يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

A سريع الغذاء تفضيل المقايسة في دروسوفيليا

6.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/62051

⸱

فبراير 11, 2021

 , 
1Monell Chemical Senses Center, 2Department of Physiology, The Diabetes Research Center, University of Pennsylvania Perelman School of Medicine

في هذه المقالة

ملخص

نقدم بروتوكولاً لـ فحص تغذية خيارين للذباب هذا الخضوع للتغذية سريع وسهل التشغيل، وهو مناسب ليس فقط للبحوث المختبرية الصغيرة النطاق، ولكن أيضا للشاشات السلوكية عالية الإنتاجية في الذباب.

الملخص

لتحديد الغذاء ذات القيمة الغذائية مع تجنب استهلاك العوامل الضارة، تحتاج الحيوانات إلى نظام ذوق متطور وقوي لتقييم بيئتها الغذائية. ذبابة الفاكهة، Drosophila الميلانوغاستر، هو كائن حي نموذج قابل للخل وراثيا التي تستخدم على نطاق واسع لفك الأسس الجزيئية والخلوية والجسية من تفضيل الغذاء. لتحليل تفضيل الطعام الطائر ، هناك حاجة إلى طريقة تغذية قوية. وصف هنا هو اختبار التغذية خيارين، والتي هي صارمة، وتوفير التكاليف، وسريعة. المقايسة هي بيتري الطبق القائم على ويشمل إضافة اثنين من الأطعمة المختلفة تستكمل مع صبغة زرقاء أو حمراء إلى نصفي الطبق. ثم، ~ 70 prestarved، يتم وضع الذباب 2-4-day-4-العمر في الطبق ويسمح للاختيار بين الأطعمة الزرقاء والحمراء في الظلام لمدة 90 دقيقة تقريبا. ويتبع فحص البطن من كل ذبابة من حساب مؤشر تفضيل. على النقيض من لوحات متعددة، كل طبق بيتري يأخذ فقط ~ 20 s لملء ويوفر الوقت والجهد. يمكن استخدام هذا الفحص الغذائي لتحديد ما إذا كان الذباب مثل أو يكره طعامًا معينًا.

المقدمة

على الرغم من الاختلافات الهائلة في البنية التشريحية لأعضاء الذوق بين الذباب والثدييات ، فإن الاستجابات السلوكية للذباب للعديد من المواد اللذيذة تشبه بشكل لافت للنظر تلك الخاصة بالثدييات. على سبيل المثال، يفضل الذباب السكر1،2،3،4،5،6،7،8،الأحماض الأمينية9،10،وانخفاض الملح11،والتي تشير إلى المواد الغذائية، ولكن رفض الأطعمة المريرة12،13،14،15 التي هي غير مستساغة أو سامة. على مدى العقدين الماضيين، وقد ثبت الذباب أن كائن حي نموذج قيمة للغاية لتعزيز فهم العديد من الأسئلة الأساسية المتعلقة الإحساس بالذوق واستهلاك المواد الغذائية، بما في ذلك الكشف عن لذيذ، نقل طعم، طعم اللدونة، والتغذية تنظيم16،17،18،19،20. ومن اللافت للنظر أن عددا من الدراسات أظهرت أن تحويل الذوق وآليات الدائرة العصبية الكامنة الكامنة في إدراك الذوق مماثلة بين ذباب الفاكهة والثدييات. لذلك ، فإن ذبابة الفاكهة بمثابة كائن تجريبي مثالي ، مما يتيح للباحثين الكشف عن المفاهيم والمبادئ المحفوظة تطورًا التي تحكم اكتشاف الطعام واستهلاكه في المملكة الحيوانية.

للتحقيق في الإحساس بالطعم في الذباب ، من الأهمية بمكان إنشاء فحص سريع وصارم لقياس تفضيل الطعام بموضوعية. على مر السنين ، وطرق التغذية المختلفة ، مثل المقايسات على أساس صبغ11،12،13،21،22،23، و يطير proboscis تمديد استجابة المقايسة24، تغذية شعرية (CAFE) مقايسة25،26، ذبابة السائل الغذاء التفاعل عداد (FLIC) اختبار27، وغيرها من أساليب combinatorial وضعت لقياس كميا تفضيل الغذاء و / أو تناول الطعام للذباب الفاكهة28،29،30،31. واحدة من نماذج التغذية الشعبية هو صبغ القائمة على اثنين من خيار اختبار التغذية باستخدام إما لوحة microtiter متعددةويل12،21،32 أو ، كما هو موضح هنا ، طبق بيتري صغيرة11،22 كما غرفة التغذية. تم تصميم هذا الفحص بناءً على شفافية بطن الذبابة. خلال هذا الفحص ، يتم وضع الذباب في غرفة التغذية وتقديمه مع خيارين من الطعام ممزوجاً إما بصبغة حمراء أو صبغة زرقاء. بمجرد اكتمال الفحص ، تظهر البطن تطير حمراء أو زرقاء اعتمادًا على الطعام الذي استهلكوه.

