Method Article

تغييرات درجة الحرارة الإضافية لتكاثر القصوى والتفريخ في أستياناكس المكسيكي

DOI:

10.3791/61708

⸱

February 14th, 2021

 ,  ,  , 
1Department of Biology, University of Maryland

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تحدد هذه المقالة الشروط المختبرية الأساسية والبروتوكولات لنظام درجة الحرارة التدريجي لتحفيز التفريخ الأقصى في رباعية Astyanax المكسيكيةالمكسيكية ، وهو نموذج ناشئ للدراسات التنموية والتطورية.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

رباعية المكسيكية, Astyanax mexicanus, هو نظام نموذج الناشئة للدراسات في التنمية والتطور. وجود سطح العينين (الأسماك السطحية) وكهف أعمى (أسماك الكهوف) يتحول في هذا النوع يمثل فرصة لاستجواب الآليات الكامنة وراء التطور المورفولوجي والسلوكي. وقد تطورت أسماك الكهوف سمات بناءة وتراجعية جديدة. وتشمل التغييرات البناءة زيادات في براعم الذوق والفكين، والأعضاء الحسية الجانبية الخط، والدهون في الجسم. وتشمل التغييرات التراجعية فقدان العينين أو تقليلها. تصبغ الميلانين، والسلوك المدرسي، والعدوان، والنوم. لاستجواب هذه التغييرات تجريبيا، من المهم الحصول على أعداد كبيرة من الأجنة التي ولدت. منذ أن تم جمع الأسماك السطحية الأصلية A. mexicanus وأسماك الكهوف في تكساس والمكسيك في التسعينيات ، تم تحفيز أحفادهم بشكل روتيني على تربية وتفريخ أعداد كبيرة من الأجنة كل شهرين في مختبر جيفري. على الرغم من أن يتم التحكم في التربية من خلال وفرة الغذاء والجودة، ودورات ضوء الظلام، ودرجة الحرارة، وجدنا أن التغيرات في درجة الحرارة الإضافية تلعب دورا رئيسيا في تحفيز التفريخ القصوى. وتوفر الزيادة التدريجية في درجة الحرارة من 72 درجة فهرنهايت إلى 78 درجة فهرنهايت في الأيام الثلاثة الأولى من أسبوع التكاثر يومين إلى ثلاثة أيام تفريخ متتالية مع أعداد قصوى من الأجنة عالية الجودة، ثم يتبع ذلك انخفاض تدريجي في درجة الحرارة من 78 درجة فهرنهايت إلى 72 درجة فهرنهايت خلال الأيام الثلاثة الأخيرة من أسبوع التفريخ. الإجراءات المبينة في هذا الفيديو تحدد سير العمل قبل وأثناء أسبوع تربية المختبر لدرجة الحرارة الإضافية حفز تفريخ.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وteleost Astyanax mexicanus لديه العينين سطح المسكن (سطح السمك) شكل والعديد من مختلف أعمى كهف المسكن (كهف الأسماك) أشكال1،2. تطورت أسماك الكهوف في ظلام دائم وتحت قيود الغذاء ، مما أدى إلى ظهور سمات بناءة وتراجعية جديدة3. وتشمل الصفات البناءة زيادات في براعم الذوق وحجم الفك، والأعضاء الحسية للخط الجانبي، واحتياطيات الدهون. وتشمل الصفات التراجعية فقدان أو الحد من تصبغ الميلانين، والعينين، والسلوكيات، مثل النوم، والتعليم، والعدوان. سمة من سمات نظام Astyanax هي الخصوبة الكاملة بين الشكلين ، مما يسمح باستخدام رسم خرائط سمة كمية لتحديد المنطقة الجينومية المرتبطة بالتطور البن....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد تمت الموافقة على هذا الإجراء من قبل المبادئ التوجيهية المؤسسية لرعاية الحيوان من جامعة ميريلاند، كوليدج بارك (حاليا IACUC 469 #R-NOV-18-59؛ المشروع 1241065-1).

