يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

وصف الريولوجيا الكلية لمخاط جيل راكر في الكارب الفضي ، Hypophthalmichthys molitrix

2.8K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/61379

⸱

يوليو 10, 2020

 ,  , 
1Department of Mechanical and Aerospace Engineering, The George Washington University

في هذه المقالة

ملخص

يقدم هذا البروتوكول طريقة لإجراء توصيف الريولوجيا للمخاط الموجود على الراكرات الخيشومية (GRs) من الكارب الفضي. يتم تقييم الخصائص اللزوجية للمخاط GR، التي تم الحصول عليها عن طريق قياس اللزوجة والتخزين ومعامل الخسارة، لإجهاد الغلة الظاهر لفهم آلية تغذية الفلتر في الموارد الوراثية.

الملخص

الكارب الفضي، Hypophthalmichthys molitrix،هو الأسماك المغذية مرشح العوالق الغازية التي تنتشر في الممرات المائية الطبيعية في حوض نهر المسيسيبي العلوي بسبب آلية تغذية مرشح عالية الكفاءة. الأجهزة المميزة تسمى الراكرات الخيشومية (GRs)، الموجودة في العديد من مغذيات المرشحات هذه، تسهل الترشيح الفعال لجسيمات الطعام مثل العوالق النباتية التي هي من بضعة ميكرونات في الحجم.

الدافع للتحقيق في الريولوجيا من المخاط GR ينبع من رغبتنا في فهم دورها في مساعدة عملية تغذية مرشح في الكارب الفضة. السائل الغني بالمخاط ، في حالة "سميكة ولزجة" قد يسهل التصاق جسيمات الطعام. يتم تسهيل النفاذ والنقل من خلال غشاء GR من خلال عمل قوى القص الخارجية التي تحفز معدلات سلالة القص المختلفة. لذلك، يمكن أن توفر الريولوجيا المخاطية دليلا حيويا على الطبيعة الهائلة للمنافسة من الشبوط الفضي داخل بركة من الأسماك تغذية مرشح. وبناء على ذلك كان من المفترض أن مخاط GR قد توفر وظيفة لاصقة للجسيمات الغذائية وتعمل كوسيلة نقل للمساعدة في عملية تغذية مرشح.

الهدف الرئيسي من البروتوكول هو تحديد إجهاد الغلة للمخاط ، الذي يعزى إلى الحد الأدنى من إجهاد القص المطلوب لبدء التدفق الذي لوحظ فيه تشوه بلاستيكي لا رجعة فيه لأول مرة عبر مادة لزجة منظمة. وبناء على ذلك، تم التحقيق في الخصائص الريولوجية لمخاط GR، أي اللزوجة والتخزين ومعامل الخسارة، لطبيعته غير النيوتونية المخففة للقص باستخدام مقياس الريمتر الدوراني.

يتم استخدام بروتوكول معروض هنا لتحليل الخصائص الريولوجية للمخاط المستخرج من الراكرات الخيشومية لسمك الشبوط الفضي ، الذي يتم صيده في موقع هارت كريك لنهر ميسوري. ويهدف البروتوكول إلى وضع استراتيجية فعالة للاختبار الريولوجي وتوصيف المواد للمخاط الذي يفترض أنه مادة لزجة منظمة.

المقدمة

الكارب الفضي، Hypophthalmichthys molitrix، هو مغذي فلتر العوالق والأنواع الغازية التي تسللت إلى العديد من الممرات المائية الطبيعية في الولايات المتحدة. تم إدخال هذا النوع في البداية في حوض نهر المسيسيبي العلوي للسيطرة على تكاثر الطحالب1،2،3. الكارب الفضي هو مغذي فعال للغاية. عادة، تتراوح أحجام جزيئات الطعام المستهلكة من 4 إلى 20 ميكرومتر إلى العوالق الحيوانية الأكبر التي تبلغ حوالي 80 ميكرومتر3و4و5. وقد تفوق هذا النوع على الأسماك الأصلية الأخرى ويمكن أن يسبب أضرارا هائلة للممرات المائية المحلية عن طريق الحد من الموارد المتاحة1و2و6. وهكذا، تصفية تغذية الأسماك مثل الكارب الفضي والكارب bighead تشكل تهديدا كبيرا للبحيراتالكبرى 1،2،6،7،8.

تصفية تغذية الأسماك تمتلك أجهزة خاصة تسمى الراكرات الخيشومية (GRs) مع طبقة رقيقة من المخاط المقيمين على سطحها. هذه الأجهزة تحسين كفاءة الترشيح وتجميع الجسيمات الصغيرة من السائل واردة. الهدف من البروتوكول المعروض هنا هو توصيف غير النيوتونية، والقص رقيق الممتلكات المادية والإجهاد العائد من مخاط GR المكتسبة من السطح الداخلي للراكرز الخيشومية في الكارب الفضة. قيمة الإجهاد العائد من GR-المخاط، التي تم التأكد منها باستخدام مقياس الريمتر الدوراني، هو من الفائدة في هذه الدراسة. ضغط الغلة المقاسة يسمى أيضا "الإجهاد العائد الظاهر" يعتمد على أساليب الاختبار مثل معدل القص ثابت- أو دينامية التذبذب سلالة من نوع9،10. القص رقيق، 'الغلة الإجهاد السائل،' يخضع للانتقال من الصلبة مثل إلى سلوك السائل مثل في الإجهاد تطبيقها الحرجة9،11. الإجهاد العائد الظاهر هو الحد الأدنى من إجهاد القص المطلوب لبدء التدفق أو ذلك الذي لوحظ فيه تشوه بلاستيكي لا رجعة فيه لأول مرة عندما ينتقل المخاط من مادة تشبه الجل إلى مادة تشبه السوائل. يمكن ملاحظة هذا السلوك في المواد اللزوجية المنظمة. إن الانتقال من سلوك يشبه الجل إلى سلوك يشبه السوائل لمخاط GR ينطوي على وظيفتين أي دور لاصق لجمع جسيمات الطعام ودور مركبة النقل للمساعدة في عملية تسليم الجسيمات والترشيح. وتشمل الوظيفة الموسعة للمخاط خلق حواجز الانتشار في مقاومة الأمراض والتنفس ، وتوفير الإفراج الخاضعة للرقابة من العوامل الغذائية والمكونات السامة وإفراز ، وخلق مسارات التمثيل الغذائي للتغذية والتعشيش ، والمساعدة في حماية الحيوانات المفترسة ، وإنتاج تعديلات طبقة الحدود التي تحسن الحركة والكفاءة الدفعية12،13،14.

على عكس السوائل البسيطة ، تمتلك السوائل المعقدة مثل المخاط خصائص تختلف باختلاف ظروف التدفق وتتطلب معلمات قياس إضافية لتحديد سلوكها البدني على نطاق السائبة. لرصد لزوجة وإجهاد الغلة من مخاط GR، يتم إجراء القياسات الريولوجية باستخدام مقياس الريمتر الدوراني. يطبق مقياس الريمتر الدوراني إجهادا أو إجهادا ثابتا أو متذبذبا للقص عن طريق قرص دوار ملامس لعينة السوائل ويقيس استجابته. الأساس المنطقي وراء استخدام هذه الأداة والتقنية هو أن الريمتر يمكن أن يوفر مجموعة من القياسات لوصف الخصائص المادية لمخاط GR من الكارب الفضي ، والتي لا يمكن تعريفها باللزوجة وحدها.

المخاط هو مادة لزجة واستجابتها الميكانيكية لتشوه مفروض بين أن من الصلبة النقية (يحكمها قانون هوك مرونة) وذلك من السائل النقي (يحكمها قانون نيوتن من اللزوجة)15،16. يمكن للشبكة الجزيئية الكلية المعقدة الموجودة داخل المخاط أن تمتد وإعادة توجيهها استجابة للقوى الخارجية أو التشوه. ويتألف مقياس الريمتر الدوراني من هندسة مخروطية ولوحة بلتيير كما هو مبين في الشكل 1 والشكل 2 (انظر الجدول 1 لمواصفات الأجهزة). وكان الهدف من هذه الدراسة هو وضع بروتوكول لتحديد الخصائص الريولوجية لمخاط GR. ميزة مقياس الريمتر الدوراني على مقياس اللزوجة هي قدرته على إجراء قياسات ديناميكية باستخدام أحجام عينات صغيرة. كان حجم عينة مخاط GR في هذه الدراسة حوالي 1.4 مل. من ناحية أخرى، يقتصر مقياس اللزوجة على معدلات القص الثابتة ويتطلب أحجام عينات كبيرة.

ومن المتوقع أن تختلف الخصائص الريولوجية للمخاط بشكل كبير داخل تشريح الكارب الفضي. على سبيل المثال، قد تختلف خصائص المخاط الموجود على أسطح GR عن العضو الظهاري. ولحصر التغير المحتمل لخصائص المخاط في مناطق مختلفة من الأسماك، تم تخفيف عينة مخاط GR المكتسبة، وتم إنشاء حلول لثلاثة تركيزات واختبارها باستخدام مقياس الريمتر الدوراني. أظهرت البيانات والنتائج المتعلقة برائحة المخاط المبلغ عنها بعد تنفيذ البروتوكول فعالية تقنية القياس. ولا يقصد بالبيانات التوضيحية الواردة في هذه الورقة تعميمها على جميع سكان الكارب الفضي. يمكن تمديد البروتوكول المعروض هنا للتحقيق في الريولوجيا المخاطية عبر مجموعات عينات أكبر لاختبار فرضيات أخرى.

الغرض من هذه الدراسة هو إظهار الاختلاف في الخصائص الريولوجية لريسولوجيا مخاط GR مع ثلاثة تركيزات مخاطية مختلفة (400 ملغم / مل ، 200 ملغم / مل و 100 ملغم / مل). يمثل تركيز 400 ملغم/مل عينة المخاط الخام التي تم حصادها من الأسماك GRs. تم استخدام الماء التأين (DI) لتمييع عينة المخاط الخام إلى 200 ملغم /مل وتركيزات 100 ملغم/مل. تخفيف عينات المخاط يسمح لتقييم درجة ترقق القص والإجهاد العائد واضح كدالة للتركيز وتحديد التركيز الذي ينتقل المخاط GR إلى السلوك غير النيوتوني. تم استخدام شاكر لتحطيم أي كتل كبيرة من المخاط في العينات للتخفيف من الأخطاء في البيانات الريولوجية بسبب انعدام التجانس.

في معظم الفقاريات، بما في ذلك الأسماك، والجزيئات الكلية السائدة تشكيل المخاط هي البروتينات الجليكوبروتين (mucins) التي تميل إلى تضخم في الماء عن طريق التشابكات أو الكيميائية عبر ربط وخلق مادة هلام مثل12،13،17،18،19،20. عالية الجزيئية الوزن، والجزيئات الكبيرة تشكيل هلام ومحتوى المياه العالية يعكس الزلقة في المخاط13. درجة عالية من التفاعلات بين الجزيئات الكلية يؤدي إلى تشكيل هلام في حين أن انخفاض مستويات التفاعلات بين الجزيئات الكلية أو الروابط المكسورة يؤدي إلى سوائل عالية اللزوجة21.

ويساعد عمليات ترشيح الجسيمات الغذائية في تصفية تغذية الأسماك من قبل الخصائص المرتبطة بمخاط GR مثل التماسك واللزوجة التي تحدد إمكاناتها للالتصاق وتك22. تعتمد قوة التصاق القائم على المخاط على تفاعلات محددة بين الجزيئيات أو الكهروستاتيكية أو الكارهة للماء23. أجرى ساندرسون وآخرون24 دراسة تعليق التغذية في السمك الأسود حيث وجدوا الأدلة على الالتصاق القائم على المخاط. وذكروا أن التصاق الجسيمات الغذائية المعلقة مع سطح المخاطية يليه نقل كتل مجمعة من الجسيمات ملزمة جنبا إلى جنب مع المخاط عن طريق توجيه تدفق المياه يتصرف على ذلك24. المخاط المعرض لمعدلات سلالة القص المتولدة من تدفق المياه يسهل تسليم الجسيمات الغذائية إلى الجهاز الهضمي. واستخدمت تقنيات التنظير لمراقبة الجسيمات المصفاة24.

