في أوفو الحقن داخل الأوعية الدموية في أجنة الدجاج

Kai Jin; Jing Zhou; Gaoyuan Wu; Ziyi Lian; Zongyi Zhao; Shujian Zhou; Chen Chen; Hongyan Sun; Yingjie Niu; Qishenng Zuo; Yani Zhang; Jiuzhou Song; Guohong Chen; Bichun Li

doi:10.3791/63458

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

في أوفو الحقن داخل الأوعية الدموية في أجنة الدجاج

7.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/63458

⸱

يونيو 3, 2022

Kai Jin¹^,² , Jing Zhou¹^,² , Gaoyuan Wu¹^,² , Ziyi Lian¹^,² , Zongyi Zhao¹^,² , Shujian Zhou¹^,² , Chen Chen¹^,² , Hongyan Sun¹^,² , Yingjie Niu¹^,² , Qishenng Zuo¹^,² , Yani Zhang¹^,² , Jiuzhou Song³ , Guohong Chen¹^,² , Bichun Li¹^,²^,⁴

¹Joint International Research Laboratory of Agriculture and Agri-Product Safety of Ministry of Education of China, Yangzhou University, ²Key Laboratory of Animal Breeding Reproduction and Molecular Design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, ³Animal & Avian Sciences, University of Maryland, College Park, ⁴College of Biotechnology, Jiangsu University of Science and Technology

في هذه المقالة

ملخص

الهدف العام من هذه الورقة هو وصف كيفية إجراء الحقن داخل الخلايا في البويضة للمواد الخارجية في أجنة الدجاج. هذا النهج مفيد جدا لدراسة البيولوجيا التنموية لأجنة الدجاج.

الملخص

كنظام نموذجي كلاسيكي لبيولوجيا الأجنة ، تم استخدام جنين الدجاج للتحقيق في التطور الجنيني والتمايز. إن توصيل المواد الخارجية إلى أجنة الدجاج له ميزة كبيرة لدراسة وظيفة الجينات ، والتربية المعدلة وراثيا ، وإعداد الوهم أثناء التطور الجنيني. نوضح هنا طريقة الحقن داخل الأوعية الدموية في البويضة حيث يمكن نقل المواد الخارجية مثل ناقلات البلازميد أو الخلايا الجرثومية البدائية المعدلة (PGCs) إلى أجنة الدجاج المانحة في مراحل النمو المبكرة. تظهر النتائج أن الحقن داخل الأوعية الدموية من خلال الشريان الأورطي الظهري والرأس يسمح للمواد المحقونة بالانتشار في الجنين بأكمله من خلال الدورة الدموية. في البروتوكول المقدم ، تم تحديد فعالية إدخال البلازميد الخارجي وناقلات الفيروسات الخيطية ، واستعمار PGCs الخارجية المحقونة في الغدد التناسلية المتلقية ، من خلال مراقبة التألق في الأجنة. تصف هذه المقالة الإجراءات التفصيلية لهذه الطريقة ، وبالتالي توفر نهجا ممتازا لدراسة وظيفة الجينات ، وبيولوجيا الجنين والنمو ، وإنتاج الدجاج الوهمي للغدد التناسلية. في الختام ، ستسمح هذه المقالة للباحثين بإجراء الحقن داخل الأوعية الدموية في البويضة للمواد الخارجية في أجنة الدجاج بنجاح كبير وقابلية للتكرار.

المقدمة

تم استخدام أجنة الدجاج على نطاق واسع لعدة قرون في التطبيقات التنموية والمناعية والمرضية وغيرها من التطبيقات البيولوجية¹،²^،³. لديهم العديد من المزايا المتأصلة على النماذج الحيوانية الأخرى في دراسة علم السموم وبيولوجيا الخلية⁴. يمكن الوصول بسهولة إلى أجنة الدجاج ويمكن التلاعب بها في المختبر ومراقبتها مباشرة في أي مرحلة من مراحل النمو ، مما يوفر نظاما مفيدا لنموذج أبحاث الأجنة.

بشكل عام ، فإن طرق توصيل جنين الدجاج الحالية مثل النقل الكهربائي والحقن تحت الجرثومي لها قيود مثل متطلبات المعدات المتخصصة وبرنامج مصمم ، وعدم ....