نُظهر اختبار سمية الطحالب للمواد الصعبة (مثل المواد الملونة أو المواد النانوية) باستخدام إعداد مضاء عموديًا بمُدرّي.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
إعداد صغير لاختبار سمية الطحالب للمواد النانوية والمواد الصعبة الأخرى
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
13 - بيانات السمية الإيكولوجية هي شرط لتسجيل المواد الكيميائية قبل السوق وما بعدها بواسطة اللوائح الأوروبية والدولية (مثل نظام REACH). وكثيراً ما يستخدم اختبار سمية الطحالب في التقييم التنظيمي للمخاطر الكيميائية. ومن أجل تحقيق موثوقية عالية وقابلية استنساخ عالية، يعد وضع مبادئ توجيهية موحدة أمرا حيويا. وبالنسبة لاختبار السمية الطحالب، تتطلب المبادئ التوجيهية ظروفاً مستقرة وموحدة من المعلمات مثل درجة الحرارة ودرجة الحرارة ومستويات ثاني أكسيد الكربون وكثافة الضوء. ويمكن أن تتداخل المواد النانوية وغيرها من المواد التي تسمى بمواد صعبة مع الضوء مما يسبب تباينا كبيرا في النتائج التي تم الحصول عليها مما يعوق قبولها التنظيمي. ولمعالجة هذه التحديات، قمنا بتطوير LEVITATT (جدول الإضاءة العمودي LED لاختبارات سمية الطحالب). يستخدم الإعداد إضاءة LED من الأسفل مما يسمح بتوزيع الضوء المتجانس والتحكم في درجة الحرارة مع تقليل تظليل العينة الداخلية. الإعداد يحسن حجم العينة للكتلة الحيوية الكم ولا في الوقت نفسه ضمان تدفق كافية من CO2 لدعم النمو الأسي للطحالب. بالإضافة إلى ذلك، يمكن تصميم مواد حاويات الاختبار لتقليل الامتزاز والتطاير. عند اختبار المواد الملونة أو تعليق الجسيمات، واستخدام أضواء LED يسمح أيضا لزيادة شدة الضوء دون توليد الحرارة إضافية. يزيد التصميم المدمج والمتطلبات الدنيا من المعدات من إمكانيات تنفيذ نظام LEVITATT في مجموعة واسعة من المختبرات. في حين أن الامتثال للمبادئ التوجيهية ISO ومنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي لاختبار السمية الطحالب، أظهرت LEVITATT أيضا انخفاض في التغير بين العينات لمادتين مرجعيتين (3،5-ديكولوروبفينول وK2Cr2O7)وثلاثة المواد النانوية (ZnO، CeO2،وBaSO4)مقارنة مع قارورة إرلنماير وألواح microtiter.
المقدمة
اختبار السمية الطحالب هو واحد من ثلاثة اختبارات إلزامية فقط تستخدم لتوليد بيانات السمية الإيكولوجية المطلوبة لتسجيل المواد الكيميائية قبل وبعد السوق بواسطة اللوائح الأوروبية والدولية (مثل REACH1 و TSCA (الولايات المتحدة الأمريكية)). ولهذا الغرض، وضعت المنظمات الدولية مبادئ توجيهية موحدة لاختبار الطحالب (مثل المنظمة الدولية للتوحيد القياسي ومنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي). هذه المعايير والمبادئ التوجيهية اختبار يصف ظروف الاختبار المثالي من حيث درجة الحرارة ودرجة الحرارة، ومستويات ثاني أكسيد الكربون وكثافة الضوء. غير أن الحفاظ على ظروف اختبار مستقرة أثناء اختبار الطحالب أمر صعب في الممارسة العملية، وتعاني النتائج من مشاكل في قابلية ا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. وصف الإعداد LEVITATT
- استخدام 20 مل قنينات الزجاج التلألؤ(الشكل 1، إدراج 1) السماح للاختراق الضوء. بدلا من ذلك، يمكن استخدام قارورة بلاستيكية خفيفة قابلة لل ركلة. كمّيّة ال [اّينتّر هّدّدّدّيّرّيّ].
- استخدام تعليق اختبار 4 مل على الأقل في بداية الاختبار للسماح بالتجريد الكمي للكتلة الحيوية وتحديد الخواص/القياس الكمي للمواد النانوية أثناء وبعد الاحتضان(الشكل 1، إدراج 2).
