صياغة وتوصيف نظام ناقل الدوبامين القائم على الإكسوسوم

Burçak Yavuz; Hakan Darici; Aslı Pınar Zorba Yildiz; Emrah Şefik Abamor; Murat Topuzoğullari; Melahat Bağirova; Adil Allahverdiyev; Erdal Karaoz

doi:10.3791/63624

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

صياغة وتوصيف نظام ناقل الدوبامين القائم على الإكسوسوم

3.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/63624

⸱

أبريل 4, 2022

Burçak Yavuz¹^,² , Hakan Darici³^,⁴^,⁵^,⁶ , Aslı Pınar Zorba Yildiz²^,⁷ , Emrah Şefik Abamor² , Murat Topuzoğullari² , Melahat Bağirova⁸ , Adil Allahverdiyev⁸ , Erdal Karaoz³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁹

¹Vocational School of Health Services/İstanbul, Altinbas University, ²Chemical Metallurgy Faculty, Department of Bioengineering, Yildiz Technical University, ³Faculty of Medicine, Department of Histology & Embryology, Istinye University, ⁴3D Bioprinting Design & Prototyping R&D Center, Istinye University, ⁵Stem Cell and Tissue Engineering R&D Center, Istinye University, ⁶Medicine Faculty, Istinye University, ⁷Vocational School of Health Services, Istinye University, ⁸The V. Akhundov National Scientific Research Medical Prophylactic Institute, ⁹Center for Stem Cells and Regenerative Medicine (LivMedCell), Liv Hospital

في هذه المقالة

ملخص

هنا ، كنا نهدف إلى الحصول على تركيبة عن طريق تحميل الدوبامين للإكسوسومات المعزولة للخلايا الجذعية من الخلايا الجذعية الوسيطة الهلامية في وارتون. يتم وصف عزل وتوصيف الإكسوسوم ، وتحميل الدواء في الإكسوسومات الناتجة ، والنشاط السام للخلايا للتركيبة المطورة في هذا البروتوكول.

الملخص

تشكل الإكسوسومات التي يتراوح حجمها بين 40 و 200 نانومتر أصغر مجموعة فرعية من الحويصلات خارج الخلية. تلعب هذه الحويصلات النشطة بيولوجيا التي تفرزها الخلايا دورا نشطا في الشحن والتواصل بين الخلايا. توجد الإكسوسومات في الغالب في سوائل الجسم مثل البلازما والسائل النخاعي والبول واللعاب والسائل الأمنيوسي واللبأ وحليب الثدي وسائل المفاصل والسائل المنوي وحمض الجنب. بالنظر إلى حجم الإكسوسومات ، يعتقد أنها قد تلعب دورا مهما في أمراض الجهاز العصبي المركزي لأنها يمكن أن تمر عبر الحاجز الدموي الدماغي (BBB). ومن ثم ، تهدف هذه الدراسة إلى تطوير نظام ناقل نانوي قائم على الإكسوسوم عن طريق تغليف الدوبامين في إكسوسومات معزولة من الخلايا الجذعية الوسيطة الهلامية في وارتون (WJ-MSCs). تم تحضين الإكسوسومات التي اجتازت عملية التوصيف بالدوبامين. تم إعادة توصيف الإكسوسومات المحملة بالدوبامين في نهاية الحضانة. تم التحقيق في الإكسوسومات المحملة بالدوبامين في إطلاق الدواء ومقايسات السمية الخلوية. أظهرت النتائج أنه يمكن تغليف الدوبامين بنجاح داخل الإكسوسومات وأن الإكسوسومات المحملة بالدوبامين لم تؤثر على صلاحية الخلايا الليفية.

المقدمة

Exosomes ، الحويصلات النشطة بيولوجيا مع ميزات كبيرة ، تتراوح في الحجم من 40 نانومتر إلى 200 نانومتر. تنشأ الإكسوسومات من غشاء الخلية وتتشكل بسبب إطلاق الإندوسومات¹. تعمل هذه الهياكل كمحاورات من خلية إلى خلية وتتفاعل مع الخلايا المجاورة لتسهيل نقل الجزيئات النشطة. يمكن عزل الإكسوسومات من العديد من المصادر المختلفة. وتشمل هذه سوائل الجسم مثل البلازما والبول والسائل النخاعي واللعاب ، وكذلك خطوط الخلايا المزروعة في ظل ظروف المختبر . تلعب الإكسوسومات دورا مهما في القضاء على تلف الأعصاب ، وذلك بفضل الجزيئات الحيوية التي تحتوي عليها ، مثل الدهون والبروتينات والأحماض النووية². تقوم Glia ، وهي الخلايا الداعمة للجهاز العص....