فحوصات هجرة الخلايا والتصاق الخلوي للتحقيق في تفاعل الخلية المضيفة بين الليشمانيا

Yasmin da Silva Luz; Amanda R. Paixão; Carla Polyana O. S. Bernardes; Thaílla Souza da Silva; Natalia Machado Tavares; Claudia I. Brodskyn; Patricia S. T. Veras; Juliana P. B. de Menezes

doi:10.3791/62461

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

فحوصات هجرة الخلايا والتصاق الخلوي للتحقيق في تفاعل الخلية المضيفة بين الليشمانيا

1.1K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/62461

⸱

أغسطس 4, 2021

Yasmin da Silva Luz^*¹ , Amanda R. Paixão^*¹ , Carla Polyana O. S. Bernardes¹ , Thaílla Souza da Silva¹ , Natalia Machado Tavares¹ , Claudia I. Brodskyn¹ , Patricia S. T. Veras¹ , Juliana P. B. de Menezes¹

¹Laboratory of Host - Parasite Interaction and Epidemiology, Gonçalo Moniz Institute

^* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

ندرس هنا الآثار المترتبة على تفاعل الليشمانيا مع مضيف من خلال استكشاف هجرة الخلايا المتغصنة المصابة بالليشمانيا. يتم وصف تمايز الخلايا المتغصنة وإصابتها ، وتحليل الهجرة ، وتقييم مجمعات الالتصاق وديناميكيات الأكتين. يمكن تطبيق هذه الطريقة على دراسات هجرة الخلايا المضيفة الأخرى عند الإصابة بالليشمانيا أو أنواع الطفيليات الأخرى داخل الخلايا.

الملخص

الليشمانيا هو طفيلي أولي داخل الخلايا يسبب مجموعة واسعة من المظاهر السريرية ، بدءا من الآفات الجلدية الموضعية ذاتية الحل إلى شكل حشوي قاتل للغاية من المرض. ويقدر عدد المصابين حاليا بنحو 12 مليون شخص في جميع أنحاء العالم، ويواجه 350 مليون آخرون خطر الإصابة بالعدوى. من المعروف أن الخلايا المضيفة المصابة بطفيليات الليشمانيا ، مثل البلاعم أو الخلايا المتغصنة ، يمكن أن تهاجر إلى أنسجة مضيفة مختلفة ، ومع ذلك لا تزال كيف تساهم الهجرة في انتشار الطفيليات وتوجيهها لا تزال غير مفهومة جيدا. لذلك ، فإن تقييم قدرة هذه الطفيليات على تعديل استجابة الخلية المضيفة والالتصاق والهجرة سيسلط الضوء على الآليات المشاركة في انتشار المرض والحشوية. الهجرة الخلوية هي عملية معقدة تخضع فيها الخلايا للاستقطاب والنتوء ، مما يسمح لها بالهجرة. تتضمن هذه العملية ، التي تنظمها ديناميكيات الأنابيب الدقيقة القائمة على الأكتين والتوبولين ، عوامل مختلفة ، بما في ذلك تعديل الالتصاق الخلوي بالركيزة. تم التحقيق في عمليات الالتصاق والهجرة الخلوية باستخدام عدة نماذج. هنا ، نصف طريقة لتوصيف الجوانب المهاجرة للخلايا المضيفة أثناء عدوى الليشمانيا . يقدم هذا البروتوكول التفصيلي تمايز الخلايا المتغصنة وإصابتها ، وتحليل حركة الخلية المضيفة وهجرتها ، وتشكيل مجمعات الالتصاق وديناميكيات الأكتين. يهدف هذا البروتوكول في المختبر إلى توضيح الآليات المشاركة في انتشار الليشمانيا داخل الأنسجة المضيفة للفقاريات ويمكن أيضا تعديله وتطبيقه على دراسات هجرة الخلايا الأخرى.

المقدمة

داء الليشمانيات ، وهو مرض استوائي مهمل تسببه طفيليات أولية تنتمي إلى جنس الليشمانيا ، ينتج عنه مجموعة واسعة من المظاهر السريرية ، من الآفات الجلدية الموضعية ذاتية الشفاء إلى الأشكال الحشوية القاتلة للمرض. تشير التقديرات إلى أن ما يصل إلى مليون حالة جديدة من حالات داء الليشمانيات تنشأ سنويا، مع الإبلاغ عن إصابة 12 مليون شخص حاليا في جميع أنحاء^{العالم.} يتسبب داء الليشمانيات الحشوي (VL) ، الذي يمكن أن يكون قاتلا في أكثر من 95٪ من الحالات عند تركه دون علاج ، في وفاة أكثر من 50,000 سنويا ، مما يؤثر على الملايين في أمريكا الجنوبية وشرق إفريقيا وجنوب آسيا ومنطقة البحر الأبيض المتوسط². ي....