرحلة الموقف من دورة المشية التالية. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 7 خيارات متقدمة لتحليل مرحلة الخطوة. يسمح هذا الخيار بعرض متعمق للتتبع وتعيينات المرحلة، بالإضافة إلى القدرة على تغيير تعيينات المرحلة. (أ) مربع تحديد علامة لعرض وتحديد العلامة المطلوبة. (B) إطار تحديد الإحداثيات: سيبرز إحداثيات الاهتمام (في هذه الحالة، إحداثيات z) سيظهر باللون الأحمر في إطار الرسم التخطيطي الرئيسي. (C) نافذة اختيار المرحلة: يمكن عرض المراحل المخصصة لطرف ما فيما يتعلق بالعلامات والإحداثيات المحددة في (A) و(B). يمكن أيضًا تحرير المراحل من خلال هذا الإطار. (D) إطار الرسم التخطيطي: يمكن مقارنة إحداثيات علامة معينة في وقت واحد أثناء مراحل دورة مشية فردية. يمثل الأخضر والأصفر مراحل الموقف والأرجوحة على التوالي للأطراف الخلفية اليمنى خلال الحركة الرباعية. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 8 عينة من البيانات الحركية ثلاثية الدناجية. (أ) يمكن تصور نتائج مختلفة من كل علامة مشتركة من مجموعة بيانات الإحداثيات ثلاثية الدقة بعد تتبع الفيديو (B) البيانات التمثيلية التي تم إنشاؤها لدورات مرحلة التمركز والتأرجح لكل طرف خلفي وطرف خلفي أثناء رباعية المشي في الفئران. الألوان تمثل مراحل الموقف والتأرجح من دورات خطوة متتالية. الأحمر والأخضر تتوافق مع مراحل الموقف الأيمن والطرف الخلفي على التوالي. الأزرق وteal تتوافق مع مراحل الموقف الخلفي والطرف الخلفي الأيسر على التوالي. الأصفر يتوافق مع مرحلة التأرجح من كل طرف. (C) يمكن مقارنة مجموعات بيانات متعددة (علامات منفصلة أو نتائج) في وقت واحد بكل سهولة. يتم اختيار بيانات سرعة إحداثيات z لعلامات مفصل الركبة اليسرى واليمنى بشكل تعسفي لإظهار السرعة الرأسية لعلامة مفصل الركبة من سطح المطحنة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 9 بيانات الحركة الزاويّة التمثيلية من الفئران السليمة والمصابة بالحبل الشوكي العنقي أثناء حركة المشي. (أ) ملف زاوية مشتركة الكوع في الفئران ممثل صحي يوضح السلس، قمم واحدة من آثار زاوية مشتركة مع دورات مشية متجاورة متسقة التي تعرض مجموعة كاملة من الحركة. القضبان الحمراء والصفراء تدل على مراحل الموقف والتأرجح على التوالي من دورة خطوة الاطراف السفلية. (ب) على النقيض من ذلك، فإن آثار في الفئران المصابة في الحبل الشوكي ممثل هي أكثر تشويها نسبيا وتظهر قمم متعددة غير متناسقة مع مجموعة أصغر عموما من الحركة المشتركة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 10 بيانات تنسيق الأطراف التمثيلية من الفئران المصابة في الحبل الشوكي السليم والعنقي أثناء حركة المشي. (أ) يتم رسم قيم إحداثيات z لعلامات metacarpophalangeal (MCP) وmetatarsophalangeal (MTP) التي تصور مقاييس ارتفاع الخطوة في ست مجموعات مختلفة بين الأطراف من حوالي 10 خطوات أثناء المشي الرباعي. يظهر هو مظاهرة تمثيلية لجميع أزواج تنسيق الأطراف الستة الممكنة. (ب) يظهر الجرذ الصحي تنسيقاإيقاعيا بالتناوب واضحا (نمط على شكل حرف L) لجميع الأزواج (i, ii, iii, iv). عندما تكون الأطراف في المرحلة (v، vi)، تتبع أزواج التنسيق نمطًا على شكل حرف D. (ج) في الحبل الشوكي العنقي المصاب، لاحظ '1' ضعف التنسيق بين الطرفين الأماميين، '3' الاقتران الجانبي الأيمن و(4) التنسيق غير العادي لأحد أزواج الأطراف المناوئة. لاحظ أن قطع التنسيق (B,C) لا تشترك في نفس المقياس. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 11 : الرسوم المتحركة 3D عصاالرقم. مثال على رقم عصا ثلاثي الدمع تم إنشاؤه من البيانات المتجنّسة. الرجاء النقر هنا لتحميل هذا الرقم.
