مقالة منهجية

زرع داخل القلب من هيدروجيلات هيدروجيل القابلة للحقن MSC التحميل بعد احتشاء عضلة القلب في نموذج مورين

DOI:

10.3791/61752

⸱

سبتمبر 20, 2020

 ,  ,  ,  ,  , 
1Cardiovascular Research Institute for Intractable Disease, College of Medicine, The Catholic University of Korea, 2Division of Cardiology, Department of Internal Medicine, Seoul St. Mary's Hospital, College of Medicine, The Catholic University of Korea, 3Division of Cardiology, Department of Internal Medicine, Uijeongbu St. Mary's Hospital, College of Medicine, The Catholic University of Korea

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد برز العلاج القائم على الخلايا الجذعية كاستراتيجية فعالة لإصلاح أنسجة القلب المصابة بعد احتشاء عضلة القلب. نحن نقدم الأمثل في تطبيق vivo لزرع الخلايا الجذعية باستخدام هيدروجيلات الجيلاتين التي هي قادرة على أن تكون الأنزيمية عبر الارتباط.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

واحدة من القضايا الرئيسية التي تواجه العلاجات الحالية للخلايا الجذعية القلبية لمنع فشل القلب بعد الأنف هو انخفاض معدلات الاحتفاظ والبقاء على قيد الحياة من الخلايا المزروعة داخل عضلة القلب المصابة، والحد من فعاليتها العلاجية. في الآونة الأخيرة ، اكتسب استخدام المواد الحيوية السقالات الاهتمام لتحسين وتعظيم العلاج بالخلايا الجذعية. الهدف من هذا البروتوكول هو إدخال تقنية بسيطة ومباشرة لزرع الخلايا الجذعية النخاعية النخاعية المشتقة من نخاع العظم (MSCs) باستخدام هيدروكسيفينيل هيدروجيل (GH) هيدروجيل. الهيدروجيل مواتية كمنصة تسليم الخلايا لتطبيقات هندسة الأنسجة القلبية بسبب قدرتها على أن تكون مشتركة مرتبطة في الموقع وارتفاع التوافق الحيوي. نقدم طريقة بسيطة لاصطناق هيدروجيلات GH تحميل MSC (MSC / hydrogels) وتقييم بقائها وانتشارها في ثلاثي الأبعاد (3D) في الثقافة المختبرية. بالإضافة إلى ذلك ، نبرهن على تقنية لزراعة MSC / hydrogels داخل القلب في الفئران ، واصفين إجراءً جراحيًا للحث على احتشاء عضلة القلب (MI) عبر ربط الشريان التاجي السفلي (LAD) الخلفي وزرع MSC / hydrogels اللاحقة.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد برز العلاج بالخلايا الجذعية القلبية كمقاربة محتملة لإصلاح عضلة القلب وتجديد1,2. على الرغم من النتائج الإيجابية الأخيرة في النماذج الحيوانية والتجارب السريرية، فإن تطبيق العلاج القائم على الخلايا الجذعية لإصلاح عضلة القلب محدود بسبب انخفاض الاحتفاظ بالخلايا المحقونة وسوء بقائها على قيد الحياة في أنسجة القلب المُفرَّجة3،4. ونتيجة لذلك، استخدام هندسة الأنسجة القائمة على الخلايا، بما في ذلك المواد الحيوية عن طريق الحقن5، بقع القلب6، والأوراق الخلوية7، وقد درست بشكل مكثف لتحسين الاحتفاظ بالخلايا والتكامل داخل عضلة القلب المضيف.

من بين مختلف النهج المحتملة لإصلاح أنسجة القلب الهندسة الحيوية، والهيدروجين القابلة للحقن جنبا إلى جنب مع أنواع الخلايا المناسبة، مثل الخلايا الجذعية mesenchymal (MSCs)، والخلايا الجذعية الجنينية (ESCs)، والخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs)، هي خيار جذاب لتسليم الخلايا بفعالية في المناطق عضلة القلب8،9. الجيلاتين، وهو بوليمر طبيعي معروف، يمكن استخدامه كمصفوفة قابلة للحقن بسبب قدرتها البيولوجية الكبيرة، والتحلل الحيوي الكبير، وانخفاض المناعة بالمقارنة مع مجموعة واسعة من المواد الحيوية المستخدمة في التطبيقات الطبية الحيوية. على الرغم من أن منصات حقن الجيلاتين القائمة لديها إمكانات كبيرة, لا تزال تطبيقها في الجسم الحي محدودة على أساس صلابة الميكانيكية المنخفضة وسهولة التحلل في البيئة الفسيولوجية.

للتغلب على هذه القيود، تم اقتراح تصميم رواية وبسيطة من الهيدروجيلات القائم على الجيلاتين تتكون من حمض البرروبيونيك هيدروكسي فينيل لتطبيقات في الجسم الحي. يمكن أن تكون الدعامات اليليباتية-هيدروكسيفينيل بروبيونيك (GH) مترافقات عبر مرتبطة في الموقع في وجود إنزيم، بيروكسيديز الفجل (HRP)، وتغليف في وقت لاحق مختلف الأدوية، الجزيئات الحيوية، أو الخلايا داخل الهيدروجيل، مما يشير إلى إمكانات كبيرة في تطبيقات هندسة الأنسجة10،11،13،14. وبالإضافة إلى ذلك، قمنا مؤخرا بالتحقيق في الآثار العلاجية للHGH الهيدروجيل التي تحتوي على MSCs مغلفة وأظهرت استخدامها في إصلاح القلب الناجح وتجديد بعد MI في نموذج مورين15. في هذا البروتوكول، نحن وصف تقنية بسيطة للتغليف وفي المختبر ثلاثي الأبعاد (3D) انتشار MSCs داخل الهيدروجيلات GH. كما نقدم إجراءً جراحيًا مصممًا لتوليد نموذج murine MI عن طريق ربط الشريان التاجي وزراعة القلب داخل القلب من الهيدروجيل GH الذي يتم تحميله MSC في القلب المُهذب.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد تم توفير جميع إجراءات البحث عن الحيوانات وفقا لقانون رعاية الحيوانات المختبرية، ودليل رعاية واستخدام المختبرات، والمبادئ التوجيهية والسياسات المتعلقة بتجارب القوارض التي قدمتها اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها في كلية الطب التابعة للجامعة الكاثوليكية في كوريا.

1- إعداد الـ MSCs والجيلاتين الهيدروجيلات القابلة للحقن

  1. ثقافة MSCs في طبق ثقافة 100 مم في 37 درجة مئوية و 5٪ CO2. عندما يصل نمو MSCs إلى 80٪ من الالتقاء، اغسل الطبق مرتين مع DPBS وأضف 1 مل من التربسين البديل عند 37 درجة مئوية لمدة 3 دقائق.
    ملاحظة: تم عزل MSCs من نخاع العظام مورين بعد الإجراءات التقليدية16، المستزرعة في متوسط النسر المعدل (DMEM) في دولبيككو (DMEM) التي تحتوي على مصل الأبقار الجنينية بنسبة 10٪ (FBS) و 1٪ مضاد حيوي −محلول مضاد للوميكوليك ، وتستخدم بين الممر 7\u20129 لهذه الدراسة.
  2. إضافة 9 مل من الثقافة المتوسطة والطرد المركزي في 500 × ز لمدة 3 دقائق. بعد ذلك ، تجاهل الماثر الناتج ، resuspend الخلايا في 1 مل من برنامج تلفزيوني ، والحفاظ على تعليق الخلية على الجليد.
  3. تمييع 10 ميكرولتر من تعليق الخلية مع 10 ميكرولتر من الأزرق Trypan والحصول على تركيز الخلية باستخدام عداد الخلايا الآلي.
  4. إعادة بناء ونقل MSCs إلى أنبوب 1 مل في كثافة 1 × 107 خلايا / مل.
  5. إعداد 6.25 wt٪ من محلول غ مترافق في برنامج تلفزيوني وفصل في 2 قارورة. بعد ذلك، اخلطي حلول GH مع إما 6 ميكروغرام/مل من الـ HRP (حل GH A) أو 0.07 wt٪ من H2O2 (GH الحل B).
    ملاحظة: إعداد الجيلاتين هيدروكسيفينيل بروبيونيك حمض (GH) conjugates وفقا للبروتوكولات المنشورة12،15.
    1. الحفاظ على نسبة 9:1 الحجمي من GH حل conjugate لHHP (GH حل A) و GH حل اقتران H2O2 (GH الحل B)، على التوالي.
  6. قبل خلط MSCs مع GH الحل A، طرد مركزي لفترة وجيزة تعليق الخلية في 1000 × ز وpirate بعناية عظمى الناتجة. في وقت لاحق، مزيج بيليه تحتوي على MSCs مع GH الحل A.

