مقالة منهجية

تحليل التهديف المنهجي لالتهاب الأمعاء في نموذج التهاب القولون الناجم عن كبريتات الصوديوم مورين ديكتران

DOI:

10.3791/62135

⸱

فبراير 14, 2021

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pathology, University of Michigan, 2Department of Surgery, Klinikum Rechts der Isar, Technische Universität München, 3Wallenberg Centre for Molecular Medicine, Linköping University, 4Department of Biomedical and Clinical Sciences (BKV), Linköping University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التهديف المنهجي لالتهاب الأمعاء باستخدام نظام مجاني بمساعدة الكمبيوتر هو أداة قوية لمقارنة التغيرات الهسطولوجية كميا في نماذج التهاب القولون التي تتميز بوجود القرحة والتغيرات الالتهابية. يعزز تقييم نقاط التهاب القولون النسيجي الملاحظات السريرية ويسهل تفسير البيانات.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نماذج التهاب القولون مورين هي الأدوات التي تستخدم على نطاق واسع في الدراسات التي تركز على فهم علم الأحياء المرضية للاضطرابات المعوية الالتهابية. ومع ذلك، لا يزال يتعين تحديد معايير قوية للقياس الكمي الموضوعي والتكراري لشدة المرض. تعتمد معظم طرق تحليل التهاب القولون على تسجيل الهسهولوجيا المحدود لقطاعات صغيرة من الأمعاء ، مما يؤدي إلى تحليلات جزئية أو متحيزة. هنا، ونحن الجمع بين الحصول على صورة عالية الدقة والتحليل الطولي للقولون بأكمله لتحديد إصابة الأمعاء والتقرح في كبريتات الصوديوم dextran (DSS) النموذج المستحث من التهاب القولون مورين. يسمح هذا البروتوكول بتوليج نتائج موضوعية وقابلة للاستنساخ دون تدريب مكثف للمستخدم. هنا، نقدم تفاصيل شاملة عن إعداد العينات وتحليل الصور باستخدام أمثلة من البيانات من التهاب القولون المستحث DSS. يمكن تكييف هذه الطريقة بسهولة مع النماذج الأخرى لالتهاب القولون المورين التي لديها التهاب كبير مرتبط بإصابة المخاطية. نحن نثبت أن جزء من الغشاء المخاطي الملتهب / المصاب والمتآكل / المتقرح نسبة إلى الطول الكامل للقولون يوازي بشكل وثيق النتائج السريرية مثل فقدان الوزن وسط تطور المرض الناجم عن DSS. يوفر هذا البروتوكول النسيجي وقتا موثوقا ومساعدة فعالة من حيث التكلفة لتوحيد تحليلات نشاط المرض بطريقة غير متحيزة في تجارب التهاب القولون DSS.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الحاجز الظهاري المعدي المعوي يلعب دورا محوريا في فصل المستضدات الإنارة ومسببات الأمراض من مقصورات الأنسجة الكامنة1. ترتبط الإصابات الظهارية والجروح المخاطية التي تظهر في الحالات المرضية مثل مرض التهاب الأمعاء (IBD) أو نقص التروية أو الإصابة الجراحية بالأعراض السريرية التي تشمل الإسهال وفقدان الوزن والدم في البراز وآلام البطن. استجابة للإصابة، تهاجر الخلايا الظهارية وتتكاثر لإعادة ظهارة وإصلاح عيوب الحاجز المخاطي. حل الالتهاب ورد سلامة المخاطية حاسمة لإعادة تأسيس التوازن المخاطي المعوي ووظيفة2،3،4.

وقد استخدمت نماذج حيوانية مختلفة لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة التي ترتبط مع الأضرار التي لحقت الحاجز الظهاري المعوي. تستخدم على نطاق واسع نماذج راسخة وسهلة التطبيق من التهاب القولون المستحث كيميائيا ، لا سيما في الدراسات المتعلقة بالإصابة الالتهابية مثل IBD. نموذج التهاب القولون مورين المشتركة، القابلة للاستنساخ، وموثوق بها توظف كبريتات الصوديوم dextran (DSS) بوساطة إصابة القولون والالتهاب. تختلف شدة المرض اعتمادا على سلالة الماوس وجرعة DSS وطول إدارة DSS والوزن الجزيئي ل DSS5و6و7.

