يستخدم الفحص الميكانيكي لتجنب الصراع كقراءة غير انعكاسية لحساسية الألم لدى الفئران والتي يمكن استخدامها لفهم الاستجابات العاطفية التحفيزية بشكل أفضل في مجموعة متنوعة من نماذج آلام الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
فحص ميكانيكي لتجنب الصراع لقياس سلوك الألم في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يتكون الألم من أبعاد حسية (مسببة للألم) وعاطفية (غير سارة). في النماذج قبل السريرية ، تم تقييم الألم تقليديا باستخدام اختبارات انعكاسية تسمح بالاستدلالات المتعلقة بالمكون المسبب للألم ولكنها توفر القليل من المعلومات حول المكون العاطفي أو التحفيزي للألم. وبالتالي فإن تطوير الاختبارات التي تلتقط مكونات الألم هذه مهم من الناحية الترجمية. وبالتالي ، يحتاج الباحثون إلى استخدام الفحوصات السلوكية غير الانعكاسية لدراسة إدراك الألم على هذا المستوى. تجنب الصراع الميكانيكي (MCA) هو اختبار سلوك طوعي غير انعكاسي راسخ ، لدراسة الاستجابات التحفيزية لحافز ميكانيكي ضار في نموذج من 3 غرف. يستخدم التغيير في تفضيل موقع الفأر ، عندما يواجه محفزات ضارة منافسة ، لاستنتاج عدم الرضا المتصور للضوء الساطع مقابل التحفيز اللمسي للمخالب. يحدد هذا البروتوكول نسخة معدلة من فحص MCA الذي يمكن للباحثين استخدامه لفهم الاستجابات العاطفية التحفيزية في مجموعة متنوعة من نماذج آلام الفئران. على الرغم من عدم وصفها على وجه التحديد هنا ، إلا أن بيانات MCA الخاصة بنا تستخدم مساعد فرويند الكامل داخل الأخمص (CFA) ، وإصابة الأعصاب المنقذة (SNI) ، ونموذج الكسر / الصب كنماذج ألم لتوضيح إجراء MCA.
المقدمة
الألم هو تجربة معقدة مع المكونات الحسية والعاطفية. يعد انخفاض عتبة إدراك الألم وفرط الحساسية للمحفزات الحرارية و / أو الميكانيكية من السمات الرئيسية لهذه التجربة ، والتي يمكن أن تلتقطها اختبارات سلوك الألم التي يستحدثها التحفيز (مثل اختبار هارجريفز للحساسية الحرارية واختبار فون فراي للحساسية الميكانيكية) 1،2. على الرغم من أن مثل هذه الاختبارات تعطي نتائج قوية وقابلة للتكرار ، إلا أنها محدودة بسبب اعتمادها على الانسحاب الانعكاسي من الحافز الضار المتصور. وقد أثار هذا تساؤلات حول الاعتماد المستمر لأبحاث الألم على هذه الاختبارات وحدها. تحقيقا لهذه الغاية ، كان باحثو الألم لعدة سنوات يستكشفون اختبارات سلوكية بديلة ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على جميع التجارب التي تنطوي على استخدام الفئران والإجراءات المتبعة فيها من قبل اللجان المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات في مركز إم دي أندرسون للسرطان وجامعة ستانفورد ، بما يتفق تماما مع دليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر.
1. بناء MCA
- بناء غرفة 1 بالأبعاد التالية: 125 مم × 125 مم × 125 مم (العرض × العمق × الارتفاع) من الأكريليك الأبيض غير الشفاف بسماكة 3 مم المستخدم في الجدران الجانبية والأرضيات والسقف. استخدم أكريليك شفاف بسماكة 3 مم للجدار الأمامي. قم بلصق جميع الجوانب معا في وقت مبكر باستخدام مادة لاصقة مخصصة من الأكريليك.
تنبيه: تعتبر مادة لاصقة الأكريليك مادة خطرة (قاب....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم استخدام فحص MCA بنجاح مع العديد من نماذج آلام الماوس المتميزة ميكانيكيا. ويبين الشكل 2 البيانات التي كان فيها مقياس النتيجة للاختيار يعبر نقطة الوسط في الغرفة 2 (الشكل 2 ألف). البيانات التي تم الحصول عليها باستخدام نقطة منتصف الطريق مقابل الهروب إلى الغرفة 3 متشابهة جدا ، ~ 40 ثانية لمنتصف الطريق مقابل ~ 45 ثانية لهروب الغرفة 3 في نموذج إصابة الأعصاب (SNI) لألم الأعصاب مع ارتفاع مسبار 5 مم13.
في نموذج الألم .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
كما هو الحال مع جميع الاختبارات السلوكية ، فإن التعامل السليم والعشوائية والعمى عن علاج الحيوانات أمر ضروري طوال الوقت. بالنظر إلى المدخلات متعددة العوامل في السلوكيات المعقدة وصنع القرار ، من الضروري التعامل مع الحيوانات وتعويدها واختبارها بأكبر قدر ممكن من الاتساق مع تقليل الضيق. يجب أيضا توخي الحذر لإعادة إنتاج توقيت وضع الماوس في الغرفة 1 ، وتشغيل مصابيح LED ، وإزالة الحاجز ، لأن الاختلافات هنا يمكن أن تؤثر على السلوك اللاحق.
وتجدر الإشارة إلى أن مختلف مقاييس النتائج المبينة في
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.
شكر وتقدير
يتم دعم جنرال موتورز من قبل زمالة الدراسات العليا NDSEG. يتم دعم VLT من قبل #GM137906 منحة NIGMS NIGMS ومؤسسة ريتا ألين. يتم دعم AJS من خلال منح وزارة الدفاع W81XWH-20-1-0277 و W81XWH-21-1-0197 ومؤسسة ريتا ألين. نحن ممتنون للدكتور أليكساي كرافيتز في كلية الطب بجامعة واشنطن لتصميم وإتاحة ملفات الطابعة ثلاثية الأبعاد مجانا لأرضية الغرفة 2 ولوحة التحقيق.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 32.8 قدم 3000K-6000K أضواء شريطية LED بيضاء قابلة للضبط ، أضواء شريط LED فائقة السطوع قابلة للتعتيم مع 600 SMD 2835 LEDs | Lepro | SKU: 410087-DWW-US | لغرفة الإضاءة 1. https://www.lepro.com/32ft-dimmable-tunable-white-led-strip-lights.html |
| "سرير سبايك" مطبوع ثلاثي الأبعاد و "طابق الغرفة 2" | Shapeways | N / A | اختياري ، للمجسات الميكانيكية كبديل لدبابيس الخريطة الضعيفة. |
| 70٪ إيثانول | مختلف | N / A | لتنظيف MCA بين الفئران. |
| أكريل المفصلة 2 | TAP بلاستيك | N / A | لربط أغطية الغرفة بالجدران الخلفية. https://www.tapplastics.com/product/plastics/handles_hinges_latches/acryl_hinge_2/122 |
| لوح أكريليك مصبوب Chemcast ، | بلاستيك | TAP | بسمك 3 مم. للجدار الأمامي للغرفة 1. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_cast_clear/510 |
| Chemcast Cast أكريليك ملون شفاف ، أحمر غامق شفاف - 50٪ | بلاستيك TAP | N / A | بسمك 3 مم. 50٪ انتقال الضوء. لجدران وأغطية الغرف 2 و 3. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_transparent_colors/519 |
| Chemcast شفاف & أمبير أكريليك مصبوب ملون غير شفاف ، علامة بيضاء غير شفافة - 0.1٪ | بلاستيك TAP | N / A | بسمك 3 مم. للجدران الجانبية وغطاء الغرفة 1. مطهر |
| https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_color/341 (مثل المبيد الرباعي) | مختبرات البحوث الدوائية ، Inc. | 65020F | لتطهير MCA في نهاية جلسة الاختبار. |
| علامات المسح الجاف واللوحة | المختلفة | N / A | لإضافة معلومات تجريبية إلى بداية لقطات الفيديو. |
| دبابيس الخريطة | المختلفة | N / A | اختياري ، للمجسات الميكانيكية. استخدم ورق الصنفرة لتخفيف النقاط الحادة قبل الاستخدام. يمكن استخدامها بدلا من الأجزاء المطبوعة ثلاثية الأبعاد. |
| مناشف ورقية | مختلفة | N / A | لتنظيف / تطهير MCA. |
| SCIGRIP Weld-On # 3 أكريليك أسمنت | TAP بلاستيك | N / A | لتجميع صفائح الأكريليك في الغرف ولصق المفصلات. https://www.tapplastics.com/product/repair_products/plastic_adhesives/weld_on_3_cement/131 |
| ساعة توقيت | مختلفة | غير متاح | لتسجيل زمن انتقال الهروب / أوقات السكون في الوقت الفعلي أو من الفيديو المسجل. |
| مؤقت | مختلف | N / A | لضمان تشغيل LED ، يتم توقيت إزالة الحاجز وإكمال الاختبار باستمرار. |
| كاميرا فيديو | مختلفة | HDRCX405 كاميرا فيديو Handycam | لتسجيل سلوك الماوس في جهاز MCA. يمكن استبداله بأي كاميرا فيديو للمستهلكين قادرة على دقة 1080 بكسل. |
| حامل ثلاثي القوائم | Famall | N / A | أي حامل ثلاثي القوائم يمكنه حمل الكاميرا على ارتفاع مقاعد البدلاء لتسجيل لقطات MCA مقبول. |
المراجع
- Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32 (1), 77-88 (1988).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
