يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

إصابة بالون فئلي من ضغط الشريان السباتي الجرذ مع تطبيق علاجي شامل

5.1K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/60473

⸱

يوليو 9, 2020

 , 

في هذه المقالة

ملخص

إصابة بالون الشريان السباتي الفئران يحاكي إجراء قسطرة سريرية تنفيذها لاستعادة تدفق الدم في الأوعية تصلب الشرايين. هذا النموذج يحفز استجابة إصابة الشرايين عن طريق اخلع جدار الشريان, وdenuding طبقة إينييتال من الخلايا البطانية, مما تسبب في نهاية المطاف إعادة عرض واستجابة فرط اللدائنية في الايحاء.

الملخص

ولا تزال أمراض القلب والأوعية الدموية السبب الرئيسي للوفاة والعجز في جميع أنحاء العالم، ويرجع ذلك جزئيا إلى تصلب الشرايين. تضيّق اللويحة الثرثرائية منطقة السطح الإنارة في الشرايين، مما يقلل من تدفق الدم الكافي إلى الأعضاء والأنسجة البعيدة. سريريا، إجراءات إعادة الأوعية مثل قسطرة البالون مع أو بدون وضع الدعامات تهدف إلى استعادة تدفق الدم. على الرغم من أن هذه الإجراءات إعادة تدفق الدم عن طريق الحد من عبء البلاك، فإنها تضر جدار السفينة، الذي يبدأ استجابة الشفاء الشرياني. تسبب استجابة الشفاء المطولة إعادة الأوعية الدموية الشريانية، أو إعادة تضييق، في نهاية المطاف الحد من النجاح على المدى الطويل من هذه الإجراءات revascularization. لذلك ، تعتبر نماذج الحيوانات قبل الكلينيكية جزءًا لا يتجزأ من تحليل الآليات الفسيولوجية الباثولوجية التي تقود إعادة الاستراحة ، وتوفر الفرصة لاختبار الاستراتيجيات العلاجية الجديدة. نماذج مورين هي أرخص وأسهل للعمل على من نماذج الحيوانات الكبيرة. بالون أو الأسلاك إصابة هما أسلوبي الإصابة المقبولة شيوعا المستخدمة في نماذج مورين. نماذج إصابة بالون على وجه الخصوص تحاكي إجراء رأب الأوعية السريرية وتسبب ضررا كافيا للشريان لتطوير ريسينسيس. هنا نحن وصف التفاصيل الجراحية لأداء وتحليل هباتية في النسيج المعدلة، والضغط التي تسيطر عليها الفئران نموذج إصابة بالون الشريان السباتي. بالإضافة إلى ذلك، يسلط هذا البروتوكول الضوء على كيفية استخدام التطبيق المحلي للحساسية للمعالجة لمنع تضخم التنسج النوبى. وأخيرا، نقدم المجهر الفلوري ورقة ضوء كمقاربة جديدة لتصوير وتصور إصابة الشرايين في ثلاثة أبعاد.

المقدمة

أمراض القلب والأوعية الدموية (القلب والأوعية الدموية) لا يزال السبب الرئيسي للوفاة في جميع أنحاء العالم1. تصلب الشرايين هو السبب الكامن وراء معظم الأمراض والوفيات المرتبطة بالداء القلبي الوعائي. تصلب الشرايين هو تراكم البلاك داخل الشرايين التي تؤدي إلى ضيق تجويف، مما يعوق ضخ الدم السليم للأعضاء والأنسجة البعيدة2. تشمل التدخلات السريرية لعلاج تصلب الشرايين الشديد رأب الأوعية بالون مع وضع الدعامات أو بدونه. ينطوي هذا التدخل على تقدم قسطرة بالون إلى موقع البلاك ، وتضخيم البالون لضغط البلاك على جدار الشريان ، وتوسيع منطقة الإنارة. هذا الإجراء يضر الشريان, ومع ذلك, بدء استجابة إصابة الشرايين3. يؤدي الت....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

وقد تمت الموافقة على جميع الأساليب المذكورة هنا من قبل لجنة رعاية الحيوانات واستخدامها المؤسسية (IACUC) من جامعة نورث كارولينا في تشابل هيل.

1. إجراءات ما قبل الجراحة

  1. تعقيم الأدوات الجراحية. أوتوكلاف جميع الأدوات الجراحية قبل الجراحة. إذا كان إجراء عمليات جراحية متعددة في نفس اليوم، تعقيم الأدوات بين العمليات الجراحية باستخدام معقمة حبة جافة.
  2. إعداد العلاجية في 25٪ بلورونيكس-127 هلام (المخفف في الماء المقطر العقيم).
  3. قم بإعداد قسطرة بالون Fogarty 2F إلى insufflator ووضع نهاية البالون من القسطرة في حقنة 1 مل مليئة بالمحلول الملحي.
  4. حث التخدير عن طريق وضع الفئران في غرفة مع isoflurane 5٪.
    1. إزالة الف....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

