نقدم بروتوكول تخطيط القلب الذي هو من الناحية الفنية سهلة وغير مكلفة وسريعة وبأسعار معقولة في الفئران الصغيرة، ويمكن أن يؤديها مع حساسية معززة. نقترح هذه الطريقة كمقاربة فحص لدراسة العوامل الدوائية والتعديلات الجينية ونماذج الأمراض في الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تسجيلات تخطيط القلب الكهربائي في الفئران المُضجرة باستخدام الرصاص الثاني
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تخطيط القلب الكهربائي هو أداة قيمة لتقييم نظام الاتّاق القلبي. وقد ساعدت البحوث الحيوانية على توليد معلومات جينية ودوائية جديدة فيما يتعلق بكهربية القلب. ومع ذلك ، فإن إجراء قياسات تخطيط القلب في الحيوانات الصغيرة في الجسم الحي ، مثل الفئران ، كان تحديًا. لتحقيق هذه الغاية، استخدمنا طريقة تسجيل تخطيط القلب في الفئران المُخدّرة مع العديد من المزايا: إنها إجراء بسيط من الناحية الفنية، وغير مكلفة، ووقت قياس قصير، وبأسعار معقولة، حتى في الفئران الصغيرة. على الرغم من القيود مع استخدام التخدير، يمكن إجراء مقارنات بين التحكم والمجموعات التجريبية مع حساسية معززة. تعاملنا مع الفئران مع ناهضين والخصوم من الجهاز العصبي اللاإرادي لتحديد صحة هذا البروتوكول وقارنا نتائجنا مع التقارير السابقة. كشف بروتوكول ECG لدينا زيادة معدلات ضربات القلب وفترات QTc على العلاج مع الأتروبين، وانخفاض معدلات ضربات القلب وفترات QTc بعد العلاج كارباكول، وارتفاع معدلات ضربات القلب وفترات QTc مع isoprenaline ولكن لم يلاحظ أي تغيير في معلمات ECG على إدارة بروبرانولول. هذه النتائج مدعومة من قبل التقارير السابقة، مما يؤكد موثوقية هذا البروتوكول ECG. وهكذا، يمكن استخدام هذه الطريقة كنهج فرز لإجراء قياسات تخطيط القلب التي لولا ذلك لن يكون محاولة بسبب ارتفاع التكلفة والصعوبات التقنية.
المقدمة
يُـُـُـــــُـــــــُــــــــــــــُــــــــــــــــــــــــــيَّ مخطط القلب الكهربائي (ECG)، وهو اختبار يقيس النشاط الكهربائي لنبضات القلب، أداة قيِّمة لتقييم نظام التوصيل القلبي. تشمل المعلمات التي يتم قياسها بواسطة تخطيط القلب معدل ضربات القلب، وفاصل العلاقات العامة، ومدة QRS، وفترة QT. باختصار، يتوافق الفاصل الزمني للعلاقات العامة مع الوقت المطلوب للدافع الكهربائي للسفر من عقدة الجيوب الأنفية الأذينية عبر العقدة الأذينية إلى ألياف بوركينجي؛ مدة QRS هي الوقت المناسب لفك القطب البطيني أن يحدث من خلال نظام Purkinje و عضلة القلب البطينية; وفترة QT هي مدة إعادة قطبية البطين.
وقد ساعدت تسجيلات ECG في الفئران الباحثين على فحص وظيفة القلب وتحديد....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية من قبل اللجنة المحلية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية، جامعة كيونغ هي (رقم الترخيص: KHUASP(SE)-18-108) ومطابقة لدليل المعاهد الوطنية للصحة الأمريكية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.
1- تجريبية
- الحفاظ على جميع الفئران (39 الفئران، Balb / c، ذكر، 7\u20129 أسابيع) في منشأة خالية من مسببات الأمراض وفقا لتوجيه لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.
- الحفاظ على الفئران على 12 ساعة دورة خفيفة / داكنة في درجة حرارة ثابتة مع حرية الوصول إلى الطعام والماء.
2- إعداد التخدير
ملاحظة: يستخدم ثلاثي البروموإيثانول على تركيبات الكيت....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
التجارب الدوائية
لتحديد ما إذا كان قياس ECG غير الباضع يعكس تأثير التشكيل اللاإرادي على نظام موصل القلب ، تم تحدي فئران Balb / c العادية مع ناهضين وخصوم للنظام العصبي اللاإرادي (ANS). واستخدمت الأتروبين والكارباخول للتأثير الحصار اللاإرادي اللاإرادي اللالاماثي والتحفيز، على التوالي، في حين تدار بروبرانولول وisoprenaline لإثارة الحصار والتحفيز غير الطبيعي متعاطفة، على التوالي9.
ارتفع معدل ضربات القلب بشكل كبير في الأتروبين -
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
هناك عدة خطوات هامة في البروتوكول. يجب أن تكون البيئة المحيطة خالية من الضوضاء والاهتزاز. يجب إدخال أقطاب ECG تحت الجلد بشكل ثابت وثابت تتطلب خطوة الإدراج تجارب أولية حتى يتم اختبار الباحث تقنيًا. وعلاوة على ذلك، ينبغي إعداد مخدر وتخزينها بشكل مناسب واستخدامها في الجرعة المناسبة. وأخيراً، يجب أن يكون موقع موجات PQRS بشكل مناسب في ضربات ECG الفردية في إطار عرض المتوسط.
وشملت دراساتنا اختبار المخدرات. ومع ذلك، إذا تم حذف الاختبارات الدوائية، يمكن تعديل الخطوة 4.7 عن طريق بدء تسجيل 5 دقائق بعد حق.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ولا يعلن أصحاب البلاغ عن أي تضارب في المصالح، مالي أو غير ذلك.
شكر وتقدير
وقد تم دعم هذا العمل من قبل برامج البحوث العلمية الأساسية التي تديرها المؤسسة الوطنية للبحوث في كوريا (NRF) (2015R1C1A2A01052419 و 2018R1D1A1B07042484).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 2،2،2-tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-25G | التخدير ، Avertin |
| Animal | Japan SLC، Inc. ، Shizuoka ، اليابان | Balb / c الفئران ، ذكر ، تتراوح أعمارهم بين 7-9 أسابيع | |
| الأتروبين | سيجما-ألدريتش | A0123 | المضاد السمبتاوي |
| BioAmp | AD Instruments ، بيلا فيستا ، أستراليا | ML132 | مكبر للصوت الحيوي |
| Carbachol | Sigma-Aldrich | C4382 | ناهض السمبتاوي |
| أقطاب كهربائية مع إبر الوخز | DongBang Acupuncture Inc. ، Sungnam ، كوريا | DB106 | 0.20 × 15 مم |
| إيزوبرينالين | Sigma-Aldrich | I2760 | ناهض متعاطف |
| LabChart 8 | AD Instruments ، Bella Vista ، أستراليا | برنامج تحليل | |
| البيانات Mouse food | LabDiet ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية | 5L79 | النظام الغذائي للفأر |
| PowerLab 2/28 | AD Instruments ، بيلا فيستا ، أستراليا | نظام الحصول على البيانات | |
| Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | الخصم المتعاطف |
| SPSS برنامج الإحصاء | SPSS SPSS | 25.0 |
المراجع
- Ho, D., et al. Heart rate and electrocardiography monitoring in mice. Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).
- Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. Cardiovascular physiol....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