- تناسب قوارير مل 20 مل مع قبعة (الشكل 1، إدراج 3) حيث يتم حفر ثقب صغير (ما يقرب من 1 مم في القطر) للسماح لتبادل CO2 مع الغلاف الجوي. هذا التبادل أمر بالغ الأهمية لضمان مستو....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
يتم إجراء اختبار أولي مع مادة مرجعية لتحديد حساسية سلالة الطحالب. المواد المرجعية المستخدمة بانتظام لر. 10000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000 7,8 ويبين الشكل 3 والجدول 2 نتيجة تمثيلية لاختبار الطحالب بما في ذلك تركيب المنحنى والنواتج الإحصائية عندما تطبق حزمة جمهورية الكونغو الديمقراطية في R على معدلات النمو.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
العوالق النباتية تحول الطاقة الشمسية وثاني أكسيد الكربون إلى مادة عضوية، وبالتالي لها دور محوري في النظام الإيكولوجي المائي. ولهذا السبب، تدرج اختبارات تثبيط نمو الطحالب كأحد ثلاثة اختبارات إلزامية للسمية المائية اللازمة لتقييم المخاطر التنظيمية للمواد الكيميائية. والقدرة على إجراء اختبار سمية الطحالب الموثوق به والقابلة للتكرار أمر أساسي في هذا الصدد. اختبار الاجهزة باستخدام قارورة Erlenmeyer يقدم مجموعة من variabilities والمضايقات كما هو موضح في المقدمة. للتحايل على هذه المسألة، تم اقتراح لوحات microtiter
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم تمويل هذا البحث من قبل PATROLS - الأدوات المتقدمة لاختبار NanoSafety ، اتفاقية المنحة 760813 في إطار برنامج البحث والابتكار في أفق 2020.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| أسيتون | سيجما ألدريتش | V179124 | |
| كلوريد الأمونيوم | سيجما ألدريتش | 254134 | |
| زجاجات بلو كاب (1 لتر) | Buch & amp هولم أ / س | 9072335 | |
| حمض البوريك | سيجما ألدريتش | B0394 | |
| كلوريد الكالسيوم ثنائي هيدرات | سيجما ألدريتش | 208290 | |
| لوح أكريليك شفاف (40 × 40 سم) كوبالت | |||
| (II) كلوريد سداسي هيدرات | سيجما ألدريتش | 255599 | |
| كلوريد النحاس (II) ثنائي هيدرات | سيجما ألدريتش | 307483 | |
| حمض الإيثيلين ديامين تترا أسيتيك ملح ثنائي الصوديوم ثنائي هيدرات | سيجما ألدريتش | ؛ E5134 | |
| مقياس الطيف الضوئي الفلوري F-7000 | هيتاشي | ||
| حمض الهيدروكلوريك | سيجما ألدريتش | 258148 | |
| سداسي هيدرات كلوريد الحديد (III) | سيجما ألدريتش | 236489 | |
| مصدر ضوء LED | Helmholt Elektronik A / S | H35161 | أبيض محايد ، 6500K |
| كلوريد المغنيسيوم سداسي هيدرات | سيجما ألدريتش | M9272 | |
| كبريتات المغنيسيوم سباعي هيدرات | سيجما ألدريتش | 230391 | |
| كلوريد المنغنيز (II) ريباعي هيدرات | سيجما ألدريتش | 221279 | |
| شاكر مداري | IKA | 2980200 | |
| فوسفات البوتاسيوم أحادي القاعدة | سيجما ألدريتش | P0662 | |
| رافيدوسيليس تحت الرأس | NORCCA | NIVA-CHL1 سلالة | |
| قارورة التلألؤ (20 مل) | فيشرساينتيفيك | 11526325 | |
| بيكربونات الصوديوم | سيجما ألدريتش | S6014 | |
| هيدروكسيد الصوديوم | سيجما ألدريتش | 415413 | |
| موليبدات الصوديوم ثنائي هيدرات | سيجما ألدريتش | 331058 & nbsp ؛ | |
| مشبك زنبركي | Frederiksen Scientific A / S | 472002 | |
| خزانة ثرموستاتي | VWR | WTWA208450 | بديل: أنبوب تهوية غرفة يتم التحكم في درجة حرارته |
| (Ø 125 مم) | سيلفان | 22605630165 | |
| الحجمي (25 مل) | DWK Life Sciences | 246781455 | |
| كلوريد الزنك | سيجما | ألدريتش 208086 |
المراجع
- European Chemicals Agency. Guidance on Registration. European Chemicals Agency. , Helsinki, Finland. (2016).
- Organisation for Economic Cooperation and Development. Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures. Organisation for E....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