| معايرة المعلمة | مدخلات المعايرة |
| طول عصا [مم] | 100 |
| L-الإطار الكلمة إزاحة [مم] | 7 |
| تكرارات للكشف عن الخارج | 4 |
| يسمح عصا طول الانحراف | 0.3 |
| يجب أن تكون عصا مرئية في كاميرات __ على الأقل | 4 |
| إصلاح نسبة العرض إلى الارتفاع | التحقق |
| إصلاح معلمة الانحراف | التحقق |
| إصلاح النقطة الأساسية | التحقق |
الجدول 1: الإعدادات المتقدمة للمعايرة. يلخص الجدول المعلمات التي استخدمناها لمعايرة إعداد الكاميرا الست بدقة. تم اختبار هذه الإعدادات تجريبيًا ووجدت الأمثل لإعدادنا.
توضح هذه المقالة البروتوكولية استخدام نظام تتبع الحركة لجمع وتحليل البيانات الحركية ثلاثية الجوانب أثناء حركة المشي الرباعية الحركة في القوارض. وتشمل السمات الهامة لنظام تحليل الحركة الحركية ثلاثية الأبعاد التحديد الكمي المفصل للحركية في الحركة المشتركة (الخطوة المرحلة الحركية، زوايا مشتركة، مجموعة من الحركة، وسرعات الخطوة) من المفاصل والأطراف المتعددة في وقت واحد، والكشف عن العجز الحركي لا يمكن قياسه بالعين المجردة، والقضاء على التحيز الذاتي في جمع البيانات وتحليلها، والتصور السهل للأطراف الكاملة والحركية الوضعية التي يمكن مقارنتها مع التجاور المتزامن للفأر بأكمله في الحركة. دون الحاجة إلى خوارزميات إضافية والنمذجة، والأساليب تظهر قدرة البرنامج على تحليل كمي الحركية من مشية مع تفاصيل كبيرة، والكفاءة، وسهولة، والدقة، واستنساخ.
في القوارض، يتم تقييم العجز الحركي في الأطراف الخلفية والخلفية بعد إصابة الحبل الشوكي (SCI) عادة باستخدام أنظمة تسجيل اللوكموتور الذاتية والموحدة مثل نظام تسجيل BBB1. أنظمة التهديف الذاتية عموما إدخال التحيز اختبار لأن الباحثين مختلفة قد تعيين درجات مختلفة لنفس العجز الحركي أو نفس الدرجة لعجز المحرك مختلفة، مما أدى إلى انخفاض قابلية التكرار وحساسية الاختبار13 . وعلاوة على ذلك، فإن عدم القدرة على الكشف عن أوجه عجز خفية تنطوي على خطر الاستدلال خطأ على آثار التدخل.