كل من بيتري طبق ومجرّات التغذية متعددة المستويات القائمة على صبغة هي قوية للغاية وتسفر عن نفس النتائج تقريبا. باستخدام هذه المقايستين ، تم تحقيق العديد من الاكتشافات الهامة والاختراقات نحو فك رموز المستقبلات والخلايا المتنوعة للغاية المسؤولة عن استشعار أذواق الطعام والملمس الغذائي11،12،21،22،32،33. في المقايسة القائمة على الصبغة، خطوة تجريبية واحدة تتطلب وقتا طويلا وجهدا هو إعداد وتحميل الطعام في غرفة التغذية. للحد من إعداد الطعام ووقت التحميل ، تم تعديل هذه المقايسة عن طريق استبدال لوحة microtiter متعددة الويل بطبق بيتري صغير ، والذي ينقسم إلى قسمين متساويين. في المقايسة التي تعتمد على طبق بيتري، يتم إضافة اثنين من الأطعمة المختلفة المكملة مع صبغة زرقاء أو حمراء إلى نصفي الطبق. ثم، ~ 70 prestarved، يتم وضع الذباب 2-4-day-4-العمر في الطبق ويسمح للاختيار بين الأطعمة الزرقاء والحمراء في الظلام لمدة 90 دقيقة تقريبا. ثم يتم فحص البطن من كل ذبابة، ويتم حساب مؤشر تفضيل (PI).

هذا بيتري طبق القائمة على اثنين من خيار اختبار التغذية بأسعار معقولة وبسيطة وسريعة. يتطلب لوح واحد متعدد المستويات حوالي 110 s لملء، في حين أن كل طبق بيتري يأخذ فقط ~20 s. وبالإضافة إلى ذلك، فإن الصفيحة المتعددة الآبار تتطلب إدخال كميات صغيرة من الأغذية إلى عدد كبير من الآبار الصغيرة (مثل 60 بئراً أو أكثر لكل صفيحة)، الأمر الذي يتطلب قدراً كبيراً من الدقة والاهتمام. وعلى العكس من ذلك، يتطلب المقايسة القائمة على طبق بيتري إجراءين فقط لكل لوحة. كما يمكن أن تنطوي على فحص التغذية عدد كبير من النسخ المتماثلة، مقايسة بيتري الطبق القائم يوفر كمية غير تماثل من الوقت والجهد. هذا الفحص يعطي نتائج مكافئة لتلك التي من المقايسة متعددة القائم على الويل وقد ثبت نجاحه في معالجة العديد من الأسئلة الأساسية في الإحساس بالذوق، بما في ذلك الملح طعم الترميز11، طعم اللدونة المعدلة من تجربة الغذاء22، والأساس الجزيئي للالمسيج الغذائي الإحساس33. وخلاصة القول، إن هذا الفحص القائم على خيارين من بيتري-طبق هو أداة قوية للتحقيق في كيفية إدراك الذباب للأوساط الغذائية الخارجية والداخلية لانتزاع سلوك التغذية المناسب.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. تجميع الدوائر المقايسة

ملاحظة: في حين يصف هذا البروتوكول استخدام طبق بيتري 35 مم(الشكل 1A)،يمكن تحقيق التأثير المطلوب باستخدام أي وعاء محكم ومصون القاع يمكن أن يقسم ويغطى.

  1. أولاً، تقسيم طبق بيتري مصفى بـ 35 ملم من خلال تحديد طول من البلاستيك (5 مم في العرض و3 مم في الارتفاع) أسفل خط الوسط مع لاصق مقاوم للماء، مما يشكل مقصورتين محكمتين. تأكد من أن الختم كامل لتجنب التسرب الذي يمكن أن يؤدي إلى خلط ركائز الغذاء اثنين يجري اختبارها.
    ملاحظة: بعد التجميع، إعادة استخدام هذا الجهاز طالما الختم يحمل.

2. إعداد قارورة المجاعة

  1. إعداد عدد كاف من قارورة ذبابة بلاستيكية فارغة؛ ثم، فضفاضة ضغط قطعة من الورق الأنسجة في الجزء السفلي. ضغط ورقة الأنسجة بما فيه الكفاية أنه يملأ الفضاء، ولكن ليس كثيرا أنه يشكل كتلة كثيفة.
    ملاحظة: تأكد من عدم وجود شقوق عميقة أو طيات في الأنسجة، لأن هذا يمكن أن يؤدي إلى الحصول على المحاصرين الذباب.
  2. إضافة ~ 3 مل الماء النقي إلى القارورة بحيث يتم تشبع الأنسجة تماما، ولكن لا يوجد ماء قائم. تأكد من عدم وجود قطرات كبيرة من المياه الزائدة على جدار القارورة. بدلا من ذلك، استبدال agarose للورق غارقة عن طريق إعداد 1٪ ث / الخامس agar الحل (دون السكروز) عن طريق إضافة 5 مل من 1٪ agarose إلى كل قارورة فارغة والسماح agarose لترسيخ في درجة حرارة الغرفة.

3. تجويع الرطب من الذباب قبل التجربة

  1. بدء المجاعة 24 ساعة قبل وقت التجربة. تحت CO2 التخدير، مجموعات فرز من ~ 70، 2-4-يوم من العمر الذباب في قارورة المجاعة المعدة، ووضع العلامات على كل قارورة مع النمط الجيني ووقت المجاعة.

4. الإعداد الكاشف

  1. إعداد الأصباغ
    ملاحظة: قبل إجراء أي تجارب، من المهم إجراء اختبار أولي لتحديد التركيزات الصحيحة من الأصباغ الحمراء والزرقاء لاستخدامها.
    1. للتشذيب التحكم، وإعداد مجموعة من التخفيفات لكل صبغة، وأداء مقايسة التغذية مع نفس الطعام مع لون صبغ مختلفة. استخدم النتائج لتحديد تركيزات الصبغتين (واحدة حمراء، واحدة زرقاء) التي تنتج PI من ~ 0 عند إضافة أي مركب تجريبي (انظر القسم 7).
      ملاحظة: على سبيل المثال، تم تثبيت تركيز الصبغة الزرقاء النهائي عند 50 ميكرومتر واختباره مقابل سلسلة من تركيزات الصبغة الحمراء. استنادا إلى منحنى جرعة صبغة حمراء، وكان التركيز الأمثل صبغة حمراء 210 μM، الذي أعطى الحد الأدنى من التحيز صبغ(الشكل 1B). أعلى تركيز صبغة حمراء يدفع الذباب إلى تفضيل الطعام الأحمر، في حين أن أقل تركيز يدفع الذباب إلى تفضيل الطعام الأزرق. صقل بعناية تركيزات الصبغة الزرقاء أو الحمراء بزيادات 1 ميكرومتر، حيث أن الاختلافات بهذا الحجم والأكبر يمكن أن تؤثر على النتائج التجريبية.
  2. إعداد 1٪ agarose
    1. الجمع بين 0.5 غرام agarose و 50 مل من المياه النقية (أو بعض منها متعددة) في وعاء آمن بالموجات الدقيقة. الميكروويف حل agarose حتى يذوب، واثارة ذلك حسب الحاجة.
  3. إعداد مكونات غذائية أخرى
    1. يذيب كل مكون غذائي، بما في ذلك السكروز وأي مركبات تجريبية، في الماء بتركيز 100 ضعف أو أعلى من التركيز النهائي الذي تم اختباره.
      ملاحظة: يجب ألا يتجاوز الحجم الإجمالي لكل مكون غذائي يضاف إلى 1٪ أجار 1 مل لكل 10 مل أجار منصهر. وإلا، قد يكون agarose مخففة جدا، وسوف لا تتوطد بشكل مناسب.
  4. إعداد وسائل الإعلام الغذائية
    1. مزيج أجار، صبغ، والمجمع التجريبي المطلوب في أنابيب الطرد المركزي البولي بروبلين المخروطية (15 أو 50 مل)؛ استخدام الماء بدلا من الطعم التجريبي في الغذاء التحكم. القيام بذلك في حين أن أجار لا يزال السائل تماما ومزيج تماما باستخدام خلاط دوامة. إبقاء الأنابيب في حمام مائي 60 درجة مئوية في حين لا تستخدم لمنع agarose من تصلب قبل أن توزع في أطباق.
  5. إعداد الأطباق للتجربة
    ملاحظة: تأكد من أن جميع الأطباق جافة تمامًا قبل البدء.
    1. Pipette 1 مل من المتوسط الأحمر التجريبية الغذاء في جانب واحد من طبق المقايسة(الشكل 1A); كرر العدد المطلوب من الأطباق. السماح لأغاروز لتبرد حتى شركة (3-5 دقيقة)، ثم ماص 1 مل من الغذاء التحكم الأزرق في الجانب الآخر من الأطباق (الشكل 1A). كرر هذه العملية مع التحكم الأحمر / التجريبية الأزرق الزوج.
      ملاحظة: تأكد من أن جميع الأطباق قد تم إعدادها بالكامل قبل بدء التجربة. استخدم الأطباق في غضون 30 دقيقة.

5. بدء فحص التغذية في الاتجاهين

  1. شل مؤقتا خطوط الطيران التجريبية على الجليد حتى لا يتم رصد أي أنشطة محركية واضحة مثل الطيران والتسلق. مرة واحدة يتم شل حركة الذباب، عكس بلطف القارورة، والاستفادة لنقل جميع الذباب في غرفة الفحص.
    ملاحظة: صدمة الباردة يستغرق ~ 3-5 دقيقة. التعرض لفترات طويلة للبرد قد يؤثر على فسيولوجيا الذبابة والصحة، وبالتالي ينبغي تجنبها.
  2. ضع الغطاء بسرعة على الغرفة واتركه جانباً. بمجرد أن يتم نقل جميع الذبابات، قم بنقل جميع الغرف إلى مساحة مظلمة ومغلقة. السماح للمجاح لتشغيل لمدة 90 دقيقة.
    ملاحظة: تقلل البيئة المظلمة من تأثير المسار البصري للذبابة على سلوك التغذية وتزيل أي إشارات بيئية من خارج الطبق.

6. إنهاء الطعم في الاتجاهين

  1. بعد مرور 90 دقيقة، قم بنقل الغرف إلى ثلاجة -20 درجة مئوية للتضحية بالذباب. بعد ~1 ساعة، عد الذباب.
    ملاحظة: عكس كل طبق بيتري قبل وضع الطبق في الثلاجة لضمان عدم تجميد الذباب على الطعام.

7. تعيين مؤشر تفضيل (PI) لتحديد تفضيل الأغذية

  1. تحت مجهر تشريح قياسي، فحص لون البطن الذباب 'في كل طبق على حدة. عد الذباب إما الأحمر أو الأزرق أو الأرجواني وفقا للون البطن (الشكل 2A). عد الذبابة إذا كان بطنها أكثر من 50٪ ملون، مما يدل على تغذية قوية(الشكل 2B). استبعاد ذبابة إذا كان يحتوي على بطنه بقعة الطعام صغيرة فقط، مما يدل على سوء الأكل (الشكل 2C).
  2. بعد أن تم حساب أعداد الذباب الذي يأكل الأزرق أو الأحمر أو الأطعمة الزرقاء والحمراء ، استخدم المعادلة التالية لتعيين كل طبق بيتري مؤشر تفضيل (PI):

PI = (عدد الذباب تناول الطعام التجريبي) - (عدد الذباب الأكل الغذاء التحكم) / (عدد الذباب الأكل الغذاء التجريبي) + (عدد الذباب الأكل الغذاء التحكم) + (عدد الذباب الأكل الغذاء التحكم) + (عدد الذباب الأكل على حد سواء)

يشير PI > 0 إلى تفضيل المركب التجريبي، ويشير PI < 0 إلى نفور من المركب التجريبي، ويشير PI = 0 إلى عدم تأثير المركب على سلوك التغذية.