الأدب على مجموعة من معدلات القص والحدود العملية في الاختبار الريولوجي للمخاط GR نادرة. لذلك ، تم البحث عن التوجيه من الدراسات الريولوجية على مخاط المعدة والأنف وعنق الرحم والرئة ، ومخاط جلد السلمون ، وحل سمك الهاغفيش ، ومواد التشحيم السطحية المشتركة للعظام حيث تمت دراسة التوصيف الريولوجي والصفات غير النيوتونية11و12و25و26و27و28و29و30و31. في الآونة الأخيرة ، تمت دراسة تأثير مخاط جلد السمك على الحركة والكفاءة الدفعية باستخدام قياس اللزوجة المستمر لمعدل القص. دراسات الريولوجيا مخاط الجلد (دون أي تخفيف أو تجانس) المتعلقة بالسوبرام، باس البحر والسلوكيات الهزيلة أظهرت غير النيوتونية في معدلات القص منخفضة عادة14.  في دراسة أخرى ذات صلة ، تم العثور على عينات مخاط الجلد الخام من الجانبين الظهري والبطيني للنعل السنغالي لإظهار سلوك غير نيوتوني ، مما يشير إلى ارتفاع لزوجة المخاط البطني في جميع معدلات القص التي تعتبر32. وقد تم الإبلاغ أيضا بروتوكولات الريولوجية الأخرى المتعلقة بتطوير سقالة هيدروجيل وتعليق مركزة للغاية باستخدام فيسكومتر معدل القص ثابت في الأدب33،34.

في هذه الدراسة، تم التحقيق في خصائص مخاط GR باستخدام معدل سلالة تسيطر عليها، مقياس الريمتر الدوراني الذي تم استخدامه على نطاق واسع في تجارب الريولوجيا على السوائل البيولوجية المعقدة25. بالنسبة للسوائل النيوتونية، تظل اللزوجة الظاهرة ثابتة، وهي مستقلة عن معدل القص وتختلف ضغوط القص خطيا مع معدلات إجهاد القص(الشكل 3A، B). بالنسبة للسوائل غير النيوتونية (مثل سوائل ترقق القص) تعتمد اللزوجة على معدل القص أو تعتمد على التشوه في التاريخ(الشكل 3A، B). يمثل معامل الخسارة (G") مدى مقاومة المادة للميل إلى التدفق وتمثيل لزوجة السوائل(الشكل 4). يمثل معامل التخزين (G') ميل المادة لاستعادة شكلها الأصلي بعد التشوه الناجم عن الإجهاد ويعادل المرونة(الشكل 4). يتم حساب زاوية المرحلة (δ) أو قيمة الظل الخسارة، من الظل العكسي G"/G'. وهو يمثل التوازن بين فقدان الطاقة وتخزينها، وهو أيضا معلمة شائعة لتميز المواد اللزجة (δ = 0 درجة لمواد هوكين صلبة؛ δ = 90 درجة للسائل اللزج؛ δ < 45 درجة لمواد صلبة لزجة δ > 45 درجة للسائل اللزج)(الشكل 4)25. الإجهاد العائد الظاهر (σy)في السوائل المنظمة يمثل تغييرا في الحالة التي يمكن ملاحظتها في البيانات الريولوجية من اكتساح الحالة المطرد والضغط الديناميكي يكتسح10. إذا كان الإجهاد الخارجي المطبق أقل من إجهاد الغلة الظاهر ، فإن المادة ستتشوه بشكل مرن. عندما يتجاوز الإجهاد الإجهاد العائد الظاهر (ملحوظ باسم "متوسط الإجهاد" في الشكل 3B)،فإن المواد الانتقال من تشوه مرنة إلى البلاستيك والبدء في التدفق في حالتهالسائلة 35. قياس معامل التخزين (G') ومعامل الخسارة (G") في عينة المخاط تحت ظروف الإجهاد المتذبذب (أو الإجهاد) يحدد مقدار التغير في الحالة المادية من سلوك يشبه الجل إلى سلوك يشبه السائل اللزج.

ويرد هنا وصف لأنواع اختبارات الريمتر التي أجريت لرصد البيانات المتعلقة بمعامل التخزين (G)) ومعامل الخسارة (G)واللزوجة الظاهرة (η). ورصدت اختبارات التذبذب الدينامي (عمليات مسح السلالات والاحتلالات الترددية) G'و G" تحت تذبذب مسيطر عليه لهندسة المخروط. حددت اختبارات اكتساح السلالة الديناميكية المنطقة اللزوجية الخطية (LVR) للمخاط من خلال مراقبة الاستجابة المادية الجوهرية(الشكل 4). واستخدمت عمليات مسح السلالات لتحديد سلوك الغلة عند تردد التذبذب المستمر ودرجة الحرارة. ورصدت اختبارات اكتساح التردد الدينامي الاستجابة المادية لزيادة التردد (معدل التشوه) على نطاق ثابت (الإجهاد أو الإجهاد) ودرجة الحرارة. تم الحفاظ على سلالة في المنطقة اللزوجية الخطية (LVR) لاختبارات اكتساح التردد الديناميكي. رصدت اختبارات معدل القص الثابتة اللزوجة الظاهرة (η) تحت دوران ثابت لهندسة المخروط. تعرض مخاط GR لخطوات إجهاد تدريجية وتم رصد اللزوجة الواضحة (η، Pa.s) لمعدل القص المتفاوت (ý، 1/s).

يعامل البروتوكول المعروض في هذه الورقة مخاط GR كمادة معقدة منظمة من اللزوجة غير المعروفة مع نطاق استجابة لزج خطي معين. تم استخراج مخاط السمك من الموارد الطبيعية من الشبوط الفضي خلال رحلة صيد في موقع خور هارت في نهر ميسوري من قبل البروفيسورة ل. باتريشيا هيرنانديز (قسم العلوم البيولوجية، جامعة جورج واشنطن) 1،2،36.  تظهر مجموعة من ال GRs داخل فم الكارب الفضي في الشكل 5A ويتم عرض رسم تخطيطي في الشكل 5B. يظهر GR مقتطع في الشكل 5C.  يتم تقديم استخراج المخاط من GRs من الكارب الفضي كمثال في الرسومات التخطيطية ، الشكل 5D، E. تم إجراء جميع اختبارات الريمتر تحت درجة حرارة ثابتة وخاضعة للرقابة تبلغ 22 ± 0.002 درجة مئوية، ودرجة الحرارة المسجلة في موقع الصيد1و2و36.  تم اختبار كل عينة مخاط ثلاث مرات مع الريمتر ، ويتم تقديم متوسط النتائج جنبا إلى جنب مع أشرطة الخطأ الإحصائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. إعداد حلول المخاط من تركيزات مختلفة

ملاحظة: يتم إعداد ثلاثة تركيزات من محلول المخاط (400 ملغم/مل، 200 ملغم/مل و100 ملغم/مل بأحجام تقريبية، 1 مل، 1 مل، و2 مل، على التوالي) لهذه التجربة.

  1. لحساب كتلة المخاط ، قم بقياس متوسط كتلة القنينات مع (Mwith-mucus ؛ ملغ) وبدون مخاط (قوارير M ; ملغ). ثم طرح كتلة من قوارير مع المخاط مع ذلك دون مخاط (M المخاط = M معالمخاط - قوارير M ; ملغ).
  2. تمييع المخاط إلى ثلاثة تركيزات (400، 200، 100، ملغم / مل) مع الماء deionized (DI).
    1. إعداد التركيز الأول للمحلول المخاط, 400 ملغم/مل بإضافة 0.6 مل DI المياه إلى المخاط باستخدام micropipette.
      ملاحظة: بما أن الحجم التقريبي للمخاط المستخرج كان 1.4 مل، فإن محلول 400 ملغم/مل سيكون له حجم إجمالي يبلغ ~ 2 مل.
    2. ضع قارورة محلول المخاط 400 ملغم /مل على شاكر للتأكد من أن محلول المخاط متجانس بشكل كاف ، ويتم تخفيف أي تجمع جسيمات مخاطية.
    3. إعداد التركيز الثاني للمحلول المخاطي، 200 ملغم/مل، عن طريق رسم نصف حجم محلول المخاط بالتركيز الأول في قارورة جديدة باستخدام ميكروبايت وإضافة 1 مل من ماء DI إلى القارورة الجديدة.
    4. كرر الخطوة 1.2.2 للقنينتين الأولى والثانية مع حلول المخاط.
    5. إعداد التركيز الثالث للمحلول المخاط, 100 ملغم/ مل, عن طريق رسم نصف حجم (1 مل) من محلول 200 ملغ / مل في قارورة جديدة باستخدام micropipette وإضافة مياه DI في قارورة جديدة.
    6. كرر الخطوة 1.2.2 لجميع التركيزات الثلاثة من المحاليل المخاطية في قوارير كل منها (انظر الشكل التكميلي 1).
    7. تخزين قوارير محلول المخاط في الثلاجة حتى يتم إجراء المعايرة والاختبارات الريمتر.

2. القياسات والحصول على البيانات باستخدام الريمتر

ملاحظة: البرمجيات المستخدمة في هذا البروتوكول للتحكم في الصك والحصول على البيانات مع الريمتر مذكورة في جدول المواد. وسيشار إلى هذا البرنامج باسم "برنامج التحكم في أجهزة الريمتر".

  1. إعداد ومعايرة أداة الريمتر.
    1. قم بتشغيل إمدادات الهواء المضغوط إلى مقياس الريمتر وتأكد من تسوية الجدول الهوائي ومقياس الريمتر باستخدام مقياس فقاعة. تويست قبالة الغطاء الواقي على رمح الريمتر وعقد رمح لا يزال في حين فك.
    2. قم بتشغيل مفاتيح الريمتر الرئيسية لتنشيط المحامل المغناطيسية على الريمتر.
    3. بدوره على جهاز الكمبيوتر التحكم الريمتر مع برنامج التحكم أداة الريمتر المثبتة في ذلك وإطلاق برنامج التحكم في أداة الريمتر (انظر الشكل التكميلي 2).
    4. إجراء معايرة الأدوات عن طريق تحديد علامات التبويب،'المعايرة | أداة' من نافذة البرنامج. اختر 'أداة' الخيار. انقر على'معايرة'تحت 'القصور الذاتي'. سجل قيمة معايرة القصور الذاتي للأداة في μN.m.s2 وكرر المعايرة 3x على الأقل لضمان أن تكون قيم المعايرة ضمن 10٪ من بعضها البعض (انظر الشكل التكميلي 3).
  2. تثبيت هندسة الريمتر على رمح الريمتر.
    1. انقر فوق علامة التبويب'Geometries'في برنامج التحكم في أداة الريمتر.
    2. تنظيف المخروط مع الهندسة المطلوبة، (قطر 40 ملم، 1◦ 0 '11'' مخروط) ولوحة بلتييه مع ايزوبروبانول (انظر الجدول 1، جدول المواد، الشكل 1، والشكل 2).
      ملاحظة: يأتي لوحة بلتيير مثبتة على الريمتر; يمكن تنظيفها مع ايزوبروبانول في حين يتم إصلاحها مباشرة إلى الريمتر.
    3. تأكد من أن لاعبا اساسيا لوحة بلتيير خالية من أي غبار مرئي ونظيفة، إذا لزم الأمر، مع ايزوبروبانول. تثبيت لوحة بلتيير إذا لم يتم تثبيته مسبقا في الريمتر وتوصيل اتصالات بالوعة الحرارة.
    4. اضغط علىزر 'قفل'على الريمتر إلى رمح القفل الذي يرتبط بهندسة المخروط. هذا يوقف موقف رمح، ولكن يمكن أن تدور بحرية في الموقف.
    5. انقر على '| مبادلة الذكية ممكن' في علامة التبويب برنامج التحكم في أداة الريمتر للسماح بالكشف التلقائي عن الهندسة (انظر الشكل التكميلي 4).
    6. بدوره رمح على رأس الريمتر المسمار على الهندسة. سوف البرنامج الكشف عن قطر 40 ملم، 1◦ 0 '11'' هندسة زاوية مخروط في هذه المرحلة (انظر الجدول 1 وجدول المواد).
    7. كرر الخطوات 2.2.5 - 2.2.6 لضمان الكشف عن الهندسة.
    8. حدد 'الفجوة' تحت 'لوحة التحكم' من برنامج التحكم في أداة الريمتر, انقر على 'خيارات' أيقونة واختار 'قوة محورية' الخيار. تعيين قوة محورية إلى '1 نيوتن'; هذا هو لضمان هندسة مخروط يمس لوحة بلتيير لتهيئة الفجوة صفر (انظر الشكل التكميلي 5).
  3. قم بإجراء معايرة هندسة الريمتر.
    1. حدد علامة التبويب ،'Geometry'من نافذة البرنامج. انقر على'معايرة'تحت 'القصور الذاتي'. سجل قيمة معايرة القصور الذاتي الهندسي في μN.m.s2 وكرر هذه الأوقات 2-3 لضمان أن تكون قيم المعايرة ضمن 10٪ من بعضها البعض.
    2. انقر على'معايرة'تحت 'الاحتكاك' في نافذة البرنامج. سجل قيمة معايرة الاحتكاك الهندسي في μN.m/(rad/s) وكرر هذه الكمية 2-3 مرات لضمان أن تكون قيم المعايرة ضمن 10٪ من بعضها البعض (انظر الشكل التكميلي 6).
  4. تنفيذ تهيئة الفجوة الصفرية
    ملاحظة: بما أنه لا يمكن رفع الهندسة بدقة فوق لوحة بلتيير لإجراء القياسات دون موضع "صفر" مرجعي، يتم إجراء تهيئة صفرية الفجوة. لأغراض القياس، الهندسة لديها فجوة هندسية مدمجة من 24 ميكرومتر و فجوة تقليم 28 ميكرومتر. تم تعيين الفجوة تقليم لتنظيف فعال السائل الزائد الذي قد تسرب خارج مساحة سطح الهندسة. هذه الفجوات ضرورية لقياس البيانات بدقة باستخدام العينة ومقياس الريمتر. الخطوة 2.4.1 مطلوبة تماما للتأكد من أن يتم تعيين الهندسة إلى فجوة صفر لتحقيق الهندسة وتقليم الفجوات من 24 ميكرومتر و 28 ميكرومتر، على التوالي.
    1. انقر على رمز'صفر الفجوة'تحت'الفجوة'علامة التبويب في' لوحة التحكم' في إطار البرنامج. اكتمال التهيئة عندما تكون القوة المحورية التي تعاني منها الهندسة أكبر من أو تساوي 1 N ، لأنها تمس لوحة Peltier. تأكد من أن الفجوة الريمترية صفر بحيث يكون موضعها المرجعي دقيقا (انظر الشكل التكميلي 7 والشكل التكميلي 8).
    2. اضغط 'صعودا وهبوطا السهم' ضوابط على أداة الريمتر أو 'هندسة رفع وانخفاض' الرموز تحت'الفجوة'علامة التبويب في برنامج التحكم أداة الريمتر لرفع الهندسة إلى أي ارتفاع التعسفي. شاشة التحكم على أداة الريمتر ولوحة التحكم في برنامج التحكم في أجهزة الريمتر ستعرض ارتفاع الفجوة (نفسه).
  5. إعداد الإجراء التجريبي في برنامج التحكم في أداة الريمتر. إجراء توصيف خصائص الريولوجية باستخدام هندسة لوحة مخروط على بلتيير في 22 درجة مئوية.
    ملاحظة: تم استخدام موقع المسح الجيولوجي الأمريكي للتأكد من درجة حرارة مياه النهر في 20 سبتمبر 2018 ، عندما تم صيد الشبوط الفضي المستخدم في تجارب مخاط GR في موقع هارت كريك36. يمكن أن تؤثر درجة حرارة المخاط على الخصائص الريولوجية. أهمية تعديل القيم لدرجة حرارة النهر هو أن تتطابق تقريبا مع درجة الحرارة التي يمكن بموجبها تقدير خصائص المخاط واقعيا.
    1. حدد علامة التبويب ،'التجارب'في برنامج التحكم في أداة الريمتر وملء المعلومات ذات الصلة مثل 'اسم' ، 'Operator' ، 'Project' إلخ.  (انظر الشكل التكميلي 9)
    2. حدد علامة التبويب ،'Geometry'وتأكد من توافق المعلومات مع الخطوات 2.2.5. - 2.2.7. (انظر الشكل التكميلي 10).
    3. حدد علامة التبويب ،'الإجراء' ، واستخدام مفاتيح الأسهم إعداد '1 : التذبذب السعة' الإجراء. (انظر الشكل التكميلي 11).
    4. تهيئة إعدادات"التحكم البيئي"على النحو التالي: "درجة الحرارة = 22 درجة مئوية"؛ 'نقع الوقت = 120 ق' والتحقق من مربع 'انتظر درجة الحرارة' (انظر الشكل التكميلي 11).
    5. تهيئة إعدادات'اختبار معلمات'كما يلي: 'التردد = 1 هرتز'؛ تعيين 'الاجتياح لوغاريتمي'؛ 'عزم الدوران = 10 إلى 10000 ميكرون.m'؛ 'النقاط في العقد = 5' (انظر الشكل التكميلي 11).