figure-protocol-1
الشكل 1 - الأرقام 1- الأرقام 1 التقويمات خلال أسبوع التكاثر وأسبوع غير التكاثر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

1. الاثنين

  1. في الساعة 9-10 صباحا، قم بإجراء ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نحن عموما تولد وتفرخ أحفاد الأسماك السطحية التي تم جمعها أصلا في Nacimiento ديل ريو تشوي في سان لويس بوتوسي، المكسيك (أسماك سطح ريو تشوي) وسان سولومون سبرينغز في حديقة ولاية بالمورهيا، تكساس (أسماك سطح تكساس) وأسماك الكهوف المستمدة من كويفا دي إل باشون (أسماك كهف باشون) في تاماوليباس، المكسيك، وكويفا دي لوس سابينوس (أسماك كهف لوس سابينوس) وسوتانو دي لا تيناجا (أسماك كهف تيناخا) في سان لويس بوتوسي المكسيك.

طوال أسبوع التربية، يتم جمع البيانات لمختلف الدبابات. لوحظ الأجنة التي ولدت في كل دبابة ل.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Astyanax mexicanus هو نموذج بيولوجي جديد يولد بشكل متكرر ويمكن تربيته بسهولة في المختبر1،2. ولأننا مهتمون بالآليات التنموية التي تكمن وراء التغيرات التطورية في أسماك كهف أ. المكسيكية، فإن إنتاج واستخدام الأجنة أمر حيوي لأهدافنا البحثية. والغرض الرئيسي من الحفاظ على مخزون بالغ من الأسماك هو إنتاج الأجنة والقلي الصغير لاستخدامه في التجارب التنموية وتجديد مخزونات تربية البالغين. في بعض الأحيان، يمكن استخدام البالغين أيضا في إجراء التجارب الفسيولوجي.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نشكر ديفيد مارتاسيان، ديدري هيسر، إيمي باركهورست، كريغ فوت، وماندي نغ على المساهمات القيمة في مختبر جيفري A. mexicanus مرفق الثقافة. ويدعم البحث في مختبر جيفري حاليا من قبل المعاهد القومية للصحة منحة EY024941.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
الديدان السوداء المائيةالشرقية ، لانكستر ، بنسلفانيالا شيء
شبكات تربية بيضالمصنوع
AquaCave Lake Forest ، IL.لا شيء
طقم اختبار قياس الألوانPetcoSKU:11916API مجموعة اختبار الأس الهيدروجيني للمياه العذبة
رقائق صفار البيضPentair ، Minneapolis ، MNNone
FingerbowlsCarolina BiologicalSupply 741004أطباق الثقافة ، 4.5 بوصة ، 250 مل
شباك محمولة باليد أيمتجر
للأجنةفيشر Scientific51-029-321HPM405 لتر
أملاح البحر الفوريةللمحيطات Spectrum Brands ، Blacksburg ، VANone
Methylene BlueSigma-Aldrich ، سانت لويس ، MOM9140
Pasteur PipettesFisher Scientific13-678-205.75 بوصة.
محلول النقع الصافيأي متجر
دورة Nutrafin أمازونلا شيءثلاجة تعزيز بكتيرية
للتغذية الحيةأي مصدر
مجهر مجسمأي مصدر
ميزان حرارةأي مصدر
Tetra Tropical CrispsSpectrum Brands ، Blacksburg ، VANone
الروبيان المالح حسب الطلب حاضنة للحيوانات الأليفةللحيوانات الأليفة

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jeffery, W. R. Cavefish as a model system in evolutionary developmental biology. Developmental Biology. 231, 1-12 (2001).
  2. Jeffery, W. R. Emerging model systems in evo-devo: cavefish and mechanisms of microevolution. Evolution & Development....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Astyanax mexicanusSurface FishCave FishIncremental TemperatureEmbryo CollectionBreeding ProtocolSpawning StimulationEmbryo StagingIncubator SetupWater Temperature

Related Articles