لمكافحة هذه المشاكل،وقد اعتمدت النظم الآلية 2،3،4،5 وأنظمة مع أو بدون استخدام خوارزميات معقدة14،15 من قبل بعض المحققين. هذه الاختبارات إجراء تحليل دورة الخطوة التي تكشف عن ملامح تحمل الوزن وأنماط تسلسل خطوة مشتقة من حركات وضع مخلب من الفئران المشي عبر المدرج. ومع ذلك، فإن العيب الرئيسي من تحليل مشية الفيديو الطائرة البطني هو أن جسم الشخص نفسه غير مرئي ة مباشرة2،3. وتصبح هذه البيانات مقصورة على المعلومات التي يتم الحصول عليها من انطباعات القدمين وحركات المخلب، وتشكك في اختيار وتفسير بارامترات مشية في تقييم العجز (انظر Chen et al.16). تفاصيل الحركة التي تكشف عن حركية الدينامية القطاعية من حركة الأطراف وتحديد المواقع لا يمكن الحصول عليها بدقة لتحليل الحركة3،5. الانحرافات الحرجة لبيانات زاوية المفاصل (أي مجموعة من الحركات، وسرعة الحركات، وما إلى ذلك)، وعلاقة المفاصل فيما يتعلق ببعضها البعض داخل الطرف وبين الأطراف، وميكانيكا الجسم الأساسية التي تغير أنماط المشية من المستحيل الحصول عليها. على هذا النحو، ما إذا كانت أي ضعف المشية يمكن ملاحظتها نتيجة لتغييرات في الحركات المشتركة الفردية و/أو المتعددة القطاعية (أي التنسيق بين الأطراف القريبة من الأبعد، والعلاقات الوضعية للجذع فيما يتعلق بالموقف ودورة المشية الأطراف، وما إلى ذلك) لا تزال ملثمين.
عدد قليل من النظم المتاحة حاليا التقاط المشية الحركية وتقييم الخلل الحركي نوعيا وكميا ولكن يتم استخدامها على نطاق أقل. وكامل الجسم عالية السرعة الفيديو تتبع نظام تحليل المشية أفلام دورات مشية عفوية من ثلاثة جوانب (واحد بطني وطائرتين جانبية) وتتبع المعالم العظمية لإخراج عدد من نتائج مشية17,18. يستخدم تحليل مشية الطائرة المترهلة من قبل بعض الباحثين للحصول على بيانات الحركة 2D من الطرف الخلفي المهتمة19،20. ومع ذلك، فإن البعد الثالث للحركة الذي يحدث متعامد إلى مستوى العرض (الجانبي أو المترهل) غير قابل للكشف في التحليلات11،18،19.
أخرى أكثر تطورا، 3D، ثلاثة الجسم الجزء القوارض الجسم نظم جمع البيانات الوضعية استخدام النمذجة الرياضية 3D لجمع البيانات، فضلا عن نظام التحليل لتتبع وقياس الحركة 3D من أجزاء الجسم القوارض في حين بما في ذلك رئيس أنماط الحركة8. وقد وضعت Madete وآخرون9 علامة على أساس نظام التقاط الحركة البصرية الإلكترونية لتحديد الحركة الوضعية 3D الجسم أثناء الحركة فوق الأرض على الحزم المشي باستخدام نظام الكاميرا سبعة. النتائج الرئيسية التي تمت دراستها في العملين الأخيرين تركز في المقام الأول على الوضع العام للقوارض بدلا ً من تحليل المشية. توفر أنظمة التقاط الحركة ثلاثية المدة بيانات مشية حركية ثلاثية المدة عالية الإنتاجية باستخدام كاميرات متعددة وأنظمة برمجيات مفصلة، كما استعرضها Bhimani et al.21. وقد استخدمت الإصدارات القديمة من نظام تحليل الحركة 3D المقدمة أيضا في العمل السابق في الفئران مع وبدون الصدمات العصبية12،22،23.
على الرغم من توافر نظم جمع وتحليل الحركة ثلاثية الجوانب للبحث، فإن الاستخدام قبل السريري لهذه التقنية في القوارض لا يزال محدوداً نسبياً. جزء من سبب هذه المشكلة هو أن بروتوكولات جمع البيانات وتحليلها تعتمد بشكل كبير على استخدام نماذج الحركية وبناء خوارزميات معقدة تناسب نموذج حركي من الطرف الخلفي للفأر أثناء المشي لتوليد غرامة، عالية الدقة مشية حركية8،9،11،22. تقدم المنهجية التفصيلية المعروضة هنا تفاصيل الإجراء الذي تم القيام به طوال العملية التجريبية بما في ذلك مناولة الحيوانات، والتدريب، والإعداد التجريبي، وجمع البيانات، وخطوات التحليل.
كما تقدم تفاصيل عن معايرة النظام، الذي هو الجزء الأساسي من البروتوكول، الذي سيضمن إمكانية الإعادة بين التجارب المجاورة داخل المواضيع وفيما بينها. التقنيات الموصوفة خطوة بخطوة إدخال الموضوعية في إجراء جمع البيانات وجعلها قابلة للاستنساخ للغاية. يمكن تصور البيانات التي تم إنشاؤها من برنامج التقاط الحركة هذا من إطار بإطار لجودة الحركة وتتبعها تلقائيًا. ويرد وصف آخر هو كيف أن جمع البيانات أو التحديد الكمي هذا لا يتطلب أي خوارزميات أو نمذجة إضافية. يمكن للطلاب والموظفين والباحثين استخدام برامج إحصائية بسيطة لتوليد مخرجات حركية أساسية دون الاعتماد على خبرة تقنية محددة.
ويمكن أيضا استخدام هذا النظام للحركة فوق الأرض، والوصول إلى واستيعاب، وغيرها من التجمعات التجريبية لتناسب الهدف التجريبي. كما يمكن تعديل عدد ونوع العلامات للذيل أو الظهر أو الجذع أو الأذنين، حسب الحاجة. والميزة الأكبر للبرامج المعروضة بالمقارنة مع النظم هي قدرتها على جمع بيانات فيديو عالية الدقة عن الموضوع. وعلى هذا النحو، يمكن فرض مجموعات معقدة من الحسابات (أي الحركات الزاويّة، وخطوط العصا التي تربط مفاصل متعددة، وما إلى ذلك) على الفيديو المسجل. يمكن التحقق من موضع العلامة والبيانات ثلاثية المدة التي تم إنشاؤها مع الحركات الفعلية للفأر في الحركة. على النقيض من ذلك، مع نظام التقاط الحركة 3D الأخرى، يتم التقاط علامات فقط، ويجب أن يتم أي إعادة تحليل على الرسومات التخطيطية عصا (إطار الهيكل العظمي) بدلا من الفيديو من الموضوع الفعلي. وبالتالي، لا يوجد التحقق من وضع العلامات على الحركة الفعلية للموضوع.
استناداً إلى الخبرة المكتسبة من هذا النظام، تلعب المعايرة دورًا حاسمًا في نجاح جمع البيانات. معايرة النظام حساسة للغاية للتغيير. وحركة طفيفة من أي كاميرا واحدة يمكن أن تضر كامل 3D تنسيق عملية جمع البيانات وتحليلها. هناك حاجة إلى اثنين فقط من الكاميرات على كل جانب من مستوى العرض لجمع البيانات، ولكن ينصح بشدة الكاميرا الثالثة لتوفير المزيد من الدقة عن طريق الرجوع إلى مواقع كل علامة مع كاميرات أخرى. ومع زيادة عدد كاميرات التتبع، ستزداد دقة الإحداثيات ثلاثية الدقة لعلامة محددة. خلال المناسبات التي تصبح فيها علامات غامضة بسبب العجز في مشية (مثل الشباك اصبع القدم أو السحب في حالة المشية بعد الصدمة العصبية)، قد تتطلب هذه الظروف تتبع يدوي واسع النطاق. ومع ذلك، فإن كمية البيانات التي يتم إنشاؤها في نهاية المطاف من تتبع يستحق الوقت المستثمر في تتبع العلامات يدويا، مما يجعلها أداة لا تقدر بثمن في الكشف عن العجز الحركي خفية.
في تجربتنا، أي مملة المرتبطة باستخدام النظام يكمن وراء استخدام المعدات والتكنولوجيا نفسها. وعلى غرار البروتوكولات الأخرى لتقييم السلوكيات الحركية، فإن الطريقة التي يتم بها التعامل مع الفئران وتدريبها على هذه المهمة تؤثر بشكل كبير على النتائج. فعلى سبيل المثال، فإن عزل الفئران عن جماعتها أمر بالغ الأهمية أثناء الاختبار؛ وإلا، تظهر الفئران التي لم يتم اختبارها ولكنها لا تزال موجودة أثناء الاختبار تدهور أداء المهمة في نهاية المطاف. درجات حرارة الغرفة المثلى، والإضاءة، ومستويات الضوضاء هي المحددات الأخرى. نشر فؤاد وآخرون تحديات أخرى تصاحب اختبار المحركات الوظيفية في الفئران24. وفي الواقع، لم يواجه المستخدمون المكفوفون من هذا المختبر الذين اتبعوا المنهجية بشكل صحيح أي عقبات رئيسية في جمع البيانات، وتتبع الحركة، وتحليل البيانات.
في هذه الورقة، يتم وصف نظام التقاط الحركة ثلاثية الأبعاد لجمع وتحليل البيانات الحركية بشكل فعال بحيث يمكن للباحثين جمع كميات هائلة من البيانات الحركية المتعمقة بسرعة من فئران متعددة. نحن نعمل حاليا على إنشاء قالب تحليل البيانات الآلي التي يمكن أن تكون مدمجة في البرنامج وتصبح قادرة على توليد تقرير عن النتائج المحددة مسبقا في غضون ثوان قليلة لحركة المشي في القوارض، على غرار ما يتم في الإنسان دراسات باستخدام التقاط الحركةونظم التحليل 6،25. تطوير هذا القالب سوف يسمح للباحثين ما قبل السريرية للحصول على بيانات مفصلة القوارض locomotor في راحة عدد قليل من النقرات من زر الماوس. ومن المأمول أن الأساليب المقدمة في هذا العمل سوف تثبت مفيدة للباحثين ما قبل السريرية لتقييم السلوك الحركي القوارض أكثر موضوعية. نحن الآن الغرامات استخدام هذا النظام لجمع عالية الإنتاجية البيانات الحركية 3D خلال السلوكيات الشائعة، والمهرة أطراف بعيدة مثل الوصول واستيعاب. الأهم من ذلك، يمكن توسيع فائدة هذه الطريقة إلى الفئران مع مجموعة متنوعة من الإصابات العصبية الصادمة وغير العصبية.
وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
شكرنا الخاص لباوان شارما على مساعدته في الإعداد التجريبي للفيديو والمساهمة الفكرية في هذا المشروع. كما نشكر كريستوفر بالاسيو على مساهمته في المساعدة في عرض بروتوكول الفيديو.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 6 كاميرات Basler (Scout scA640-120gu) نظام التقاط الحركة. | Simi Reality Motion Systems GmbH Max-Planck-Str. 11 85716 Unterschleibheim ، ألمانيا | غير | متاح جهاز تسجيل لتحليلات الحركة. |
| إطار المعايرة والعصا | Simi Reality Motion Systems GmbH Max-Planck-Str. 11 85716 Unterschleibheim ، ألمانيا | معايرة | على شكل حرف L N / A تحدد نظام الإحداثيات العالمي ، وعصا شكل ترايدنت (100 مم) |
| جهاز تسجيل | Shah Lab | N / A | لتحليلات الحركة. العلامات مصنوعة حسب الطلب في مختبرنا من عيون googly 0.5 سم مغطاة بشريط عاكس. |
| Matlab | Mathworks، Inc ، Natic ، Ca | N / A | برنامج تحليل البيانات |
| قفص القوارض | مخصص داخل ستوني بروك. | N / A | قفص زجاجي شفاف يستخدم للحفاظ على القوارض على جهاز المشي. |
| Simi Reality Motion Systems | Simi Reality Motion Systems GmbH Max-Planck-Str. 11 85716 Unterschleibheim ، ألمانيا | N / A | برنامج تتبع ثلاثي الأبعاد. |
| المشي | Mk Automation Inc. ، بلومفيلد ، CT 06002 | N / A | المشي المستخدم في حركة القوارض. |