يهدف هذا البروتوكول إلى رصد التغيرات في myelin (إزالة الغموض وإعادة التناخي) عن طريق التصوير المقطعي للانبعاثات البوزيترونية (PET) في نموذج حيواني للتصلب المتعدد.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
التصوير المقطعي للانبعاثات في فيفو قياس محتوى Myelin في نموذج الجرذ Lysolecithin من التصلب المتعدد
في هذه المقالة
إشعار تصحيح
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
ملخص
الملخص
التصلب المتعدد (MS) هو مرض عصبي مع توسع انحطاط عصبي وعصبية وديمالين في الجهاز العصبي المركزي ، مما يؤدي إلى الاختلالات الحركية ، والإعاقة النفسية ، والضعف المعرفي أثناء تقدم التصلب العصبي المتعدد. التصوير المقطعي للانبعاثات البوزيترونية (PET) هو تقنية تصوير قادرة على قياس في التعديلات الخلوية والجزيئية.
يمكن استخدام أجهزة الراديو مع تقارب إلى myelin سليمة لفي التصوير في الجسم الحي من تغيرات محتوى myelin مع مرور الوقت. فمن الممكن للكشف عن زيادة أو نقصان في محتوى الميلين، ما يعني أن هذه التقنية التصوير يمكن الكشف عن عمليات إزالة الغموض وإعادة النعين في الجهاز العصبي المركزي. في هذا البروتوكول نبين كيفية استخدام التصوير بزيت PET للكشف عن التغيرات في myelin في نموذج الفئران lysolecithin ، وهو نموذج للآفات التململ البؤري (الناجمة عن حقن مجسم) (أي ، نموذج لمرض التصلب المتعدد). 11 تم إجراء التصوير بالحيوانات الأليفة C-PIB في خط الأساس ، وأسبوع و4 أسابيع بعد حقن الليسوليسيتين المجسمة 1٪ في المخطط الأيمن (4 ميكرولتر) والكولوسوم (3 ميكرولتر) من دماغ الفئران ، مما يسمح بالتدسيم الكمي لإزالة الغموض البؤري (موقع الحقن بعد أسبوع) وعملية إعادة النظر (موقع الحقن في 4 أسابيع).
Myelin PET التصوير هو أداة مثيرة للاهتمام لرصد التغيرات في الجسم الحي في محتوى myelin التي يمكن أن تكون مفيدة لرصد تطور المرض demyelinating والاستجابة العلاجية.
المقدمة
التصلب المتعدد (MS) هو مرض عصبي يصيب الجهاز العصبي المركزي ، ويتميز بالالتهاب ، وإزالة الغموض ، وفقدان المحوري1. تشخيص هذا المرض متغير حتى مع التقدم في العلاج، وهو واحد من الأسباب الأكثر شيوعا للعجز العصبي لدى الشباب1. ويستند تشخيص مرض التصلب العصبي المتعدد على معايير المظاهر السريرية والتصور للآفات المميزة عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI)2،3.
يمكن أن يكون التصوير المقطعي للانبعاثات البوزيترونية (PET) أداة مفيدة لرصد في الجسم الحي لتطور مرض التصلب العصبي المتعدد والآثار العلاجية. ويستخدم على نطاق واسع مركب بيتسبرغ B ra....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وقد أجريت جميع الإجراءات وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الوطني لمراقبة التجارب على الحيوانات (CONCEA، البرازيل) ووافقت عليها لجنة أخلاقيات البحوث الحيوانية التابعة لكلية الطب بجامعة ساو باولو (CEUA-FMUSP، البرازيل - رقم البروتوكول: 25/15).
ملاحظة: في هذا البروتوكول، ونحن تبين كيفية الحث على نموذج الفئران lysolecithin من التصلب المتعدد وكيفية الحصول على وتحليل الصور PET الميلين.
1. إعداد حل ليسوليسيتين
- وزن lysolecithin (L-α-Lysphosphatidylylcholine من صفار البيض) على مقياس تحليلي باستخدام أنبوب بلاستيكي مخروطي (1.5 مل).
- إضافة المالحة المعقمة إلى أنبوب لجعل 1٪ حل (على سبيل المثال: تزن 1 ملغ من ly....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
ويبين الشكل 1 الصور التوضيحية 11C-PIB PET PET مع التغيرات myelin مع مرور الوقت. في المسح الأساسي، لا يمكن رؤية أي اختلافات في محتوى myelin (أي، لا يوجد أي إزالة الغموض). في صورة نقطة الوقت لمدة أسبوع واحد ، من الممكن رؤية الآفة ذات الديمايلات البؤرية (في نصف الكرة الأيمن) كما هو مبين من قبل السهم الأبيض. يتم عرض الصور في 3 طائرات تشريحية (إكاليل، محوري، والقوس) ومن الممكن تحديد الآفة ذات المحاية في كل منها. صورة 1-أسبوع هو التوضيح من آفة محددة جيدا في موقع الحقن، تمثل التعريفي الن.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
أكبر ميزة من استخدام نموذج lysolecithin لدراسة التصلب المتعدد هو الجدول الزمني السريع لإزالة الغموض (حوالي 1 أسبوع) و remyelination (حوالي 4 أسابيع) أن يحدث14. ويمكن أيضا أن يكون هذا النموذج في الفئران15, ومع ذلك, التعريفي في الفئران هو أكثر فائدة لفي التصوير في الحيوانات الأليفة في الجسم الحي نظرا لحجم أكبر من الدماغ الفئران مقارنة الفئران.
