يقدم هذا العمل بروتوكولا لاستكشاف تأثير مكافحة السمنة لنبتين يستخدمان معا، لمدة 5 أسابيع. كان هناك إدارة مشتركة للمستخلص والنظام الغذائي الغني بالدهون (HFD) في الفئران البدينة. يمكن أن تعزز هذه الطريقة فوائد النباتات في علاج السمنة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج سريع لتقييم إمكانات مكافحة السمنة من مزيج من العطرية Syzygium (القرنفل) والسموم الكمون (الكمون) على C57BL6/j الفئران تغذية النظام الغذائي الغني بالدهون
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
وقد أظهرت العديد من الدراسات أن المحتويات الكيميائية النباتية للنباتات هي عوامل محتملة مضادة للسمنة. في هذه الدراسة ندرس تأثير استخدام مزيج من الأزرار الجافة من العطريات Syzygium والبذور من سيمينوم الكمون (CC) على الفئران C57BL6/J الناجمة عن السمنة عن طريق النظام الغذائي الغني بالدهون (HFD). والهدف من هذه الدراسة هو إثبات أن الطريقة المقترحة في الدراسة خفضت السمنة بشكل كبير بعد عدة أسابيع من التجارب. تم استخراج المقتطف من كلا النباتين باستخدام الموجات فوق الصوتية لتعزيز استخراج المواد الكيميائية النباتية. تم الحصول على ظروف الاستخراج الأمثل مع الإيثانول على النحو التالي: 50:50 v/v المياه مع قوة الموجات فوق الصوتية من 300 واط، ووقت ultrasonication من 30 دقيقة. أدى الإدارة المتزامنة لاستخراج CC في HFD لمدة 5 أسابيع إلى تنظيم ملامح الدهون (الكوليسترول والدهون الثلاثية) ، والحد من تناول الطعام ، وزيادة الوزن ، والأنسجة الدهنية ووزن الكبد. النتائج التي تم الحصول عليها من قبل هذا النموذج السمنة تشير إلى أن استخراج CC يمكن أن تمنع السمنة. بالمقارنة مع الطريقة التقليدية 16 أسابيع (8 أسابيع للحصول على الدهون، و 8 أسابيع لانقاص وزنه)، تم الحصول على نتائج مماثلة في نموذج السمنة الدراسة الحالية في وقت أقل من التجريب.
المقدمة
تراكم الدهون الزائدة في الجسم هو سمة من سمات السمنة. عدم التوازن بين استهلاك الطاقة واستهلاكها يؤدي إلى تخزين الطاقة الزائدة في الخلايا الدهنية، والتي ترتبط بعوامل الخطر الأيضية لارتفاع السكر في الدم ومقاومة الأنسولين في مرض السكري من النوع 2، وارتفاع ضغط الدم، وارتفاع الكوليسترول في الدم، وأمراض القلب والأوعية الدموية1،2.
المنتجات الطبيعية مع الحد الأدنى من الآثار الجانبية وانخفاض التكلفة قد تلقت اهتماما متزايدا منذ الدراسات السابقة وأفادت المواد الكيميائية النباتية النشطة بيولوجيا وعوامل مكافحة السمنة المحتملة مع الآليات التي عكس أو تأخير متلازمة التمثيل الغذائي والأمراض المرتبطةبها 8.
وقد درست العديد من النباتات الطبية لمنع السمنة والأمراض ذات الصلة. من بينها، وقد تم التحقيق في العطرية Syzygium لقدرتها المضادة للسمنة في العلاج في المختبر على خلايا 3T3-L1 وفي علاج الجسم الحي على الفئران التي تتغذى على نظام غذائي عالي الدهون11. وبالإضافة إلى ذلك، لوحظت آثار كبيرة لمكافحة زيادة الوزن في محاكمة مفتوحة متعددة المراكز من الكمونوم cyminum على مواضيع السمنة المفرطة12. في هذه الدراسة، تم استخدام الفئران C57BL6/J للتحقيق في النموذج التجريبي السريع لتقييم عامل محتمل لمكافحة السمنة باستخدام مزيج من كل من النباتات الصالحة للأكل.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وقد وافقت لجنة التجارب الحيوانية التابعة للجنة التجارب الحيوانية التابعة لهيئة علم الأحياء التابعة ل Escuela Nacional de Ciencias Biologicas على جميع التجارب على الحيوانات؛ البروتوكول رقم 2732).
1. إعداد استخراج مزيج من القرنفل والكمون
ملاحظة: تم شراء النباتات الصالحة للأكل، Syzygium العطرية (القرنفل) والكمونوم cyminum (الكمون) من وسط دي Abastos CDMX، المكسيك.
- طحن 500 غرام من البذور من النباتات وأداء استخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية. Sonicate لهم (320 واط؛ 24 كيلوهرتز التردد، 30 دقيقة) مع الإيثانول: الماء (60:40 v/v) في نطاق درجة حرارة 30 ± 4 درجةمئوية.
- تصفية المواد الصلبة باستخدام Whatman رقم 2 ورقة تصفية تحت فراغ وتركيز استخراج مع المبخر الدوارة.
- قياس الطيف الأشعة فوق البنفسجية فيس من استخراج كل من النباتات (CC).
2. الحيوانات
- استخدام الذكور C57BL6/J الفئران من ستة أسابيع من العمر (48 في المجموع، وزن الجسم 24-29 غرام) للدراسة.
- منزل الحيوانات في مجموعات من ثمانية في ظروف المختبر القياسية: درجة الحرارة (20-22 ± 1 درجة مئوية)، الرطوبة النسبية (45-54 ± 2٪)، والإضاءة (08:00-20:00 ساعة) مع الغذاء والماء الإعلان libitum. تأقلم الفئران في هذه الظروف لمدة أسبوع قبل التجربة.
3. إجراء تجريبي
- إعداد النظام الغذائي الغني بالدهون14 كما هو الحال في الجدول 1.
- في بداية الاختبار، تخضع كل مجموعة من المجموعات التي تشكلت (ن = 8) لعلاجات مختلفة: تغذية المجموعة 1 على نظام غذائي طبيعي. المجموعة 2، على نظام غذائي عالي الدهون. المجموعة 3, على نظام غذائي عالي الدهون + 100 ملغم/كغ من مستخلص CC; المجموعة 4، على النظام الغذائي الغني بالدهون + 250 ملغم/كغ من مستخلص CC. المجموعة 5، على النظام الغذائي الغني بالدهون + 450 ملغم/كغ من مستخلص CC. المجموعة 6، على النظام الغذائي الغني بالدهون + phentermine (دواء مضاد للتطفل يستخدم كسيطرة إيجابية)15.
- إطعام جميع مجموعات الفئران لمدة 5 أسابيع وتسجيل كمية الطعام المستهلكة يوميا.
- في أنبوب اختبار مع سدادة، تجانس استخراج أو الدواء مع جرعة من الماء المقابلة للمجموعة التي تدار العلاج. ويتم ذلك مع دوامة شاكر.
- مرة واحدة متجانسة، إضافة كل العلاج المقابلة في شارب كل مجموعة.
4. جمع العينات
- قياس كل من تناول الطعام ووزن الجسم مرة واحدة في الأسبوع. سرعة الفئران بين عشية وضحاها لمدة 5 أسابيع.
- التضحية بهم عن طريق خلع عنق الرحم والنخر.
- بعد التضحية بالفئران، شل حركتها في وضع ية.
- باستخدام ملقط ومقص جراحي نظيف، حدد مكان الجلد المركزي ورفعه بالقرب من الأعضاء التناسلية واصنع شقا صغيرا بحجم 0.2 مم.
- أدخل المقص المسطح أفقيا في الشق وفصل جلد البطن بعناية عن جدار البطن.
- مع ملقط، ورفع الجلد المركزي ومع مقص الجراحية قطع عليه على مستوى القفص الصدري. ثم قطع الجلد فوق كل من الأطراف الخلفية لتسهيل جمع الأنسجة الدهنية.
- ضمان جمع جميع الأنسجة الدهنية من الجسم عن طريق تشريح حاد مع مقص والملقط. مرة واحدة جمعت، ضع الأنسجة الدهنية في رقائق الألومنيوم. تذكر لجمع الدهون حول الأعضاء التناسلية. تجنب تراكم الشعر والجلد لعدم تغيير النتائج.
- للوصول إلى الأنسجة الدهنية الحشوية، قطع عضلة البطن بمقص جراحي من الأعضاء التناسلية إلى القفص الصدري، مما يجعل شق في عضلات البطن من الأعضاء التناسلية نحو ظهر الماوس.
- إجراء استئصال الكبد لإزالة 100٪ من الكبد. لتعكير الكبد، وإزالة الأعضاء غير الضرورية وقطع الأوردة الكبدية والشرايين لفصل الكبد عن بقية الجسم. كخطوة أخيرة، استخراج المرارة بدقة من الكبد16.
- قياس ارتفاع الكولسترول في الدم (الكوليسترول) وارتفاع الدهون (الدهون الثلاثية) باستخدام مجموعات المقايسة التجارية وفقا لمؤشرات الشركة المصنعة.
5. التحليل الإحصائي
ملاحظة: يجب أن تكون جميع النتائج التجريبية ممثلة من ثلاثة مقايسات مستقلة، يتم التعبير عنها على أنها متوسط الانحراف المعياري ±.
- حساب الخطأ القياسي مع تحليل ANOVA أحادي الاتجاه للتباين يليه اختبار نطاق Tukey. النظر في P< 0.05 كما ذات دلالة إحصائية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
استخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية
وكان الشرط الأمثل لاستخراج الإيثانول: الماء (50:50، v/v) مع قوة الموجات فوق الصوتية من 300 W ووقت ultrasonication من 30 دقيقة. وبهذه الطريقة، كان الاستخراج أسرع من طرق الاستخراج التقليدية(الجدول 2). وأظهر المستخلص ذروة امتصاص مكثفة عند 320 نانومتر في أطياف الأشعة فوق البنفسجية المرئية(الشكل 1).
تناول الطعام ووزن الجسم
وتظهر التغيرات في وزن الجسم للفئران نظرا لتركيزات مختلفة من استخراج (10...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في هذه الدراسة قمنا بتقييم، لأول مرة، تأثير الإدارة عن طريق الفم من مزيج من القرنفل والكمون (CC) استخراج على ملامح الدهون والسمنة في الفئران التي تتغذى على نظام غذائي عالي الدهون لمدة 5 أسابيع. وأشارت النتائج إلى أن مجموعات HFD أظهرت زيادة وزن الجسم أعلى بكثير بالمقارنة مع مجموعة ND، والتي أظهرت أن تحريض السمنة في نموذج السمنة كان ناجحا. وقد أسفرت الجرعة التي تعطى من ال CC (100 و200 و450 ملغم/كغ/يوم) عن انخفاض في تناول الطعام ووزن الجسم. وبالتالي ، يجب أن يكون الانخفاض في تناول الطعام بسبب انخفاض شهية الحيوانات.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ولا يعلن المؤلفون عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
وقد دعم هذا البحث معهد السياسة الوطنية للكيكسيكو.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الماء المقطر | أي بائع | غير | متاح للبائعين الآخرين وكذلك |
| الإيثانول | فيرمونت | 6063 | 99.8٪ نقاء |
| <قوي> مكونات النظام الغذائي< / قوي> | |||
| الكازين | أي بائع | N / A | |
| السليلوز | أي بائع | N / A | |
| Centrum توازن الفيتامينات المتعددة | فايزر | ن / أ | |
| الكولين Bitartrate | أي بائع | N / A | |
| L- سيستين | سيجما ألدريتش | 168149 | متاح للبائعين الآخرين أيضا |
| شحم الخنزير | أي بائع | غير | |
| Rotavapor | Buchi | R-300 | |
| Shimadzu UV-1800 UV / مقياس الطيف الضوئي المرئي | Cole Parmer | T-83400-20 | متاح للبائعين الآخرين بالإضافة |
| وحدة الموجات فوق الصوتية | Elma | TI-H-20 | متاح للبائعين الآخرين بالإضافة إلى |
| مضخة فراغ | Buchi | V-100 |
المراجع
- Singla, P., Bardoloi, A., Parkash, A. A. Metabolic effects of obesity: A review. World Journal of Diabetes. 1 (1), 76-88 (2010).