ويبين الشكل 1 جميع المواد والأدوات الجراحية المستخدمة لإجراء هذه الجراحة. Hematoxylin & eosin (H & E) تلطيخ من مقطعين الشرياني المصابين لمدة أسبوعين يسمح لتصور واضح من فرط التنسج النيوئي. يظهر الشكل 2 صور تمثيلية لـ H&E-مقاطع عرضية شريانية ملونة من شريان صحي ومصاب ومعالج. كما يحدد الشكل 2 كيفية قياس مستوى تضخم التنسج الحديث في شريان مصاب باستخدام ImageJ، وهو برنامج لمعالجة الصور يستخدم على نطاق واسع. وباستخدام هذا النهج،.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

إصابة بالون الشريان السباتي الفئران هي واحدة من أكثر النماذج الحيوانية ريسينسيسس المستخدمة على نطاق واسع ودراسة. وقد أبلغت كل من الأصلي نموذج إصابة البالون3 وتعديل الضغط التي تسيطر عليها الفرق10 الاختلافات إصابة العديد من جوانب استجابة إصابة الشرايين التي تحدث أيضا في البشر، مع القيود القليلة التي هي أن ثركمبوس الغنية الفيبرين نادرا ما يتطور والالتهاب المحلي هو الحد الأدنى بالمقارنة مع نماذج الإصابات الأخرى مثل في الأرنب فرط الكوليسترول أو نماذج porcine9

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون أنه لا يوجد تضارب في المصالح فيما يتعلق بنشر هذه المخطوطة.

شكر وتقدير

تم دعم N.E.B بمنحة تدريبية من المعهد الوطني لعلوم الصحة البيئية (5T32ES007126-35، 2018)، ورابطة القلب الأمريكية زمالة ما قبل الدكتوراه (20PRE35120321). E.S.M.B كان باحثا KL2 بدعم جزئي من قبل مركز قيادة الأمم المتحدة للعلوم السريرية والعلوم المترجمة برنامج العلماء K12 (KL2TR002490، 2018)، والمعهد الوطني للقلب والرئة والدم (K01HL145354). يشكر المؤلفون الدكتور بابلو أرييل من مختبر خدمات المجهر التابع لقيادة الأمم المتحدة لمساعدته في LSFM. تم إجراء الفحص المجهري للوراء الفلوري في مختبر خدمات المجهر. ويدعم مختبر خدمات المجهر، قسم علم الأمراض والطب المختبري، جزئيا من قبل P30 CA016086 مركز السرطان منحة الدعم الأساسية لمركز مكافحة السرطان خطبرجر مركز شامل للسرطان.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1 مل حقنةفيشر14955450
1 مل حقنة مع إبرةBD309626
2 قسطرة إدواردز لايفساينسبالون فرنسي 120602F
4-0 خياطة إثيلون (نايلون)إيثيكون662H
4-0 فيكريل خياطةإيثيكون إنكJ214H
7-0 خياطة البرولينEthicon Inc8800H
70٪ كحول
مضاد للأرانب Alexa Fluor 647Thermo Fisher ScientificA21245
كبريتات الأتروبينVedco Incللاستخدام البيطري
مسحات قطنيةPuritan806-WC
العلوم الدقيقة المنحنية Hemostats13009-12
ملقط منحني ناعمأدوات العلومالدقيقة 11203-25
مقص ناعمأدوات العلوم الدقيقة14090-11
شاشCovidien2252
IHC-Tek المخفف (درجة الحموضة 7.4)IHC WorldIW-1000
InsufflatorMerit MedicalIN4130
محلول
اليودمرهم العين التشحيمDechraللاستخدام البيطري
العلوم الدقيقة مقص Mayo14010-15
أدوات العلوم الدقيقة18055-05
مقص التشريح المجهريأدوات العلومالدقيقة 15004-08
Micro-Serrefine Clamp تطبيق الملقطأدوات العلوم الدقيقة18057-14
حامل إبرةأدوات العلوم الدقيقة12003-15
Pluronic-127 (مخفف في ماء معقم)Sigma-AldrichP244325٪ محضر
Rabbit Anti-CD31Abcamab28364
مشابك الورق المنحنية للضام
Rimadyl (Carprofen)Zoetis Incللاستخدام البيطري
محلولملحي
العلومالملقط القياسية11006-12
الستارة المعقمةDynarex4410
T-Pins
إيثيلي أدوات أدوات الدقيقة تعمل بشكل جيدأدوات الدقيقة

المراجع

  1. American Heart Association. Cardiovascular Disease: A Costly Burden for America, Projections Through 2035. American Heart Association CVD Burden Report. , (2017).
  2. Singh, R. B., Mengi, S. A., Xu, Y. J., Arneja, A. S., Dhalla, N. S. Pathoge....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

إصابة الشريان السباتي بالبالونإصابة بالبالون محكومة الضغطمجهر الفلورية بالورقة الضوئيةتحليل فرط تنسج البطانة الداخليةتقنية المشبك الوعائيطريقة شق الشريانالشريان السباتي المشتركالتحليل النسيجي للشريانتطبيق الهلام العلاجي