Method Article

طريقة بسيطة معدلة لتحريض احتشاء عضلة القلب في الفئران

DOI:

10.3791/63042

⸱

December 3rd, 2021

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Cardiology, The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, 2Department of Cardiology, Ren Ji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تحت التخدير الكافي ، تم إخراج قلب الفأر من خلال الفضاء الوربي ، وتم إحداث احتشاء عضلة القلب بنجاح عن طريق ربط الشريان النازل الأمامي الأيسر (LAD) باستخدام مواد متاحة بسهولة في معظم المختبرات.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يمثل احتشاء عضلة القلب (MI) أحد الأسباب الرئيسية للوفاة. تستخدم نماذج MI على نطاق واسع للتحقيق في الآليات المرضية لإعادة عرض ما بعد MI وتقييم العلاجات الجديدة. تم استخدام طرق مختلفة (على سبيل المثال ، علاج الأيزوبروتيرينول ، والإصابة بالتبريد ، وربط الشريان التاجي ، وما إلى ذلك) للحث على MI. بالمقارنة مع علاج الأيزوبروتيرينول والإصابة بالتبريد ، قد يعكس ربط الشريان التاجي بشكل أفضل الاستجابة الإقفارية وإعادة التشكيل المزمن بعد MI. ومع ذلك ، فإن الطرق التقليدية لربط الشريان التاجي في الفئران تمثل تحديا تقنيا. تصف الدراسة الحالية عملية بسيطة وفعالة لتحريض MI في الفئران بمواد متاحة بسهولة. تم قطع جلد صدر الفأر تحت التخدير المستقر. تم إخراج القلب على الفور من خلال الفضاء الوربي بعد الفصل الحاد بين الصدرية الكبرى والصدرية الصغرى. تم ربط الفرع الهابط الأمامي الأيسر (LAD) بخياطة 6-0 3 مم من أصله. بعد ربط LAD ، أشار التلوين بكلوريد 2،3،5-ثلاثي فينيل تترازوليوم (TTC) إلى تحريض ناجح ل MI والتغيرات الزمنية لحجم ندبة ما بعد MI. وفي الوقت نفسه ، أظهرت نتائج تحليل البقاء على قيد الحياة وفيات علنية في غضون 7 أيام بعد MI ، ويرجع ذلك أساسا إلى تمزق القلب. علاوة على ذلك ، أظهر تقييم تخطيط صدى القلب بعد MI تحريضا ناجحا لضعف الانقباض وإعادة تشكيل البطين. بمجرد إتقانه ، يمكن إنشاء نموذج MI في الفئران في غضون 2-3 دقائق بمواد متاحة بسهولة.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يمثل احتشاء عضلة القلب (MI) أحد الأسباب المهمة للوفاة والعجز في جميع أنحاء العالم1،2،3،4،5. على الرغم من إعادة التروية في الوقت المناسب ، يوجد حاليا نقص في العلاجات الفعالة لعلاج إعادة تشكيل القلب بعد MI. في المقابل ، بذلت جهود كبيرة للاستكشاف الميكانيكي واستغلال العلاج ل MI6،7،8. وتجدر الإشارة إلى أن إنشاء نماذج MI هو شرط أساسي لتحقيق هذه الغايات.

تم اقتراح عدة طرق (على سبيل المثال ، عل....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتم إجراء التجارب التي تنطوي على عمل حيواني مع جميع الموافقات اللازمة من لجنة أخلاقيات رعاية المختبر في مستشفى رينجي ، جامعة شنغهاي جياو تونغ ، كلية الطب (R52021-0506). تم استخدام إناث وذكور الفئران C57BL / 6J الذين تتراوح أعمارهم بين 8-10 أسابيع في الدراسة.

1. إعداد معدات التخدير المبسطة (اختياري)

ملاحظة: هذا إعداد اختياري قبل الجراحة ويمكن استبداله بتخدير قابل للمعايرة كما هو مذكور في القسم 2. يجب استشارة لجنة أخلاقيات الحيوان المؤسسية والطبيب البيطري (الأطباء البيطريين) قبل تكييف هذا الإعداد في الإجراءات الحيوانية.

  1. خذ أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل ، وقم بعمل قطع عمودي على المحور الطويل ل....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يوضح الشكل 1 البروتوكول التجريبي وبعض الخطوات الحاسمة. معدات التخدير المبسطة تسبب التخدير. كما هو موضح في الشكل 2 أ ، كان التخدير المستحث مستقرا ، كما ينعكس في معدلات التنفس العادية (تراوحت من 90-107 أنفاس / دقيقة في الفئران المختبرة). بعد ربط الشريان التاجي ، أشار تحليل تلطيخ TTC إلى تحريض ناجح لاحتشاء عضلة القلب والتغيرات الزمنية لحجم ندبة ما بعد MI (الشكل 2B). وفي الوقت نفسه ، أظهرت نتائج تحليل البقاء على قيد الحياة وفيات علنية ف.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وأظهر هذا التقرير بروتوكولا سهلا لتحريض MI في الفئران ذات المواد المتاحة بسهولة، والذي تم تعديله من طريقة أبلغ عنهاGAO 16. لا غنى عن نماذج Murine MI للاستكشاف الميكانيكي وشاشة الأدوية لخلل وظيفي بعد MI وإعادة عرض12. من بين التقنيات الحالية لتحريض MI ، يمثل ربط الشريان التاجي الأكثر شيوعا. يلخص ربط الشريان التاجي بأمانة طبيعة نقص تروية احتشاء عضلة القلب ويؤدي إلى شفاء الندبة واستجابة إعادة تشكيلها على غرار السيناريو السريري18,19

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل بمنح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81930007 ، 81625002 ، 81800307 ، 81470389 ، 81500221 ، 81770238) ، وبرنامج شنغهاي للقادة الأكاديميين المتميزين (18XD1402400) ، ولجنة العلوم والتكنولوجيا في بلدية شنغهاي (201409005200) ، وبرنامج شنغهاي بوجيانغ للمواهب (2020PJD030) ، ومؤسسة الصين لعلوم ما بعد الدكتوراه (2020M671161 ، BX20190216).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
2،3،5-Triphenyltetrazolium كلوريدSIGMAT8877-25GTTC تلطيخ
4-0 خياطة الحريرYUANKANG4-0أداة جراحية
الأوتوكلافHIRAYAMAHVE-50التعقيم للبوبرينورفين الصلبة
Qinghai Pharmaceutical FACTORY Co.، Ltd.H10940181يقلل من آلام ما بعد الجراحة
أنبوب الطرد المركزيالأمل البيولوجي1850-K15ML
كريم مزيل الشعرZIKER BIOTECHNOLOGYZK-L2701عامل إزالة الشعر لحيوانات المختبر
ForcepRWDF12028أداة جراحية
فلتر الغازZHAOXINSA-493حماية المشغل
IsofluraneRWD20071302تستخدم للتخدير
مصدر الضوءBeijing PDVLG-150Bمصباح التشغيل
إرقاء البعوض الصغيرFST13011-12إبرة أداة جراحية
BINXIONG42180104أداة جراحية
وخياطة الحرير 6-0إبرة أداة جراحيةJIAHESC086
ShangHaiJZJ32030أداة جراحية
حامل إبرةShangHaiJZJ32010أداة جراحية
مسحات بوفيدون اليودSingleLadyGB26368-2010مقص تطهير الجلد
CNSTRONGJYJ1030أداة جراحية
كريم العين المعقمShenyang Xingqi Pharmaceutical Co.، Ltd.H10940177يمنع جفاف القرنية
نظام تصوير بالموجات فوق الصوتية فائق الدقة للحيوانات الصغيرةVisualSonicsVevo 2100تحليل تخطيط صدى القلب
إبرة حامل

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Fu, Y., et al. A simple and efficient method for in vivo cardiac-specific gene manipulation by intramyocardial injection in mice. Journal of Visualized Experiments. (134), e57074(2018).
  2. Pell, S., Fayerweather, W. E.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Myocardial InfarctionCoronary Artery LigationMouse MI ModelVentricular RemodelingTTC StainingPost MI RemodelingContractile DysfunctionEchocardiographic AssessmentCardiac RuptureIntramyocardial Injection

Related Articles