2. في الموقع MSC التحميل وثلاثية الأبعاد في الثقافة في المختبر

  1. تحميل GH الحل A (التي تحتوي على MSCs) و GH الحل B في جانبي حقنة مزدوجة. لوحة 300 ميكرولتر من حلول GH المدمجة مع MSCs بكثافة نهائية تبلغ 5 × 106 خلايا/مل على شريحة غرفة ذات ثمانية بئر.
  2. بعد تشكيل هيدروجيل في الموقع وتغليف MSC اللاحقة عبر الربط عبر الأنزيمية، إضافة 700 ميكرولتر من DMEM تحتوي على 10٪ FBS و 1٪ مضاد حيوي-حل مضاد للعمول.
  3. احتضان الشريحة عند 37 درجة مئوية و5٪ CO2 واستبدال الوسط ثقافة كل 2\u20123 أيام.

3. تأكيد انتشار في المختبر والبقاء من MSCs داخل الهيدروجيلات GH

  1. لتحديد جدوى MSCs مثقف 3D داخل هيدروجيلس GH، استخدم خلية حية / ميتة تلطيخ المقايسة بعد وقت الحضانة المحددة سلفا.
  2. بعد حضانة MSCs مغلفة في هيدروجيلس GH لمدة 3، 5، 7 أو 14 يوما، التعرق المتوسطة وغسل البئر مرتين مع برنامج تلفزيوني.
  3. إعداد حل تلطيخ يحتوي على 5 ميكرولتر من الكالسين AM و 20 ميكرولتر من الإتهيديوم هومديمر-1 (EthD-1) في 10 مل من DPBS.
  4. إضافة 200 μL من حل تلطيخ إلى البئر واحتضان لمدة 30 دقيقة في الظلام في درجة حرارة الغرفة.
  5. التعرق حل تلطيخ وغسل البئر مرتين مع برنامج تلفزيوني.
  6. قم بفصل الغرفة بعناية عن الشريحة ووضع غطاء كامل على الهيدروجيلات GH. استخدم مجهرًا مجهريًا لتصور درجة الانتشار والتغيرات المورفولوجية لثنائيات MSCs المغلفة.
    ملاحظة: تم الحصول على صور الفلورسنت تحت التكبير 200x وصورت في الإثارة / الانبعاثات الطول الموجي من 470/540 نانومتر للكالسين و516/607 نانومتر لEthD-1.

4. التعريفي احتشاء عضلة القلب في الفئران

  1. تخدير الذكور 7 أسابيع من العمر C57BL/6 الفئران (20\u201222 غرام) مع حقن داخل الصفتون من خليط من Zoletil (30 ملغ / كجم) وRompun (10 ملغ / كغ) في المالحة.
  2. قبل الجراحة، إزالة الصدر الماوس باستخدام كريم إزالة الشعر وتعقيم الجلد مع اليود.
  3. ضع الماوس على طاولة التشغيل و intubate عن طريق إدخال قسطرة في القصبة الهوائية لتوفير الأكسجين التكميلي عن طريق التهوية الميكانيكية.
  4. قطع بلطف من خلال الجلد باستخدام مقص الجراحية ومن ثم اختراق العضلات الوربية بواسطة مقص صغير. فصل الأضلاع اليسرى 2 و 3 باستخدام خياطة الحرير 5-0 للحفاظ على تجويف الصدر المفتوح.
  5. ligate بعناية في اليسار الأمامي تنازلي (LAD) الشريان التاجي باستخدام حامل إبرة مع 8-0 البولي بروبلين خياطة وقطع خياطة باستخدام الكهربائي.
  6. مراقبة تغير اللون الفوري في الجدار البطيني الأيسر الأمامي.