الخطوة الأولى من نموذج التعريفي هو أن نكون حذرين للغاية. تم التحقق من صحة هذا النموذج لتصوير MYEL.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
شكر وتقدير
β معدات المكعبات (Molecubes NV، بلجيكا) بدعم من مؤسسة ساو باولو للبحوث، FAPESP - البرازيل (#2018/15167-1). لدى LES منحة دراسية للدكتوراه من FAPESP - البرازيل (#2019/15654-2).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الميزان التحليلي | Marte | AUWZZOD | الحد الأقصى: 220 جم - الحد الأدنى: 1 مجم |
| مبخر Anestesia | Nanitech | 15800 | |
| مكعب بيتا | Molecubes | ||
| مشبك البلدغ | Stoelting | 5212043P | |
| كلوريكسيدين | ريوكيميكا | 0.5٪ / 100 مل | |
| مسحات قطنية | جونسون إي جونسون | ||
| معاير الجرعة | Capintech | ||
| Drill | Kinzo powertools | 352901 | موديل Q0M-DC3C |
| أنبوب Eppendorf | Eppendorf | 30125150 | 1.5 مل |
| زيوت تشحيم العين | ADVFARMA | 30049099 | الفازلين 15 جم (نقاء صيدلاني) |
| ملقط ناعم | Stoelting | 52102-38P | |
| قفازات | Descarpack | 212101 | 6.5 حجم |
| وسادة التدفئة | حقنة حقن Softhear | ||
| Hamilton | 80314 | 10 & ، 32ga ، موديل 701 | |
| حقنة Insuline | BD | 328328 | 1 مل محاقن الأنسولين مع إبرة |
| Isoflurane | Crist á ؛ lia | 410525 | 100 مل ، تركيز 1 مل / 1 مل |
| كيتوبروفين أو غيره من المسكنات | سانوفي | 100 مجم / 2 مل | |
| ليدوكائين | هيبولابور | 1.1343.0102.001-5 | 2٪ / 20 مل |
| لتر - ألفا ؛ ليزوفوسفاتيديل كولين من صفار البيض | سيجما ألدريتش | L-4129 | 25 مجم - & جي ؛ 99٪ ، النوع الأول ، حامل |
| إبرة | Stoelting | 5212290P | |
| أكسجين | أبيض مارتينز | 7782-44-7 | برنامج PMOD للغاز المضغوط |
| PMOD | الإصدار 4.1 | وحدة تنصهر قناع | |
| تخدير الفئران | KOPF | موديل 906 | |
| سالين | فارماس | 0543325 / 14-8 | 0.9٪ كلوريد الصوديوم للحقن ، 10 مل |
| شفرات Scapel | Stoelting | 52173-10 | |
| مقابض Scapel | Stoelting | 52171P | |
| Scissor | Stoelting | 52136-50P | |
| ميزان شبه تحليلي | Quimis | BK-3000 | كحد أقصى: 3,100 جم ؛ الحد الأدنى: 0.2 جرام |
| ماكينة حلاقة | Mega profissional | AT200 | |
| Model Stereotactic | Device KOPF | حامل Nodel 900 | |
| العالمي مع دعم إبرة | KOPF | موديل 1772-F1 | هاميلتون لدعم 5 و 10 & micro ؛ ل |
المراجع
- Oh, J., Vidal-Jordana, A., Montalban, X. Multiple sclerosis: clinical aspects. Current Opinion in Neurology. 31 (6), 752-759 (2018).
- Sand, I. K. Classification, diagnosis, and differential diagnosis of multiple sclerosis. Current Opinion in Neurology.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
تصحيح
Formal Correction: Erratum: Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis
Posted by JoVE Editors on 2/16/2023. Citeable Link.
An erratum was issued for: Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. The citation was updated.
The citation was updated from:
de Paula Faria, D., Cristiano Real, C., Estessi de Souza, L., Teles Garcez, A., Navarro Marques, F. L., Buchpiguel, C. A. Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. J. Vis. Exp. (168), e62094, doi:10.3791/62094 (2021).
to:
de Paula Faria, D., Real, C.C., Estessi de Souza, L., Teles Garcez, A., Navarro Marques, F. L., Buchpiguel, C. A. Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. J. Vis. Exp. (168), e62094, doi:10.3791/62094 (2021).
