يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

التنبؤ ببتر باستخدام خلايا السلف أحادية النوى في المرضى الذين يعالجون من الأوعية مع الإقفاريات الحرجة

3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/61503

⸱

سبتمبر 22, 2020

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Experimental Metabolism and Clinical Research Laboratory, Clinical Research Department, Division of Biomedical Research, Centro Médico Nacional 20 de Noviembre, ISSSTE, 2Vascular Surgery and Angiology Department, Centro Médico Nacional 20 de Noviembre, ISSSTE, 3Regenerative Medicine and Tissue Engineering Laboratory; Coordination of Research, Centro Médico Nacional 20 de Noviembre, ISSSTE

في هذه المقالة

ملخص

قد يحدث بتر الأطراف السفلية حتى بعد رأب الأوعية من الأوعية المعرقلة في الإقفارية الطرف الحرج (CLI). تعكس خلايا السلف أحادية النوى (MPCs) إصلاح الأوعية الدموية. يصف هذا البروتوكول القياس الكمي لثناء الغدد العاملة من الدورة الدموية بالقرب من رأب الأوعية، وعلاقته بالخلل البطاحلي والتنبؤ ببتر الأطراف السفلية.

الملخص

يمثل إقفار الأطراف الحرجة (CLI) مرحلة متقدمة من مرض الشرايين المحيطية. عملية رأب الأوعية تحسن تدفق الدم إلى الطرف السفلي; ومع ذلك، تقدم بعض المرضى بشكل لا رجعة فيه إلى بتر الأطراف. إن مدى تلف الأوعية الدموية وآليات إصلاح الأوعية الدموية هي عوامل تؤثر على نتيجة ما بعد الرأب الوعائي. خلايا السلف أحادية النوى (MPCs) هي رد فعل على تلف الأوعية الدموية وإصلاحها ، مع القدرة على عكس أمراض الأوعية الدموية. يصف هذا البروتوكول القياس الكمي لـ MPCs التي تم الحصول عليها من الدورة الدموية من الأوعية القريبة من موقع رأب الأوعية، وكذلك علاقتها بالخلل البطايني وقدرتها التنبؤية على بتر الأطراف في الأيام الثلاثين التالية بعد رأب الأوعية في المرضى الذين يعانون من CLI.

المقدمة

يتميز مرض الشرايين الطرفية (PAD) بانسداد الأوعية الدموية المزمن والتقدمي مع الحد من إمدادات الدم1. على نطاق عالمي، يؤثر PAD من الأطراف السفلية على حوالي 10٪ من السكان المسنين، في حين يتم تقديم ما يصل إلى 7٪ من هذه الحالات إلى بتر الأطراف2،3.

يمثل الإقفاريات الحرجة (CLI) العرض الأكثر خطورة لـ PAD1. المرضى عادة ما تعاني من الألم في الراحة, قرحة, أو الغرغرينا التي تعزى إلى الشرايين انسداد; في حين أن التشخيص السريري غير مواتية وتتميز بـ 30٪ من خطر بتر الأطراف والوفيات خلال 1 سنة3,4,5.

رأب الأوعية هو إجراء الأوعية الدموية طفيفة التوغل التي يمكن أن تعيد تدفق الدم إلى الطرف السفلي في المرضى الذين يعانون من CLI; ومع ذلك، فإن بعض المرضى تتطلب حتما بتر الأطراف الرئيسية، حتى بعد العلاج بتر الأوعية1،5. تحديد مبكر من النتائج غير المواتية بعد رأب الأوعية أمر قيم جدا، وذلك بسبب إمكانية إنفاذ العلاج.