عادة ما يتم تقييم تلف المخاط المعوي أثناء التهاب القولون DSS باستخدام مؤشر نشاط المرض (DAI) ، وهي درجة مركبة يحددها فقدان الوزن ، ومحتوى دم البراز ، واتساق البراز. محتوى الدم البراز يمكن أن تكون مجهرية (الكشف عن استخدام اختبار حمض غواياك البراز) أو العياني; يصنف الاتساق البرازي على أنه صلب أو ناعم أو سائل (أي الإسهال)5،8. يمكن أن يكون تسجيل هذه المعلمات السريرية ذاتيا وقد يختلف اعتمادا على تجربة المستخدم وتحيزه ، على الرغم من أن البيانات توفر بشكل عام معلومات موثوقة وبالتالي يستخدمها باحثو IBD على نطاق واسع. وعلى النقيض من ذلك، لا توجد طريقة مقبولة عموما للتقييم النسيجي للضرر المخاطي. الأكثر شيوعا، يتم فحص مناطق مختارة من القولون من قبل أخصائي أمراض مدرب وسجل على أساس العديد من المعلمات التي عادة ما تشمل إصابة سرداب وتسلل الكريات البيض9،10،11. ومع ذلك، لأن عدد المعلمات التي تم التحقيق فيها وكمية الأنسجة التي تم تحليلها يختلف بشكل كبير بين التقارير الفردية، فإن قابلية مقارنة العديد من الدراسات المنشورة محدودة. للحد من التحيز المراقب وتعزيز التوافق بين الدراسات، وبروتوكول التهديف النسيجي المثالي ينبغي: 1) تشمل طول القولون بأكمله، والتهاب المخاطية المعوية في معظم الأحيان متغير وتخطي الآفات شائعة، 2) الحد من التحليل إلى مفتاح محدد والمعلمات قابلة للتفسير بسهولة للحد من الذاتية، 3) تسهيل المعالجة السريعة والمتسقة لأعداد كبيرة من العينات، و 4) استخدام أدوات متاحة على نطاق واسع وبأسعار معقولة للحصول على البيانات والتحليل والعرض.

هنا نحن نصف تقنية لمعالجة القولون بأكمله أو أجزاء طويلة من الأمعاء الدقيقة في تكوين "لفة السويسرية" جنبا إلى جنب مع استخدام نظام تسجيل مجاني بمساعدة الكمبيوتر لتحليل التهاب المخاطية المعوية والضرر بسبب التهاب القولون الناجم عن DSS.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على جميع التجارب الحيوانية الموصوفة من قبل لجنة استخدام الحيوانات ورعايتها في جامعة ميشيغان.

1. حصاد الأنسجة

  1. القتل الرحيم الفئران بطريقة إنسانية باستخدام التخدير isoflurane تليها خلع عنق الرحم، وفقا للبروتوكولات المعتمدة. وبالنسبة لجميع التجارب على الحيوانات، حصل مجلس مراجعة معتمد على الموافقة وفقا للمبادئ التوجيهية الوطنية والمؤسسية لمناولة الحيوانات.
  2. ضع الماوس على لوحة تشريح في وضعية غير صحيح. شل حركة أطراف الماوس باستخدام إبر G 20 G x 1 1/2 بوصة.
  3. باستخدام ملقط ومقص، وجعل شق صغير على جلد البطن وسحبه إلى الجانب لفضح الصفاق.
  4. افتح تجويف البطن مع شق خط الوسط في الصفاق من عظم العانة إلى جانبي البطن.
  5. إزالة الأنسجة والأعضاء بعناية حتى يتم تصور الأمعاء الغليظة. قطع عظم الحوض على جانبي القولون لتصور كامل للجهاز، وتمتد من فتحة شج نحو cecum.
  6. إزالة الدهون بلطف، الأوردة الصغيرة والشرايين تعلق على القولون، في حين تشريح بعناية الجهاز، وقطع قريبة فقط إلى فتحة الجج والقاصر فقط إلى الكوم.
    ملاحظة: يجب أن تظل القولون تشريح في درجة حرارة الغرفة أثناء إكمال الإجراء لفة السويسرية.
  7. مسح بعناية القولون مع برنامج تلفزيوني 1x، وذلك باستخدام إبرة الغافاج البلاستيك مرنة إدراجها من خلال فتحة الشرج لإزالة محتويات البراز.
  8. وضع القولون في خط مستقيم، وفتح طوليا على طول الشريان المتوسطي. تقسيم القولون طوليا من البعيدة إلى الطرف القريب (الشكل 1A). نصف الأنسجة يمكن استخدامها للتحليل النسيجي في حين يمكن معالجة الآخر للطخة الغربية, PCR أو تدحرجت في لفة السويسرية الثانية لمجهر المناعة المجمدة الطازجة12.