- Ojulari, O. V., Lee, S. G., Nam, J. O. Beneficial Effects of Natural Bioactive Compounds from Hibiscus sabdariffa L. on Obesity. Molecules. 24 (1), 210(2019).
- Bahmani, M., et al. Obesity phytotherapy: review of native herbs used in traditional medicine for obesity. Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 21 (3), 228-234 (2016).
- Ríos-Hoyo, A., Gutiérrez-Salmeán, G. New Dietary Supplements for Obesity: What We Currently Know. Current Obesity Reports. 5 (2), 262-270 (2016).
- Hasani-Ranjbar, S., Nayebi, N., Larijani, B., Abdollahi, M. A systematic review of the efficacy and safety of herbal medicines used in the treatment of obesity. World Journal Gastroenterology. 15 (25), 3073-3085 (2009).
- Hardeman, W., Griffin, S., Johnston, M., Kinmonth, A. L., Wareham, N. J. Interventions to prevent weight gain: a systematic review of psychological models and behaviour change methods. Nternational Journal of Obesity and Related Metabolic Disorders. 24 (1), 131-143 (2000).
- Dinda, B., Dinda, M., Roy, A., Dinda, S. Dietary plant flavonoids in prevention of obesity and diabetes. Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 120, 159-235 (2020).
- Mayer, M. A., Hocht, C., Puyo, A., Taira, C. A. Recent advances in obesity pharmacotherapy. Current Clinical Pharmacology. 4 (1), 53-61 (2009).
- Rafie, A. Z. M., Syahir, A., Ahmad, W. A. N. W., Mustafa, M. Z., Mariatulqabtiah, A. R. 2018 supplementation of stingless bee honey from heterotrigona itama improves antiobesity parameters in high-fat diet induced obese rat model. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , 6371582(2018).
- Song, J., et al. Anti-obesity effects of the flower of prunus persica in high-fat diet-induced obese mice. Nutrients. 11, 2176(2019).
- Jung, C. H., Ahn, J., Jeon, T. -I., Kim, T. W., Ha, T. Y. Syzygium aromaticum ethanol extract reduces high-fat diet-induced obesity in mice through downregulation of adipogenic and lipogenic gene expression. Experimental and Therapeutic Medicine. 4 (3), 409-414 (2012).
- Said, O., Saad, B., Fulder, S., Khalil, K., Kassis, E. Weight Loss in Animals and Humans Treated with "Weigh level", a Combination of Four Medicinal Plants Used in Traditional Arabic and Islamic Medicine. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , 874538(2011).
- Anaya-Esparza, L. M., Ramos-Aguirre, D., Zamora-Gasga, V. M., Yahia, E., Montalvo-Gonzalez, E. Optimization of ultrasonic-assisted extraction of phenolic compounds from Justicia spicigera leaves. Food Science and Biotechnology. 27 (4), 1093-1102 (2018).
- Ayoub, R. M., et al. The effect of anthocyanin-rich purple vegetable diets on metabolic syndrome in obese Zucker. Journal of Medical Food. , (2017).
- Go, R., et al. Effects of anti-obesity drugs, phentermine and mahuang, on the behavioral patterns in Sprague-Dawley rat model. Laboratory of Animals Research. 30 (2), 73-78 (2014).
- Tan, P., Pepin, É, Lavoie, J. L. Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA analysis. Journal of Visualized Experiments. (13), e57026(2018).
- Bjorndal, B., Burri, L., Staalesen, V., Skorve, J., Berge, R. K. Different adipose depots: Their role in the development of metabolic syndrome and mitochondrial response to hypolipidemic agents. Journal of Obesity. 2011, 490650(2011).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