قد توفر عوامل الخطر التقليدية قدرة تنبؤية محدودة لبتر الأطراف الرئيسية في المرضى الذين يخضعون لعملية CLI للرأب الوعائي6. تمثل المؤشرات الحيوية الموجهة للفيزياء المرضية طرقًا جديدة ذات تطبيقات سريرية محتملة ، والتي قد تؤدي إلى فائدة خاصة في الأمراض المتعلقة بإصابة الأوعية الدموية7. في الوقت الحاضر ، ومشاركة السكان الخلوية التي تملك خصائص إصلاح البطانية ، في موقع البلاك تصلب الشرايين ، وقد اعترف بشكل متزايد8،9.

وتستمد خلايا السلف أحادية النوى (MPCs) من نخاع العظام والخصائص الهيكلية والوظيفية الخاصة من الخلايا الجذعية مع قدرات تجديد الأوعية الدموية. نظرا لقدرة لجنة السياسة النقدية على التكاثر، والهجرة وإظهار الالتزام الأوعية الدموية; وقد أصبحت هذه الخلايا مرشحين جيدين لتعكس إصلاح endothelial ردا على10،11،12. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الاهتمام المستمر بالآليات الكامنة وراء إصابة الأوعية الدموية قد حفز على استكشاف الدور التنبؤي للعلامات الحيوية المحلية التي تحدث ، حيث أنها تعتبر تعكس تلف الأوعية الدموية وإصلاح7و13و14.

الغرض من هذه الدراسة هو وصف كيفية تحديد كمية ال MPCs التي تنتشر بالقرب من انسداد الأوعية الدموية في المرضى الذين يعانون من CLI يخضع لعملية رأب الأوعية; وكيفية تقييم العلاقة بين اللجان MPCs مع مؤشرات الخلل البطانية وبتر الأطراف.

بالمقارنة مع التكهن على أساس الأمراض المصاحبة وميزات الأوعية الدموية الجوهرية، فإن كمية ال MPCs المحلية تظهر قدرة محددة على التنبؤ بالنتائج السريرية فيما يتعلق بالخلل البطانية وبتر الأطراف. باستمرار، وقد وصفت بعض الدراسات دور التكهن من المؤشرات الحيوية مماثلة أثناء تقييم المرضى الذين يعانون من PAD15،16.

استناداً إلى النتائج السابقة7، قد تكون الطريقة الموصوفة هنا مفيدة لتحديد مبكر للسكان المعرضين لخطر النتائج الوعائية الضارة في العديد من البيئات السريرية ، مثل الأمعاء السفلية والأوعية الدموية والسكتة الدماغية والتهاب الأوعية الدموية والجلطات الوريدية وغيرها التي تنطوي على إصابة الأوعية الدموية وإصلاحها.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

وافقت لجنة أخلاقيات البحوث المؤسسية من Centro Médico Nacional "20 de Noviembre" ISSSTE على هذا البروتوكول المحتمل ، وقدم جميع المرضى المسجلين موافقة خطية مستنيرة.

1- تقييم كتلة الأوعية الدموية في الأطراف السفلية، وأخذ عينات الدم، والبلاستيس الوعائي بالون

ملاحظة: عينة الدراسة المستخدمة في هذه التجربة تتألف من 20 مريضا بالسكري، الذين تتراوح أعمارهم بين 68 سنة و 10 من أصل 20 كانوا من الذكور. وكان نصف العينة من المدخنين وكانت معظم الاعتلالات المشتركة السائدة هي مرض السكري من النوع 2، وارتفاع ضغط الدم الشرياني الجهازي و/أو ديسليبيديميا. وكان القصد من هذه العينة أن تكون موحدة بالنسبة للأمراض العمرية والجنس والمراضة المشتركة. التحيز المحتمل بسبب التأثير السريري الديموغرافي على العلاقة بين MPCs وCLI لا يمكن استبعاده.

  1. تقييم شدة سريرية من الإقفاريات الطرف وفقا لتصنيف رذرفورد13 (انظر الجدول التكميلي 1).
  2. إجراء تصوير الأوعية السفلية للأطراف، وأخذ عينات الدم، والورم بالون.
    1. استخدام مضادات التخثر والأدوية المخدرة قبل الجراحة.
    2. ضع إبرة 18 G في الوعاء الدموي في موقع الفخذ المحدد.
    3. وضع مقدم وتقدم سلك دليل مرنة. ثم، يتم تغيير الدليل الأولي لمزيد من المقدم 6 Fr.
    4. استخدام الحقن الدوري من وسائل الإعلام التباين أو CO2 تحت دليل الفلورسكوب لتحديد مسار الشريان والأوعية الدموية المواقع المسدودة (الشكل 1).
      ملاحظة: استخدام وسائط التباين 40 سم مكعب، المخفف 1:1 في 0.9٪ ملحي، أو CO2 في 10 إلى 20 مل لكل طلقة في ضغط من 12 psi.
    5. إدخال اثنين من 0.014 الأسلاك دليل الملاحة Fr واثنين من 0.014 أسلاك دليل دعم الأب في السفينة وتقدم لهم حتى الموقع المحظورة.
      ملاحظة: يتم استخدام اثنين من الأسلاك دليل 0.014 Fr (260 سم طويلة) للملاحة واثنين من 0.014 Fr أسلاك دليل (260 سم طويلة) وتستخدم لدعم، خلال إجراء واحد.
    6. إدخال 5 Fr و 3 Fr القسطرة بالتتابع وجمع 10 مل من الدم من أقرب موقع لعرقلة الأوعية الدموية. الحفاظ على عينات الدم على الجليد.
      ملاحظة: قد تكون أحجام القسطرة 5 Fr و 3 Fr، ويتم تغييرها أثناء الإجراء.
    7. تقدم سلك دليل مرة أخرى. ثم، إدخال قسطرة بالون رأب الأوعية، الذي يحتوي على بالون قابل للنفخ يقع في نهاية القسطرة. تقدم قسطرة بالون رأب الأوعية ووضع الحق في البالون في موقع الآفة. قم بإجراء عملية رأب الأوعية عن طريق نفخ البالون ضد لوحة الحجب الموجودة في جدار الأوعية الدموية. تحقق من استعادة تدفق الدم.
      ملاحظة: قد توضع الدعامة في المنطقة المحجوبة للمساعدة في إبقاء الشريان مفتوحًا بعد الإجراء.
    8. إدخال قسطرة والتقدم حتى أقرب موقع إلى كتلة الأوعية الدموية. جمع 10 مل من الدم في 30 دقيقة الفاصل الزمني بعد رأب الأوعية. الحفاظ على عينات الدم على الجليد.
      ملاحظة: يوصى بجمع عينات الدم قبل وبعد رأب الأوعية لتقييم تأثير رأب الأوعية على عدد الـMPCs.
    9. إزالة جميع الأسلاك تحت التوجيه الفلوري.
    10. توفير إجراءات الرعاية بعد العملية الجراحية، بما في ذلك العلاج المضاد للتخثر باستخدام اليناكسابارين في 1 ملغ/ كغ تحت الجلد كل 12 ساعة، والأسبرين 100 ملغ، الستاتين، والتخويل. ضغط في موقع ثقب الأوعية الدموية خلال 24 ساعة.

2. القياس الكمي ل الخلايا أحادية النوى السلف (MPCs) (الشكل 2)

  1. إلى أنبوب مخروطي جديد 15 مل، نقل 6 مل من الدم الذي تم جمعه وتمييع 1:1 (v/v) مع برنامج تلفزيوني.
    ملاحظة: معالجة الدم في غضون 1 ساعة من جمع.
  2. الاستعداد لفصل التدرج الكثافة، عن طريق إضافة 2 مل من متوسطة التدرج الكثافة إلى 3 أنابيب الاختبار لكل منهما. ثم، إضافة 3 aliquots حجم متساو من الدم المخفف في كل أنبوب الاختبار.
    ملاحظة: لا تتجاوز ثلاثة أرباع قدرة أنبوب الاختبار القصوى.
  3. أجهزة الطرد المركزي عند 1,800 x ز لمدة 30 دقيقة عند 4 درجة مئوية. جمع طبقة واجهة الحاضر كخاتم باستخدام ماصة، ونقلها إلى أنبوب جديد. إضافة 2 مل من برنامج تلفزيوني وتدور في 1800 س ز لمدة 6 دقائق في 4 درجة مئوية. حفظ بيليه لأن هذا سوف تحتوي على MPCs.
  4. اغسل الكريه التي تحتوي على الـ MPCs مع PBS بواسطة الطرد المركزي كما هو موضح في الخطوة 2.3. استخدام برنامج تلفزيوني جديد لكل غسل وتدور في 1800 س ز لمدة 2 دقيقة في 4 °C. كرر العملية لمدة 6 مرات.
  5. بعد الغسيل الأخير، استخدم 1 مل من برنامج تلفزيوني لإعادة تعليق بيليه الخلية. تمييع 20 ميكرولتر من تعليق الخلية مع 20 ميكرولتر من 0.4٪ trypan الأزرق، 1:1 (v/v). استخدم 10 ميكرولتر من هذا التعليق الخلوي لعد الخلايا باستخدام مقياس الهيموسيت والمجهر الخفيف.
  6. Aliquot 1 × 106 MPCs في أنابيب 5 ml تدفق سابقا.
    ملاحظة: إعداد الأجسام المضادة المطابقة لـ isotype.
  7. أجهزة الطرد المركزي الأنابيب في 1800 س ز لمدة 6 دقائق في 4 درجة مئوية. التعرق وتجاهل المابير.
  8. تخفيف الأجسام المضادة الأولية في 100 ميكرولتر من محلول حضانة الأجسام المضادة [1X PBS، pH 7.4، EDTA 2 mM، BSA 0.05٪] وإضافة إلى الأنبوب. Resuspend لمدة 10 ق واحتضان لمدة 20 دقيقة في 4 درجة مئوية، في الظلام.
    ملاحظة: كانت التركيزات النهائية للأجسام المضادة الأولية المستخدمة في هذا البروتوكول CD45 1:50، CD34 1:20، KDR 1:50، CD184 1:20، CD133 1:50. ويمكن وقف البروتوكول في هذه الخطوة عن طريق تحديد الخلايا الليمفاوية في 4٪ شبهformaldehyde في برنامج تلفزيوني وتخزين عينات تصل إلى 24 ح في 4 درجة مئوية.
  9. أجهزة الطرد المركزي في 1800 × ز لمدة 2 دقيقة في 4 درجة مئوية والتخلص من الفائق. Resuspend في 500 ميكرولتر من 1X PBS، وhH 7.4، EDTA 2 mM.
  10. إجراء تحليل تدفق قياس الثغرات.
    1. إعداد الخلفية مع الأجسام المضادة التحكم المتطابقة مع الأيزوتايب. ثم، في مؤامرة FSC / SSC حدد الخلايا الليمفاوية تنتشر، في محاولة لاستبعاد الحطام الخلوي، الحبيبات المتبقية، والجسيمات الأخرى. ويعتبر هذا التوزيع 100٪.
      ملاحظة: تنتشر الخلايا الليمفاوية عادة في المنطقة اليسرى السفلى من المؤامرة.
    2. استخدام بوابة مع النمط المناعي المشترك الذي يحتوي على عدد كبير من الخلايا CD45+ وD34+. ثم، حدد للنوعات المناعية الإيجابية المزدوجة باستخدام البوابة التي تم تحديدها سابقا CD45+، CD34+، وإضافة إما KDR (VEGFR -2)+، CD133+ أو CD184+. تحديد الأسطح الفرعية لـ MPCs بواسطة علامات سطح الخلايا المحددة الخاصة بها. تقرير كنسبة مئوية من الأحداث المسورة.
  11. تحديد السكان الفرعيين الرئيسيين للبلدان المُمَكِّلة. في هذه الدراسة كانت النماذج المناعية التي تم تحليلها CD45+CD34+CD133+; CD45+CD34+CD184+؛ CD45+CD34+CD133+CD184+؛ CD45+CD34+KDR+؛ CD45+CD34+KDR+CD133+ وDD45+CD34+KDR+CD1847،17.
    ملاحظة: تم استخدام علامات سطح الخلية هذه للدراسة: CD45 (الخلايا اللمفاوية)، CD34 (الخلايا البطانية و /أو الأوعية الدموية)، KDR (VEGFR-2) (علامة غشاء الخلايا البطانية)، CD133 (خلايا السلف البطانية) وCD184 (الخلايا الجذعية الدموية والخلايا البطانية).

3- علاقة المراكز الميكرفة مع تعديل الوظيفة البطانية واختبار الديناميكا الدموية (FMD)

  1. تحديد تمدد بالتدفق (FMD)، قبل وما بعد رأب الأوعية.
    1. استخدم محول خطي في الأوعية الدموية لقياس قطر الشريان العضدي.
    2. ضع الكفة من مقياس ضغط الدم فوق موقع القياس في الساعد و insufflate في 50 مم زئبق فوق ضغط الدم الانقباضي لمدة 5 دقائق وفرغ.
    3. تحديد مرة أخرى قطر الشريان العضدي في غضون 60 ثانية المقبلة. استخدم المعادلة أدناه لتقدير الـ إف إم إند.
      ملاحظة: حساب درجة توسيع نطاق استخدام المعادلة (٪ = (أقصى قطر بعد نقص التروية عابرة - قطر القاعدي) × 100 / قطر القاعدي.
  2. ربط عدد الـ MPCs بقيمة الـ FMD الأساسية ودلتا ما بعد رأب الأوعية من الـ FMD.

4- القدرة التنبؤية للبلدان غير الممَرَكَة على بتر الأطراف

  1. جدولة مواعيد طبية دورية بعد رأب الأوعية بالون والتفريغ المريض, لتقييم نوعية تدفق الدم إلى الطرف السفلي.
  2. تقييم الخطورة السريرية لاقفارية الأطراف في 2 أسابيع بعد رأب الأوعية. تقييم حل آلام الراحة، انخفاض نقص التروية، والحفاظ على القدم الوظيفية، وفقا لتصنيف روثرفورد13.
  3. قارن الشدة السريرية لاقفوية الأطراف، في خط الأساس مقابل المتابعة. تحديد الحالات التي تتطلب بتر كبير بسبب نتائج غير مواتية.
  4. ربط عدد الـMPCs مع نسبة المرضى الذين يحتاجون إلى بتر كبير في الطرف السفلي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

وتم جمع عينات دم من الشرايين المسدودة، في الموقع الذي تم تناوله من أجل رأب الأوعية، من 20 مريضاً بالسكري، يبلغ عمرهم 68 عاماً، و10 من أصل 20 من الذكور. وكان نصف عينة السكان من المدخنين. وكانت الآفات الوعائية أساسا كما سجل روثرفورد الدرجة السادسة; في حين أظهر المرضى ارتفاع معدل انتشار مرض السكري من النوع 2 (100٪)، وارتفاع ضغط الدم (70٪) وعسر الدم (55٪).

30 يوما من المتابعة السريرية بعد أن أجريت عملية رأب الأوعية في الأطراف السفلية. نسبة السكان الفرعية لجنة السياسة النقدية في خط الأساس أو دينامي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

قد تظهر عملية جمع الدم في الموقع الدقيق الكتلة الوعائية صعوبات تقنية؛ لذلك، قمنا بجمع الدم في القرب من كتلة الأوعية الدموية. وبالمثل، فإن كمية الـMPCs القريبة من اللويحات الوعائية تبدو ديناميكية للغاية وقد تنشأ اختلافات قبل وبعد رأب الأوعية. وفقا لملاحظاتنا، فمن المستحسن لتقييم خط الأساس و 30min-بعد تغيير الأوعية الدموية في عدد من MPCs، لأنها قد تعكس العديد من العمليات الفسيولوجية المرضية التي تحدث في الأضرار الوعائية وإصلاحها.

يوصى بإجراء معالجة عينات الدم لتحديد الـ MPCs في غضون الـ 3 ساعات ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون دعم البرنامج المؤسسي E015 للمشروع ID 356.2015.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
BSARoche10735086001ألبومين مصل البقر (BSA) كعامل تخزين مؤقت ومثبت وقياسي وللمزج.
حبات المعايرةMiltenyi Biotec / MACS# 130-093-607MACيتم توفير حبات المعايرة في محلول مائي يحتوي على 0.05٪ أزيد الصوديوم. 3.5 مل لما يصل إلى 100 اختبار
CD133 / 1 (AC133) -PEMilteny Biotec / MACS# 130-080-801الأجسام المضادة المترافقة مع R-Phycoerythrin في PBS / EDTA buffer
CD184 (CXCR4) -PE-VIO770Miltenyi Biotec / MACS# 130-103-798أحادي النسيلة ، النوع المتماثل المؤتلف البشري IgG1 ، مترافق
CD309 (VEGFR-2 / KDR) -APCMiltenyi Biotec / MACS# 130-093-601جسم مضاد مترافق مع R-Phycoerythrin في PBS / EDTA buffer
CD34-FITCMiltenyi Biotec / MACS# 130-081-001استنساخ الجسم المضاد أحادي النسيلة AC136 يفصل حاتم من الفئة الثالثة من CD34
CD45- VioBlueMiltenyi Biotec / MACS# 130-092-880الجسم المضاد CD45 أحادي النسيلة ،
الأنابيب المخروطيةالبشرية الحرارية العلمية# 33965115 مل أنابيب الطرد المركزي المخروطية
أنابيب القياس الخلويFALCON Corning العلامة التجارية# 3520525 مل أنبوب البوليسترين المستدير القاع. نمط 12x75. عقيم.
EDTABIO-RAD# 161-0729المعادن الثقيلة ، (مثل الرصاص) < ؛ 10 جزء في المليون ، Fe< 0.01٪ ، As< 1 جزء في المليون ، غير قابل للذوبان < ؛ 0.005٪
تحسين Neubauerبدون علامة تجاريةبدون رقم كتالوجمقياس الدم لعد الخلايا. (النطاق 0.1000 مم ، 0.0025 مم 2)
جمع الدم K2 EDTA BDVacutainer# 367863أنبوب فراغ بلاستيكي أرجواني (K2E) 10.8 مجم ، 6 مل.
تقنيات الخلايا الجذعيةالليمفاوية01-63-12-002-Aمعقمة والتحقق من وجود السموم الداخلية. الكثافة: 1.077 & plusmn; 0.001 جم / مل
بارافورمالدهايدSIGMA-ALDRICHتثبيت العينات البيولوجية ، (مسحوق ، 95٪)
نقل الماصة 1،3 ملCRM GlobePF1016 ، PF1015ماصة النقل هي أداة تسهل نقل السوائل بدقة أكبر.
أنابيب الاختبارKIMBLE CHASE45060 13100أنابيب اختبار مقاومة للحرارة. الحجم / الغطاء 13 × 100 مم
المترافقة أنابيب #SZBF0920V

المراجع

  1. Serrano-Hernando, F. J., Martín-Conejero, A. Peripheral artery disease: Pathophysiology, diagnosis and treatment. Revista Española de Cardiología. 60 (9), 969-982 (2007).
  2. Agarwal, S., et al. Burden of re-admissions among patients with critical limb ischemia. Journal of the American College of Cardiology. 69 (15), 1897-1908 (2017).
  3. Kolte, D., et al. Thirty-day re-admissions after endovascular or surgical therapy for critical limb ischemia: Analysis of the 2013 to 2014 nationwide re-admissions databases. Circulation. 136 (2), 167-176 (2017).
  4. Rowlands, T. E., Donnelly, R. Medical therapy for intermittent claudication. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 34, 314-321 (2007).
  5. Cronewett, J. L. Acute limb ischemia and lower extremity chronic arterial disease: Rutherford's vascular surgery (8th ed.). , Saunders Elsevier. Philadelphia, PA. (2014).
  6. Dick, F., et al. Surgical or endovascular revascularization in patients with critical limb ischemia: influence of diabetes mellitus on clinical outcome. Journal of Vascular Surgery. 45 (4), 751-761 (2007).
  7. Suárez-Cuenca, J. A., et al. Coronary circulating mononuclear progenitor cells and soluble biomarkers in the cardiovascular prognosis after coronary angioplasty. Journal of Cellular and Molecular Medicine. 23 (7), 4844-4849 (2019).
  8. Franz, R., et al. Use of autologous bone marrow mononuclear cell implantation therapy as a limb salvage procedure in patients with severe peripheral arterial disease. Journal of Vascular Surgery. 50 (6), 1378-1390 (2009).
  9. Benoit, E., O'Donnell, T. F., Patel, A. N. Safety and efficacy of autologous cell therapy in critical limb ischemia: A systematic review. Cellular Transplantation. 22 (3), 545-562 (2013).
  10. Hill, J. M., et al. Circulating endothelial progenitor cells, vascular function, and cardiovascular risk. New England Journal of Medicine. 348 (7), 593-600 (2003).
  11. Schmidt-Lucke, C., et al. Reduced number of circulating endothelial progenitor cells predicts future cardiovascular events: proof of concept for the clinical importance of endogenous vascular repair. Circulation. 111 (22), 2981-2987 (2005).
  12. Smadja, D. M. Early endothelial progenitor cells in bone marrow are a biomarker of cell therapy success in patients with critical limb ischemia. Cytotherapy. 14 (2), 232-239 (2012).
  13. Kremastinos, D. T., et al. Intracoronary cyclic-GMP and cyclic-AMP during percutaneous transluminal coronary angioplasty. International Journal of Cardiology. 53 (3), 227-232 (1996).
  14. Truong, Q. A., Januzzi, J. L., Szymonifka, J., Thai, W. E., Wai, B., Lavender, Z. Coronary sinus biomarker sampling compared to peripheral venous blood for predicting outcomes in patients with severe heart failure undergoing cardiac resynchronization therapy: the BIOCRT study. Heart Rhythm. 11 (12), 2167-2175 (2014).
  15. Ding, N., et al. Fibrosis and inflammatory markers and long-term risk of peripheral artery disease: The ARIC study. Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. 40 (9), 2322-2331 (2020).
  16. Potier, L., et al. Plasma copeptin and risk of lower-extremity amputation in Type 1 and Type 2 diabetes. Diabetes Care. 40 (12), 2290-2297 (2019).
  17. Schmidt-Lucke, C., et al. Quantification of circulating endothelial progenitor cells using the modified ISHAGE protocol. PLoS One. 5 (1), 13790(2010).
  18. Marboeuf, P., et al. Inflammation triggers colony forming endothelial cell mobilization after angioplasty in chronic lower limb ischemia. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 6 (1), 195-197 (2008).
  19. Regueiro, A., et al. Mobilization of endothelial progenitor cells in acute cardiovascular events in the PROCELL study: Time-course after acute myocardial infarction and stroke. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 80, 146-155 (2015).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

قياس التدفق الخلويالطرد المركزي بالتدرج الكثافيالخلل الوظيفي البطانيالتنبؤ ببتر الطرفتصنيف روثرفوردقياس تمدد الشريان العضدي المستجيب للتدفقجمع الدم في حالات الانسداد الوعائي
التنبؤ ببتر باستخدام خلايا السلف أحادية النوى في المرضى الذين يعالجون من الأوعية مع الإقفاريات الحرجة
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.