تم تشكيل مركب مضيف ضيف من القرعيات[7] أوريل وحمض اليوريك في محلول مائي قبل إضافة كمية صغيرة إلى محلول Au NP لاستشعار التحليل الطيفي رامان الكمي المحسن للسطح (SERS) باستخدام مقياس الطيف المعياري.
مقالة منهجية
تم تشكيل مركب مضيف ضيف من القرعيات[7] أوريل وحمض اليوريك في محلول مائي قبل إضافة كمية صغيرة إلى محلول Au NP لاستشعار التحليل الطيفي رامان الكمي المحسن للسطح (SERS) باستخدام مقياس الطيف المعياري.
يصف هذا العمل طريقة سريعة وحساسة للغاية للكشف الكمي عن علامة حيوية مهمة، حمض اليوريك (UA)، عن طريق التحليل الطيفي لرامان المحسن سطحيا (SERS) مع حد اكتشاف منخفض يبلغ ~ 0.2 ميكرومتر لقمم مميزة متعددة في منطقة بصمات الأصابع، باستخدام مطياف معياري. يتم توسط مخطط الاستشعار الحيوي هذا من خلال تعقيد المضيف والضيف بين الدورة الكبيرة والقرعيات[7] uril (CB7) و UA، والتكوين اللاحق للتقاطعات النانوية البلازمونية الدقيقة داخل المجاميع النانوية Au NP: CB7 ذاتية التجميع. كما تم إجراء توليف سهل من Au NP للأحجام المرغوبة لركائز SERS استنادا إلى نهج الحد من السترات الكلاسيكي مع خيار يتم تسهيله باستخدام جهاز توليف آلي تم بناؤه في المختبر. يمكن توسيع هذا البروتوكول بسهولة ليشمل الكشف المتعدد الإرسال عن المؤشرات الحيوية في سوائل الجسم للتطبيقات السريرية.
حمض اليوريك ، وهو المنتج النهائي لعملية التمثيل الغذائي لنيوكليوتيدات البيورين ، هو علامة حيوية مهمة في مصل الدم والبول لتشخيص أمراض مثل النقرس وتسمم الحمل وأمراض الكلى وارتفاع ضغط الدم وأمراض القلب والأوعية الدموية والسكري1،2،3،4،5. تشمل الطرق الحالية للكشف عن حمض اليوريك الفحوصات الأنزيمية اللونية ، والكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء والرحلان الكهربائي الشعري ، والتي تستغرق وقتا طويلا ومكلفة وتتطلب إعداد عينات متطورة6،7،8،9.
يعد التحليل الطيفي لرامان المحسن سطحيا تقنية واعدة للتشخيص الروتيني في نقطة الرعاية لأنه يسمح بالكشف الانتقائي عن الجزيئات الحيوية عبر بصمات الاهتزاز الخاصة بها ويوفر العديد من المزايا مثل الحساسية العالية والاستجابة السريعة وسهولة الاستخدام وعدم إعداد العينات أو الحد الأدنى منها. يمكن لركائز SERS القائمة على الجسيمات النانوية المعدنية النبيلة (على سبيل المثال ، Au NPs) تعزيز إشارات Raman لجزيئات التحليل بمقدار 4 إلى 10 أوامر من الحجم10 عبر التعزيز الكهرومغناطيسي القوي الناجم عن رنين البلازمون السطحي11. يمكن بسهولة تصنيع Au NPs ذات الأحجام المصممة خصيصا بدلا من التصنيع الذي يستغرق وقتا طويلا للمركبات النانوية المعدنية المعقدة12 ، وبالتالي يتم استخدامها على نطاق واسع في التطبيقات الطبية الحيوية بسبب خصائصها المتفوقة13،14،15،16. يمكن أن يؤدي ربط الجزيئات الحلقية الكبيرة ، القرعيات [n] urils (CB n ، حيثn = 5-8 ، 10) ، على سطح Au NPs إلى زيادة تعزيز إشارات SERS لجزيئات التحليل حيث يمكن لجزيئات CB المتماثلة والصلبة للغاية التحكم في التباعد الدقيق بين Au NPs وتحديد موقع جزيئات التحليل في المركز أو على مقربة من النقاط الساخنة البلازمونية عن طريق تكوين مجمعات المضيف الضيف (الشكل 1)17 ، 18,19,20. تشمل الأمثلة السابقة لدراسات SERS باستخدام Au NP: CBn nanoaggregates المتفجرات النيتروجينية ، والعطريات متعددة الحلقات ، و diaminostilbene ، والناقلات العصبية ، والكرياتينين 21،22،23،24،25 ، مع إجراء قياسات SERS إما في كوفيت أو عن طريق تحميل قطرة صغيرة على حامل عينة مصنوع خصيصا. ويعد مخطط الكشف هذا مفيدا بشكل خاص لتحديد المؤشرات الحيوية بسرعة في مصفوفة معقدة ذات قابلية عالية للتكرار.
