التنميط الجيني السريع من الأنسجة باستخدام الماوس سيغما استخراج - N - PCR الأمبير الأنسجة كيت

ملخص

ويتم ذلك على التنميط الجيني الكامل للماوس عينة الذيل ، بما في ذلك هضم الأنسجة وقراءات PCR ، في واحدة ونصف الساعة باستخدام سيغما SYBR الاخضر المقتطف - N - PCR الأمبير الأنسجة عدة.

الملخص

الكشف عن الجينوم من الحمض النووي عبر تضخيم PCR والكشف على الجل هو طريقة الكهربي القياسية التي يتم تحديد النمط الجيني لعينة الأنسجة. إعداد التقليدية الأنسجة للPCR جاهزة الحمض النووي وعادة ما تستغرق عدة ساعات إلى أيام ، اعتمادا على عينة الأنسجة. وهكذا يمكن النمط الجيني للعينة يتم تأجيلها لعدة أيام ، وهي ليست خيارا لأنواع مختلفة من التجارب. نحن هنا لشرح التنميط الجيني الكامل للماوس عينة الذيل ، بما في ذلك هضم الأنسجة وقراءات PCR ، في واحدة ونصف الساعة باستخدام سيغما SYBR الاخضر المقتطف - N - PCR الأمبير الأنسجة كيت. أولا ، علينا أن نظهر استخراج خمسة عشر دقيقة من الحمض النووي من عينات الأنسجة. ثم ، علينا أن نظهر في الوقت الحقيقي للقراءة للخروج من التضخيم PCR من العينة ، والذي يسمح لتحديد عينة ايجابية كما أنه يجري تضخيمها. معا ، واستخراج قراءات في الوقت الحقيقي والسريع من أجل السماح الفوري لتحديد النمط الجيني لأنواع مختلفة ومتنوعة من الأنسجة من خلال طريقة موثوقة لPCR.

البروتوكول

الرجاء انقر هنا لعرض البروتوكول.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
<أضف رابطًا إلى="http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?lang=en&N4=XNATG%7CSIGMA&N5=SEARCH_CONCAT_PNO%7CBRAND_KEY&F=SPEC&cm_sp=affiliate-_-Jove-_-12346">طقم SYBR Green Extract-N-Amp لإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) للأنسجة	طقم الكواشف	Sigma-Aldrich	<رابط تشعبي="http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?lang=en&N4=XNATG%7CSIGMA&N5=SEARCH_CONCAT_PNO%7CBRAND_KEY&F=SPEC&cm_sp=affiliate-_-Jove-_-12346">XNATG	تتضمن: محلول الاستخلاص، ومحلول التعادل ب، ومحلول تحضير الأنسجة، ومزيج Extract-N-Amp SYBR Green الجاهز لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR ReadyMix)