2. إعداد اللفائف السويسرية

  1. تقليم الأنسجة الزائدة من القولون القريب باستخدام شفرة حلاقة حتى يتم الحصول على نفس العرض تقريبا على طول القولون كله.
  2. محاذاة القولون لفضح التجويف التي تواجه المتابعة، وتسطيح الأنسجة تماما باستخدام إبرة الغافاج مرنة. إضافة المزيد من برنامج تلفزيوني، إذا لزم الأمر، للحفاظ على الأنسجة رطبة طوال العملية.
  3. إزالة الفائض من برنامج تلفزيوني باستخدام مسح الورق. مع حقنة وإبرة gavage، إضافة 10٪ محايدة العازلة حل الفورماليين على الأنسجة لمدة 2-3 دقيقة لإصلاح وتسطيح الأنسجة.
  4. استخدام ملقط مستقيم للاستيلاء على نهاية القولون البعيدة وتطور القولون في دوائر متحدة المركز من القاصي إلى نهاية قريبة(الشكل 1B).
    ملاحظة: من الممكن أن تدفع إلى الوراء داخل لفة السويسرية في حين المتداول باستخدام السبابة لضمان الأنسجة داخل لفة.
  5. إدراج إبرة 27 G لتثبيت القولون في الوسط لعقد شكل لفة السويسرية(الشكل 1C).
  6. ضع اللفة السويسرية مع الإبرة في كاسيت تضمين داخل حاوية عينة الأنسجة.
    ملاحظة: يجب توجيه الأنسجة بالتوازي مع ما يتعلق بالكاسيت قبل التثبيت(الشكل 1D).
  7. إصلاح الأنسجة في 10٪ محايدة العازلة حل الفورماليين بين عشية وضحاها في 4 °C13.
  8. بعد التثبيت بين عشية وضحاها، وغسل الأنسجة 3x مع برنامج تلفزيوني.
  9. إضافة الإيثانول 70٪ إلى الأنسجة قبل عملية تضمين البارافين. إزالة الإبرة من لفة السويسرية قبل المتابعة. يمكن تخزين الأنسجة في الإيثانول في درجة حرارة الغرفة حتى تضمين البارافين13.
  10. وضع عينات في معالج الأنسجة، وتضمين في البارافين، وإعداد أقسام 4 ميكرومتر، شنت على الشرائح المجهر مشحونة إيجابيا(الشكل 1E). يمكن أن يكون هذا نقطة توقف اختيارية.
    ملاحظة: التوجه السليم للأنسجة أمر بالغ الأهمية لتحقيق المقاطع المناسبة لتحليل الصور. سوف يؤدي تضمين اللفة السويسرية المتوازية في كاسيت البارافين إلى أقسام كاملة تم تخصيصها لتحليل الصور (الشكل 1F- 1H). يجب تجنب المقاطع المائلة لمنع المقاطع غير المكتملة (الشكل 1I-1K). لمزيد من التفاصيل، راجع قسم المناقشة.
  11. أقسام وصمة عار مع الهيماتوكسيلين واليوسين (H &؛ E)13.

3. المسح الضوئي الرقمي والتحليل

ملاحظة: للحصول على تقييم دقيق للتغييرات mucosal حدد المقاطع التي تتضمن 90٪ على الأقل من طول القولون الإجمالي.

  1. مسح المقاطع الملطخة ضوئيا باستخدام الماسح الضوئي الشريحة أو الصور (انظر جدول المواد). تحتاج الصور المنتجة إلى دقة 0.25 ميكرون لكل بكسل مع هدف 40x وتكبير 40x.
  2. تثبيت وتنزيل برنامج مناسب للتحليل الرقمي للشرائح الممسوحة ضوئيا (انظر جدول المواد).
  3. فتح الصور الممسوحة ضوئيا في برنامج معالجة الصور(الشكل 2A). تحقق من أن القولون بأكمله مرئية وأنه لا توجد مناطق مفقودة من العينة.
  4. تنشيط أدوات شريط الصور والمقياس للتسمية لتحديد الشرائح الممسوحة ضوئيا بشكل صحيح بالنقر فوق صور التسمية (الشكل 2A).
  5. افتح أداة التعليقات التوضيحية بالنقر فوق الشروح،(الشكل 2A)وإنشاء 3 طبقات مختلفة بالنقر فوق طبقة جديدة (الشكل 2B)لتحديد الطول الإجمالي للفة السويسرية ، والالتهاب / الإصابة ، والتآكل / التقرح. اختر لونا مختلفا لكل طبقة بالنقر فوق لون الطبقة (الشكل 2B).
  6. قياس طول كل طبقة / فئة من خلال النقر على أداة القلم (الشكل 2A)، وذلك باستخدام الغشاء المخاطي العضلات كمرجع:
    1. عرض الصورة في 400 ميكرومتر التكبير (أو أكثر) لتسهيل التصور الكافي للغشاء المخاطي العضلات.
      ملاحظة: يتم التحكم في التكبير بسهولة باستخدام عجلة التمرير الماوس وسوف تحتاج إلى ضبط حسب الضرورة أثناء التحرك عبر المقطع لرسم كافة الخطوط.
    2. انقر على أداة القلم لرسم خط بعد الغشاء المخاطي العضلات (الشكل 2A). حرك المؤشر حسب الحاجة لتصور المنطقة المجاورة للتحليل.
      ملاحظة: في كل مرة يتم إيقاف القلم، سيتم إنشاء منطقة طبقة جديدة صغيرة. يمكن تصور وتحريرها مع علامة التبويب مناطق الطبقة (حدد الجزء المطلوب وانقر فوق حذف الطبقة في حالة حدوث أخطاء أو تصحيحات ، الشكل 2B).
  7. بمجرد تحديد جميع الطبقات (الشكل 2C) ، قم بتصدير البيانات باستخدام زر تصدير الشبكة إلى ملف نصي داخل خيارات مناطق الطبقة(الشكل 2B).
    ملاحظة: حفظ الملفات غالبا أثناء إنشاء الطبقات لضمان تخزين البيانات بشكل صحيح.
  8. افتح الملفات النصية وانسخ البيانات باستخدام برنامج جدول بيانات. مجموع جميع شرائح من كل منطقة وحساب النسبة المئوية للإصابة والتقرح فيما يتعلق بالطول الكلي.
  9. لحساب نقاط التهاب القولون النسيجي (HCS) وتقييم شدة المرض ، والنظر في ثلاث خصائص رئيسية على النحو المفصل أدناه.
    1. تحقق من وجود الغشاء المخاطي المعوي السليم الذي يتميز بالخلايا الظهارية المنظمة في المحور المضيء سرداب، بروبريا الصفيحة مع عدد قليل من الخلايا المناعية، والغشاء المخاطي العضلي subjacent الذي واجهات الغشاء المخاطي والغشاء المخاطي(الشكل 3A).
    2. التحقق من وجود التهاب / إصابة التي تتميز سرداب الظهارية التي هي مخففة أو مفقودة جزئيا الخلايا الظهارية والتهاب المخاطية مع تسلل العدلات إلى سرداب (الشكل 3B).
    3. التحقق من وجود تآكل / تقرح الذي يتميز مناطق خالية من ظهارة السطح أو المناطق التي تفتقر تماما سرداب الظهارة مع أو بدون الكريات البيض المرتبطة بها (الشكل 3C).
  10. حساب HCS من المناطق المصابة والمقرحة التي أعرب عنها كنسبة مئوية من الطول الإجمالي في الصيغة التالية:
    figure-protocol-1