8. تنظيف الدوائر المقايسة

  1. على الفور تنظيف أطباق بيتري عن طريق كشط من الركيزة الغذائية وشطفها مع الصابون غير معزز والماء. نقع أطباق بيتري بين عشية وضحاها في الماء المقطر. تحقق من أن الختم المقسم في كل طبق لا يزال محكمًا ، ثم اترك هواء الطبق جافًا.
    ملاحظة: بعد التأكد من عدم وجود agarose المتبقية أو صبغة تلطيخ، أطباق بيتري جاهزة للاستخدام مرة أخرى.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في هذا الفحص، تم تقسيم طبق 35 مم إلى قسمين متساويين للتغذية، حيث يحتوي كل نصف من الطبق على طعام agarose إلى جانب صبغة زرقاء أو حمراء(الشكل 1A). لاستبعاد التحيز صبغ، تم صقل تركيزات صبغة زرقاء وحمراء بعناية لتحقيق تقريبي "0" PI عندما تم إضافة هذين الأصباغ فقط(الشكل 1B). مرة واحدة تم تحميل طبق بيتري مع الغذاء اختبارها، ~ 70 الرطب تجويع، تم نقل الذباب الكبار 2-4 يوما من العمر إلى الطبق، مما يسمح لهم بالاختيار بين خيارين الغذاء في الظلام. بعد 90 دقيقة، تم فحص لون الب...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تتضمن هذه الطريقة عدة خطوات هامة حيث يمكن أن تحدث مشاكل. أولاً، تأكد من أن الذباب يبتلع كمية كافية من الطعام لتوفير بيانات مستقرة. إذا كان الذباب يأكل بشكل سيئ ، تأكد من أن الذباب قد تم تجويعه لمدة 24 ساعة على الأقل ، وأن الوسائط التجريبية تحتوي على الحد الأدنى من تركيز السكروز (2 mM). لمزيد من تحفيز استهلاك الطعام، إطالة فترة المجاعة الرطب إلى ما بعد 24 ساعة، اعتمادا على حالة الذباب الفسيولوجية. إذا فشل الكثير من الذباب في البقاء على قيد الحياة المجاعة لفترات طويلة، وضمان أن يتم إضافة ما يكفي من الماء إلى ورقة الأنسجة ع...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ولا يعلن أصحاب البلاغ عن أي تضارب في المصالح أو مصالح مالية متنافسة.

شكر وتقدير

ويود المؤلفون أن يشكروا الدكتور تينغوي مي لمساعدته على تحسين فحص التغذية الذي يختاره خياران. كما يودون أن يشكروا صموئيل تشان ووايت كولميس على تعليقاتهما على المخطوطة. تم تمويل هذا المشروع من قبل المعاهد الوطنية للصحة المنح R03 DC014787 (Y.V.Z.) وR01 DC018592 (Y.V.Z.) ومن قبل مؤسسة أمبروز مونيل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
35 ملم طبق بتريفيشر ساينتفيك08-772E
أغاروزتوماس C756P56
لاصقة شفافةفيشر ساينتفيكNC9884114
أنابيب الطرد المركزي المخروطيةفيشر ساينتفيك05-527-90
مجهر تشريحأمسكوبSM-2T-6WB-V331
FCF Brilliant BlueWako Chemical3844-45-9
Fly CO2< / sub> إعداد التخديرGenesee Scientfic59-114 / 54-104M
حاضنة Fly مع دورة نهارية / ليلية قابلة للبرمجةPowers Scientific Inc.IS33SD
خطوط
طبق زجاجي (آمن للاستخدام في الميكروويف)
زجاجة تخزين الوسائط KimwipesFisher Scientific06-666A
Fisher Scientific50-192-9998
مقسم بلاستيكي مقطوع ليناسب الطبق من ورقة لا يزيد سمكها عن 5 مم
قوارير ذبابة بلاستيكيةجينيسي Scientific32-116
السكروزMillipore SigmaS9378
Sulforhodamine BMillipore SigmaS9012
مركب Tastant من الفائدة
خلاط دوامةBenchmark ScientificBV1000
حمام مائيفيشرFSGPD05
العلميةالطيران العلمي

المراجع

  1. Jiao, Y., Moon, S. J., Montell, C. A Drosophila gustatory receptor required for the responses to sucrose, glucose, and maltose identified by mRNA tagging. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (35), 14110-14115 (2007).
  2. Dahanukar, A., Foster, K., van der Goes van Naters, W. M., Carlson, J. R. A Gr receptor is required for response to the sugar trehalose in taste neurons of Drosophila. Nature Neuroscience. 4 (12), 1182-1186 (2001).
  3. Ueno, K., et al. Trehalose sensitivity in Drosophila correlates with mutations in and expression of the gustatory receptor gene Gr5a. Current Biology. 11 (18), 1451-1455 (2001).
  4. Fujii, S., et al. Drosophila sugar receptors in sweet taste perception, olfaction, and internal nutrient sensing. Current Biology. 25 (5), 621-627 (2015).
  5. Wang, Z., Singhvi, A., Kong, P., Scott, K. Taste representations in the Drosophila brain. Cell. 117 (7), 981-991 (2004).
  6. Thorne, N., Chromey, C., Bray, S., Amrein, H. Taste perception and coding in Drosophila. Current Biology. 14 (12), 1065-1079 (2004).
  7. Slone, J., Daniels, J., Amrein, H. Sugar receptors in Drosophila. Current Biology. 17 (20), 1809-1816 (2007).
  8. Dus, M., et al. Nutrient sensor in the brain directs the action of the brain-gut axis in Drosophila. Neuron. 87 (1), 139-151 (2015).
  9. Toshima, N., Tanimura, T. Taste preference for amino acids is dependent on internal nutritional state in Drosophila melanogaster. Journal of Experimental Biology. 215 (16), 2827-2832 (2012).
  10. Melcher, C., Bader, R., Pankratz, M. J. Amino acids, taste circuits, and feeding behavior in Drosophila: towards understanding the psychology of feeding in flies and man. Journal of Endocrinology. 192 (3), 467-472 (2007).
  11. Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila. Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).
  12. Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila. Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).
  13. Moon, S. J., Kottgen, M., Jiao, Y., Xu, H., Montell, C. A taste receptor required for the caffeine response in vivo. Current Biology. 16 (18), 1812-1817 (2006).
  14. Dweck, H. K. M., Carlson, J. R. Molecular logic and evolution of bitter taste in Drosophila. Current Biology. 30 (1), 17-30 (2020).
  15. Lee, Y., et al. Gustatory receptors required for avoiding the insecticide L-canavanine. Journal of Neuroscience. 32 (4), 1429-1435 (2012).
  16. Montell, C. A taste of the Drosophila gustatory receptors. Current Opinion in Neurobiology. 19 (4), 345-353 (2009).
  17. Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. Candidate taste receptors in Drosophila. Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).
  18. Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. Peripheral coding of taste. Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).
  19. Scott, K. Gustatory processing in Drosophila melanogaster. Annual Review of Entomology. 63, 15-30 (2018).
  20. Freeman, E. G., Dahanukar, A. Molecular neurobiology of Drosophila taste. Current Opinion in Neurobiology. 34, 140-148 (2015).
  21. Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster. Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).
  22. Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel. Nature Neuroscience. 16 (10), 1468-1476 (2013).
  23. Bantel, A. P., Tessier, C. R. Taste preference assay for adult Drosophila. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (115), e54403(2016).
  24. Shiraiwa, T., Carlson, J. R. Proboscis extension response (PER) assay in Drosophila. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (3), e193(2007).
  25. Ja, W. W., et al. Prandiology of Drosophila and the CAFE assay. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (20), 8253-8256 (2007).
  26. Diegelmann, S., et al. The CApillary FEeder assay measures food intake in Drosophila melanogaster. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (121), e55024(2017).
  27. Ro, J., Harvanek, Z. M., Pletcher, S. D. FLIC: high-throughput, continuous analysis of feeding behaviors in Drosophila. PLoS One. 9 (6), 101107(2014).
  28. Yoshihara, M. Simultaneous recording of calcium signals from identified neurons and feeding behavior of Drosophila melanogaster. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (62), e3625(2012).
  29. Deshpande, S. A., et al. Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology. Nature Methods. 11 (5), 535-540 (2014).
  30. Yapici, N., Cohn, R., Schusterreiter, C., Ruta, V., Vosshall, L. B. A taste circuit that regulates ingestion by integrating food and hunger signals. Cell. 165 (3), 715-729 (2016).
  31. Jiang, L., Zhan, Y., Zhu, Y. Combining quantitative food-intake assays and forcibly activating neurons to study appetite in Drosophila. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (134), e56900(2018).
  32. Moon, S. J., Lee, Y., Jiao, Y., Montell, C. A Drosophila gustatory receptor essential for aversive taste and inhibiting male-to-male courtship. Current Biology. 19 (19), 1623-1627 (2009).
  33. Zhang, Y. V., Aikin, T. J., Li, Z., Montell, C. The basis of food texture sensation in Drosophila. Neuron. 91 (4), 863-877 (2016).
  34. Itskov, P. M., et al. Automated monitoring and quantitative analysis of feeding behaviour in Drosophila. Nature Communications. 5, 4560(2014).
  35. Qi, W., et al. A quantitative feeding assay in adult Drosophila reveals rapid modulation of food ingestion by its nutritional value. Molecular Brain. 8, 87(2015).
  36. Simpson, J. H., Looger, L. L. Functional imaging and optogenetics in Drosophila. Genetics. 208 (4), 1291-1309 (2018).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

Drosophila
A سريع الغذاء تفضيل المقايسة في دروسوفيليا
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.