هنا، نقدم بروتوكول لجمع أطياف رامان البؤرية من البشر في الدراسات السريرية جنبا إلى جنب مع النهج الكيميائية للإزالة الطيفية الخارجية واستخراج لاحق ة من السمات الرئيسية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
حل المياه والبروتينات والدهون من في فيفو الأطياف رامان البؤرية من الطبقة القرنية من خلال نهج قياس كيميائي
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تطوير هذا في الجسم الحي البؤري رامان طريقة مطيافية تمكن من القياس المباشر للمياه والبروتينات والدهون مع دقة عمق في البشر. هذه المعلومات مهمة جدا للأمراض المتصلة بالبشرة وتميز أداء منتجات العناية بالبشرة. ويوضح هذا البروتوكول طريقة لجمع أطياف رامان البؤرية والتحليل اللاحق لمجموعة البيانات الطيفية التي تستفيد من المقاييس الكيميائية. والهدف من هذه الطريقة هو وضع بروتوكول موحد لجمع البيانات وتوفير التوجيه العام لتحليل البيانات. المعالجة المسبقة (على سبيل المثال، إزالة الأطياف الخارجية) هي خطوة حاسمة عند معالجة مجموعات البيانات الكبيرة من الدراسات السريرية. وعلى سبيل المثال، نقدم إرشادات تستند إلى المعرفة المسبقة لمجموعة البيانات لتحديد أنواع القيم الخارجية ووضع استراتيجيات محددة لإزالتها. يتم إجراء تحليل مكون رئيسي، ويتم مقارنة أطياف التحميل بالأطياف من المواد المرجعية لتحديد عدد المكونات المستخدمة في التحليل النهائي لدقة منحنى المتغيرات المتعددة (MCR). وقد نجح هذا النهج في استخراج معلومات ذات مغزى من مجموعة بيانات طيفية كبيرة.
المقدمة
في الدراسات السريرية، في الجسم الحي البؤري رامان مطياف أظهرت قدرتها الفريدة لتحديد سمك القرنية الطبقة ومحتوى المياه1،2،3،4،وتتبع اختراق المواد النشطة تطبق موضعيا على الجلد5،6. كنهج غير الغازية، يكشف مطياف رامان البؤري الإشارات الجزيئية على أساس أوضاع الاهتزاز. وبالتالي، لا حاجة لوضع العلامات7. في الجسم الحي البؤري رامان مطيافييوفر المعلومات الكيميائية مع دقة عمق استنادا إلى الطبيعة البؤرية لهذه التقنية. هذه المعلومات التي تعتمد على العمق مفيدة جدا في دراسة آثا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وقد وافقت لجنة الاستعراض المؤسسي لمستشفى بيجين للأطفال على هذه الدراسة امتثالا للمبادئ التوجيهية الأخلاقية لإعلان هلسنكي لعام 1975. وقد أجريت وفقا للمبادئ التوجيهية التراث الثقافي غير المادي للممارسة السريرية الجيدة. وقد أجريت الدراسة في الفترة من أيار/مايو إلى تموز/يوليه 2015.
1. جمع في الجسم الحي الأطياف رامان البؤرية من البشر مع التهاب الجلد التأتبي
- إدراج المواضيع التي تتوافق مع المعايير التالية.
- تشمل مواضيع تتراوح أعمارهم بين 4-18 سنة.
- تشمل الأشخاص الذين يعانون من التهاب الجلد التأتبي الخفيف إلى المعتدل (درجة 2 أو 3 وفقا للتقييم العالمي للطبيب) مع أعراض المرض النشط على 5٪ -30٪ من سطح الجسم، مع ما لا يقل عن ا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
في هذه الدراسة السريرية، تم جمع الأطياف رامان في الجسم الحي البؤري من 28 موضوعا ً تتراوح أعمارهم بين 4 و18 سنة. وقد جُمع ما مجموعه 862 30 أطياف رامان مع بروتوكول جمع البيانات المذكور أعلاه. تحتوي مجموعة البيانات الطيفية الكبيرة هذه على 20% من القيم الخارجية الطيفية كما هو موضح في الشكل 4ألف. تمت إزالة الأطياف الخارجية المنخفضة للإشارة إلى الضوضاء بعد تحديد سطح الجلد، تليها PCA لتحديد الأطياف مع ميزات ضوء الغرفة. العامل الثالث في هذا النموذج PCA هو تحديد قمم ضوء الغرفة. ويتأكد ذلك من خلال.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
أثناء جمع البيانات، كما هو موضح في القسمين 2 و3 من البروتوكول، تم جمع كل ملف عمق في منطقة مع اتصال بين نافذة الصك والجلد من خلال العثور على المناطق الداكنة من الصور المجهرية التي تم تسليط الضوء عليها في الدوائر الحمراء في الشكل 2جيم وبمجرد تحديد هذه المناطق، كان من الضروري بدء ملف عمق فوق سطح الجلد لتحديد موقع سطح الجلد بدقة لإجراء تحليل البيانات. وقد استُخدم موقع سطح الجلد فيما بعد لتحديد العمق النسبي لكل طيف في ملف العمق المقابل. كما هو مذكور في القسم 1 من البروتوكول، بدء.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
ويقر المؤلفون إلى حد كبير بالدعم المالي المقدم من قسم الرعاية التحليلية والتطهير الشخصي للوظائف المؤسسية. ونود أن نعرب عن امتناننا للمديرين المعاوبين التحليليين السيدة ياسمين وانغ والدكتور روب غاردنر على توجيههم ودعمهم، والسيدة لي يانغ على مساعدتها في جمع البيانات.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مصل الأبقار الألبومين | سيجما - ألدريتش | ||
| كوليسترول | سيجما - ألدريتش | ||
| كوليسترول 3-كبريتات الصوديوم | سيجما - ألدريتش | ||
| دي - إريثرو - ديهيدروسفينجوزين | سيجما - ألدريتش | ||
| دي ماء | منقى مع ميليبور (18.2 م أوميغا ؛) | ||
| محلل الجلد Gen2-SCA | River Diagnostics ، روتردام ، هولندا | Gen2 | |
| Matlab 2018b | Mathwork | 2018b | |
| N-behenoyl-D-erythro-sphingosine | Avanti Polar Lipids، Inc. | ||
| N-Lignoceroyl-D-erythro-sphinganine (سيراميد) Avanti | Polar Lipids، Inc. | ||
| حمض الأوليك | سيجما ألدريتش | ||
| حمض البالمتيك | سيجما ألدريتش | ||
| حمض بالميتوليك | سيجما ألدريتش | ||
| PLS_Toolbox الإصدار 8.2 | Eigenvector Research Inc. | 8.2 | |
| تشخيص نهر RiverICon | ، روتردام ، هولندا | الإصدار 3.2 | |
| Squalene | Sigma-Aldrich | ||
| Stearic Acid | Sigma-Aldrich |
المراجع
- Caspers, P., Lucassen, G., Bruining, H., Puppels, G. Automated depth - scanning confocal Raman microspectrometer for rapid in vivo determination of water concentration profiles in human skin. Journal of Raman Spectroscopy. 31 (8-9), 813-818 (2000).
- Crowther, J., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