    ملاحظة: يجمع HCS بين النسبة المئوية للالتهاب / الإصابة والتآكل / التقرح إضافة عامل اثنين إلى الأخير ، استنادا إلى افتراض معقول بأن فقدان الظهارة الكامل يؤدي إلى أقصى قدر من فقدان سلامة الحاجز وبالتالي أسوأ مرض. يمثل HCS باستمرار التغيرات المورفولوجية الناجمة عن التهاب القولون التجريبي الناجم عن DSS. ومن المثير للاهتمام، أننا لم نر علاقة واضحة بين أعداد المجاميع اللمفاوية القولونية أو بصيلات وشدة المرض السريري في التهاب القولون DSS، وبالتالي، لم ندرج القياس الكمي في هذا التحليل.
  11. التقاط لقطة من الصور التمثيلية (انقر فوق لقطة، الشكل 2A)، وحفظ. وتشمل أشرطة مقياس إذا لزم الأمر عن طريق النقر على إظهار / إخفاء شريط مقياس ( الشكل2A).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لتوضيح موثوقية هذا التحليل نقاط التهاب القولون النسيجي في سياق الضرر المخاطي بعد تحدي DSS والتعافي اللاحق من التهاب القولون ، قمنا بإعطاء 2.5٪ DSS في مياه الشرب لثمانية فئران من النوع البري C57BL6 من الذكور عمرها 10 أسابيع لمدة 5 أيام تليها فترة نقاهة مع الماء العادي لمدة 5 أيام. لم يكن هناك أي تغيير في وزن الجسم أثناء الإدارة الحادة ل DSS ، من اليوم 0 إلى 5(الشكل 4A). انخفض وزن الجسم بشكل كبير بعد اليوم الخامس، عندما بدأت الفئران في شرب مياه الصنبور العادية....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لدينا نظام نقاط التهاب القولون النسيجي يشكل أداة موثوق بها لقياس التهاب الأنسجة والضرر في الأمعاء. يوفر هذا النهج فهما أفضل لحالة الأمراض النسيجية للجهاز بأكمله دون تحيز لاختيار مناطق صغيرة أو أقسام غير مكتملة. ومن بين الخطوات الحاسمة لتنفيذ هذا البروتوكول بنجاح الإعداد السليم للقوائم السويسرية التي تسمح بتحليل ما لا يقل عن 90٪ من طول القولون؛ التوجه المتوازي أثناء تضمين البارافين وتقسمه لضمان مقاطع الأنسجة المستقيمة والموحدة ذات الآراء الطولية من السراديب الظهارية؛ الممارسة والتدريب بإشراف من أخصائي علم أمراض متمرس للتأ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يرغب المؤلفون في الاعتراف بالدعم المقدم من تمويل المعاهد القومية للصحة DK055679 و DK089763 و DK079392 و DK061739 و DK072564 وخدمات مسح الشرائح المرضية بجامعة ميشيغان.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
Aperio AT2 – حجم كبير ، مسح رقمي كاملLeica BiosystemsAperio AT2
وسادات سفلية ماصة مع حاجز رطوبة مقاوم للماءVWR International56616-032
American Line 66-0089 شفرة أحادية الحافة ، 100 لكل عبوةGT الغرب الأوسطTL5837
BD Luer-Lok محاقن يمكن التخلص منها بدون إبرفيشر علمي14-823-2A
مقص الحول بون - أدوات العلوم الدقيقة ToughCut11103-09
مقص الحول بون - أدوات العلوم الدقيقة ToughCut14084-09
Dumont # 5العلوم الدقيقة11251-20
محلول فورمالين ، مخزن محايد ، 10٪SigmaHT501640-19L
HistoPrep 70٪ EaFisherbran70٪ كحول إيثيلي مشوه
ImageScopeAperioالإصدار 12.3.3.5039http://www.leicabiosystems.com/pathology-imaging/aperio-epathology/integrate/imagescope/
حاويات عينات LeakBuster: SterileStarplex ScientificB120210
Phosphate-Buffere Salt ، بدون الكالسيوم والمغنيسيومCorning21-040-CV
، 20 GA × 30 ممInstechFTP2030
PrecisionGlide ، الحجم: 20 جم × 1 1/2بوصة BD (Becton و Dickinson and Company)305176
إبرة PrecisionGlide ، الحجم: 27 جم × 1/2بوصة BD (بيكتون وديكنسون وشركاه)305109
حقنة ، 10 ملBD (بيكتون وديكنسون وشركاه)302995
كاسيت مناديل UnisetteSimportM505-2
للشرائح أدوات ملقط أنابيب التغذية البلاستيكية إبرة

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kagnoff, M. F. The intestinal epithelium is an integral component of a communications network. Journal of Clinical Investigation. 124 (7), 2841-2843 (2014).
  2. Laukoetter, M. G., Nava, P., Nusrat, A. Role of the intestinal barrier in inflammatory bowel disease. World Journal of Gastroenterology. 14 (3), 401-407 (2008).
  3. Baumgart, D. C., Sandborn, W. J. Crohn's disease. Lancet. 380 (9853), 1590-1605 (2012).
  4. Ordas, I., Eckmann, L., Talamini, M., Baumgart, D. C., Sandborn, W. J. Ulcerative colitis. Lancet. 380 (9853), 1606-1619 (2012).
  5. Vowinkel, T., Kalogeris, T. J., Mori, M., Krieglstein, C. F., Granger, D. N. Impact of dextran sulfate sodium load on the severity of inflammation in experimental colitis. Digestive Diseases and Sciences. 49 (4), 556-564 (2004).
  6. Kitajima, S., Takuma, S., Morimoto, M. Histological analysis of murine colitis induced by dextran sulfate sodium of different molecular weights. Experimental Animals. 49 (1), 9-15 (2000).
  7. Mahler, M., et al. Differential susceptibility of inbred mouse strains to dextran sulfate sodium-induced colitis. American Journal of Physiology. 274 (3), 544-551 (1998).
  8. Wirtz, S., Neufert, C., Weigmann, B., Neurath, M. F. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nature Protocols. 2 (3), 541-546 (2007).
  9. Kozlowski, C., et al. An entirely automated method to score DSS-induced colitis in mice by digital image analysis of pathology slides. Disease Models & Mechanisms. 6 (3), 855-865 (2013).
  10. Perse, M., Cerar, A. Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2012, 718617(2012).
  11. Mizoguchi, A. Animal models of inflammatory bowel disease. Progress in Molecular Biology and Translational Science. 105, 263-320 (2012).
  12. Flemming, S., et al. Desmocollin-2 promotes intestinal mucosal repair by controlling integrin-dependent cell adhesion and migration. Molecular Biology of the Cell. 31 (6), 407-418 (2020).
  13. Luna, L. G. Armed Forces Institute of Pathology (U.S) & Armed Forces Institute of Pathology (U.S.). Manual of Histologic Staining Methods of the Armed Forces Institute of Pathology. 3d edn. , Blakiston Division. (1968).
  14. Kelm, M., et al. Targeting epithelium-expressed sialyl Lewis glycans improves colonic mucosal wound healing and protects against colitis. The Journal of Clinical Investigation Insight. 5 (12), (2020).
  15. Reed, M., et al. Epithelial CD47 is critical for mucosal repair in the murine intestine in vivo. Nature Communications. 10 (1), 5004(2019).
  16. Laukoetter, M. G., et al. JAM-A regulates permeability and inflammation in the intestine in vivo. Journal of Experimental Medicine. 204 (13), 3067-3076 (2007).
  17. Khounlotham, M., et al. Compromised intestinal epithelial barrier induces adaptive immune compensation that protects from colitis. Immunity. 37 (3), 563-573 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة