يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

أدوات بسيطة محلية الصنع للتعامل مع ذباب الفاكهة -دروسوفيلا ميلانوجاستر

16.1K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/59613

⸱

يوليو 24, 2019

1Department of Zoology and Animal Physiology, College of Biological Sciences, China Agricultural University

في هذه المقالة

ملخص

وصف هنا هو استخدام العديد من الأدوات محلية الصنع لنقل، والبرد، وقتل كبار البالغين Drosophila، وكذلك لتنظيف قارورة ثقافة الزجاج وجمع البيض. هذه الأدوات هي سهلة لجعل وفعالة إلى حد ما في التعامل مع Drosophila.

الملخص

ذبابة الفاكهة، دروسوفيلا melanogaster، ويستخدم على نطاق واسع على حد سواء في البحوث البيولوجية والتعليم البيولوجيا. التعامل مع الذباب الكبار أمر شائع ولكن من الصعب في الممارسة العملية، كما يطير الذباب الكبار. ويتضح هنا كيفية جعل بعض الأدوات البسيطة والفعالة من حيث التكلفة لمعالجة القضايا الصعبة في التعامل مع دروسوفيلا. يتم إجراء ثقوب في سدادات رغوة ويتم إدراج نصائح ماصة أو المسارات في الثقوب. الذباب ثم تتحرك فقط في اتجاه واحد في تلميح ماصة / قمع التجميع، مما يسمح السيطرة الفعالة على نقل Drosophila الكبار إلى أو الخروج من قارورة. وقد تم تعديل البروتوكولات القائمة للذان بالذباب البارد عن طريق التبريد في الجليد المسحوق ونقلها إلى سطح بارد وصلب من الثلج. يتم تغطية كيس الثلج مع قطعة من الشاش الطبية التي تحافظ على الذباب المعطلة من الماء المكثف عند فحصها تحت مجهر مجسم. وأخيراً يتم قتل الذباب لعدوها وفرزها أو التخلص منها عن طريق التلويح بالميكرولو. كما تم تطوير قفص على شكل زجاجة لجمع البيض، فضلا عن جهاز توفير العمالة والبروتوكول المصاحب لتنظيف قارورة ثقافة الزجاج.

المقدمة

ذبابة الفاكهة، دروسوفيلا melanogaster، هو كائن حي نموذجي يستخدم على نطاق واسع في البحوث البيولوجية وتثقيف البيولوجيا لدراسة مجموعة واسعة من المواضيع1،2. المشاكل الأساسية للتعامل مع Drosophila هي نقل البالغين من قارورة إلى قارورة وشل الذباب بحيث تكون أسهل للتعامل معها، كما يمكن لجميع البالغين (باستثناء بعض المتحولين3،4) تطير.

تقليديا ، يقوم الباحث بنقل الذباب من قارورة إلى أخرى عن طريق عقد قنينتين من الفم إلى الفم ، والتنصت على الذباب إلى أسفل أو السماح للذباب أن يطير إلى قارورة أخرى ، ثم فصل وإعادة توصيل كل من قارورة4. ومن الواضح أن هذا يتطلب أن فتح قنينتين بنفس القطر، وأنه من الصعب السيطرة على كمية الذباب المنقولة. وفي الوقت نفسه، وهذا يتطلب أيدي سريعة لإنجاز هذه المهمة، والهروب من الذباب الضال يمكن أن يؤدي إلى مشاكل للمختبر أو الفصول الدراسية. إضافة الذباب البكر الممتاز أو الذباب الذكور إلى الصليب أعدت بالفعل هي مهمة روتينية أخرى في تجارب دروسوفيلا. تقليديا، يجب أن يتم تعطيل الذباب في قارورة الصليب قبل إضافة الذباب إضافية.

يتم التخدير Drosophila الكبار بشكل روتيني عن طريقالأثير، CO 2، أو تقشعر لها الأبدان5. بالمقارنة مع الأثير والتعرض CO 2، تقشعر لها الأبدان هو العامل الأكثر فعالية من حيث التكلفة لشل القصوى Drosophila وأقل ضررا على كل من الذباب والباحثين (وخاصة الطلاب الصغار)6،7. ومع ذلك، الماء الذي يتكثف باستمرار على السطح البارد أو غرفة يبلل الذباب. من الصعب تحديد الأنماط الظاهرية للذباب الرطب، ويمكن أن تصبح بسهولة التالفة أثناء التلاعب8،9. وقد أدى ذلك إلى منع طريقة التبريد من أن تصبح مقبولة على نطاق أوسع.

وقد سبق وصف أدوات لنقل ذبابة وطريقة لتبريد ذبابة10. هنا، يتم الإبلاغ عن تقنية التخدير تقشعر لها الأبدان المعدلة التي هي آمنة وموثوق بها، وممكنة لتجارب دروسوفيلا. كما هو موضح في هذه الورقة هي 1) طرق لقتل البالغين للعد، والفرز، أو التخلص منها، 2) الأجهزة الموفرة للعمالة والبروتوكولات لتنظيف قارورة ثقافة الزجاج، و 3) قفص بسيط لجمع البيض. ويمكن استخدام الأدوات المصممة بسهولة والفعالة من حيث التكلفة الموصوفة هنا لمعالجة القضايا الصعبة المتعلقة بمناولة الذبابة، وقد تم اختبار هذه الأساليب وثبت أنها قوية وموثوق بها وسهلة المنال للباحثين ذوي الخبرة والمبتدئين.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. إعداد الأدوات والملحقات

  1. سدادات تلميح/قمع
    1. الحصول على اثنين من المقابس الإسفنج (يجب أن يكون قطر المقابس أكبر قليلا من القطر الداخلي للقوارير المستخدمة لنقل الذباب). جعل حفرة في مراكز المقابس الإسفنج مع الحديد لحام الكهربائية ساخنة.
    2. الحصول على اثنين من 1 مل نصائح ماصة، وقطع واحد في نصف عرضية بسكين حادة، وتجاهل نهاية مدببة. ثم، قطع 1.5 سم من نهاية وأشار قبالة طرف ماصة الثاني. الغراء بقايا اثنين من نصائح ماصة جنبا إلى جنب مع لاصق لجميع الأغراض لجعل تلميح ماصة ممدود (الشكل1A).
    3. إدراج قمع وطرف ماصة ممدود في المقابس الإسفنجية لجعل تلميح وسدادة قمع (يشار إليها فيما بعد باسم T- و F-سدادات) وغطاء طرف ماصة مع أنبوب الطرد المركزي الصغير 100 درجة مئوية (الشكل1A).
      ملاحظة: يجب أن يكون طول جذع القمع أكبر من ارتفاع القابس. إذا كان أقصر من أو يساوي ارتفاع المكونات، ثم الذباب سوف يهرب من فتح الجذعية. يجب أن تقع نهاية جذع القمع على الأقل 2 سم فوق سطح وسط الثقافة أو الجزء السفلي من قارورة فارغة. ومن الأفضل أن تكون المسارات الصغيرة (مثل قطر القرص <60 مم) ذات أقطار فتحة الجذعية الداخلية الصغيرة (<5 مم). يمكن استخدام الزجاج أو قمع البلاستيك لجعل F-سدادة. ومع ذلك، فإن المسارات البلاستيكية هي الأفضل لفصول البيولوجيا، لأنها كسر أقل سهولة من المسارات الزجاجية.
  2. إبر التشريح المجهري
    1. الحصول على أقلام الرصاص الميكانيكية التي تشعر بالراحة في اليد ودبابيس الحشرات التي تتطابق مع أقطار (على سبيل المثال، 0.5 ملم، 0.7 ملم) من عبوات الرصاص الخاصة بهم.
    2. قطع نهايات واسعة من دبابيس الحشرات مع زوج من كماشة وملف شقة قطع. استبدال الرصاص مع دبابيس (الشكل1B). اضغط على زر النقر وتغذية 0.5-1 سم من دبوس لإجراء تشريح. تنظيف دبوس ودفعه مرة أخرى تماما إلى رمح قلم رصاص بعد نشاط تشريح لجعله آمنا لأي شخص للتعامل معها.
      ملاحظة: الإبر المجهرية مفيدة ليس فقط في تشريح الأعضاء مثل الغدد اللعابية اليرقات ولكن أيضا في عد وفرز الذباب الكبار القتلى.
  3. حزم الثلج الصلب
    1. الحصول على العديد من حزم الثلج الصلب القابلة لإعادة التجميد (من الأفضل أن تكون حزم الثلج كبيرة الحجم). يظهر الشكل 1C حزم الجليد التي عملت بشكل جيد، والذي يقيس 26.5 سم × 14.5 سم × 2.5 سم ولها الجانبين العلوي والسفلي التي هي مسطحة تماما.
    2. قطع الشاش الطبي (غير المعقمة) إلى قطع أصغر قليلا من الأسطح الباردة من حزم الثلج التي تغطيها. على سبيل المثال، قطعة من الشاش الطبية أصغر قليلا من 26.5 سم × 14.5 سم هو الأفضل لتغطية كيس الثلج هو مبين في الشكل 1C.
      ملاحظة: وتشمل الملحقات اللازمة لهذه الأدوات تقشعر لها الأبدان: مربع الجليد (استخدمنا 25 سم × 15 سم × 15 سم مربع رغوة لشخص واحد و 37 سم × 28 سم × 20 سم مربع لأكثر من شخص واحد)، والذي يستخدم لتخزين الجليد المسحوق؛ زوج من ملاقط غرامة نقطة، والتي تستخدم للاستيلاء على الذباب المبردة من قبل أجنحتهم ونقلها إلى قارورة. زوج من قفازات العمل واقية، والتي تستخدم لاتخاذ أكياس الثلج المبردة من -20 درجة مئوية الفريزر؛ والفيلم البلاستيك، والذي يستخدم لتغطية مرحلة مجهر مجسم.
  4. دروسوفيلا البيض جمع قفص
    ملاحظة: الجاهزة دروسوفيلا أقفاص جمع البيض متوفرة من العديد من شركات التكنولوجيا الحيوية11. ويرد هنا وصف لقفص صغير لجمع البيض على شكل زجاجة من الأكريليك لأطباق بيتري عيار 60 مم (الشكل1D إلى اليسار؛ ويظهر تصميم القفص في الوسط). ويمكن تكييفها لأحجام طبق بيتري الأخرى (على سبيل المثال، 100 ملم، 35 ملم). وهذا يسمح بنقل الذباب إلى أو خارج القفص بكل سهولة. يمكن إعداد قفص بسيط على النحو التالي.
    1. استخدام القاطع المفاجئة لقطع زجاجة مشروب من البلاستيك اللين (500 مل، القطر الداخلي حوالي 65 ملم) في نسبة تقريبية 2:1 (نهاية مدببة: نهاية حادة) وتجاهل نهاية حادة.
    2. التفاف شريط من ورق البطاقات حول لوحة عصير التفاح (القطر الداخلي 60 ملم) مع شريط لاصق [يتم استخدام لوحة عصير التفاح لجمع البيض (الشكل1E،والحق)].
  5. سائق فرشاة أنبوب لاسلكي
    1. الحصول على برنامج تشغيل الحفر اللاسلكي (السرعة القصوى = 500 دورة في الدقيقة).
    2. الحصول على فرشاة أنبوب التي لديها شعيرات على طول جوانبها، فضلا عن الجبهة. من الناحية المثالية، يجب أن يكون قطر الفرشاة أكبر قليلا من قطر قارورة الثقافة التي تحتاج إلى تنظيف. قطع نهاية مقبضه بحيث يمكن إدراجها في تشاك الحفر (الشكل1D).
      ملاحظة: وتشمل الملحقات اللازمة لهذه الأدوات التنظيف الإسفنج الفولاذ المقاوم للصدأ وقفازات مطاطية طويلة الكفة.

2. نقل الذباب الكبار من قارورة A إلى القارورة B

ملاحظة: نقل الذباب البالغ من قارورة إلى أخرى هو الممارسة الأكثر شيوعا التي أجريت في تجارب Drosophila [على سبيل المثال، نقل الذباب من الثقافة القديمة (A) إلى ثقافة جديدة (B) أو من قارورة متقاطعة (A) إلى قارورة فارغة (B)] لالتخدير. يمكن استخدام البروتوكول الموضح هنا في أي أنشطة نقل ذبابة للبالغين. ما لم ينص على خلاف ذلك، يستخدم هذا البروتوكول لنقل الذباب من قارورة A إلى قارورة B في جميع أنحاء هذه الورقة.

  1. تحقق من الجذعية من قمع F-سدادة وطرف ماصة من T-سدادة بعناية، ثم مسح أي الذباب التي لا تزال في سدادات مع منفاخ الهواء المطاط. هذه الخطوة هي ذات أهمية قصوى، وخاصة عندما يتم استخدام مجموعة واحدة من T- و F-سدادات لنقل مستمر من خطوط Drosophila مختلفة.
  2. اضغط أسفل الذباب في قارورة A واستبدال المكونات مع T-سدادة، ثم سد قارورة B مع F-سدادة.
  3. عكس قارورة A على قارورة B، إدراج طرف ماصة نهاية سدادة T في فتح قمع F-سدادة، ضرب حافة قارورة مقلوبة A للسماح للذباب للانزلاق من طرف ماصة ومن خلال الجذعية من قمع، وإسقاط في قارورة B. إذا كان أي طعام قديم في قارورة A يصبح أقل إحكاما، فإنه قد ينخفض عندما يتم عكس قارورة A وطرقت. في مثل هذه الحالة، عكس قارورة B على قارورة A والسماح للذباب للزحف حتى في قارورة B.
  4. افصل الـ(تي-ستوبر) عن سدادة F قم بغطاء طرف الماصة في نهاية سدادة T بأنبوب طرد مركزي صغير بـ 200 ميكرولتر إذا كان الذباب المتبقي في قارورة A بحاجة إلى نقله إلى قارورة أخرى بشكل مؤقت؛ خلاف ذلك، إزالة T-سدادة وإعادة توصيل قارورة A. إزالة F-سدادة وإعادة توصيل قارورة B.

3. تعطيل الذباب عن طريق تقشعر لها الأبدان

  1. يُحفظ حزم الثلج القابلة لإعادة التجميد في فريزر -20 درجة مئوية لمدة 24 ساعة على الأقل قبل الاستخدام.
  2. ضع كيس ثلج بارد وصلب في درجة حرارة الغرفة (RT) لمدة 20 دقيقة. يمكن إعادة استخدام الشاش الطبي في البرودة الذبابة التالية. في الوقت نفسه، برد قارورة فارغة في الجليد المسحوق.
  3. نقل الذباب الكبار التي تحتاج إلى تعطيل في قارورة فارغة المبردة (CEV). عندما يتم فصل قارورة نقل اثنين، وتغطي CEV مع طبق بيتري أو المكونات وضرب CEV ضد الجليد سحقت للاستفادة من جميع الذباب في CEV وصولا الى القاع. كرر هذه العملية عدة مرات حتى يتم تعطيل جميع الذباب. الذباب سيتم تعطيله في غضون 30 s. بعد ذلك، ضع CEV في الجليد لمدة دقيقة واحدة. ليس من المستحسن نقل الكثير من الذباب في وقت واحد للالتخدير.
  4. صب الذباب المبردة على الشاش الطبي الذي يغطي حزمة الجليد. نشر الذباب المتداخلة مع فرشاة الطلاء وتأكد من أن كل ذبابة يمكن تبريدها من قبل السطح البارد من icepack. إذا كانت حزمة الثلج الصلبالمبردة تنتفخ قليلا، ووضعها على منشفة والعمل على جانبها المسطح.
  5. إزالة مقاطع المرحلة من مجهر مجسم، وتغطية المرحلة مع قطعة من فيلم من البلاستيك، ووضع icepack على خشبة المسرح. تشغيل الضوء العلوي (مصدر الضوء البارد هو مرغوب فيه)، والتركيز على مجهر ستيريو ونقل icepack حتى يمكن رؤية الذباب المبردة بوضوح.

4. قتل الذباب الكبار للعد، والفرز، أو التخلص

  1. نقل الذباب الكبار في قارورة فارغة وتغطيتها مع طبق بيتري.
  2. عكس القارورة، وتسخينها لمدة دقيقة + 20 ق في فرن الميكروويف، والسماح للذباب الميت قطرة في طبق بيتري.
  3. وضع قفازات العمل واقية واتخاذ القارورة من الميكروويف. صب الذباب الميت على بطاقة ورقية بيضاء، عد أو فحص الذباب مع إبرة تشريح دقيق تحت مجهر مجسم، والتخلص من الأجسام ذبابة في علبة القمامة بعد المراقبة.
  4. لقتل الذباب غير المرغوب فيه، قم بتسخين الذباب لمدة 2-3 دقائق في فرن ميكروويف، ثم انقر فوق الذبيحة في علبة قمامة.
    ملاحظة: ليس من المستحسن قتل بعض سلالات متحولة الجناح (على سبيل المثال، المسوخ طول الجناح) للفحص، كما أنه من الصعب الحكم من الذبيحة إذا كانت أجنحة تمتد إلى ما وراء غيض من البطن، والذي ينظر إليه في الذباب البرية من نوع.

5. نقل الذباب في / خارج زجاجة على شكل قفص جمع البيض

ملاحظة: كما ذكر أعلاه، يتم استخدام T- و F-سدادات لنقل الذباب من وإلى قفص جمع البيض. الذباب لا تحتاج إلى التخدير طوال هذه العملية. ويمكن الاطلاع على تفاصيل أخرى، مثل إعداد عصير التفاح المتوسطة، وجمع البيض، وdechorionization، في الأدب12.

  1. أدخل قفص جمع البيض في طبق عصير التفاح أو قم بتركيب طبق عصير التفاح على القفص المصنوع من زجاجة المشروبات الغازية. ختم المفصل حول المكونين مع شريط من فيلم البارافين.
  2. وضع أكبر عدد ممكن من الذباب في القفص وإعادة توصيل القفص مع سدادة رغوة بعد نقل الذباب.
  3. لتغيير الطعام للذباب في القفص، نقل الذباب في القفص إلى قارورة فارغة.
  4. استبدل طبق عصير التفاح وأعد ختمه، ثم نقل الذباب من القارورة مرة أخرى إلى القفص.
  5. عندما ينتهي جمع البيض، نقل الذباب في قارورة فارغة ونقلها إلى قارورة الثقافة.

6. تنظيف الزجاج ثقافة قارورة

ملاحظة: عموما، قارورة الثقافة القديمة يحتوي على الذباب الحية. في البروتوكول الموضح هنا، هذه الذباب لا تحتاج إلى أن تقتل قبل التنظيف إلا إذا كانت الذباب المعدلة وراثيا.

  1. إزالة أي حبر علامة دائمة من قارورة ثقافة الزجاج مع الرطب، والإسفنج الفولاذ المقاوم للصدأ.
  2. نقع قارورة الثقافة في المياه الجارية.
    1. ملء بالوعة المختبر بالماء، إضافة الصابون غسل الصحون السائلة في الماء، ومزيج.
    2. تزج قارورة الثقافة في الماء، ثم إزالة المكونات، والسماح للمياه لتشغيل في القارورة. المنظفات طبق في الماء سيجعل أي الذباب الكبار المتبقية تغرق في القاع وتغرق في الماء.
    3. نقع قارورة الثقافة القديمة في الماء لمدة 30 دقيقة على الأقل.
  3. تخفيف تشاك من الحفر، وإدراج فرشاة أنبوب الاختبار وإعادة تشديد تشاك. تحقق من اتجاه محدد الدوران وتأكد من دوران الحفر في اتجاه عقارب الساعة. ضبط الزناد السرعة وضمان أن السرعة القصوى أقل من 500 دورة في الدقيقة.
  4. تنظيف قارورة الثقافة.
    1. تنظيف قارورة الثقافة تقريبا.
      1. وضع قفاز مطاطي الكفة طويلة على اليد غير المهيمنة وعقد القارورة في الماء.
      2. عقد سائق فرشاة أنبوب اللاسلكي مع اليد المهيمنة العارية، والضغط على الفرشاة في قارورة الثقافة، والضغط على الزناد.
        ملاحظة: لا تراجع البطارية في الماء. الفرشاة الدوارة سوف تفكك الطعام القديم، بوبا، وما إلى ذلك، وإزالة أكثر من 95٪ من النفايات.
      3. تفريغ النفايات في علبة قمامة منفصلة. كرر هذه العملية حتى يتم تنظيف معظم النفايات في كل قارورة.
    2. تنظيف قارورة الثقافة جيدا.
      1. تنظيف فرشاة أنبوب، واستنزاف وتنظيف الحوض، وإعادة تعبئتها بالماء النظيف.
      2. إزالة النفايات المتبقية من كل قارورة ثقافية على النحو المبين في القسم 6-4-1.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تم تطوير سدادات T و F كمجموعة من الأدوات البسيطة التي يمكن تكييفها واستخدامها في أي أنشطة نقل ذبابة. نقل الذباب من ثقافة قديمة إلى العديد من الثقافات الطازجة ينطوي على إزالة المقابس من قارورة جديدة، واستبدالها مع F-سدادات، ثم التنصت على الذباب في القارورة القديمة، وإزالة بسرعة المكونات لها، واستبدالها مع T-سدادة. إذا كان الطعام القديم مدمج، فمن المهم أن الوجه القارورة القديمة وإدراج غيض من T-سدادة في افتتاح F-سدادة، ثم اضغط على الذباب إلى أسفل في قارورة جديدة. ثم، يتم تنفيذ استبدال T- و F...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

ويرد في هذه الورقة وصف لبعض الأدوات محلية الصنع للتعامل مع الأنشطة الأساسية التي تنطوي عليها تربية دروسوفيلا وتجريبها. هذه الأدوات بسيطة ولكنها فعالة إلى حد ما. تقريبا، أي مختبر يمكن أن تجعل هذه الأدوات بسهولة، والبحث أو مختبر التدريس لا تحتاج إلى العثور على بديل الجاهزة التي ربما لا تتوفر محليا.

نقل ذبابة هو الممارسة الأكثر شيوعا ومهمة صعبة في تجارب دروسوفيلا. للأسف، حتى الآن، لم يتموصف أي أدوات نقل 3،4،<...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

وليس لدى صاحب البلاغ ما يكشف عنه.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
زوج من الكماشة
سائق الحفرالسرعة القصوى: 500 دورة في الدقيقة
مكواة
ملف
قمعالقرص < ؛ 60 مم
ثلج
دبابيس
الحرارة بالأشعة تحت الحمراءHCIYET HT-830
قفازات
أقلام رصاص
شاش
أنبوبالدقيق 100 ul
الميكروويف
بارافيلم
بيري القطرالداخلي 60 مم
أطراف1 مل
فيلم
طبق& فاي ؛ 36 مم تستخدم لتغطية القارورة الفارغة
ملاقط
قفازات
الثلجالتجميد 26.5 مرة ؛ 14.5 مرات ؛ 2.5 سم أو أكبر
منفاخ
مطاطي كبس القاطع
زجاجة500 مل ، القطر الداخلي 65 مم
سدادة
من الفولاذ المقاوم للصدأ
فرشاة
أنبوب قارورة& فاي. 34 ملم ومرات; 90 مم
اللاسلكي لحام كهربائيةقطرصندوق الحشراتميزان مطاطية طويلة صفعةميكانيكيةطبي الطرد المركزي فرن الماصة بلاستيكي بيري نقطةالعمل الواقية أكياس الصلبة القابلة لإعادة هواء مشروبات غازية إسفنجيةإسفنج

المراجع

  1. Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
  2. JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
  3. Ashburner, M., Roote, J. Laboratory Culture of Drosophila. Drosophila Protocols. Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, R. S. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. Ch. 585-599 (2000).
  4. Greenspan, R. J. Fly pushing: The theory and practice of Drosophila genetics. Cold Spring Harbor Laboratory Press. , (2004).
  5. Ashburner, M., Thompson, J. The laboratory culture of Drosophila. The genetics and biology of Drosophila. Ashburner, M., Wright, T. R. F. 2a, Academic Press. 1-109 (1978).
  6. Ratterman, D. M. Eliminating ether by using ice for Drosophila labs. Tested Studies For Laboratory Teaching. O'Donnell, M. A. , 259-265 (2003).
  7. Culturing techniques for Drosophila . , Available from: https://www.ptbeach.com/cms/lib/NJ01000839/Centricity/Domain/113/ap%20biology%20Labs/Culturing%20techniques%20for%20Drosophila.pdf (2019).
  8. Markow, T. A., O'Grady, P. M. Drosophila: A Guide to Species Identification and Use. , Academic Press. (2006).
  9. Artiss, T., Hughes, B. Taking the Headaches Out of Anesthetizing Drosophila: A Cheap & Easy Method of Constructing Carbon Dioxide Staging. The American Biology Teacher. 69 (8), e77-e80 (2007).
  10. Qu, W. -H., Zhu, T. -B., Yang, D. -X. A Modified Cooling Method and its Application in Drosophila Experiments. Journal Of Biological Education. 49 (3), 302-308 (2015).
  11. Egg-laying cages for drosophila. , Available from: https://www.kisker-biotech.com/frontoffice/product?produitId=0H-19-17 (2018).
  12. Roberts, D. B. Drosophila: a practical approach. , 2nd edn, Oxford University Press. (1998).
  13. Tang, M., Peng, Q. -F., Yang, D. Two devices for Drosophila experiments (in Chinese). Bulletin of Biology. 45 (11), 49-50 (2010).
  14. Zhou, T. -y, Gan, J., Yang, D. Preparation of sponge plug and sponge plug based fly transferring device for Drosophila experiments (in Chinese). Bulletin of Biology. 46 (6), 49-50 (2011).
  15. Yang, D. Genetics laboratory investigation. , 3rd edn, Science Press. (2016).
  16. Yang, D. Carnivory in the larvae of Drosophila melanogaster and other Drosophila species. Scientific Reports. 8, (2018).
  17. Stocker, H., Gallant, P. Getting Started: An Overview on Raising and Handling Drosophila. Drosophila: Methods and Protocols. Dahmann, C. , Humana Press. (2008).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

أدوات بسيطة محلية الصنع للتعامل مع ذباب الفاكهة -دروسوفيلا ميلانوجاستر
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.