تم إنشاء نماذج الماوس الخاصة بالعظام البشرية المنتشرة في الكبد باستخدام تقنيات غرس العظام الجراحية مع قطعه الورم المشتقة من المريض وتقنيات حقن الابر مع الخلايا البشرية المستزرعة من سرطان الجلد البقري.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
جيل من الكبد البشرية العظام الإنسان الجلد البقري النظام الأساسي في الفئران نقص المناعة
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
في العقود الاخيره ، تم الاعتراف بشكل متزايد بالأورام الجلدة المزروعة بالمرض المشتقة من المريض أو خطوط الخلايا البشرية المثقفة كنماذج أكثر تمثيلا لدراسة السرطانات البشرية في الفئران ضعيفه المناعة من الخلية البشرية التقليدية خطوط في المختبر. في الاونه الاخيره ، تم تطوير نماذج الأورام التي تم زرعها بالمريض والمستخرجة من المخ (PDX) في الفئران لتحسين تكرار ميزات أورام المريض. ومن المتوقع ان يكون نموذج الماوس الكبدية العظام المجسمة منصة أبحاث السرطان مفيده, توفير رؤى في علم الاحياء الورم والعلاج بالعقاقير. ومع ذلك ، فان زرع ورم الكبد التقويمي معقد بشكل عام. هنا نقوم بوصف البروتوكولات الخاصة بنا لغرس العظام المستخلصة من أورام الميلانوما المستمدة من المريض الكبدي المنتشر في الكبد. لقد قمنا باستزراع الكبد البشري المنتشر في الفئران الخلوية يمكن ان ينتج عن البروتوكولات معدلات نجاح تقنيه عاليه باستمرار باستخدام تقنيه غرس العظام الجراحية مع قطع من ورم الميلانوما المشتق من المريض أو تقنيه حقن ابره مع خط الخلايا البشرية مثقف. كما نقوم بوصف البروتوكولات الخاصة بالمسح المقطعي للكشف عن أورام الكبد الداخلية وتقنيات أعاده الغرس باستخدام الأورام بالتبريد لتحقيق أعاده التطعيم. معا ، توفر هذه البروتوكولات منصة أفضل لنماذج الفئران الورم الأورام الكبدية من الميلانوما الكبد المنتشرة في البحوث الانتقالية.
المقدمة
الميلانوما هو الورم الخبيث داخل العين الأكثر شيوعا بين البالغين في العالم الغربي. وخلال السنوات 50 الماضية ، ظلت حالات الاصابه بسرطان الجلد البقري (5.1 حاله في المليون) مستقره في الولايات المتحدة1و2. ينشا سرطان الجلد الميلاني من الخلايا الصباغية في القزحية ، الجسم الهسلاري ، أو المشيميه ، وهو مرض مميت للغاية عندما يتطور الانبثاث. وكان معدل الوفاات من المرضي الذين يعانون من سرطان الجلد الميلاني الورم الخبيث 80 ٪ في 1 سنه و 92 ٪ في 2 سنوات بعد التشخيص الاولي للنقائل. الوقت بين تشخيص الانبثاث والموت عاده ما تكون قصيرة ، اقل من 6 أشهر ، دون التحية للعلاج3،4. ينتشر السرطان من خلال الدم ويميل إلى الانتشار بشكل مهيمن إلى الكبد (89-93%)4,5. وهناك حاجه ماسه إلى نموذج الماوس فعاله لمزيد من التحقيق في سرطان الجلد الكبد المنتشرة الورم الميلاني. للبحوث الانتقالية ، هناك طلب واضح لتوليد الكبد المترجمة المنتشرة نموذج الماوس الميلانوما.
ومن المتوقع ان توفر نماذج الفئران التي تستمد من المريض الأورام الخبيثة (PDX) استراتيجيات الطب الفردية. وقد تكون هذه النماذج التنبؤيه للنتائج السريرية ، وتكون مفيده لتقييم المخدرات قبل السريرية ، وتستخدم للدراسات البيولوجية للأورام6. نماذج PDX التمثيلية هي الفئران المزروعة بالأورام الخبيثة ، والتي لديها ورم في المواقع تحت الجلد. يمكن لمعظم الباحثين القيام بعمليه جراحيه لزرع تحت الجلد دون ممارسه خاصه7,8. كما يمكنهم أيضا مراقبه الأورام تحت الجلد بسهوله. علي الرغم من ان نماذج PDX تحت الجلد أصبحت شعبيه في مرحله البحث ، لديهم بعض العقبات في الانتقال إلى الاستخدام العملي. الزرع تحت الجلد قوات المرضي المستمدة من الأورام لكسب الطعم في بيئة مجهريه مختلفه من أصل الورم ، بحيث يؤدي إلى فشل الاستخلاص وبطء نمو الورم 9،10،11، 12و13و14. قد يكون المنهج التقويمي أكثر مثاليه وعقلانيه لنموذج pdx لأنه يستخدم نفس الجهاز مثل الورم الأصلي15,16.
في الاونه الاخيره ، قمنا بتطوير بروتوكولات لتقنيات زرع العظام الجراحية لأورام سرطان الجلد التي تستمد من المريض الكبد والمنتشرة وتقنيات حقن الابر مع الكبد البشري المنتشرة-خط خلايا سرطان الجلد الميلاني في إيماءه. Cg-prkdcscidIl2rgtm1Wjl/szj (موردي المجموعة) الفئران17،18. وتؤدي البروتوكولات إلى معدلات نجاح تقنيه عاليه باستمرار. كما انشانا تقنيات المسح المقطعي التي هي مفيده للكشف عن أورام الكبد الداخلية ، وطورنا أعاده غرس الأورام بالتبريد في منصة PDX. وجدنا ان الأورام الميلانوما الورم الميلانيني النماذج الحفاظ علي خصائص الورم الكبد المريض الأصلي ، بما في ذلك السمات الخلوية والجزيئية. معا ، توفر هذه التقنيات منصة أفضل لنماذج الأورام السرطانية الكبدية لسرطان الجلد البقري في البحث الانتقالي.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
يجب علي المرضي المسجلين في الدراسة تقديم موافقه خطيه تسمح باستخدام العينات الجراحية المهملة لأغراض البحث والدراسات الوراثية ، وفقا لبروتوكول وافق عليه مجلس المراجعة المؤسسية. وقد نفذ هذا البروتوكول بما يتفق تماما مع التوصيات الواردة في دليل رعاية واستخدام المختبرات التابعة للمعاهد الوطنية للصحة والتي وافقت عليها اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الماشية (IACUC).
1. جمع الانسجه السرطانية المستمدة من المريض الطازجة
- الحصول علي الانسجه السرطانية المستمدة من المريض من الجراحة أو خزعة ابره في غرفه العمليات في المستشفى.
- وضع الانسجه السرطانية في حاويه 100 mL التي تحتوي علي الحل المتوازن الملح هانكس (HBSS) علي الجليد.
- نقل الانسجه إلى غطاء معقم (مستوي السلامة البيولوجية 2) في المختبر.
- انتقل إلى الخطوة 2 في أقرب وقت ممكن.
ملاحظه: لأسباب تتعلق بالسلامة ، يستثني المرضي المصابين بفيروس نقص المناعة المعروف أو التهاب الكبد B أو C.
2. معالجه الانسجه السرطانية المستمدة من المريض الطازجة
- وضع الانسجه في أنبوب 50 mL التي تحتوي علي الفوسفات-مخزنه المالحة (تلفزيوني) علي الجليد. لغسل الانسجه ، أضافه تلفزيوني في الأنبوب وتجاهل تلفزيوني من الأنبوب مرتين.
- نقل الانسجه إلى طبق بيتري التي تحتوي علي تلفزيوني علي الجليد.
- باستخدام ملقط معقمه ومقص ، وأزاله أجزاء نخريه من الانسجه. الحفاظ علي الانسجه رطبه وبارده خلال الخطوات 2.3 إلى 2.5. لعينات خزعة ابره ، تخطي الخطوة 2.3 و 2.5 ، وعدم قطع العينات.
ملاحظه: النسيج الميت غالبا ما ينهار بسهوله عند لمسها. - قطع النسيج إلى 1 مم3 مكعبات لزراعه الكبد الجراحية.
- تقطع بقية النسيج إلى مكعبات 2 ملم في طبق بيتري.
- نقلها إلى ميكروتيوب 1.7 ملم مع فورالين 4 ٪ للتحليل النسيجي والي أنبوب آخر للتحليل الجينوم والبروتينية.
- وضع الأنابيب المجهرية في جره النيتروجين السائل مع النيتروجين السائل. نقل الأنابيب إلى 80 درجه مئوية الفريزر للتخزين الدائم.
ملاحظه: الوقت بين أزاله العينة من المريض ومعالجه الانسجه يجب ان لا تتجاوز 30 دقيقه.
3. زرع الكبد الجراحي مع الانسجه السرطانية المستمدة من المريض
- رش جميع الكائنات القادمة إلى غطاء محرك العقار لعمليه جراحيه مع 70 ٪ ايثيل الكحول.
ملاحظه: وهذا يشمل الاداات الجراحية ، منصات التدفئة ، وآلات التخدير. - قياس وزن مسحه القطن وورقه النسيج.
- تخدير الماوس مع 3-5 ٪ المبخر ايزوفلواني بوضعه في غرفه الاستقراء.
- مره واحده يتم تخدير الماوس بالبالكامل ، وضعه في موقف ضعيف علي وساده التدفئة. وضع مخروط ايزوفلواني علي خطم الماوس لاستنشاق 1.5-3 ٪ ايزوفلواني للحفاظ علي التخدير.
ملاحظه: الماوس يحتاج إلى ان يكون علي لوحه التدفئة خلال الاجراء بأكمله. قد يسبب نقص التدفئة انخفاض حرارة الجسم. - تاكيد التخدير السليم من قبل اي رد فعل عندما يتم وخز القدم من الماوس مع ملقط متناهي الفائق.
- حقن البوبرينورفين (0.6 ملغم/كغ) جلد علي الجناح باستخدام ابره 27 غ علي حقنه صغيره قبل الجراحة.
- تطبيق 70 ٪ ايثيل الكحول إلى البطن وانتشار الفراء صعودا وهبوطا. بعد نشر الفراء ، وتاكيد التصور أسهل من الجلد تحت المنطقة دون الساحلية اليسرى لخفض أسهل. لا يحلق الفراء من البطن.
ملاحظه: فان الفراء إخفاء موقع الشق بعد الجراحة ومنع الماوس من خدش عمليه الشق بعد. ومع ذلك ، يمكنك حلاقه الفراء لمنع العدوى من موقع الشق وفقا للمعايير المؤسسية. - تطبيق اليود والسماح لها ان تمتص في الجلد.
- ضع ستاره جراحيه معقمه مع ثقب بطول 2 سم علي الفاره.
- رفع جلد البطن مع ملقط الفائقة المنحنية وجعل 1 سم عرضيه اليسار شق الجلد سوبربي مع مقص المنحني.
- ادخل طرف المقص المنحني تحت جلد الشق وافتحه قليلا للفصل بين الصفاق والجلد. اسحب المقص من الشق بشفرات مغلقه.
ملاحظه: فتح وإغلاق مقص داخل الماوس يمكن ان يسبب الضرر والنزيف. - حدد موقع الكبد تحت الصفاق. تاكيد لون محمر داكن من خلال الصفاق.
- مع المقص المنحني ، قم باجراء شق عرضي بطول 1 سم في الصفاق. إذا نزف الشريان الصفاقي من حافه القطع ، توقف فورا النزيف مع الحذر.
- انتزاع الانسجه الدهنية باستخدام ملقط الفائقة المنحنية مع يد واحده ، وادراج حافه مسحه من القطن تحت فص الكبد الأيسر ولفه مسحه إلى الأسفل مع اليد الأخرى لإخراج الكبد.
ملاحظه: الاستيلاء علي الانسجه الدهنية مهم للحفاظ علي الانسجه الدهنية من التصاق إلى مسحه القطن. - اكستريورز الكبد علي مسحه القطن ووضع الكبد علي ورقه النسيج غير المنسوجة ماصه.
ملاحظه: ورقه النسيج يلعب اثنين من الأدوار الاساسيه في استقرار الكبد وامتصاص النزيف. - اجراء شق 5 مم في العرض والعمق باستخدام شفره المشرط رقم 11 عقيمه لتشكيل جيب في حمه في حين الضغط بهدوء علي موقع شق مع مسحه القطن.
- ادخل النصل بالتوازي مع سطح الكبد واقطعه أفقيا.
- اضغط علي موقع الشق مع مسحه القطن لوقف اي نزيف.
ملاحظه: لا تبقي شفره عموديه ، والا فانك سوف كسر من خلال الكبد وتجرح السفن الكبيرة في وسط الكبد.
- لفه مسحه القطن التصاعدي لفتح موقع الشق وزرع 1 مم3 مكعب من الانسجه السرطانية في الجيب مع ملقط الفائقة المنحني. سحب الملقط اثناء المتداول مسحه القطن في الدوران العكسي والضغط لأسفل.
ملاحظه: الضغط لأسفل علي موقع الشق مع مسحه القطن بينما تراجع الملقط يساعد علي منع نزوح الورم داخل الجيب. - خذ مسحه القطن برفق من موقع الشق بعد الغرس. انتقل إلى الخطوة 3.19 في أقرب وقت ممكن.
- ضع الاصبغه الدموية القابلة للامتصاص علي موقع الشق.
- تاكيد الأرقاء. إذا استمر النزيف ، أضف المزيد من الأرقاء علي موقع الشق.
- قشر الكبد من ورقه النسيج مع ملقط (ويفضل ان تكون حاده المنتهية) ووضع الكبد مره أخرى في تجويف البطن.
- خياطه الصفاق مع الاربطه مزدوجة باستخدام 5-0 قابل للامتصاص خياطه.
- خياطه الجلد مع الاربطه الثلاثية باستخدام 5-0 قابل للامتصاص خياطه.
ملاحظه: الاربطه الثلاثية تساعد علي منع الشق الجراحي. - مراقبه الماوس حتى مستيقظا تماما ووضعها مره أخرى في القفص.
- قياس وزن مسحه القطن وورقه النسيج مع الدم لحجم النزيف اثناء الجراحة. قارنها مع أوزانها الاصليه قبل الجراحة. تقليل النزيف اثناء الجراحة إلى اقل من 10 ٪ من حجم الدم المتداول في الماوس.
4. جمع ومعالجه الكبد البشري المثقف المنتشرة الخلايا الميلانوما الخلية الخط
- اعداد الخلايا المستزرعة.
- جمع الخلايا وحساب رقم الخلية باستخدام عداد خليه.
- اعداد كميه مناسبه من تعليق الخلية ل 10.0 x 106 خلايا في أنبوب 15 مل.
- تدور الانبوبه في 300 x g لمده 5 دقائق في جهاز الطرد المركزي في درجه حرارة الغرفة.
- أزاله ماده طافي في أنبوب 15 مل. ترك بيليه الخلية في الجزء السفلي من الأنبوب.
- أضافه 50 μL من RPMI 1640 المتوسطة إلى أنبوب 1.7 mL.
- قطع غيض من تلميح 200 μL مع مقص لتكبير فتح الطرف.
- أضافه 60 μL من مصفوفة غشاء الطابق السفلي باستخدام ماصه مع طرف قطع في أنبوب 1.7 mL التي لديها RPMI.
- مزيج RPMI ومصفوفة في أنبوب 1.7 mL. الدوامة.
- أضافه 110 μL من الخليط في بيليه الخلية في أنبوب 15 مل. نقل تعليق الخلية إلى أنبوب 1.7 mL جديد.
- الحفاظ علي أنبوب علي الجليد قبل حقن ابره.
5. زرع ابره جراحيه من الكبد البشري مثقف المنتشرة الخلايا الميلانوما الخلية الخط في الكبد
- اتبع البروتوكول أعلاه من الخطوات 3.1 إلى 3.15.
- جمع تعليق الخلية مع حقنه صغيره مع ابره 27 G.
- ادخل الابره علي طول سطح الكبد وتقدم غيض من الابره 5 مم أعمق.
- حقن 20 μL من تعليق الخلية في الكبد.
- كوي نقطه الادراج في الكبد لمنع تسرب الخلايا المحقونة. تاكيد الأرقاء.
- اتبع البروتوكول أعلاه من الخطوات 3.21 إلى 3.24.
6. CT المسح الضوئي
- ضع الماوس في الدولة المستيقظة.
- مسح الذيل مع وساده الكحول معقمه للتطهير وتوسع الاوعيه.
- حقن 100 μL من الاشعه المقطعية وكيل النقيض من خلال الوريد الذيل مع 27 ز ابره علي حقنه 1 مل.
- انتظر 4 ساعات بعد الحقن قبل أخذ الاشعه المقطعية.
ملاحظه: هو ياخذ 4 [ه] حتى العاملة يكون تناولت بكبده [كوبفر] خلايا. - بعد أربع ساعات من الحقن ، تخدير الماوس الحامل للورم مع 3 – 5% من الايزوفلوان المبخر من خلال وضعه في غرفه الاستقراء.
- بمجرد ان يتم تخدير الفاره بالبالكامل ، ضعها في الموضع المعرض علي CT. ضع مخروط ايزوفلونان علي خطم الماوس ليستنشق 1.5-3 ٪ ايزوفلونان للحفاظ علي التخدير.
- تاكيد التخدير السليم من قبل اي رد فعل عندما يتم وخز القدم من الماوس مع ملقط متناهي الفائق.
- تاخذ الاشعه المقطعية لمده 15 دقيقه.
- تاكد من ان الماوس حتى استيقظ تماما بعد الاشعه المقطعية ووضعها مره أخرى في القفص.
- تقييم لوجود الورم وقياس حجم الورم علي الصور المقطعية.
ملاحظه: عامل التباين يعزز الكبد الطبيعي حمه بحيث يكون من السهل التعرف علي الورم غير المعزز. لا تسيء تفسير المرارة والمعدة كورم.
7. حصاد وتجهيز الانسجه
- الفئران موت ببطء باستخدام CO2 تليها خلع عنق الرحم عن طريق وضع السبابة والإبهام وراء الجمجمة وسحب الجسم من قاعده الذيل. انتقل إلى الخطوة 7.2 في أقرب وقت ممكن.
- وضع الماوس في موقف ضعيف ورذاذ البطن مع 70 ٪ ايثيل الكحول.
- استخدم ملقط معقم ومقص معقم لاجراء شق عرضي بطول 3 سم تحت عمليه الخنجري للكشف عن أعضاء البطن.
- المكوس الانسجه السرطانية وتنفيذ الخطوات 2.1 إلى 2.2.
- تقطع بقية الورم إلى مكعبات 2 ملم في طبق بيتري.
- نقلها إلى أنبوب المبردة مع البرد لأعاده زرع بعد التجميد.
- وضع الأنابيب في حاويه تجميد المبردة مليئه الايزوبروبانول.
- نقل الحاوية إلى 80 درجه مئوية الفريزر للتخزين المؤقت. لا تضع المكعبات الباكية بالتبريد مباشره في خزان النيتروجين السائل. تجميد لهم ببطء في معدل التبريد من-1 درجه مئوية/دقيقه للحفاظ علي الانسجه السرطانية.
- في اليوم التالي ، نقل الأنابيب إلى خزان النيتروجين السائل للتخزين الدائم.
8. أعاده الغرس
- الحفاظ علي الأنابيب المجمدة في جره النيتروجين السائل مع النيتروجين السائل حتى علي استعداد لزرع الانسجه. تقليل التعرض للانسجه إلى درجه حرارة الغرفة للحفاظ علي القدرة علي البقاء وتعزيز فرص الوصول إلى المطعم.
- ذوبان أنبوب بالتبريد في 37 درجه مئوية حمام المياه.
- نفذ الخطوات 2.2 – 2.4.
- زرع الورم المذاب في الفئران كما هو موضح في الخطوات 3.1 – 3.24.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
زرع العظام الجراحية باستخدام طريقه جيب الكبد يمكن زرع الكبد البشري الورم الميلاني سرطان الجلد المنتشر في الكبد الفار مع معدل نجاح عال من 80 ٪ في غضون سته أشهر. الورم الطعم الغريب الترقيع في الكبد كورم الانفرادي دون العقيدات ابنه (الشكل 1 والشكل 3a). تقنيه حقن العظام الجراحية في الكبد باستخدام الخلايا الدقيقة المزروعة بالكبد البشري المنتشرة في الكبد في جميع الحالات (الشكل 2 والشكل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ونماذج الكسب غير المكثف الحالية التي تتطلب عملا كثيفا ، وتستغرق وقتا طويلا ، وباهظه التكلفة لإنشاءها. وقد أنشئت نماذج الماوس الورم المجسم الأورام الخبيثة لسرطان الكبد أكثر من عقدين من الزمان19،20،21. ومع ذلك ، هذه التقنية معقده وتتطلب استخدام المعدات الخاصة ، مثل حامل الابره الصغرى و 6-0 إلى 8-0 الغرز الدقيقة تحت المجهر. يجب ان يكون الورم وانسجه الكبد العادية مخيط بعناية بحيث لا يضر خياطه انسجه الكبد الهشة. التقنيات التقليدية تؤ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.
شكر وتقدير
ونحن نشكر السيد اوهارا ، والسيد ك. سايتو ، والسيد تيراي ، علي استعراض المخطوطة. ويقر المؤلفون بالمراجعة النقدية للمساعدة التحريرية والانجليزيه لهذه المخطوطة من قبل الدكتور ر. ساتو في مركز فوكس تشيس للسرطان. تم دعم العمل الموصوف هنا من قبل صندوق البحوث بوني كرول ، وصندوق البحوث مارك وينزيرل ، وصندوق بحوث سرطان الجلد العين في جامعه توماس جيفرسون ، ومؤسسه المجتمع اوساكا ، و JSPS KAKENHI منحه رقم JP 18K15596 في مدينه اوساكا جامعه. وكانت الدراسات في مختبر الدكتور ا. أبلين مدعومة بمنحه المعاهد القومية للصحة R01 GM067893. وقد تم تمويل هذا المشروع أيضا من قبل جائزه عميد العلوم التحويلية ، وهي جائزه المبادرة البرنامجية لجامعه توماس جيفرسون.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <قوي>المواد والأنسجة< / قوي> | |||
| بوبرينورفين | |||
| CO2< / sub> خزان | |||
| Cryomedium | |||
| Exitron nano 12000 (عامل تباين الجسيمات النانوية القائمة على الأرض القلوية) | Miltenyl Biotec | 130-095-700 | |
| HBSS 1x ، مع الكالسيوم و أمبير المغنيسيوم | كورنينج | 21-020-CM | |
| خلايا الورم الميلانيني العنبي النقيلي في الكبد | |||
| البشري أنسجة الورم الميلانيني في الكبد | يجب أن تتم جميع مناولة الأنسجة في غطاء السلامة الحيوية من المستوى 2. كن حذرا عند العمل مع الأنسجة البشرية ؛ استخدم القفازات دائما وتجنب ملامسة الجلد المباشرة. افترض أن المرضى قد يكونون مصابين بفيروس نقص المناعة البشرية أو غيره من الكائنات الحية شديدة الانتقال. لا تعالج العينات المعروفة بأنها تحمل العدوى. | ||
| بوردو اليود | |||
| الأيزوفلوران | 67618-150-17 | ||
| الأيزوبروبانول | فيشر العلمي | A416-1 | تجنب الاتصال المباشر بالجلد والعين واستنشاق عامل التخدير. |
| النيتروجين | |||
| Matrigel HC | BD | 354248 | |
| NOD. Cg-Prkdcscid< / sup>Il2rgtm1Wjl< / sup>< / em> / SzJ (NSG) الفئران | جاكسون لاب | 5557 | من 4 إلى 8 أسابيع |
| PBS 1x ، بدون الكالسيوم والمغنيسيوم | Corning | 21-031-CM | |
| RPMI 1640 | Corning | 10-013-CV | |
| وسادة تحضير الكحول المعقمة (70٪ كحول الأيزوبروبيل) | منتجات Nice-Pak | B603 | |
| 4٪ محلول عازلة للفوسفات بارافورمالدهايد | واكو | 163-20145 | |
| 70٪ محلول كحول إيثيلي | فيشر ساينتفيك | 04-355-122 | |
| <قوي>الاسم< / قوي | ><قوي>الشركة< / قوي> | <قوي>رقم الكتالوج | تعليقات |
| Equipments | |||
| تمتص الهيموسات | جونسون آند جونسون | 63713-0019-61 | |
| الأوتوكلاف | |||
| قياس | |||
| Cautery | Bovie Medical | MC-23009 | |
| مسحة قطنية | |||
| للطرد | |||
| حاوية التجميد بالتبريد | NALGENE | 5100-0001 | |
| Cryotube | SARSTEDT | 72.379 | |
| مقص منحني | الدقة العالمية | 503247 | |
| ملقط منحني متناهية الصغر | أدوات الدقة العالمية | 501302 | |
| الفريزر | |||
| ورقة القماش | |||
| F / AIR علبة فلتر | هارفارد جهاز هارفارد | 600979 | |
| وسادة | |||
| مبخر الأيزوفلوران | الحرفي العلمي | 66317-1 | |
| النيتروجين | |||
| السائل النيتروجين | السائل Thermo Fisher Scientific | 2123 | |
| Micro-CT scan | Siemens | ||
| حامل إبرة | الدقة العالمية | 501246 | |
| أطباق بتري | زجاجة رذاذ | ||
| غطاء معقم | السلامة الحيوية المستوى 2 خزانة | ||
| معقم رقم 11 مشرط | AD Surgical | A300-11-0 | |
| ملقط مستقيم | أدوات الدقة العالمية | 14226 | |
| ستارة | |||
| تقييد الوريد | الذيل Braintree Scientific | TV-150-STD | |
| حمام | |||
| 1 مل حقنة TB مع إبرة 27 جرام | BD | 309623 | |
| أنبوب 1.7 مل | Bioexpress | C-3260-1 | |
| 5-0 PDO خياطة | AD الجراحية | S-D518R13 | |
| 15 مل أنابيب مخروطية | AZER SCIENTIFIC | ES-9152N | |
| 27 G إبرة | BD | 780301 | |
| 27 جم إبرة | هاميلتون | 7803-01 | |
| 50 مل أنابيب مخروطية | AZER SCIENTIFIC | ES-9502N | |
| 50 & micro ؛ L حقنة صغيرة | دينار | بحريني 80630 | |
| 50 & مايكرو; L حقنة صغيرة | هاميلتون | 7655-01 | |
| حاوية 100 مل | فيشر 12594997 | ||
| 200 & طرف |
المراجع
- Aronow, M. E., Topham, A. K., Singh, A. D. Uveal Melanoma: 5-Year Update on Incidence, Treatment, and Survival (SEER 1973-2013). Ocular Oncology and Pathology. 4 (3), 145-151 (2018).
- Krantz, B. A., Dave, N., Komatsubara, K. M., Marr, B. P., Carvajal, R. D. Uveal melanoma: epidemiology, etiology, and treatment of primary disease. Clinical Ophthalmology. 11, 279-289 (2017).
- Gragoudas, E. S., et al. Survival of patients with metastases from uveal melanoma. Ophthalmology. 98 (3), 383-389 (1991).
- Diener-West, M., et al. Development of metastatic disease after enrollment in the COMS trials for treatment of choroidal melanoma: Collaborative Ocular Melanoma Study Group Report No. 26. Archives of Ophthalmology. 123 (12), 1639-1643 (2005).
- Collaborative Ocular Melanoma Study Group. Assessment of metastatic disease status at death in 435 patients with large choroidal melanoma in the Collaborative Ocular Melanoma Study (COMS): COMS report no. 15. Archives of Ophthalmology. 119 (5), 670-676 (2001).
- Hidalgo, M., et al. Patient-derived xenograft models: an emerging platform for translational cancer research. Cancer Discovery. 4 (9), 998-1013 (2014).
- Kim, M. P., et al. Generation of orthotopic and heterotopic human pancreatic cancer xenografts in immunodeficient mice. Nature Protocols. 4 (11), 1670-1680 (2009).
- Némati, F., et al. Establishment and characterization of a panel of human uveal melanoma xenografts derived from primary and/or metastatic tumors. Clinical Cancer Research. 16 (8), 2352-2362 (2010).
- Wilmanns, C., et al. Modulation of Doxorubicin sensitivity and level of p-glycoprotein expression in human colon-carcinoma cells by ectopic and orthotopic environments in nude-mice. International Journal of Oncology. 3 (3), 413-422 (1993).
- Kang, Y., et al. Proliferation of human lung cancer in an orthotopic transplantation mouse model. Experimental and Therapeutic. 1 (3), 471-475 (2010).
- Fichtner, I., et al. Establishment of patient-derived non-small cell lung cancer xenografts as models for the identification of predictive biomarkers. Clinical Cancer Research. 14 (20), 6456-6468 (2008).
- Marangoni, E., et al. A new model of patient tumor-derived breast cancer xenografts for preclinical assays. Clinical Cancer Research. 13 (13), 3989-3998 (2007).
- Bergamaschi, A., et al. Molecular profiling and characterization of luminal-like and basal-like in vivo breast cancer xenograft models. Molecular Oncology. 3 (5-6), 469-482 (2009).
- Ho, K. S., Poon, P. C., Owen, S. C., Shoichet, M. S. Blood vessel hyperpermeability and pathophysiology in human tumour xenograft models of breast cancer: a comparison of ectopic and orthotopic tumours. BMC Cancer. 12, 579(2012).
- Hoffman, R. M. Patient-derived orthotopic xenografts: better mimic of metastasis than subcutaneous xenografts. Nature Reviews Cancer. 15 (8), 451-452 (2015).
- Rubio-Viqueira, B., Hidalgo, M. Direct in vivo xenograft tumor model for predicting chemotherapeutic drug response in cancer patients. Clinical Pharmacology & Therapeutics. 85 (2), 217-221 (2009).
- Ozaki, S., et al. Establishment and Characterization of Orthotopic Mouse Models for Human Uveal MelanomaHepatic Colonization. American Journal of Pathology. 186 (1), 43-56 (2016).
- Kageyama, K., et al. Establishment of an orthotopic patient-derived xenograft mouse model using uveal melanomahepatic metastasis. Journal of Translational Medicine. 15 (1), 145(2017).
- Fu, X. Y., Besterman, J. M., Monosov, A., Hoffman, R. M. Models of human metastatic colon cancer in nude mice orthotopically constructed by using histologically intact patient specimens. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 88 (20), 9345-9349 (1991).
- Rashidi, B., et al. An orthotopic mouse model of remetastasis of human colon cancer liver metastasis. Clinical Cancer Research. 6 (6), 2556-2561 (2000).
- Fan, Z. C., et al. Real-time monitoring of rare circulating hepatocellular carcinoma cells in an orthotopic model by in vivo flow cytometry assesses resection on metastasis. Cancer Research. 72 (10), 2683-2691 (2012).
- Jacob, D., Davis, J., Fang, B. Xenograftictumor modelsinmiceforcancer research, atechnical review. Gene Therapy and Molecular Biology. 8, 213-219 (2004).
- Ahmed, S. U., et al. Generation of subcutaneous and intrahepatic human hepatocellular carcinoma xenografts in immunodeficient mice. Journal of Visualized Experiments. 25 (79), e50544(2013).
- Kim, M., et al. Generation of humanized liver mouse model by transplant of patient-derived fresh human hepatocytes. Transplantation Proceedings. 46 (4), 1186-1190 (2014).
- Lavender, K. J., Messer, R. J., Race, B., Hasenkrug, K. J. Production of bone marrow, liver, thymus (BLT) humanized mice on the C57BL/6 Rag2(-/-)γc(-/-)CD47(-/-) background. Journal of Immunological Methods. 407, 127-134 (2014).
- Boll, H., et al. Micro-CT based experimental liver imaging using a nanoparticulate contrast agent: a longitudinal study in mice. PLoS One. 6 (9), e25692(2011).
- Zhao, X., et al. Global gene expression profiling confirms the molecular fidelity of primary tumor-based orthotopic xenograft mouse models of medulloblastoma. Neuro-Oncology. 14 (5), 574-583 (2012).
- Rubio-Viqueira, B., et al. An in vivo platform for translational drug development in pancreatic cancer.Clinical. Cancer Research. 12 (15), 4652-4661 (2006).
- Siolas, D., Hannon, G. J. Patient-derived tumor xenografts: transforming clinical samples into mouse models. Cancer Research. 73 (17), 5315-5319 (2013).
- Alkema, N. G., et al. Biobanking of patient and patient-derived xenograft ovarian tumour tissue: efficient preservation with low and high fetal calf serum based methods. Scientific Reports. 6 (5), 14495(2015).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