  6. إعداد التجربة لتحديد المدى اللزوجي الخطي (LVR) للمخاط من التركيز المعروف (100 ملغم / مل)
    1. باستخدام micropipette المناسبة ومصصة تلميح رسم ما يقرب من 0.3 مل من محلول مخاط السمك من تركيز 100 ملغ / مل (انظر الخطوة 1.2، جدول المواد).
    2. أدخل حل المخاط على لوحة بلتييه باستخدام micropipette (انظر الشكل 2).
    3. اضغط على زر"تقليم الفجوة"على الريمتر لخفض الهندسة إلى لوحة بلتيير. بدلا من ذلك، انقر على'تقليم الفجوة'أيقونة تحت'الفجوة'علامة التبويب في'لوحة التحكم'الخيار في برنامج التحكم في أداة الريمتر (انظر الشكل التكميلي 12).
    4. استخدام micropipette مع طرف ماصة لإزالة أي حل المخاط الزائدة وضمان أن السائل تحت الهندسة دون أي تسرب بالقرب من محيط الهندسة.
      ملاحظة: سيؤدي التحميل غير السليم للسائل إلى أخطاء في القياسات. تحت عينة مملوءة سوف انخفاض توزيع عزم الدوران وأكثر من عينة مملوءة سيؤدي توزيعات الإجهاد خاطئة بسبب تسرب على طول الحواف.
    5. حدد 'موتور' و 'سرعة' علامات التبويب إلى 5 راد / ثانية و 0 راد / ثانية بالتناوب, حتى يكون هناك الحد الأدنى من الجمود والسرعة في العينة تحت الهندسة. وشاشة التحكم على جهاز الريمتر ولوحة التحكم في برنامج التحكم في أجهزة الريمتر سوف تعرض السرعة (انظر الشكل التكميلي 13).
    6. اضغط على زر"الفجوة الهندسية"على الريمتر لخفض الهندسة إلى الفجوة المناسبة المحددة مسبقا لكل هندسة محددة. بدلا من ذلك، انقر على'الفجوة الهندسية' أيقونةتحت'الفجوة'علامة التبويب في'لوحة التحكم'الخيار في برنامج التحكم في أجهزة الريمتر (انظر الشكل التكميلي 14).
  7. قم بتشغيل التجربة لتحديد المدى اللزوجي الخطي (LVR) لمخاط التركيز المعروف (100 ملغم / مل).
    1. انقر فوق 'بدء' رمز على برنامج التحكم في أداة الريمتر (انظر الشكل التكميلي 15).
      ملاحظة: يقوم مقياس الريمتر بإجراء قياسات تلقائية؛ بمجرد الضغط على زر'Start'، سيستغرق مقياس الريمتر حوالي 20 دقيقة لإكمال الاختبار. يحدد إعداد "النقاط لكل عقد" في الخطوة 2.5.5 مقدار الوقت الذي سيحتاجه مقياس الريمتر لإكمال القياسات.
    2. تشغيل التجربة بالنقر فوق 'نعم' على مربع المنبثقة التي تظهر وتقترح أن يتم خفض الفجوة الهندسية إلى المسافة الصحيحة لبدء التجربة، إن لم يكن خفضت بالفعل.
    3. مراقبة قطعة الأرض في الوقت الحقيقي التي تم إنشاؤها بواسطة الريمتر الذي يبلغ عن التخزين (G') والخسائر (G') moduli.
      ملاحظة: G 'و G" هي مودولي التخزين والخسارة، على التوالي. يمثل معامل التخزين ميل المادة لاستعادة شكلها الأصلي بعد التشوه الناجم عن الإجهاد ويعادل المرونة. يمثل معامل الخسارة مدى مقاومة المادة للميل إلى التدفق وتمثيل لزوجة السوائل (انظر الشكل 4).
    4. تعيين المحور X من المؤامرة إلى 'نسبة سلالة التذبذب'. للقيام بذلك، انقر بزر الماوس الأيمن على الرسم البياني المعروض واخترعلامة التبويب "متغيرات الرسم البياني" (انظر الشكل التكميلي 16).
    5. سجل نسبة سلالة التذبذب من المؤامرة قبل المواد يدخل نطاق Viscoelastic غير الخطية، وبمجرد الانتهاء من الاختبار.
    6. اضغط 'صعودا وهبوطا السهم' الضوابط على أداة الريمتر أو 'هندسة رفع وانخفاض' الرموز تحت'الفجوة'علامة التبويب في برنامج التحكم أداة الريمتر لرفع الهندسة إلى أي ارتفاع التعسفي فوق لوحة بلتييه.
    7. حفظ الملف الذي يحتوي على كل من الإجراء التجريبي والنتائج في تنسيق الملف الأصلي لبرنامج التحكم في أداة الريمتر للتأكد من المنطقة اللزوجية الخطية (LVR) لعينة المخاط.
      ملاحظة: يمكن القيام بذلك عن طريق تعيين المحور X للمؤامرة لسلالة السعة (٪) و / أو إجهاد معادلة التوازن الثابت ، رمز الإجهاد (σ̄) ، الرسم البياني ؛ مفتاح في الميكانيكا. التذبذب قبل أن تدخل البيانات المنطقة اللزوجية غير الخطية (NLVR) (انظر الشكل التكميلي 16).
  8. تشغيل عمليات الاجتياح الديناميكية ومثبتة الدولة معدل القص اختبار اختبار التجارب في المدى اللزوجي الخطي (LVR) لمخاط تركيز معروف 100, ملغم / مل لتوليد نتائج من ثلاث عينات مخاط مستقلة من 100 ملغم / مل. تنفيذ هذه الخطوات على عينات تركيز المخاط المتاحة بشكل فردي.
    1. كرر الخطوات 2.5.1 - 2.5.4.
    2. تهيئة إعدادات'اختبار معلمات'كما يلي: 'التردد = 1 هرتز'؛ تعيين 'الاجتياح لوغاريتمي'؛ 'سلالة ٪ = 100 إلى 10000 ٪؛ 'نقاط في العقد = 10'.
    3. حدد علامة التبويب"الإجراء"واستخدم مفاتيح الأسهم التي تم إعدادها لإجراء '2: تردد التذبذب'.
    4. تهيئة إعدادات"التحكم البيئي"على النحو التالي: "درجة الحرارة = 22 درجة مئوية"؛ 'نقع الوقت = 0.0 ق'.
    5. تهيئة إعدادات'اختبار معلمات'كما يلي: 'سلالة ٪ = 1 ٪'; تعيين 'الاجتياح لوغاريتمي'؛ 'التردد = 20 إلى 1 هرتز'؛ 'نقاط في العقد = 10'.
    6. حدد علامة التبويب'Procedure'واستخدم مفاتيح الأسهم التي تم إعدادها لإجراء '3: مسح التدفق'.
    7. تهيئة إعدادات"التحكم البيئي"على النحو التالي: "درجة الحرارة = 22 درجة مئوية"؛ 'نقع الوقت = 0.0 ق'.
    8. تهيئة إعدادات'اختبار معلمات'كما يلي: 'معدل القص = 1 إلى 10000 1/s'؛ 'نقاط في العقد = 10'؛ خانة الاختيار "استشعار الحالة الثابتة".
    9. كرر الخطوات 2.7.1 - 2.7.2 وانتظر حتى تكتمل التجربة، حوالي 45 دقيقة.
    10. اضغط 'صعودا وهبوطا السهم' ضوابط على أداة الريمتر أو 'الهندسة رفع وانخفاض' الرموز تحت علامة التبويب 'الفجوة' في برنامج التحكم أداة الريمتر لرفع الهندسة إلى أي ارتفاع التعسفي.
    11. استخدام مناديل المتاح والقفازات لإزالة وتنظيف المخاط على لوحة بلتييه مع حل isopropanol (انظر جدول المواد).
    12. حفظ الملف الذي يحتوي على كل من الإجراء التجريبي والنتائج في تنسيق الملف الأصلي لبرنامج التحكم في أداة الريمتر.