هنا ، تم عرض طريقة سهلة لتشكيل مجمعات مضيف ضيف من CB7 وعلامة حيوية مهمة UA ، وتحديد كمية UA مع حد اكتشاف يبلغ 0.2 ميكرومتر عبر تجميعات CB7 بوساطة Au NPs في الوسائط المائية باستخدام مقياس الطيف المعياري ، وهو أمر واعد للتطبيقات التشخيصية والسريرية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
1. توليف NPs الاتحاد الافريقي
2. توصيف NPs الاتحاد الافريقي
3. تشكيل مجمعات CB7-UA
4. استشعار SERS من UA
5. تحليل البيانات
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في توليف Au NP المقدم ، تظهر أطياف UV-Vis تحولا في قمم LSPR من 521 نانومتر إلى 529 نانومتر بعد 10 خطوات متنامية (الشكل 4 A ، B) بينما تظهر بيانات DLS توزيعا ضيقا للحجم حيث يزداد حجم Au NPs من 25.9 نانومتر إلى 42.8 نانومتر (الشكل 4C ، D). يبلغ متوسط أحجام G0 و G5 و G10 المقاسة من صور TEM (الشكل 4E) 20.1 ± 2.1 نانومتر و 32.5 ± 2.3 نانومتر و 40.0 ± 2.2 نانومتر على التوالي ، مع حساب 200 جسيم في كل حالة....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تسمح طريقة التوليف الآلي الموصوفة في البروتوكول بتوليف Au NPs ذات الأحجام المتزايدة بشكل متكرر. على الرغم من وجود بعض العناصر التي لا تزال بحاجة إلى تنفيذها يدويا ، مثل الإضافة السريعة لسترات الصوديوم أثناء تخليق البذور والتحقق بشكل دوري للتأكد من أن أنابيب PEEK آمنة ، فإن هذه الطريقة تسمح ل Au NPs ذات الأحجام الكبيرة (حتى 40 نانومتر) ، والتي تتطلب عادة حقن يدوية متعددة من HAuCl4 وسترات الصوديوم ، ليتم تصنيعها عن طريق الإضافة المستمرة على مدى فترة طويلة من الزمن.
يمكن إجراء مزيد من...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
تي سي إل ممتنة للدعم المقدم من منحة الجمعية الملكية للأبحاث 2016 R1 (RG150551) وجائزة UCL BEAMS Future Leader Award الممولة من خلال جائزة الرعاية المؤسسية من قبل EPSRC (EP/P511262/1). WIKC و TCL و IPP ممتنون للمنحة الدراسية الممولة من برنامج A*STAR-UCL RESEARCH ATTACHMENT من خلال EPSRC M3S CDT (EP/L015862/1). تود GD و TJ أن تشكر EPSRC M3S CDT (EP / L015862/1) على رعاية طلابها. تعترف TJ و TCL بابتكارات Camtech للمساهمة في طلاب TJ. جميع المؤلفين ممتنون لصندوق الوصول المفتوح UCL.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 40 نانومتر من الجسيمات النانوية الذهبية | NanoComposix | AUCN40-100M | NanoXact ، 0.05 مجم / مل ، عارية (سيترات) |
| أنبوب الطرد المركزي | Corning Falcon | 14-432-22 | حجم 50 مل |
| Cucurbit [7] uril | صنع | انظر المرجع 19 | |
| الذهب (III) كلوريد ثلاثي الهيدرات | Sigma aldrich | 520918 | 99.9٪ أساس المعادن النزرة |
| حقنة يمكن التخلص | Cole-Parmer | WZ-07945-15 | حجم 3 مل |
| Luer-to-MicroTight محول | LuerTight | P-662 | 360 & م القطر الخارجي الأنابيب إلى Luer حقنة |
| نظرة خاطفة الأنابيب | IDEX | 1572 | 360 & م القطر الخارجي ، 150 مو ؛ م القطر الداخلي |
| PEEK الأنابيب القاطع | IDEX | WZ-02013-30 | أنابيب كروماتوغرافيا البوليمر الشعري ل 360 & micro ؛ م إلى 1/32 "OD الأنابيب |
| مطياف رامان | بصريات المحيط | QE برو | |
| سترات الصوديوم ثنائي الهيدرات ثلاثي القاعدة | سيجما ألدريتش | S4641 | ACS كاشف ، & ge ؛ 99.0٪ |
| مسبار قياسي للصوتيات | |||
| Digi-Sense | WZ-08516-55 | مضخة | |
| حقنة | K علاء الدين | ALADDIN2-220 | 2 حقنة ، أقصى حجم للحقنة 60 مل |
| ميزان حرارة مزدوج حراري | Digi-Sense | WZ-20250-91 | حرارة مزدوج حراري أحادي الإدخال مع خلاط |
| حراري قابل للتتبع من NIST5382000031 Eppendorf | مع Eppendorf SmartBlock لأنابيب 50 مل | ||
| حمض اليوريك | Sigma aldrich | U2625 | & ge ؛ 99٪ ، بلوري |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن