يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

مُسَاَنّة مُعَدِيّة سابقة لدراسة المبيضات المبيضات البَيكانسِيّة الواصلة Morphogenesi في الجهاز الهضمي

4.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/61488

⸱

يوليو 1, 2020

 ,  , 
1College of Veterinary Medicine, Midwestern University, 2Masters in Biomedical Science Program, College of Graduate Studies, Midwestern University, 3Department of Pathology and Population Medicine, College of Veterinary Medicine, Midwestern University

في هذه المقالة

ملخص

مقايسة الجسم الحي السابق المذكورة في هذه الدراسة باستخدام مستخلصات التجانس الأمعاء وتلطيخ المناعة الفلوريس يمثل طريقة جديدة لدراسة التشكل الواصل من المبيضات albicans في الجهاز الهضمي. ويمكن استخدام هذه الطريقة للتحقيق في الإشارات البيئية التي تنظم التحول المورفوجينيك في القناة الهضمية.

الملخص

المبيضات albicans الواصلة morphogenesi في الجهاز الهضمي (GI) يتم التحكم بإحكام من قبل مختلف الإشارات البيئية، ويلعب دورا هاما في نشر والعوامل المسببة للأمراض الفطرية الانتهازية. ومع ذلك، طرق لتصور هيفا الفطرية في الجهاز الهضمي في الجسم الحي هي التحدي الذي يحد من فهم الإشارات البيئية في السيطرة على عملية تكوين هذه المورفون. البروتوكول الموصوف هنا يوضح طريقة رواية ex vivo للتصور من المورفينجينيات الواصلة في مقتطفات متجانسة الأمعاء. باستخدام مقايسة الجسم الحي السابق ، توضح هذه الدراسة أن محتويات cecal من الفئران المعالجة بالمضادات الحيوية ، ولكن ليس من فئران التحكم غير المعالجة ، تعزز تولد الواصلة C. alphcans في محتوى الأمعاء. وعلاوة على ذلك، إضافة مجموعات محددة من الأيض الأمعاء مرة أخرى إلى محتويات cecal من الفئران المعالجة بالمضادات الحيوية ينظم بشكل تفاضلي الفرتال morphogenesis السابقين. يمثل هذا البروتوكول، الذي يُؤخذ معًا، طريقة جديدة لتحديد الإشارات البيئية التي تتحكم في التشكل الواصلي C. albicans في الجهاز الهضمي والتحقيق فيها.

المقدمة

المبيضات albicans هو الانتهازية ، متعدد الأشكال المسببة للأمراض الفطرية التي عادة ما تكون commensal ، ولكن يمكن أن تخضع لتغيير مورفولوجية في شكل خبيث قادر على التسبب في التهابات تهدد الحياة في الأفراد المناعة1،2،3،4،5،6،8،9،11،12،13. C. albicans هو السبب الرئيسي للعدوى الانسومية الجهازية، مع معدل وفيات 40\u201260٪ حتى مع العلاج المضاد للفطريات2،14،15. على الرغم من أن C. albicans يقيم في مختلف المنافذ المضيفة بما في ذلك الجهاز التناسلي الإناث16,17, تجويف الفم من الأفراد الأصحاء18 والجهاز الهضمي (GI) المسالك19,20, الغالبية العظمى من الالتهابات الجهازية تنشأ من الجهاز الهضمي وعلاوة على ذلك, وكثيرا ما أكد مصدر العدوى الجهازية أن الجهاز الهضمي21،22،23،24،25،26،27،28،29،30،31،32،33،34. C. تتأثر الإمراضية albicans في الجهاز الهضمي بمجموعة واسعة من العوامل; ومع ذلك ، فإن السمة الرئيسية الضرورية للوعاء هي الانتقال من مورفولوجيا خلية الخميرة إلى مورفولوجيا الخلايا الواصلة35،36،37،38،39،40،41،42،43،44. C. albicans التعلق والنشر من الجهاز الهضمي أثناء العدوى يرتبط بشدة مع قدرته على الانتقال من خميرة commensal إلى hyphae ضراوة، مما يسمح للفطريات أن تسبب الأمراض الغازية44،45،46،47،48،49،50،51،52،53.

مجموعة متنوعة من العوامل في الأمعاء، بما في ذلك ن أسيتيلغلوسكامين، تنظيم تشكيل الواصلة من قبل C. albicans . ولذلك، فمن الأهمية بمكان لتضييق الفجوة في المعرفة فيما يتعلق بتشكل الغشاء الواصل لهذا الممرض الفطري في الجهاز الهضمي54،55،56. تشير الأدلة الحديثة إلى أن مختلف الأيضات الأمعاء السيطرة بشكل تفاضلي في morphogenesis الواصلة من C. albicans في المختبر57,58,59,60. ومع ذلك، تشكل القيود التقنية قضايا عند محاولة دراسة تكوّن الأمعاء في عينات الأمعاء الحية في العينات، خاصة تلطيخ الخميرة وخلايا الواصلة والتحليل الكمي لتطوير الواصلة. لفهم C. albicans الواصلة morphogenesis في الجهاز الهضمي، تم تطوير طريقة فيفو السابق باستخدام مقتطفات قابلة للذوبان من محتوى الأمعاء المتجانسة من الفئران لدراسة تأثير الأيض على تكوين الواصلات الفطرية. استخدام عينات الأمعاء من الفئران التي هي مقاومة وعرضة لعدوى ج. albicans GI، وهذه الطريقة سوف تساعد على تحديد ودراسة تأثير الأيض والمضادات الحيوية وxenobiotics على تكوين الحمى الفطرية في الجهاز الهضمي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع بروتوكولات الحيوان من قبل جامعة الغرب الأوسط لجنة الرعاية الحيوانية المؤسسية واستخدام (IACUC) كما هو موضح قبل57. وافقت اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوان واستخدامه في جامعة الغرب الأوسط على هذه الدراسة بموجب بروتوكول MWU IACUC #2894. وتتبع سياسات رعاية الحيوانات في وزارة المياه والحيوانات سياسة خدمات الصحة العامة بشأن الرعاية الإنسانية واستخدام الحيوانات المختبرية والسياسات المنصوص عليها في قانون رعاية الحيوان.

1. الفئران دراسة البروتوكول القياسي

  1. استخدام الفئران C57BL/6J الذكور والإناث على الأقل ستة أسابيع من العمر. تكملة لهم مع الماء المعقم مع أو بدون cefoperazone (0.5 ملغ / مل).
    1. شارك الفئران في مجموعات من 5 ، مع كل قفص يحتوي إما على جميع الفئران الذكور أو جميع الإناث. توفير الفئران الماوس القياسية تشاو والمياه (عن طريق زجاجة 400 مل) في جميع الأوقات.
    2. تحقق من الأقفاص يومياً لضمان أن تكون مستويات الطعام والماء كافية، وفحص الفئران بحثًا عن علامات الضيق.
  2. استبدال المياه مع cefoperazone كل 48 ح لضمان توفير المضادات الحيوية الطازجة بغض النظر عن المياه المتبقية في زجاجات التغذية القفص.
  3. بعد 5\u20127 أيام من العلاج cefoperazone، القتل الرحيم الفئران عن طريق CO2 الاختناق مراقبة بروتوكول IACUC المنشأة. تأكيد الموت عن طريق خلع عنق الرحم.
  4. تشريح الفئران باستخدام مقص حاد معقم الأوتوكلاف الحادة والملقط المعقم الأوتوكلاف.
    1. بعد القتل الرحيم ، قم بتأمين الحيوان على سطح تشريح عن طريق تثبيت جميع الأطراف بحيث يتعرض البطن.
    2. رش منطقة البطن مع الإيثانول 70٪ لمنع الفراء من الالتصاق بالملقط، مقص، أو أقسام الأمعاء أثناء تشريح.
    3. استخدام ملقط لقرصة ورفع قسم من الجلد في قاعدة البطن وخلق شق صغير من خلال الجلد واللفافة الكامنة باستخدام مقص. اتخاذ الحذر الشديد عند إجراء هذا الشق لتجنب ثقب الأعز أو جدار الأمعاء.
    4. تمديد هذا قطع إلى القفص الصدري، وفضح جزئيا تجويف البريتوني. جعل خفض بدءا من نقطة الشق الأولي على جانبي تمتد صعودا وشقيا.
    5. سحب هذه اللوحات بشكلٍ ثنائية، ودبوس على السطح المُشَرِّح لفضح التجويف البريتوني بشكل كامل.
  5. استخراج الجهاز الهضمي باستخدام ملقط، في حين استخدام مقص لجعل تخفيضات متفوقة على المعدة وفي منطقة القاصي من الأمعاء الغليظة لضمان جمع أكبر قدر من محتوى الأمعاء من كل قسم.
  6. عند إزالة الجهاز الهضمي، يجب الحرص على تجنب تمزق المكونات الفردية. فصل المعدة والأمعاء الدقيقة والأمعاء الغليظة والأمعاء الغليظة بشكل فردي باستخدام مقص في نهاياتها القريبة وفص.
  7. لجمع كل محتويات الأمعاء من كل قسم، وجعل شق واحد في نهاية بعيدة من كل قسم باستخدام مقص، تليها يدويا طرد محتوى القناة الهضمية في أنبوب microcentrifuge 1.5 مل باستخدام ملقط.
  8. تخزين محتويات القناة الهضمية في -80 درجة مئوية لجراسيس الجسم الحي السابق.