5. زرع داخل الرحم من هيدروجيلس GH تحميل MSC

  1. بعد الحث على احتشاء عضلة القلب من قبل ربط LAD، حقن 10 ميكرولتر من حلول GH MSC التحميل في نقطتين مختلفتين في المنطقة الحدودية في المزارع (المجموع: 2 × 105 MSCs/20 ميكرولتر) باستخدام حقنة مزدوجة مجهزة بإبرة 26G.
    1. باتباع نفس الإجراء الموضح في الخطوة 1، قم بإعداد ونقل حلول GH التي تحمل MSC إلى حقنة مزدوجة.
      ملاحظة: لتقييم engraftment من هيدروجيل GH تحميل MSC داخل المنطقة الزراعية، MSCs وCONS الاقتران تم مسبقا المسمى مع PHK26 وisothiocyanate الفلوريسين (FITC)، على التوالي.
  2. استعادة تجويف الصدر المفتوحة وإغلاق العضلات والجلد باستخدام 5-0 الغرز.
    ملاحظة: قبل إغلاق الصدر، قم بإزالة الهواء باستخدام حقنة قسطرة.
  3. قم بإزالة أنبوب القصبة الهوائية ووضع الماوس في قفص تحت مصباح الأشعة تحت الحمراء أثناء التعافي.
  4. للانسهاة بعد الجراحة، تُعطى حقن كيتوبروفين تحت الجلد (5 ملغم/كغم يومياً) بحد أدنى 72 ساعة. يجب مراقبة جميع الفئران عن كثب لفترة مناسبة لضمان الشفاء السليم بعد العمليات الجراحية وكذلك علاج الألم الكافي.

6- تخطيط صدى القلب

  1. بعد أربعة أسابيع من الزرع، في البداية تخدير الماوس مع isoflurane 5٪ ثم ضبط تركيز isoflurane إلى 1٪.
  2. إزالة الصدر باستخدام كريم إزالة الشعر ووضع الماوس على وسادة التدفئة. تطبيق هلام محول الموجات فوق الصوتية على الصدر.
  3. الحصول على ثنائي الأبعاد محاور قصيرة الباراسترالي وجهات النظر وسجل M-وضع تتبع على مستوى العضلات الحليمية.
    ملاحظة: ضع محول صفيف خطي (7\u201215 ميغاهرتز) في الخط الباراسترالي الأيسر وعرض الهياكل التشريحية.
  4. قياس الخطوط المقابلة لـ LVAW و LVID و LVPW للحصول على سمك جدار القلب ، وبعد الغرفة ، وتقصير جزئي.
    ملاحظة: قارن وظيفة القلب بما في ذلك كسر الطرد (EF)، وتقصير الكسور (FS)، وحجم نهاية الانقباضي (ESV) على مستوى العضلات الحليمية لضمان التقييم السليم في نفس الموقع التشريحي.

7. التقييم الهستولوجي

  1. في الوقت المحدد سلفا بعد زرع هيدروجيل GH تحميل MSC في القلب المعاجم، والقتل الرحيم الفأر في غرفة CO2 وجمع القلب للتحليل النسيجي15.
  2. للهماتوسلين ويوسين (H & E) وماسون ثلاثية اللون (MT) تلطيخ, إصلاح أنسجة القلب تشريح في 4٪ شبهformaldehyde (PFA) وتضمين في البارافين. المقبل، وقطع كتل القلب البارافين جزءا لا يتجزأ من 4 ميكرومتر المقاطع المسلسل باستخدام microtome وصمة عار المقاطع مع وصمة عار طن متري وفقا للبروتوكولات القياسية17.
  3. الحصول على الصور على ماسح الشرائح في التكبير 20x وحساب حجم المزارع لمجموعات العلاج.
    حجم الإحفار (٪) = إجمالي محيط المزارع / إجمالي محيط LV x 100
  4. حساب كلا المحيطين قياس طول خط الوسط. بالنسبة لضاحية خط الوسط LV، قم بقياس أطوال الخط المركزي بين الأسطح البطانية والإيبلاردي. بالنسبة لضواط خط الوسط ، قم بقياس أطوال الإحتلال بما في ذلك أكثر من 50٪ من سمك عضلة القلب18كله .
    ملاحظة: تم إجراء كافة تحليلات الصور باستخدام برنامج ImageJ.
  5. قياس سمك الجدار من ندبة في مستويات العضلات الحليمة.
  6. حساب جزء من منطقة الكولاجين.
    منطقة الكولاجين (٪) = المساحة الإجمالية للتليف الخلالي/منطقة myocyte × 100

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ومن أجل تسليم MSCs بفعالية إلى عضلة القلب المُهدَّد، استُخدمت في هذا البروتوكول كبسولات هيدروجيلات قابلة للربط عبرية قابلة للربط في الموقع موصوفة في الشكل 1. قبل زرع الجسم الحي ، تم تأكيد انتشار وبقاء MSCs في هيدروجيلس GH بواسطة 3D في المختبر الحي / الخلية الميتة التي تلطيخ المقايسة (العيش: الأخضر ؛ الميت: الأحمر). كما هو مبين في الشكل 2، أظهرت الصور التمثيلية انتشارًا كافًا من MSCs ، مما يظهر الشبكات المتفرعة داخل الهيدروجيلات GH. وبالإضافة إلى ذلك، لوحظ بوضوح ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