3. كرر البروتوكول لتركيزات أخرى من المحاليل المخاطية من 200 ملغم / مل و 400 ملغ / مل.

  1. تنفيذ الخطوات 2.5 - 2.8 بما في ذلك جميع الخطوات الفرعية المدرجة فيه لتركيزين المتبقية من المحاليل المخاط, 200 ملغم/ مل و 400 ملغم/مل.

4. التمثيل الرسومي وتحليل البيانات

ملاحظة: التعليمات البرمجية المتوفرة في ملف التعليمات البرمجية التكميلية بتنفيذ متوسط البيانات وإنشاء أخطاء التكرار، تراكب البيانات من كافة التجارب. ميزات حساب الانحراف المعياري غير متوفرة في برنامج التحكم في أداة الريمتر. تتم كتابة التعليمات البرمجية بلغة برمجة لتحليل البيانات، بعد المعالجة والتمثيل الرسومي (انظر جدول المواد للحصول على التفاصيل).

  1. تصدير البيانات المتولدة من الخطوة 2.8 المتعلقة تركيز المخاط 100 ملغ / مل GR والخطوة 3.1 المتعلقة 200mg/mL و 400 ملغ / مل GR تركيزات المخاط في شكل جدول البيانات عن طريق النقر على علامة التبويب, 'ملف | تصدير | Excel' في برنامج التحكم في أداة الريمتر (انظر الشكل التكميلي 17).
  2. تشغيل رموز تكميلية لتوليد قطع من اللزوجة واضحة (η) لمعدلات سلالة القص متفاوتة ( ## ρ̇ رمز المعادلة في تحليل الديناميكيات ) ومعامل الخسارة (G) ، ومعامل التخزين (G') وزاوية المرحلة (δ) لإجهاد التذبذب متفاوتة ( معادلة التوازن الثابت ، رمز الإجهاد (σ̄) ، الرسم البياني ؛ مفتاح في الميكانيكا. ) وتوليد نتائج تمثيلية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في هذا القسم، نقدم نتائج التجارب على مخاط GR باستخدام مقياس الريمتر الدوراني مع هندسة مخروطية (قطر 40 مم، 1° 0 '11') ولوحة بلتيير. ساعدت التجارب في توصيف السلوك غير النيوتوني ، ترقق القص من مخاط GR والإجهاد العائد الواضح الذي يصور انتقال المخاط من مادة تشبه الجل إلى مادة تشبه السوائل. وتنطوي النتائج التمثيلية على وصف كمي لحدود عزم الدوران المنخفضة وآثار التدفق الثانوي لأجهزة قياس المسافات الدورانية. ساعدت حدود الأجهزة وقياسات معدل السلالة الثابتة والديناميكية في التأكد بدقة من الاتجاهات السلوكية اللزوجية والإجهاد الظاهر ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أحد الأهداف الرئيسية لتطوير هذا البروتوكول هو إثبات أنه مناسب تماما لتوصيف الريولوجي لمخاط GR عندما تتوفر أحجام عينات صغيرة جدا. نحن نعترف بأن هناك حاجة إلى مزيد من العينات من مدرسة من الكارب الفضي لتوصيف الخصائص الريولوجية لمخاط GR بشكل كامل والبيانات المعروضة هنا ليست تعميما عبر جميع سكان الكارب الفضي. لدينا تقنية مبررة بسبب فعاليتها مع التوصيف الريولوجي لأحجام العينات الصغيرة ومع التحقيقات الموسعة التي تنطوي على مجموعات أكبر من عينات المخاط.

الخطوات الحاسمة في البروتوكول هي إعداد حلول مخاطي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

يقر المؤلفون بالدعم والتمويل من مركز GW للكيميائيات الحيوية والهندسة الحيوية. نشكر البروفيسورة ل. باتريشيا هيرنانديز من قسم العلوم البيولوجية في جامعة جورج واشنطن لإلهامها التحقيق والتعاون المستمر، وتوفير الخبرة البيولوجية في فسيولوجيا الشبوط الفضي وتوفير عينات المخاط. ونشكر الطلاب، السيد ديفيد بالومبو، والسيدة كارلي كوهين، والسيد إسحاق فينبرغ، والسيد دومينيك بتروسينو، والسيد ألكسيس ريندوس، والسيدة بريسيلا فارغيز، والسيد كارتر تيغن، والسيد راغاف باجور على المساعدة في المختبر، والسيد توماس إيفانز والسيد جيمس توماس من شركة TA Instruments، نيو كاسل، دي على دعمهم في تدريب وصيانة مقياس الريمتر. تم التقاط صور للأرقام 5A،C خلال تشريح قام به البروفيسور ل. باتريشيا هيرنانديز من قسم العلوم البيولوجية في جامعة جورج واشنطن.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
<قوي > المواد < / قوي >
مناديل كيمVWR470224-038لتنظيف العينة من لوحة
قفازاتVWR89428-750لمنع تلوث العينة
ماصةVWR89079-974لنقل العينة من قارورة إلى مقياس الريومتر
نصائح الماصةالحرارية العلمية72830-042لنقل العينة من قارورة إلى مقياس الريومتر
شاكرVWR89032-094لخلط عينة من
قواريربشكل متجانسVWR 66008-710يحتوي على أحجام عينة مقاسة
مقياس الوزنOhausScout & ndash ؛ موازين SPXلوزن كتلة عينات المخاط
<قوية > الكواشف الكيميائية < / قوي >
ماء منزوع الأيونات (H20)-سائل
معقم 70٪ إيزوبروبانول (C3H8O)VWR89108-162سائل
<قوي > GR مخاط < / قوي >
100 مجم / مل تركيز ، 2 مل-مادة لزجة
تركيز 400 مجم / مل ، 1 مل-مادة لزجة
تركيز 200 مجم / مل ، 1 مل-مادة لزجة
مرنة <قوية > برنامج < / قوي>
MATLABMathworksR2017aتحليل البيانات والمعالجة اللاحقة والتمثيل الرسومي
TriosTA Instrumentsv4.5.042498برنامج التحكم والتحليل في أداة مقياس الريومتر
المخاط مرنة