2. إعداد الخميرة استخراج بيبتون ديكستروز (YPD) لوحات أجار

  1. إلى زجاجة 1 لتر إضافة 25 غرام من الخميرة استخراج بيبتون ديكستروز مرق مسحوق, 10 غرام من أجار, والمياه فائقة الخطورة إلى حجم النهائي من 500 مل.
  2. أوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة على دورة سائلة لتعقيم الوسائط.
  3. تحت غطاء تدفق لارينار، صب ما يقرب من 20 مل من وسائل الإعلام أجار في لوحة بيتري العقيمة. 500 مل من وسائل الإعلام أجار ينبغي أن تسفر عن لوحات 25 تقريبا.
  4. تخزين لوحات في 4 درجة مئوية حتى جاهزة للاستخدام.

3. السابقين فيفو الإعدادية لم مقايسة الغشاء الواصل

  1. 11 ثقافة جديدة من C. albicans SC5314 على لوحة YPD أجار واحتضان بين عشية وضحاها في 30 درجة مئوية.
  2. اختيار اثنين إلى ثلاثة مستعمرات الفردية المتوسطة الحجم من بين عشية وضحاها نمت C. albicans SC5314 الثقافة وإعادة تعليق في 1 مل من الفوسفات المالحة المخزنة (PBS).
  3. استرداد محتويات الأمعاء المجمدة من -80 درجة مئوية والفريزر وذوبان في 25 درجة مئوية.
  4. تزن حوالي 150 ملغ من محتويات الأمعاء في أنبوب جديد 1.5 مل.
  5. إعادة تعليق محتويات القناة الهضمية مع 150 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني (محتوى القناة الهضمية وبرنامج تلفزيوني في 1:1 الوزن إلى نسبة حجم).
  6. دوامة بسرعة عالية لمدة 30 s لتجانس محتويات الأمعاء والسماح للجلوس في درجة حرارة الغرفة لمدة دقيقة تقريبا.
  7. الطرد المركزي المتجانس في 1000 س ز لمدة 3 دقائق.
  8. نقل فائقة إلى أنبوب جديد 1.5 مل.
  9. كرر الخطوتين 3.7 و3.8 لإزالة كل الحطام في المُنَاط.
  10. إضافة 10 μL من C. albicans SC5314 inoculum أعدت أعلاه لهذا مكبر
  11. تخلط جيدا واحتضان في 37 درجة مئوية لمدة 4 إلى 5 ساعات.

4. إضافة خارجية من المستقلبات إلى مستخلصات الأمعاء المتجانسة لم مقايسة المورفينية الواصلية

  1. استرداد محتويات الأمعاء المجمدة من -80 درجة مئوية والفريزر وإعادة تعليقها في برنامج تلفزيوني بنسبة 1:1 (الوزن: حجم).
  2. إضافة التركيز المطلوب من الأيض الأمعاء لمحتوى الأمعاء وخليط برنامج تلفزيوني.
  3. دوامة بسرعة عالية لمدة 30 s لتجانس محتويات الأمعاء التي تحتوي على الأيض والسماح للجلوس في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقيقة.
  4. الطرد المركزي المتجانس في 1000 س ز لمدة 3 دقائق.
  5. نقل فائقة إلى أنبوب جديد 1.5 مل. كرر الخطوتين 4.4 و 4.5 لإزالة كل الحطام في المُنَاط.
  6. إضافة 10 ميكرولتر من C. albicans SC5314 inoculum أعدت أعلاه لهذا مكبر. تخلط جيدا واحتضان في 37 درجة مئوية لمدة 4 إلى 5 ساعات.

5. C. albicans morphogenesis فحص (مناعة والتصوير)

  1. الطرد المركزي العينات في 1000 س ز لمدة 2 دقيقة والتخلص من افرط عن طريق الأنابيب.
  2. إصلاح العينات في 100 ميكرولتر من 2٪ شبهفورمالدهيد (PFA) لمدة 15 دقيقة.
  3. جهاز طرد مركزي في 1000 × ز لمدة 2 دقيقة والتخلص من افرا عن طريق الأنابيب.
  4. غسل العينات مرتين مع 1 مل من برنامج تلفزيوني. لغسل العينات، إعادة تعليق بيليه في برنامج تلفزيوني عن طريق الأنابيب بلطف. لا دوامة العينة لأن هذا يمكن أن تلحق الضرر هياكل الواصلة. بعد إعادة التعليق، الطرد المركزي في 1000 س ز لمدة 2 دقيقة والتخلص من افرط عن طريق الأنابيب.
  5. احتضان العينات في درجة حرارة الغرفة في 100 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني تحتوي على الأجسام المضادة متعددة النسيلة C. albicans (1:100 تخفيف) لمدة 30 دقيقة.
  6. غسل العينات ثلاث مرات مع 1 مل من برنامج تلفزيوني.
    ملاحظة: عند استخدام جسم مضاد فلوري، يوصى بأن يتم تنفيذ جميع خطوات التخفيف والغسيل في ضوء خافت لتجنب تبييض الصور وتحسين طول العمر العينة.
  7. احتضان العينات في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة في 100 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني يحتوي على المضادة للأرانب IgG Alexafluor 488 في 1:500 تخفيف. قم بإجراء حضانة في درج أو غرفة مظلمة لتجنب تبييض الصور.
  8. غسل العينات ثلاث مرات مع 1 مل من برنامج تلفزيوني.
  9. إعادة تعليق العينات في 100 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني ونقلها إلى لوحة 96-جيدا للتصوير.
    ملاحظة: عندما لا يتم تصويرها، فمن المستحسن أن لوحة 96-جيدا أن تكون ملفوفة في رقائق الألومنيوم لتجنب تبييض الصورة.
  10. الخلايا الفطرية الصورة باستخدام العدسات 20x و 40x الهدف باستخدام مجهر التصوير الفلوري. استخدم فلتر البروتين الفلورسنت الأخضر (الطول الموجي للإثارة 470/40 والطول الموجي للانبعاثات 525/50) للكشف عن الفلوريسنس.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

هذه النتائج جنبا إلى جنب مع النتائج السابقة من مختبر ثانغاماني60 تشير إلى أنه عندما يتم زراعة C. albicans السابقين في مستخلصات تجانس الأمعاء مأخوذة من المعدة والأمعاء الدقيقة والأمعاء الغليظة من السيطرة غير المعالجة والفئران المعالجة بالمضادات الحيوية، C. albicans يتطور عموما مع مورفولوجيا الخميرة(الشكل 1B). ومع ذلك، عندما تزرع في مستخلص cecal من الفئران المعالجة بالمضادات الحيوية، C. albicans يخضع بسهولة morphogenesis، مما أدى إلى عينات تحت...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

الطريقة الموصوفة هنا تقدم طريقة جديدة للتحقيق في تأثير المضادات الحيوية، والآثار الغذائية، وxenobiotic والعلاجية على C. albicans الهضاب المورفيجن في الجهاز الهضمي. منذ غالبية الالتهابات الجهازية تنشأ من الجهاز الهضمي21،22،23،24،25،26،27،28،

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ولا يملك أصحاب البلاغ مصالح مالية متنافسة أو تضارباً آخر في المصالح.

شكر وتقدير

الكتاب الاعتراف الموارد والدعم من جامعة الغرب الأوسط الخلوية والجزيئية مرفق البحوث الأساسية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1 - 10 & ميكرو ؛ L Pipet Tipsفيشر Scientific02-707-454متفرقات
100 - 1000 & L Pipet Tipsفيشر Scientific02-707-400متفرقات
20 - 200 & L Pipet TipsFisher Scientific02-707-451متفرقات
2-حمض ميثيل بوتيريكSigma193070-25Gمركب مثبط للخيوط
488 ماعز مضاد للأرانب IgGInvitrogen (فيشر)A11008IF تلطيخ ثانوي ab
AgarFisherBP1423-500YPD مكون أجار
مجهر التصوير الآليKeyenceBZX700
المبيضات البيضاء الأجسام المضادةInvitrogen (فيشر)PA1-27158IF تلطيخ أولي ab
cefoperazoneكايمان16113المضاد الحيوي
حمض الديوكسيكوليكSigma30960مركب مثبط للخيوط
D-GlucoseFisherD16-500مركب معزز للخيوط
فيشر08-885
حمض اللاكتيكAlfa AesarAAAL13242-06مركب مثبط
حمض الليثوكوليكSigmaL6250-10Gمركب مثبط
للخيوط حمض البالمتيكSigmaP5585-10Gمركب مثبط الخيوط
ParaformaldehydeAlfa AesarA11313IF تلطيخ مثبت
محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) ، 10xAlfa AesarJ62692PBS مكون
p-tolylacetic acidSCBTsc-257959مركب مثبط للخيوط
حمض الزباشيكSigma283258-250Gمركب مثبط للخيوط
مقص حاد نهاياتفيشر28301
ماء معقم Milli-QN / AN /A متفرقات
YPD مرقBD Biosciences242810مكون أجار YPD
ملقط للخيوط

المراجع

  1. Huffnagle, G. B., Noverr, M. C. The emerging world of the fungal microbiome. Trends in Microbiology. 21 (7), 334-341 (2013).
  2. Wisplinghoff, H., et al. Nosocomial bloodstream infections in US hospitals: analysis of 24,179 cases from a prospective nationwide surveillance study. Clinical Infectious Diseases. 39 (3), 309-317 (2004).
  3. Hajjeh, R. A., et al. Incidence of Bloodstream Infections Due to Candida Species and In Vitro Susceptibilities of Isolates Collected from 1998 to 2000 in a Population-based Active Surveillance Program. Journal of Clinical Microbiology. 42 (4), 1519-1527 (2004).
  4. Lockhart, S. R., et al. Species Identification and Antifungal Susceptibility Testing of Candida Bloodstream Isolates from Population-Based Surveillance Studies in Two U.S. Cities from 2008 to 2011. Journal of Clinical Microbiology. 50 (11), 3435-3442 (2012).
  5. Pfaller, M., et al. Epidemiology and outcomes of candidemia in 3648 patients: data from the Prospective Antifungal Therapy (PATH Alliance(R)) registry, 2004-2008. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 74 (4), 323-331 (2012).
  6. Angarone, M. Fungal infections in cancer patients. Cancer Treatment and Research. 161, 129-155 (2014).
  7. Brown, G. D., et al. Hidden killers: human fungal infections. Science Translational Medicine. 4 (165), 113(2012).
  8. Calton, E. A., et al. Invasive bacterial and fungal infections in paediatric patients with cancer: incidence, risk factors, aetiology and outcomes in a UK regional cohort 2009-2011. Pediatric Blood & Cancer. 61 (7), 1239-1245 (2014).
  9. Carter, J. H., et al. Medical management of invasive fungal infections of the central nervous system in pediatric cancer patients. Pediatric Blood & Cancer. 62 (6), 1095-1098 (2015).
  10. Low, C. Y., Rotstein, C. Emerging fungal infections in immunocompromised patients. F1000 Medicine Reports. 3, 14(2011).
  11. Mousset, S., et al. Treatment of invasive fungal infections in cancer patients-updated recommendations of the Infectious Diseases Working Party (AGIHO) of the German Society of Hematology and Oncology (DGHO). Annals of Hematology. 93 (1), 13-32 (2014).
  12. Perfect, J. R., Hachem, R., Wingard, J. R. Update on epidemiology of and preventive strategies for invasive fungal infections in cancer patients. Clinical Infectious Diseases. 59, Suppl 5 352-355 (2014).
  13. Sipsas, N. V., Kontoyiannis, D. P. Invasive fungal infections in patients with cancer in the Intensive Care Unit. International Journal of Antimicrobial Agents. 39 (6), 464-471 (2012).
  14. Falagas, M. E., Apostolou, K. E., Pappas, V. D. Attributable mortality of candidemia: a systematic review of matched cohort and case-control studies. European Journal of Clinical Microbiology and Infectious Diseases. 25 (7), 419-425 (2006).
  15. Chi, H. W., et al. Candida albicans versus non-albicans bloodstream infections: the comparison of risk factors and outcome. Journal of Microbiology, Immunology and Infection. 44 (5), 369-375 (2011).
  16. Drell, T., et al. Characterization of the vaginal micro- and mycobiome in asymptomatic reproductive-age Estonian women. PLoS One. 8 (1), 54379(2013).
  17. Merenstein, D., et al. Colonization by Candida species of the oral and vaginal mucosa in HIV-infected and noninfected women. AIDS Research and Human Retroviruses. 29 (1), 30-34 (2013).
  18. Ghannoum, M. A., et al. Characterization of the oral fungal microbiome (mycobiome) in healthy individuals. PLoS Pathogens. 6 (1), 1000713(2010).
  19. Hoffmann, C., et al. Archaea and fungi of the human gut microbiome: correlations with diet and bacterial residents. PLoS One. 8 (6), 66019(2013).
  20. Noble, S. M., Gianetti, B. A., Witchley, J. N. Candida albicans cell-type switching and functional plasticity in the mammalian host. Nature Reviews Microbiology. 15 (2), 96-108 (2017).
  21. Samonis, G., et al. Prospective evaluation of effects of broad-spectrum antibiotics on gastrointestinal yeast colonization of humans. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 37 (1), 51-53 (1993).
  22. Sahni, V., et al. Candidemia--an under-recognized nosocomial infection in Indian hospitals. The Journal of the Association of Physicians of India. 53, 607-611 (2005).
  23. Meijer-Severs, G. J., Joshi, J. H. The effect of new broad-spectrum antibiotics on faecal flora of cancer patients. Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 24 (4), 605-613 (1989).
  24. Kennedy, M. J., Volz, P. A., Edwards, C. A., Yancey, R. J. Mechanisms of association of Candida albicans with intestinal mucosa. Journal of Medical Microbiology. 24 (4), 333-341 (1987).
  25. Miranda, L. N., et al. Candida colonisation as a source for candidaemia. Journal of Hospital Infections. 72 (1), 9-16 (2009).
  26. Nucci, M., Anaissie, E. Revisiting the source of candidemia: skin or gut. Clinical Infectious Diseases. 33 (12), 1959-1967 (2001).
  27. Raponi, G., Visconti, V., Brunetti, G., Ghezzi, M. C. Clostridium difficile infection and Candida colonization of the gut: is there a correlation. Clinical Infectious Diseases. 59 (11), 1648-1649 (2014).
  28. Guastalegname, M., Russo, A., Falcone, M., Giuliano, S., Venditti, M. Candidemia subsequent to severe infection due to Clostridium difficile: is there a link. Clinical Infectious Diseases. 57 (5), 772-774 (2013).
  29. Nerandzic, M. M., Mullane, K., Miller, M. A., Babakhani, F., Donskey, C. J. Reduced acquisition and overgrowth of vancomycin-resistant enterococci and Candida species in patients treated with fidaxomicin versus vancomycin for Clostridium difficile infection. Clinical Infectious Diseases. 55, Suppl 2 121-126 (2012).
  30. Krause, R., Krejs, G. J., Wenisch, C., Reisinger, E. C. Elevated fecal Candida counts in patients with antibiotic-associated diarrhea: role of soluble fecal substances. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 10 (1), 167-168 (2003).
  31. Krause, R., et al. Role of Candida in antibiotic-associated diarrhea. The Journal of Infectious Diseases. 184 (8), 1065-1069 (2001).
  32. Zuo, T., et al. Gut fungal dysbiosis correlates with reduced efficacy of fecal microbiota transplantation in Clostridium difficile infection. Nature Communications. 9 (1), 3663(2018).
  33. Delaloye, J., Calandra, T. Invasive candidiasis as a cause of sepsis in the critically ill patient. Virulence. 5 (1), 161-169 (2014).
  34. Cole, G. T., Halawa, A. A., Anaissie, E. J. The role of the gastrointestinal tract in hematogenous candidiasis: from the laboratory to the bedside. Clinical Infectious Diseases. 22, Suppl 2 73-88 (1996).
  35. Lo, H. J., et al. Nonfilamentous C. albicans mutants are avirulent. Cell. 90 (5), 939-949 (1997).
  36. Gale, C. A., et al. Linkage of adhesion, filamentous growth, and virulence in Candida albicans to a single gene, INT1. Science. 279 (5355), 1355-1358 (1998).
  37. Bendel, C. M., et al. Systemic infection following intravenous inoculation of mice with Candida albicans int1 mutant strains. Molecular genetics and metabolism. 67 (4), 343-351 (1999).
  38. Toenjes, K. A., et al. Small-molecule inhibitors of the budded-to-hyphal-form transition in the pathogenic yeast Candida albicans. Antimicrobial agents and chemotherapy. 49 (3), 963-972 (2005).
  39. Carlisle, P. L., et al. Expression levels of a filament-specific transcriptional regulator are sufficient to determine Candida albicans morphology and virulence. Proceedings of the National Academy of Sciences. 106 (2), 599-604 (2009).
  40. Fazly, A., et al. Chemical screening identifies filastatin, a small molecule inhibitor of Candida albicans adhesion, morphogenesis, and pathogenesis. Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (33), 13594-13599 (2013).
  41. Pande, K., Chen, C., Noble, S. M. Passage through the mammalian gut triggers a phenotypic switch that promotes Candida albicans commensalism. Nature genetics. 45 (9), 1088(2013).
  42. Bar-Yosef, H., Gonzalez, N. V., Ben-Aroya, S., Kron, S. J., Kornitzer, D. Chemical inhibitors of Candida albicans hyphal morphogenesis target endocytosis. Scientific reports. 7 (1), 5692(2017).
  43. Mendelsohn, S., Pinsky, M., Weissman, Z., Kornitzer, D. Regulation of the Candida albicans hypha-inducing transcription factor Ume6 by the CDK1 cyclins Cln3 and Hgc1. mSphere. 2 (2), 00248(2017).
  44. Vila, T., et al. Targeting Candida albicans filamentation for antifungal drug development. Virulence. 8 (2), 150-158 (2017).
  45. Pande, K., Chen, C., Noble, S. M. Passage through the mammalian gut triggers a phenotypic switch that promotes Candida albicans commensalism. Nature Genetics. 45 (9), 1088-1091 (2013).
  46. Lo, H. J., et al. Nonfilamentous C. albicans mutants are avirulent. Cell. 90 (5), 939-949 (1997).
  47. Bar-Yosef, H., Vivanco Gonzalez, N., Ben-Aroya, S., Kron, S. J., Kornitzer, D. Chemical inhibitors of Candida albicans hyphal morphogenesis target endocytosis. Scientific Reports. 7 (1), 5692(2017).
  48. Carlisle, P. L., et al. Expression levels of a filament-specific transcriptional regulator are sufficient to determine Candida albicans morphology and virulence. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (2), 599-604 (2009).
  49. Mendelsohn, S., Pinsky, M., Weissman, Z., Kornitzer, D. Regulation of the Candida albicans Hypha-Inducing Transcription Factor Ume6 by the CDK1 Cyclins Cln3 and Hgc1. mSphere. 2 (2), (2017).
  50. Bendel, C. M., et al. Effects of Alteration of the Candida albicans Gene INT1 on Cecal Colonization in Orally Innoculated Mice. Pediatric Research. 45, 156(1999).
  51. Gale, C. A., et al. Linkage of adhesion, filamentous growth, and virulence in Candida albicans to a single gene, INT1. Science. 279 (5355), 1355-1358 (1998).
  52. Toenjes, K. A., et al. Small-molecule inhibitors of the budded-to-hyphal-form transition in the pathogenic yeast Candida albicans. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 49 (3), 963-972 (2005).
  53. Fazly, A., et al. Chemical screening identifies filastatin, a small molecule inhibitor of Candida albicans adhesion, morphogenesis, and pathogenesis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (33), 13594-13599 (2013).
  54. Naseem, S., Gunasekera, A., Araya, E., Konopka, J. B. N-acetylglucosamine (GlcNAc) induction of hyphal morphogenesis and transcriptional responses in Candida albicans are not dependent on its metabolism. Journal of Biological Chemistry. 286 (33), 28671-28680 (2011).
  55. Piispanen, A. E., Hogan, D. A. PEPped up: induction of Candida albicans virulence by bacterial cell wall fragments. Cell Host & Microbe. 4 (1), 1-2 (2008).
  56. Xu, X. L., et al. Bacterial peptidoglycan triggers Candida albicans hyphal growth by directly activating the adenylyl cyclase Cyr1p. Cell Host & Microbe. 4 (1), 28-39 (2008).
  57. Guinan, J., Thangamani, S. Antibiotic-induced alterations in taurocholic acid levels promote gastrointestinal colonization of Candida albicans. FEMS microbiology letters. 365 (18), (2018).
  58. Guinan, J., Villa, P., Thangamani, S. Secondary bile acids inhibit Candida albicans growth and morphogenesis. Pathogens and disease. 76 (3), (2018).
  59. Guinan, J., Wang, S., Hazbun, T. R., Yadav, H., Thangamani, S. Antibiotic-induced decreases in the levels of microbial-derived short-chain fatty acids correlate with increased gastrointestinal colonization of Candida albicans. Scientific Reports. 9 (1), 1-11 (2019).
  60. Gutierrez, D., et al. Antibiotic-induced gut metabolome and microbiome alterations increase the susceptibility to Candida albicans colonization in the gastrointestinal tract. FEMS microbiology ecology. 96 (1), 187(2020).
  61. Witchley, J. N., et al. Candida albicans morphogenesis programs control the balance between gut commensalism and invasive infection. Cell Host & Microbe. 25 (3), 432-443 (2019).
  62. Witchley, J. N., Penumetcha, P. M., Noble, S. M. Visualization of Candida albicans in the Murine Gastrointestinal Tract Using Fluorescent In Situ Hybridization. JoVE (Journal of Visualized Experiments). (153), e60283(2019).
  63. Johansson, M. E., Hansson, G. C. Preservation of mucus in histological sections, immunostaining of mucins in fixed tissue, and localization of bacteria with FISH. Mucins. , Springer. 229-235 (2012).
  64. Lossinsky, A. S., et al. The histopathology of Candida albicans invasion in neonatal rat tissues and in the human blood-brain barrier in culture revealed by light, scanning, transmission and immunoelectron microscopy scanning. Histology and histopathology. , (2006).
  65. Rosenbach, A., Dignard, D., Pierce, J. V., Whiteway, M., Kumamoto, C. A. Adaptations of Candida albicans for growth in the mammalian intestinal tract. Eukaryotic Cell. 9, 1075-1086 (2010).
  66. Vautier, S., et al. C andida albicans colonization and dissemination from the murine gastrointestinal tract: the influence of morphology and T h17 immunity. Cellular Microbiology. 17, 445-450 (2015).
  67. Lyman, C., Navarro, E., Garrett, K., Roberts, D., Pizzo, P., Walsh, T. Adherence of Candida albicans to bladder mucosa: development and application of a tissue explant assay. Mycoses. 42, 255-259 (1999).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

نواتج أيض الأمعاءمحتويات الأعورفئران معالجة بالمضادات الحيويةالمجهر الفلوريزراعة الخلايا الفطريةمستخلصات متجانسات الأمعاء
مُسَاَنّة مُعَدِيّة سابقة لدراسة المبيضات المبيضات البَيكانسِيّة الواصلة Morphogenesi في الجهاز الهضمي
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.