حقن هيدروجيلس GH لديها إمكانات كبيرة في التطبيقات في الجسم الحي بسبب قدرتها على دمج متجانسة العوامل العلاجية المتنوعة في الموقع. وعلاوة على ذلك، يمكن التلاعب بسهولة بخواصها الفيزيائية والبيوكيميائية استنادا إلى المتطلبات التي تعتمد على الأمراض. في هذا الصدد، وقد اقترح هيدروجيلس عن طريق الحقن لمعالجة القيود الرئيسية في العلاج بالخلايا الجذعية القلبية الحالية يعوقها سوء البقاء على قيد الحياة والاحتفاظ بالخلايا (أي، < 10٪ في غضون 24 ح بعد زرع) في القلب المصاب19،20. ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المؤلفات يتلقّون ما من تعارضات الفائدة أن يعلن مع هذا عمل.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويدعم هذا البحث من قبل برنامج بحوث العلوم الأساسية من خلال مؤسسة البحوث الوطنية في كوريا (NRF) الممولة من وزارة التربية والتعليم (NRF-2018R1D1A02049346)

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
4٪ بارافورمالدهيد (PFA)IntronIBS-BP031-2
5-0 خياطة حريريةAILEESK534
8-0 خياطة بولي بروبيلينETHICONM8732H
شريحة غرفة 8 آبارNunc LAB-TEK154534
قسطرة الأوعية الدموية بلس (22GA)BD Angiocath PlusREF382423
المضادات الحيوية المضادة للعضلGibco15240-062
جهاز الطرد المركزيGYROGEN1582MGR
مجهر متحد البؤرZeissLSM 510
غطاء زلةMARIENFELD101242
مجموعة أدوات الكي بدرجة حرارة عاليةBovieQTY1
DMEMGibco11995-065
DPBSGibco14040-133
حقنة
EOSINSIGMA-ALDRICH
الإيثانولEMSUREK49350783 739
FBSGibco16000-044
Fechtner ملقط الملتحمة التيتانيومWORLD PRECISISON INSTRUMENTSWP1820
Fluorescein أيزوثيوسيانات أيزومر I (FITC)SIGMA-ALDRICHF7250
ملقطHEBUHB0458
كريم إزالة الشعرIldong وسادة تسخين صيدلانية
Stoelting50300نظام
50301وسادة تسخين بديلة ل 50300 (10 × 12.5 سم)
هيماتوكسيلينSIGMA-ALDRICHHHS80
بيروكسيد الفجل (HRP ؛ 250-330 وحدة / مجم)SIGMA-ALDRICHP8375
بيروكسيد الهيدروجين (H2< / sub>O2< / sub> ؛ 30 بالوزن ٪ في H2< / sub>O)SIGMA-ALDRICH216763
اليودالأخضر الصيدلانية
طقم تلطيخ الخلايا الحية / الميتةThermo FisherR37601
جهاز التنفسهارفارد جهاز
الطرد المركزي الصغيرHANILMicro 12
حامل إبرة صغيرةKASCO37-1452
مقص صغيرHEBUHB7381
مجهرOLYMPUSSZ61
MT طقم تلطيخSIGMA-ALDRICHHT1079-1SETWeigert & rsquo; s محلول الهيماتوكسيلين الحديدي
HT15-1KTثلاثي الألوان وصمة عار (ماسون) كيت
HB7454
شريط جراحي3M micopore1530-1
كاسيت الأنسجةScilab كورياCas3003
هلام محول الطاقةSUNGHEUNGSH102
حامل إبرة سمك السلمون المرقط الباراكير منحنيKASCO50-3710c
نظام الموجات فوق الصوتيةPhilipsAffiniti 50
XyleneJUNSEIهاتف: 25175-0430
فاخرة مزدوجة HT110116 بطانية الحرارة المنزلية الصناعي البارافين LK LABKOREA H06-660-107 PBS buffer Gibco 10010-023 طقم تلطيخ PHK26 SIGMA-ALDRICH MINI26 الشرائح الماسح الضوئي Leica SCN400 مقص جراحي HEBU

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jhund, P. S., McMurray, J. J. Heart failure after acute myocardial infarction: a lost battle in the war on heart failure. Circulation. 118 (20), 2019-2021 (2008).
  2. Cahill, T. J., Kharbanda, R. K. Heart failure after myocardial infarction in the era of primary percutaneous coronary intervention: Mechanisms, incidence and identification of patients at risk. World Journal of Cardiology. 9 (5), 407-415 (2017).
  3. Cambria, E., et al. Translational cardiac stem cell therapy: advancing from first-generation to next-generation cell types. npj Regenerative Medicine. 2, 17(2017).
  4. Lemcke, H., Voronina, N., Steinhoff, G., David, R. Recent Progress in Stem Cell Modification for Cardiac Regeneration. Stem Cells International. 2018, 1909346(2018).
  5. Alagarsamy, K. N., Yan, W., Srivastava, A., Desiderio, V., Dhingra, S. Application of injectable hydrogels for cardiac stem cell therapy and tissue engineering. Reviews in Cardiovascular Medicine. 20 (4), 221-230 (2019).
  6. Gaetani, R., et al. Epicardial application of cardiac progenitor cells in a 3D-printed gelatin/hyaluronic acid patch preserves cardiac function after myocardial infarction. Biomaterials. 61, 339-348 (2015).
  7. Gao, L., et al. Myocardial Tissue Engineering With Cells Derived From Human-Induced Pluripotent Stem Cells and a Native-Like, High-Resolution, 3-Dimensionally Printed Scaffold. Circualtion Research. 120 (8), 1318-1325 (2017).
  8. Hasan, A., et al. Injectable Hydrogels for Cardiac Tissue Repair after Myocardial Infarction. Advanced Science. 2 (11), 1500122(2015).
  9. Wu, R., Hu, X., Wang, J. Concise Review: Optimized Strategies for Stem Cell-Based Therapy in Myocardial Repair: Clinical Translatability and Potential Limitation. Stem Cells. 36 (4), 482-500 (2018).
  10. Lee, Y., et al. In situ forming gelatin-based tissue adhesives and their phenolic content-driven properties. Journal of Materials Chemistry B. 1 (18), 2407-2414 (2013).
  11. Lee, Y., Bae, J. W., Lee, J. W., Suh, W., Park, K. D. Enzyme-catalyzed in situ forming gelatin hydrogels as bioactive wound dressings: effects of fibroblast delivery on wound healing efficacy. Journal of Materials Chemistry B. 2 (44), 7712-7718 (2014).
  12. Lee, S. H., et al. In situ Crosslinkable Gelatin Hydrogels for Vasculogenic Induction and Delivery of Mesenchymal Stem Cells. Advanced Functional Materials. 24 (43), 6771-6781 (2014).
  13. Jung, B. K., et al. A hydrogel matrix prolongs persistence and promotes specific localization of an oncolytic adenovirus in a tumor by restricting nonspecific shedding and an antiviral immune response. Biomaterials. 147, 26-38 (2017).
  14. Kim, G., et al. Tonsil-derived mesenchymal stem cell-embedded in situ crosslinkable gelatin hydrogel therapy recovers postmenopausal osteoporosis through bone regeneration. PLoS One. 13 (7), 0200111(2018).
  15. Kim, C. W., et al. MSC-Encapsulating in situ Cross-Linkable Gelatin Hydrogels To Promote Myocardial Repair. ACS Applied Bio Materials. 3 (3), 1646-1655 (2020).
  16. Meirelles Lda, S., Nardi, N. B. Murine marrow-derived mesenchymal stem cell: isolation, in vitro expansion, and characterization. Br J Haematol. 123 (4), 702-711 (2003).
  17. Ojha, N., et al. Characterization of the structural and functional changes in the myocardium following focal ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 294 (6), 2435-2443 (2008).
  18. Takagawa, J., et al. Myocardial infarct size measurement in the mouse chronic infarction model: comparison of area- and length-based approaches. Journal of Applied Physiology. 102 (6), 2104-2111 (2007).
  19. Terrovitis, J., et al. Noninvasive Quantification and Optimization of Acute Cell Retention by In vivo Positron Emission Tomography After Intramyocardial Cardiac-Derived Stem Cell Delivery. Journal of the American College of Cardiology. 54 (17), 1619-1626 (2009).
  20. Dib, N., Khawaja, H., Varner, S., McCarthy, M., Campbell, A. Cell Therapy for Cardiovascular Disease: A Comparison of Methods of Delivery. Journal of Cardiovascular Translational Research. 4 (2), 177-181 (2011).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة