يصف الأسلوب التهاب--حساسية نقص الأكسجين--الدماغية وإصابات الدماغ فرط الاكسده في النمس P17 لنمذجة التفاعل المعقد بين التهاب المطول وإصابات المخ المؤكسدة التي تعاني منها في عدد من الرضع الخدج الراحل.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج النمس من التهاب-حساسة في وقت متاخر الخدج-أصابه الدماغ الدماغية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
هناك حاجه مستمرة للنماذج ذات الصلة سريريا من العدوى في فتره ما قبل الولادة ونقص الأكسجين-نقص التروية (HI) التي لاختبار التدخلات العلاجية للرضع مع المضاعفات العصبية من قبل النضج. وتعد الشركات المرشحة المثالية لنمذجة الدماغ البشري قبل الأوان ، لأنها تولد العقول الحية وتطور الادمغه المهبلية بعد الولادة. عند الولادة ، ونمو الدماغ النمس يشبه الجنين 13 أسبوعا الإنسان ، مع يوم بعد الولادة (P) 17 مجموعات تعتبر مساويه للرضع في الحمل 32-36 أسبوعا. نحن وصف نموذج الاصابه في النمس P17 ، حيث يتبع أداره عديد السكاريد الثنائية نقص التروية الدماغية ، نقص الأكسجين ، و hyperoxia. يحاكي هذا التفاعل المعقد بين التهابات المطولة ، ونقص التروية ، ونقص الأكسجين ، والاكسده التي يعاني منها عدد من الولدان الذين يصابون بإصابات دماغيه. تعرض الماشية المصابة مجموعه من شده الاصابه الاجماليه ، مع التغيرات المورفولوجية في الدماغ بما في ذلك تضييق الجيروسكوبات القشرية المتعددة والكبريت المصاحب. كما تظهر الإصابات التي أصيب بها المصابون تباطؤ النمو المنعكس ، وسرعه إبطا وأكثر تنوعا في التنقل في المنصة اليه ، وانخفاض الاستكشاف في حقل مفتوح. يوفر هذا النموذج منصة لاختبار العلاجات المفترضة للرضع المصابين باعتلال الدماغ حديثي الولادة المرتبطة بالتهاب ومرحبا ، ودراسة أليات الاصابه التي تؤثر علي التنمية القشرية ، والتحقيق في المسارات التي توفر المرونة في غير متاثر الحيوانية.
المقدمة
هناك حاجه مستمرة لنماذج الحيوانية الكبيرة التي تعكس الفيزيولوجيا المرضية من قبل النضج ونقص الأكسجين في فتره ما قبل الولادة-نقص التروية التي يمكن اختبار التدخلات العلاجية للرضع. في 2017 ، 9.93 ٪ من الرضع 382,726 ولدوا في الولايات المتحدة ولدوا الخدج ، و 84 ٪ من هؤلاء الرضع ولدوا بين 32 و 36 أسابيع من الحمل1. في الأطفال الخدج ، يكون التعرض للعدوى أو التهابات في الولادة أمرا شائعا ، حيث يمكن للتنشيط المناعي للأمهات بسبب مسببات الامراض الفيروسية أو البكتيرية ان يبدا المخاض قبل الأوان. بعد الولادة ، يتعرض الرضع الخدج لخطر الاصابه بالإنتان المبكر أو المتاخر2. وكثيرا ما يعاني الأطفال الخدج أيضا فترات من نقص الأكسجين ، وانخفاض ض....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وقد أجريت الإجراءات وفقا لدليل المعاهد القومية للصحة لرعاية واستخدام المختبرات الحيوانية وكجزء من البروتوكول المعتمد من قبل لجنه الرعاية والاستخدام المؤسسي للحيوانات في جامعه واشنطن.
1. الاعداد وأداره LPS
ملاحظه: راجع الشكل 1 للجدول الزمني للإجراءات.
- قبل البدء في الاجراء ، ختم ، تعقيم والاوتوكلاف جميع الاداات الجراحية والستائر الجراحية. اعداد الادويه قبل الجراحة في قوارير معقمه. احسب معدل التدفق المطلوب لاستبدال الهواء في غرفه نقص الأكسجين/hyperoxia مع الغاز التجريبي في 8 – 10 دقيقه.
- اعداد عديد السكاريد (lps من e. كولاي 055: B5) في محلول ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
من 34 (ن = 18 الذكور, ن = 16 إناث) الحيوانية من سته الصغار المعرضين للاهانه, ثمانيه الماشية (24%; n = 4 الذكور, ن = 4 الإناث) في المجموعة المصابة توفي خلال فتره نقص الأكسجين الثاني (ن = 5), خلال أداره درجه الحرارة (ن = 2) في المجموعة المصابة ، تسعه من 26 ناج (35%) إصابات إجماليه ظاهره. وأصيبت خمسه من الماشية (ن = 5 ذكور) بإصابات متوسطه ، وأصيبت أربعه من الماشية (ن = 2 ذكور ، ن = 2 إناث) بإصابات شديده ، عرفت بأنها عشرات الامراض الاجماليه من 2 إلى 5 ومن 6 إلى 9 علي التوالي (الشكل 2ا
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ونظرا لأوجه التشابه المادية والتنموية المشتركة بين الدماغ النمس والدماغ البشري ، فان النمس يستخدم بشكل متزايد لنمذجة إصابات الدماغ البالغة والتنموية. 8،9،10،11،12. ومع ذلك ، تشير البحوث حتى الآن إلى ان الدماغ النمس هو علي حد سواء مقاومه للاصابه الاوليه ، فضلا عن البلاستيك عاليه ، مع العجز السلوكية تتناقص مع مرور الوقت حتى في وضع الإصابات المرضية مرئية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.
شكر وتقدير
تم تمويل تطوير النموذج بيل وميليندا غيتس المؤسسة ، فضلا عن المعاهد القومية للصحة منحه 5R21NS093154-02 (NICHD).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 80٪ أكسجين | Praxair | ||
| 9٪ أكسجين | Praxair | ||
| ماصة واقي منضدة | Kimtech | 7546 | |
| المنصة الآلية | Noldus | ||
| Betadine فرك | |||
| Bupivacaine | باترسون البيطري | 07-888-9382 | |
| البوبرينورفين | |||
| الفرجار | SRA منتجات | القياس ME-CAL-FP-200 | نطاق 200 مم ، دقة 0.01 مم |
| القطن الشاش الإسفنج | فيشر العلمي | 22028556 | |
| إرقاء ناعم منحني | Roboz | RS-7101 | |
| ملقط منحني | أدوات الدقة | العالمية 501215 | |
| إرقاء ربط خياطة منحنية | Roboz | RS-7111 | |
| Ethovision برنامج تتبع Noldus | |||
| Eye Lubricant | Rugby | NDC 0536-1970-72 | |
| Ferrets (Mustela putorius furo) | Marshall Biosciences | Outbred (بدون سلالة محددة) | |
| Formalin | Fisher Scientific | SF100-4 | 10٪ (عازلة الفوسفات / معتمدة) |
| ماكينة قص الشعر | كونير | GMT175N | |
| محاقن الأنسولين | BD | 329461 | 0.3 سم مكعب 3 مم 31 جم |
| إيزوفلوران | بيرامال | 66794-017-25 | |
| ليدوكائين | باترسون بيطري | 07-808-8202 | |
| قائمة LPS | البيولوجية | LPS فائقة النقاء # 423 | |
| مستشعر الأكسجين | BW تنبيه الغاز | GAXT-X-DL-2 | |
| بنتوباربيتال | |||
| Tellfresh | 1960 | 10 لتر ؛ 373 × 270 × 135 مم < > 3 < / sup> | |
| محلول ملحي ، 0.9٪ | Hospira | RL-4492 | |
| شفرة مشرط | Integra Miltex | 297 | |
| مقبض مشرط | أدوات الدقة العالمية | 500236 | # 3 ، 13 سم |
| خياطة معقمة | ناعمة أدوات العلوم | 18020-50 | الحرير المضفر ، 5/0 |
| المشبك الجراحي | أدوات العلوم الدقيقة | 12020-09 | |
| مزيل المشبك الجراحي | أدوات العلوم الدقيقة | 12023-00 | |
| الستائر الجراحية | Medline Unidrape | VET3000 | |
| القفازات الجراحية | Ansell Perry Inc | 5785004 | |
| مقاطع Surigical | أدوات العلوم الدقيقة | 12022-09 | |
| ميزان حرارة (مستقيم) | ميزان حرارة YSI | Precision 4000A | |
| (ماء) | فيشر ساينتفيك | 14-648-26 | |
| شريط سري | Grafco | 3031 | |
| حمام مائي | TSCOL19 Thermo Scientific | 19 لتر |
المراجع
- Martin, J. A., Hamilton, B. E., Osterman, M. J. K., Driscoll, A. K., Drake, P. Births: Final Data for 2017. National Vital Statistics Report. 67 (8), 1-49 (2018).
- Vanhaesebrouck, P., et al. The EPIBEL study: outcomes to discharge from hospital for extremely preterm....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
