وصف هنا هو استخدام العديد من الأدوات محلية الصنع لنقل، والبرد، وقتل كبار البالغين Drosophila، وكذلك لتنظيف قارورة ثقافة الزجاج وجمع البيض. هذه الأدوات هي سهلة لجعل وفعالة إلى حد ما في التعامل مع Drosophila.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
أدوات بسيطة محلية الصنع للتعامل مع ذباب الفاكهة -دروسوفيلا ميلانوجاستر
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
ذبابة الفاكهة، دروسوفيلا melanogaster، ويستخدم على نطاق واسع على حد سواء في البحوث البيولوجية والتعليم البيولوجيا. التعامل مع الذباب الكبار أمر شائع ولكن من الصعب في الممارسة العملية، كما يطير الذباب الكبار. ويتضح هنا كيفية جعل بعض الأدوات البسيطة والفعالة من حيث التكلفة لمعالجة القضايا الصعبة في التعامل مع دروسوفيلا. يتم إجراء ثقوب في سدادات رغوة ويتم إدراج نصائح ماصة أو المسارات في الثقوب. الذباب ثم تتحرك فقط في اتجاه واحد في تلميح ماصة / قمع التجميع، مما يسمح السيطرة الفعالة على نقل Drosophila الكبار إلى أو الخروج من قارورة. وقد تم تعديل البروتوكولات القائمة للذان بالذباب البارد عن طريق التبريد في الجليد المسحوق ونقلها إلى سطح بارد وصلب من الثلج. يتم تغطية كيس الثلج مع قطعة من الشاش الطبية التي تحافظ على الذباب المعطلة من الماء المكثف عند فحصها تحت مجهر مجسم. وأخيراً يتم قتل الذباب لعدوها وفرزها أو التخلص منها عن طريق التلويح بالميكرولو. كما تم تطوير قفص على شكل زجاجة لجمع البيض، فضلا عن جهاز توفير العمالة والبروتوكول المصاحب لتنظيف قارورة ثقافة الزجاج.
المقدمة
ذبابة الفاكهة، دروسوفيلا melanogaster، هو كائن حي نموذجي يستخدم على نطاق واسع في البحوث البيولوجية وتثقيف البيولوجيا لدراسة مجموعة واسعة من المواضيع1،2. المشاكل الأساسية للتعامل مع Drosophila هي نقل البالغين من قارورة إلى قارورة وشل الذباب بحيث تكون أسهل للتعامل معها، كما يمكن لجميع البالغين (باستثناء بعض المتحولين3،4) تطير.
تقليديا ، يقوم الباحث بنقل الذباب من قارورة إلى أخرى عن طريق عقد قنينتين من الفم إلى الفم ، والتنصت على الذباب إلى أسفل أو السماح للذباب أن يطير إلى قارورة أخرى ، ثم فصل وإعادة توصيل كل....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. إعداد الأدوات والملحقات
- سدادات تلميح/قمع
- الحصول على اثنين من المقابس الإسفنج (يجب أن يكون قطر المقابس أكبر قليلا من القطر الداخلي للقوارير المستخدمة لنقل الذباب). جعل حفرة في مراكز المقابس الإسفنج مع الحديد لحام الكهربائية ساخنة.
- الحصول على اثنين من 1 مل نصائح ماصة، وقطع واحد في نصف عرضية بسكين حادة، وتجاهل نهاية مدببة. ثم، قطع 1.5 سم من نهاية وأشار قبالة طرف ماصة الثاني. الغراء بقايا اثنين من نصائح ماصة جنبا إلى جنب مع لاصق لجميع الأغراض لجعل تلميح ماصة ممدود (الشكل1A).
- إدراج قمع وطرف ماصة ممدود في المقابس الإسفنجية لجعل تلميح وسدادة قمع (يشار إليها فيما بعد باسم T- و F-سدادات....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم تطوير سدادات T و F كمجموعة من الأدوات البسيطة التي يمكن تكييفها واستخدامها في أي أنشطة نقل ذبابة. نقل الذباب من ثقافة قديمة إلى العديد من الثقافات الطازجة ينطوي على إزالة المقابس من قارورة جديدة، واستبدالها مع F-سدادات، ثم التنصت على الذباب في القارورة القديمة، وإزالة بسرعة المكونات لها، واستبدالها مع T-سدادة. إذا كان الطعام القديم مدمج، فمن المهم أن الوجه القارورة القديمة وإدراج غيض من T-سدادة في افتتاح F-سدادة، ثم اضغط على الذباب إلى أسفل في قارورة جديدة. ثم، يتم تنفيذ استبدال T- و F.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ويرد في هذه الورقة وصف لبعض الأدوات محلية الصنع للتعامل مع الأنشطة الأساسية التي تنطوي عليها تربية دروسوفيلا وتجريبها. هذه الأدوات بسيطة ولكنها فعالة إلى حد ما. تقريبا، أي مختبر يمكن أن تجعل هذه الأدوات بسهولة، والبحث أو مختبر التدريس لا تحتاج إلى العثور على بديل الجاهزة التي ربما لا تتوفر محليا.
نقل ذبابة هو الممارسة الأكثر شيوعا ومهمة صعبة في تجارب دروسوفيلا. للأسف، حتى الآن، لم يتموصف أي أدوات نقل 3،4،<.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
وليس لدى صاحب البلاغ ما يكشف عنه.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| زوج من الكماشة | |||
| سائق الحفر | السرعة القصوى: 500 دورة في الدقيقة | ||
| مكواة | |||
| ملف | |||
| قمع | القرص < ؛ 60 مم | ||
| ثلج | |||
| دبابيس | |||
| الحرارة بالأشعة تحت الحمراء | HCIYET HT-830 | ||
| قفازات | |||
| أقلام رصاص | |||
| شاش | |||
| أنبوب | الدقيق 100 ul | ||
| الميكروويف | |||
| بارافيلم | |||
| بيري القطر | الداخلي 60 مم | ||
| أطراف | 1 مل | ||
| فيلم | |||
| طبق | & فاي ؛ 36 مم تستخدم لتغطية القارورة الفارغة | ||
| ملاقط | |||
| قفازات | |||
| الثلج | التجميد 26.5 مرة ؛ 14.5 مرات ؛ 2.5 سم أو أكبر | ||
| منفاخ | |||
| مطاطي كبس القاطع | |||
| زجاجة | 500 مل ، القطر الداخلي 65 مم | ||
| سدادة | |||
| من الفولاذ المقاوم للصدأ | |||
| فرشاة | |||
| أنبوب قارورة | & فاي. 34 ملم ومرات; 90 مم |
المراجع
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