المراجع

  1. Cohen, K. E., Hernandez, L. P. The complex trophic anatomy of silver carp, Hypophthalmichthys molitrix, highlighting a novel type of epibranchial organ. Journal of Morphology. 279, 1615-1628 (2018).
  2. Cohen, K. E., Hernandez, L. P. Making a master filterer: Ontogeny of specialized filtering plates in silver carp (Hypophthalmichthys molitrix). Journal of Morphology. 279, 925-935 (2018).
  3. Cremer, M., Smitherman, R. Food habits and growth of silver and bighead carp in cages and ponds. Aquaculture. 20 (1), 57-64 (1980).
  4. Battonyai, I., et al. Relationship between gill raker morphology and feeding habits of hybrid bigheaded carps (Hypophthalmichthys spp.). Knowledge and Management of Aquatic Ecosystems. 416, 36(2015).
  5. Zhou, Q., Xie, P., Xu, J., Ke, Z., Guo, L. Growth and food availability of silver and bighead carps: Evidence from stable isotope and gut content analysis. Aquaculture Research. 40 (14), 1616-1625 (2009).
  6. Freedman, J. A., Butler, S. E., Wahl, D. H. Impacts of invasive Asian carps on native food webs (Final Report). , University of Illinois, Kaskaskia Biological Station. Urbana-Champaign, IL. (2012).
  7. Nico, L., Fuller, P., Li, J. Silver carp (Hypophthalmichthys molitrix)-FactSheet. , (2017).
  8. Walleser, L., Howard, D., Sandheinrich, M., Gaikowski, M., Amberg, J. Confocal microscopy as a useful approach to describe gill rakers of Asian species of carp and native filter-feeding fishes of the upper Mississippi River system. Journal of Fish Biology. 85 (5), 1777-1784 (2014).
  9. Nelson, A. Z., Ewoldt, R. H. Design of yield-stress fluids: a rheology-to-structure inverse problem. Soft Matter. 13, 7578-7594 (2017).
  10. Chen, T. Rheological Techniques for Yield Stress Analysis. TA Instruments Applications Note, RH025. , (2020).
  11. Ewoldt, R. H., Johnston, M. T., Caretta, L. M. Experimental challenges of shear rheology: how to avoid bad data. Complex Fluids in Biological Systems. Spagnolie, S. , Springer. (2015).
  12. Thornton, D. J., Sheehan, J. K. From Mucins to Mucus: Toward a more coherent understanding of this essential barrier. Proceedings of the American Thoracic Society. 1, 54-61 (2004).
  13. Shepard, K. L. Functions for fish mucus. Reviews in Fish Biology and Fisheries. 4, 401-429 (1994).
  14. Fernández-Alacid, L., et al. Skin mucus metabolites in response to physiological challenges: A valuable non-invasive method to study teleost marine species. Science of the Total Environment. 644, 1323-1335 (2018).
  15. Wagner, C. E., Wheeler, K. M., Ribbeck, K. Mucins and Their Role in Shaping the Functions of Mucus Barriers. Annual Reviews in Cell and Developmental Biology. 34, 189-215 (2018).
  16. Bird, R. B., Armstrong, R. C., Hassager, O. Dynamics of Polymeric Liquids, Volume 1: Fluid Mechanics. , Wiley. New York. 1255-1284 (1987).
  17. Mantle, M., Allen, A. Isolation and characterisation of the native glycoprotein from pig small intestinal mucus. Biochemical Journal. 195, 267-275 (1981).
  18. Allen, A., Hutton, D. A., Pearson, J. P., Sellers, L. A. Mucus glycoprotein structure, gel formation and gastrointestinal mucus function. Mucus and Mucosa (Ciba Foundation Symposium). Nugent, J., O'Conner, M. , Pitman. London. 137-156 (1984).
  19. Asakawa, M. Histochemical studies of the mucus on the epidermis of eel, Anguillajaponica. Bulletin of Japanese Society of Scientific Fisheries. 36, 83-87 (1970).
  20. Fletcher, T. C., Jones, R., Reid, L. Identification of glycoproteins in goblet cells of epidermis and gill of plaice (Pleuroneces platessa L.), flounder (Platichthys flesus (L.)) and rainbow trout (Salmo gairdneri Richardson). Histochemical Journal. 8, 597-608 (1976).
  21. Silberberg, A. Mucus glycoprotein, its biophysical and gel forming properties. Symposia of the Society for Experimental Biology. 43, 43-64 (1989).
  22. Hills, B. The Biology of Surfactants. , Cambridge Univ. Press. Cambridge. 408(1988).
  23. Aubert, H., Brook, A. J., Shephard, K. L. Measurement of the adhesion of a desmid to a substrate. British Phycology Journal. 24, 293-295 (1989).
  24. Sanderson, S. L., Cech, J. J., Patterson, M. R. Fluid dynamics in suspension feeding black fish. Science. 251, 1346-1348 (1991).
  25. Lai, S. K., Wang, Y. Y., Wirtz, D., Hanes, J. Micro- and macrorheology of mucus. Advanced Drug Delivery Reviews. 61 (2), 86-100 (2009).
  26. Chaudhary, G., Ewoldt, R. H., Thiffeault, J. L. Unravelling hagfish slime. Journal of Royal Society Interface. 16 (150), 20180710(2019).
  27. Downing, S., Salo, W., Spitzer, R., Koch, E. The hagfish slime gland: a model system for studying the biology of mucus. Science. 214, 1143-1145 (1981).
  28. Hwang, S. H., Litt, M., Forsman, W. C. Rheological properties of mucus. Rheologica Acta. 8, 438-448 (1969).
  29. Litt, M. Mucus rheology. Archives of Internal Medicine. 126, 417-423 (1970).
  30. Quarishi, M. S., Jones, N. S., Mason, J. The rheology of nasal mucus: a review. Clinical Otolaryngology. 23, 403-413 (1998).
  31. Nordgård, C. T., Draget, K. I., Seternes, T. Rheology of salmon skin mucus. Annual Transactions - The Nordic Rheology Society. 23, 175-179 (2015).
  32. Fernández-Alacid, L., et al. Comparison between properties of dorsal and ventral skin mucus in Senegalese sole: Response to an acute stress. Aquaculture. 513, 734410(2019).
  33. Yüce, C., Willenbacher, N. Challenges in Rheological Characterization of Highly Concentrated Suspensions - Case Study for Screen-printing Silver Pastes. Journal of Visualized Experiments. (122), e55377(2017).
  34. Sultan, S., Mathew, A. P. 3D Printed Porous Cellulose Nanocomposite Hydrogel Scaffolds. J. Vis. Exp. (146), (2019).
  35. Barnes, H. A., Hutton, J. F., Walters, K. An Introduction to Rheology. , Elsevier. Amsterdam. (1989).
  36. National Water Information System. USGS Current Conditions for USGS 06910450 Missouri River at Jefferson City, MO. U.S. Geological Survey. , Available from: https://nwis.waterdata.usgs.gov/usa/nwis/uv/?cb_00010=on&cb_00060=on&cb_00065=on&format=gif_default&site_no=0691045&p09-19&end_date=2018-09-21 (2020).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

وصف الريولوجيا الكلية لمخاط جيل راكر في الكارب الفضي ، Hypophthalmichthys molitrix
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.